1α,25-二羟基维生素D_(3)对哮喘小鼠SIRT1、GATA-3表达及气道炎症水平的影响

目的探究1α,25-二羟基维生素D_(3)对哮喘小鼠气道炎症变化的影响及可能机制。方法将24只SPF级BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组、哮喘+1α,25-二羟基维生素D_(3)(哮喘+VD_(3))组,每组8只。哮喘组和哮喘+VD_(3)组小鼠于第1、8、15天给予卵清蛋白(OVA)混悬液0.2 ml致敏,对照组给予生理盐水0.2 ml;哮喘组和哮喘+VD_(3)组于第22~28天使用1%OVA雾化吸入激发,对照组给予等量生理盐水雾化吸入,每次雾化30 min,1次/d,连续激发7 d;哮喘+VD_(3)组每次雾化前30 min给予1α,25-二羟基维生素D_(3)注射液(4μg/kg),对照组和哮喘组给予等量生理盐水。最后一次激发后麻醉处理采集小鼠血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织标本。采用HE染色和PAS染色观察肺组织病理学改变及气道黏液水平的变化;ELISA法检测血清IgE及BALF中炎性因子白细胞介素(IL)-4、IL-5、IL-13水平;免疫组化、Western blotting检测小鼠肺组织中沉默信息调节因子1(SIRT1)和GATA结合蛋白-3(GATA-3)的表达情况。采用Pearson直线相关分析肺组织SIRT1、GATA-3表达水平(SIRT1、GATA-3的平均OD值)与小鼠血清IgE及BALF中IL-4、IL-5、IL-13浓度的相关性。结果与对照组比较,哮喘组小鼠肺组织气管及伴行血管周围炎性细胞浸润明显增多,其中以嗜酸性粒细胞为主,支气管管腔狭窄,气道黏膜上皮增生,气管内黏液分泌增多;哮喘+VD_(3)组小鼠上述改变较哮喘组减轻。与对照组比较,哮喘组小鼠血清IgE和BALF中IL-4、IL-5、IL-13等炎性因子水平及肺组织中GATA-3表达均增高(P<0.05),肺组织中SIRT1表达降低(P<0.05);与哮喘组比较,哮喘+VD_(3)组小鼠血清IgE和BALF中IL-4、IL-5、IL-13水平及肺组织GATA-3表达均降低(P<0.05),肺组织SIRT1表达增高(P<0.05)。相关性分析结果显示,小鼠肺组织SIRT1表达水平与GATA-3表达量、血清IgG及BALF中IL-4、IL-5、IL-13水平均呈负相关(P<0.05);小鼠肺组织GATA-3表达水平与血清IgG及BALF中IL-4、IL-5、IL-13水平均呈正相关(P<0.05)。结论1α,25-二羟基维生素D_(3)可缓解哮喘小鼠的气道炎症,其机制可能是通过上调肺组织中SIRT1的表达,抑制GATA-3的表达,进而降低炎性因子(IL-4、IL-5、IL-13)水平。

1,25-二羟基维生素D3在临床医学领域中的研究进展

维生D具有调节钙、磷代谢,影响细胞分化等生理功能。越来越多的研究表明维生素D缺乏与多种疾病的发生与发展相关,例如骨质疏松症、免疫性疾病、帕金森病、动脉粥样硬化、肿瘤等。本文主要就维生素D在临床医学治疗领域的研究进展作一综述。

血清可溶性髓系细胞触发性受体1、白细胞介素-21、25羟基维生素D在炎症性肠病患儿中的表达及相关性

目的探讨血清可溶性髓系细胞触发性受体1(sTREM-1)、白细胞介素-21(IL-21)、25羟基维生素D[25(OH)D]在炎症性肠病患儿中的表达及相关性。方法选取107例炎症性肠病患儿纳入观察组,另选取同期53例健康体检儿童纳入对照组,依照疾病活动性将观察组患儿分为活动期组54例和缓解期组53例,分别比较观察组与对照组、活动期组与缓解期组sTREM-1、IL-21、25(OH)D表达水平,采用Kendall's tau-b法分析sTREM-1、IL-21、25(OH)D与炎症性肠病活动性的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析sTREM-1、IL-21、25(OH)D诊断炎症性肠病和预测炎症性肠病活动期的曲线下面积(AUC)、敏感度、特异度。结果观察组血清sTREM-1、IL-21水平高于对照组,25(OH)D水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。活动期组血清sTREM-1、IL-21水平高于缓解期组,25(OH)D水平低于缓解期组,差异有统计学意义(P<0.05)。Kendall′s tau-b相关性分析显示,sTREM-1、IL-21与炎症性肠病活动性呈正相关(r=0.460、0.484,P<0.05),25(OH)D与炎症性肠病活动性呈负相关(r=-0.434,P<0.05)。ROC曲线显示,sTREM-1、IL-21、25(OH)D和三者联合诊断炎症性肠病的AUC分别为0.791、0.852、0.808和0.862,敏感度分别为74.80%、81.30%、75.50%和81.30%,特异度分别为75.50%、75.50%、81.30%和79.20%;sTREM-1、IL-21、25(OH)D和三者联合预测炎症性肠病活动期的AUC分别为0.821、0.840、0.799和0.840,敏感度分别为79.60%、75.90%、77.40%和87.00%,特异度分别为79.20%、75.50%、83.30%和79.20%。结论血清sTREM-1、IL-21、25(OH)D水平与儿童炎症性肠病的发生与发展密切关联,动态监测其水平有助于为临床诊断炎症性肠病和评估患儿病情进展提供重要参考依据。

25-羟基维生素D3水平及其受体基因rs2228570 F/f位点多态性与深圳地区子宫内膜异位症遗传易感性分析

目的了解不同临床分期子宫内膜异位症(EMT)25-羟基维生素D3[25-(OH)VitD3]水平及与糖类抗原-125(CA125)和细胞因子的相关性及维生素D受体基因(VDR)rs2228570 F/f位点多态性,探讨其与深圳地区EMT遗传易感性。方法选择2021年5月至2023年1月在深圳市龙华区人民医院确诊EMT患者102例(EMT组),年龄19~46岁,平均年龄32.57岁;临床分期Ⅰ期19例,年龄19~40岁,平均年龄30.25岁;Ⅱ期27例,年龄19~42岁,平均年龄31.05岁;Ⅲ期35例,年龄20~44岁,平均年龄31.82岁;Ⅳ期21例,年龄21~46岁,平均年龄33.91岁。同期非EMT患者78例(对照组),年龄18~48岁,平均年龄31.82岁。分别检测25-(OH)VitD3、CA125、白细胞介素6(IL-6)及干扰素-γ(IFN-γ)水平,同时分析VDR rs2228570 F/f位点多态性。结果EMT组25-(OH)VitD3和IFN-γ水平[(11.38±3.37)ng/mL、(14.90±3.65)pg/mL]明显低于对照组[(18.86±1.41)ng/mL、(20.99±2.10)pg/mL],而CA125和IL-6水平[(36.08±12.49)U/mL和(27.00±10.82)pg/mL]明显高于对照组[(17.70±2.52)U/mL和(13.37±1.64)pg/mL],差异有统计学意义(P<0.05);EMT组25-(OH)VitD3和IFN-γ水平Ⅳ期<Ⅲ期<Ⅱ期<Ⅰ期,而CA125和IL-6水平Ⅳ期>Ⅲ期>Ⅱ期>Ⅰ期,不同临床分期之间差异有显著统计学意义(P<0.001);经相关分析,EMT组25-(OH)VitD3与CA125、IL-6水平及临床分期呈负相关,而与IFN-γ水平呈正相关(r=-0.6773,-0.6836、-0.7481、0.6951,P<0.05);EMT组ff基因型和f等位基因频率(61.76%和72.06%)明显高于对照组(17.95%和26.28%),而FF基因型和F等位基因频率(17.65%和27.94%)明显低于对照组(65.38%和73.72%),差异有统计学意义(P<0.05);但Ff基因型频率(20.59%vs 16.67%)差异无统计学意义(P>0.05),且不同临床分期EMT患者VDR rs2228570 F/f位点基因型和等位基因频率差异无统计学意义(P>0.05);不同基因型EMT患者25-(OH)VitD3水平存在差异(P<0.05),其中ff基因型25-(OH)VitD3水平[(9.30±2.15)ng/mL]明显低于Ff和FF基因型[(14.59±1.56)ng/mL、(15.14±1.85)ng/mL],差异有统计学意义(P<0.05);但FF与Ff基因型差异无统计学意义(P>0.05)。结论EMT患者25-(OH)VitD3水平明显降低,且与CA125、IL-6、IFN-γ水平及临床分期存在一定的相关性。同时VDR rs2228570 F/f位点分布呈多态性,其中ff基因型EMT患者25-(OH)VitD3水平更低,可能是导致深圳地区EMT发病的危险易感基因之一。

1α,25-二羟基维生素D3通过表皮生长因子受体和细胞周期调节卵巢癌细胞的生长

目的:研究1α,25-二羟基维生素D3(1,25VD3)通过对表皮生长因子受体和细胞周期的调控调节人卵巢癌细胞的生长。方法:用1,25VD3处理人卵巢癌细胞株OVCAR3后,MTT法测定细胞生长情况,流式细胞仪分析细胞周期,Western blot检测EGFR表达。用pcDNA3-EGFRvIII质粒转染OVCAR3细胞,筛选出稳定过表达EGFR的克隆株EGFR-OVCAR3。用1,25VD3及EGFR抑制剂分别处理OVCAR3和EGFR-OVCAR3细胞,Western blot检测p27、Cyclin E和GADD45蛋白表达。结果:1,25VD3下调OVCAR3细胞EG-FR蛋白表达,对细胞生长有明显抑制作用,使其G0/G1和G2/M期增多,S期明显减少,而对EGFR-OVCAR3细胞无明显作用。Western blot显示,1,25VD3上调OVCAR3细胞p27和GADD45蛋白表达,下调Cyclin E蛋白表达,而对EGFR-OVCAR3细胞三种蛋白表达无调节作用,用EGFR抑制剂处理EGFR-OVCAR3细胞后,又能调节p27和cyclin E蛋白的表达。结论:1,25VD3可以调节EGFR蛋白表达,并进而调节下游分子,包括p27和GADD45,最后调控细胞周期,抑制细胞G1/S期转换和G2/M期转换,从而抑制卵巢癌细胞的生长。

儿童矮小症与25羟基维生素D,IGF-1,IGFBP-3的相关性

目的探讨儿童矮小症与25-(OH)D、IGF-1、IGFBP-3的相关性。方法以60例儿童矮小症作为观察组;另选择同期于本院体检健康的儿童32例作为参照组。采用化学发光免疫分析法测定IGF-1,IGFBP-3表达;采取酶联免疫吸附试验对血清内的25-(OH)D含量开展检测。比较两组25-(OH)D、IGF-1、IGFBP-3表达阳性率,分析其与儿童矮小症的相关性。结果入组儿童的性别、年龄以及父母身高比较无差异(P>0.05);相比参照组,矮小症三组患儿的25-(OH)D、IGF-1、IGFBP-3均呈下降趋势,其中ISS组、PGHD组的25-(OH)D、IGF-1、IGFBP-3水平高于CGHD组,差异有统计学意义(P<0.05),ISS组、PGHD组的25-(OH)D、IGF-1、IGFBP-3水平比较无差异(P>0.05),25-(OH)D、IGF-1、IGFBP-3水平与矮小症均呈负相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论儿童矮小症与25-(OH)D、IGF-1、IGFBP-3之间关系密切,对矮小症的诊断和综合评价具有重要意义,可作为该病的确诊指标之一。

1α,25-二羟基维生素D3对人卵巢癌细胞株表皮生长因子受体的调节

目的:研究1α,25-二羟基维生素D3(1,25VD3)对人卵巢癌细胞株表皮生长因子受体(EGFR)表达的调节作用。方法:用1,25VD3或其类似物EB1089处理人卵巢癌细胞株OVCAR3、2008和CAOV3,应用Western blot、Northern Blot和mRNA稳定性分析等方法检测EGFR表达的变化。结果:1,25VD3或EB1089作用后三种人卵巢癌细胞中EGFR的蛋白和mRNA表达水平均下降。用1,25VD3和放线菌素D、RNA酶抑制剂处理OVCAR3细胞后,Northern blotting分析结果显示,1,25VD3作用4h后没有改变EGFR mRNA的半衰期。结论:1,25VD3在mRNA转录水平下调人卵巢癌细胞株EGFR的表达。

维生素D受体基因多态性与2型糖尿病及血清1,25-二羟基维生素D_3的相关性研究

目的探讨维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)基因ApaI酶切位点多态性与2型糖尿病及血清1,25-二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]的相关性。方法采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,检测105例2型糖尿病患者和105例正常者的VDR基因型,用酶联免疫吸附(Elisa)法测定血清1,25(OH)2D3水平,并检测相关临床及生化指标,比较VDR基因型和等位基因频率的分布差异及不同基因型血清1,25(OH)2D3等相关指标的差异。结果维生素D受体基因ApaⅠ位点基因型和等位基因频率在两组中的分布差异明显(P<0.01)。糖尿病组等位基因a和基因型aa频率明显高于对照组。基因型AA组及Aa组血清1,25(OH)2D3高于基因型aa组,而收缩压、舒张压及空腹血糖低于基因型aa组,且差别有显著性意义(P<0.05或0.01)。结论 Apa I位点的VDR基因多态性与2型糖尿病存在相关性。血清1,25(OH)2D3水平、空腹血糖及血压与VDR基因多态性密切相关。

头胎和经产围产期奶牛对25-羟基维生素D_(3)营养效应的对比分析

【目的】探究不同胎次奶牛对25-羟基维生素D3的机体反应,分析胎次对奶牛生产性能、产后疾病发生率及后代犊牛生长性能的影响,进而揭示围产期奶牛胎次对25-羟基维生素D3营养效应的具体作用。【方法】选择体况评分一致(3.25)、预产期前21 d的健康荷斯坦奶牛26头,按照胎次分配头胎组(胎次=1,n=11)和经产组(胎次≥2,n=15)。试验奶牛饲喂统一饲粮,每日补充3 mg/头25-羟基维生素D3。试验期82 d(第22天为预计产犊日)。记录产犊后奶牛日乳产量,同时采集产犊后0、7、21 d的乳样,用于检测乳成分。于产犊前21、7 d(-21、-7 d),分娩当天(0 d),产犊后7、21 d采集饲料及母牛、后代犊牛血液样品,分别用于检测饲料常规营养成分、血液免疫及抗氧化指标,以及血液骨、胶原代谢相关指标,并检测0、60日龄犊牛的体重和体尺指标。【结果】(1)与头胎奶牛相比,经产奶牛产后7、21 d乳产量极显著或显著升高(P<0.01;P<0.05),产后7 d非脂乳固体率显著降低(P<0.05)。(2)经产奶牛较头胎奶牛血液中免疫球蛋白G(IgG)含量显著升高(P<0.05)。与头胎奶牛相比,在产犊前21和7 d时经产奶牛血液中降钙素(CT)含量显著升高(P<0.05);在产犊7 d时,经产奶牛血液中抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)含量极显著升高(P<0.01),经产奶牛血液中CT和IgM含量极显著降低(P<0.01),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量极显著升高(P<0.01);在产犊21 d时,经产奶牛血液IgM和TNF-α含量显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01)。(3)经产奶牛后代犊牛60日龄时体高极显著高于头胎奶牛后代犊牛(P<0.01)。【结论】头胎和经产围产期奶牛对25-羟基维生素D3的营养效应具有显著差异,围产期添加25-羟基维生素D3可使头胎奶牛血液免疫能力提高;经产奶牛骨、胶原代谢能力增强,同时其后代犊牛60日龄时体高增加。

25-羟基维生素D_3对肉鸡生长性能、骨骼矿化及肠道维生素D受体基因表达的影响

为研究25-羟基维生素D_3(25-OH-D_3)对1~28日龄白羽肉鸡生长性能、骨骼矿化以及肾脏1α-羟化酶、肠道细胞核维生素D受体(n VDR)和细胞膜维生素D受体(m VDR)基因表达的影响,试验选用1日龄罗斯308白羽肉鸡公雏240只,随机分成4个处理,每个处理6个重复,每个重复10只鸡。Ⅰ组为基础日粮组(不添加维生素D),Ⅱ组为正对照组(基础日粮中添加1000 IU/kg的维生素D_3),Ⅲ、Ⅳ组为试验组(分别饲喂在基础日粮中添加500、1000 IU/kg的25-OH-D_3)。结果显示:(1)与基础日粮Ⅰ组相比,Ⅲ、Ⅳ组1~28日龄肉鸡体增重、采食量提高,料重比降低(P<0.05);与正对照Ⅱ组相比,Ⅲ、Ⅳ组1~28日龄肉鸡体增重、采食量、料重比差异不显著(P>0.05)。(2)与基础日粮Ⅰ组相比,Ⅲ、Ⅳ组28日龄肉鸡胫骨、股骨和跖骨重量、灰分重量及钙、磷含量得到显著改善(P<0.05);与正对照Ⅱ组相比,Ⅲ组胫骨、股骨和跖骨灰分重量提高(P<0.05);Ⅳ组与正对照Ⅱ组28日龄肉鸡骨骼矿化无显著差异(P>0.05)。(3)与基础日粮Ⅰ组及正对照Ⅱ组相比,Ⅲ组28日龄肉鸡肾脏1α-羟化酶mRNA表达水平提高234.72%和243.73%(P<0.01);与试验Ⅲ组相比,试验Ⅳ组肾脏1α-羟化酶m RNA表达水平降低10.46%(P<0.05)。(4)与基础日粮Ⅰ组及正对照Ⅱ组相比,Ⅲ组28日龄肉鸡十二指肠n VDR mRNA表达水平无显著差异(P>0.05);与试验Ⅲ组相比,试验Ⅳ组十二指肠n VDR mRNA表达水平降低32.56%(P<0.05)。(5)与基础日粮Ⅰ组相比,Ⅲ组28日龄肉鸡十二指肠mVDR mRNA表达水平提高25.29%(P<0.05);与正对照Ⅱ组相比,试验Ⅲ组mVDR mRNA表达水平无显著差异(P>0.05);与试验Ⅲ组相比,试验Ⅳ组mVDR mRNA表达水平降低24.50%(P<0.05)。试验表明:日粮中添加500 IU/kg的25-OH-D_3可显著提高肉鸡肾脏1α-羟化酶和十二指肠mVDR mRNA表达水平,改善肉鸡生长性能和骨骼矿化。

利用薯蓣皂甙元完整骨架形式合成1α,25-二羟基维生素D_3

首次利用薯蓣皂甙元的完整骨架经16步反应以7.6%的总收率合成了骨化三醇(1α,25-二羟基维生素D3)的光化反应前体.3-苄基保护的薯蓣皂甙元经还原开E/F环产生3,16,26-胆甾三醇-3-苄醚(5).除去化合物5C-16羟基后,其C-26羟基经消除和羟基化反应转移到C-25位.目标分子A/B环结构单元通过薯蓣皂甙元A/B环的官能团转化被构筑.按照已知的光化反应,(1S,3R)-胆甾-5,7-二烯-1,3,25-三醇能被转化成为1α,25-二羟基维生素D3.

1,25-二羟基维生素D_3对原发性骨质疏松骨折愈合影响的骨形态计量学研究

目的观察1,25-二羟基维生素D3(1,25-dihydroxyvitaminD3,1,25(OH)2D3)对原发性骨质疏松骨折愈合中骨形态计量学的影响。方法通过对Ⅰ型骨质疏松骨折模型和Ⅱ型骨质疏松骨折模型进行1,25(OH)2D3干预,8周后对骨痂组织进行形态计量学测定。结果在Ⅰ型骨质疏松骨折模型和Ⅱ型骨质疏松骨折模型中,1,25(OH)2D3干预组的骨体积和骨小梁厚度均较无1,25(OH)2D3干预组显著提高(P<0.05或P<0.01),1,25(OH)2D3干预组的骨小梁间距较无1,25(OH)2D3干预组明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论1,25(OH)2D3对Ⅰ型和Ⅱ型骨质疏松骨折愈合均有促进作用。

1,25-二羟基维生素D_3抑制K562细胞增殖及其机制

目的观察1,25二-羟基维生素D3〔1,25(OH)2D3〕对白血病细胞株K562增殖的影响并初步探讨其作用机制。方法间接免疫荧光法鉴定维生素D受体(VDR)在K562细胞的表达;四噻唑蓝法(MTT)、AO/EB、流式细胞PI单染分析细胞生长抑制率、细胞凋亡率及细胞周期;比色法检测凋亡信号蛋白———天冬酰胺特异酶切的半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活性。结果①K562细胞核阳性表达VDR;②10-8mol.L-11,25(OH)2D3可明显抑制K562细胞增殖,促进凋亡,凋亡率从4.1%(对照组)增至26.5%,P<0.01;③1,25(OH)2D3作用后K562细胞的Caspase-3活性增加,P<0.05,提示细胞凋亡伴随着Caspaes-3活性升高。结论1,25(OH)2D3可明显抑制K562细胞增殖,促进细胞凋亡,其作用机制与Caspase-3活性增加相关。

1,25-二羟维生素D3与2型糖尿病相关性研究进展

2型糖尿病是一种常见的慢性代谢性疾病,其发病率逐年增加。1,25-二羟维生素D3是维生素D3的活性形式,具有多种生物学功能。研究表明,维生素D3通过调节胰岛素分泌、改善胰岛素抵抗和调节血糖代谢等途径,对2型糖尿病的预防和治疗具有潜在的益处。与此同时,目前对于1,25-二羟维生素D3与2型糖尿病之间的确切机制仍不清楚,需要进一步的研究来阐明其作用机制。本文旨在探讨1,25-二羟维生素D3与2型糖尿病之间的相关性,并对相关研究进展进行综述,并为预防和治疗2型糖尿病提供新的策略和方法。

1,25-二羟基维生素D_3对Th17细胞调控的研究进展

1,25-二羟基维生素D3[1,25（OH）2D3]是维生素D在体内的主要活性代谢产物。在体内具有多方面活性,如调节肾、肠道钙、磷代谢及组织生长分化等功能,主要通过维生素D受体（VDR）来介导。1,25（OH）2D3具有免疫调节作用,可多方位调控机体免疫功能,

饲粮中添加25-羟基维生素D3对麻黄肉鸡生长性能和屠宰性能的影响

试验旨在研究饲粮中添加2000 IU/kg 25-羟基维生素D3对麻黄肉鸡生长性能和屠宰性能的影响。选用3600只1日龄江丰中速麻黄肉仔鸡,分为试验组和对照组,每组5个重复,每个重复360只。对照组饲喂基础饲粮,试验组饲喂基础饲粮中添加2000 IU/kg 25-羟基维生素D3的饲粮,饲养周期59 d。结果表明:试验组肉鸡平均日增重、出栏成活率分别提高1.62%(P<0.05)和1.17%(P<0.01),耗料增重比降低3.11%(P<0.01);试验组屠宰胴体一级品率提高2.04%(P<0.01),滴水损失降低22.08%(P<0.05),胫骨长度、胫骨折断强度和尺骨折断强度分别提高2.71%(P<0.05)、14.42%(P<0.05)和12.31%(P<0.05);试验组血清中钙、无机磷浓度分别提高8.00%(P<0.05)和12.67%(P<0.05),血清中总蛋白含量、总抗氧化能力分别提高15.77%(P<0.01)、24.49%(P<0.01),丙二醛含量降低20.12%(P<0.01)。可见,饲粮中添加2000 IU/kg 25-羟基维生素D3能够提高麻黄肉鸡的日增重和成活率,并改善骨骼质量与胴体品质。

2型糖尿病患者血清1,25-二羟基维生素D_3的变化及意义

目的:比较2型糖尿病患者与正常人之间血清1,25-二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]水平的差异,分析维生素D与2型糖尿病的关系。方法:选择2型糖尿病患者110例为病例组,同期本院健康体检者105例为对照组。用ELISA法测定血清1,25(OH)2D3水平,同时进行问卷调查并检测相关临床及生化指标,统计分析。结果:血清1,25(OH)2D3在病例组和对照组中的差异明显(P<0.01),血清1,25(OH)2D3与空腹血糖呈显著负相关(rs=-0.696,P<0.01)。结论:血清1,25(OH)2D3在2型糖尿患者中明显低于正常人。空腹血糖越高,血清1,25(OH)2D3越低。

盐酸埃克替尼联合1α,25-二羟基维生素D_3对人肺腺癌A549细胞增殖及EGFR表达的影响

目的:研究盐酸埃克替尼和1α,25-二羟基维生素D3单药及联合用药对人肺腺癌A549细胞增殖及表皮生长因子受体(EGFR)表达的影响。方法:盐酸埃克替尼和1α,25-二羟基维生素D3单药及联合用药处理A549细胞后,用CCK-8法检测细胞增殖抑制率的变化;用Western blot法及RT-PCR法分别检测细胞EGFR蛋白及EGFR mRNA表达的变化。结果:与单药盐酸埃克替尼组和1α,25-二羟基维生素D3组相比,联合用药组具有更强的细胞增殖抑制作用(P均<0.05);联合用药组及1α,25-二羟基维生素D3单药组EGFR蛋白及EGFR mRNA表达水平较阴性对照组及盐酸埃克替尼单药组有明显升高(P均<0.05)。结论:盐酸埃克替尼与1α,25-二羟基维生素D3联合用药对人肺腺癌A549细胞具有协同抗增殖作用;其机制可能与1α,25-二羟基维生素D3升高了EGFR mRNA及EGFR蛋白的表达,从而更有利于盐酸埃克替尼发挥抗肿瘤作用有关。

1,25-二羟基维生素D_3对小鼠非酒精性脂肪肝性肝纤维化进程的抑制作用

目的:探讨1,25-二羟基维生素D3[1,25-dihydroxyvitamin D3,1,25(OH)2D3]对蛋氨酸-胆碱缺乏(methionine-choline-deficient,MCD)饮食诱导的非酒精性脂肪肝性肝纤维化的抑制作用及其可能机制.方法:将30只C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组和干预组,每组10只.采用MCD饮食诱导建立非酒精性脂肪肝性肝纤维化模型.其中,模型组和干预组饲以MCD饲料.干预组给予1,25(OH)2D3(5μg/kg)腹腔注射,正常组和模型组给予同样剂量的生理盐水腹腔注射,2次/wk.干预8wk后,试剂盒检测小鼠血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)和谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)水平;肝组织苏木素和伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色观察组织形态学变化;RT-PCR检测转化生长因子β(transforming growth factor beta,TGF-β)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和Ⅰ型胶原mRNA的表达.结果:与正常组相比,模型组小鼠ALT和AST水平以及TGF-1,α-SMA和Ⅰ型胶原mRNA的表达均明显升高(P=0.000,P=0.000,P=0.044,P=0.003,P=0.027);而与模型组相比,1,25(OH)2D3干预组除了TGF-β1mRNA的表达无变化外,其他指标均显著下降(P=0.000,P=0.005,P=0.020,P=0.027).HE染色结果显示,模型组肝组织可见大量脂肪变性(胞质内充满大小较一致的脂滴空泡),且血管周围炎症细胞浸润严重;而干预组两者程度都有减轻,但后者效果更明显.结论:1,25(OH)2D3可改善肝功能,且可能通过对-SMA和Ⅰ型胶原基因的调控达到减缓MCD饮食诱导的非酒精性脂肪肝性肝纤维化进程的目的.

1,25-二羟基维生素D_3对肠黏膜屏障的保护作用及机制探讨

目的观察1,25-二羟基维生素D3[1,25-(OH)_2VitD_3]对肠黏膜屏障的保护作用,并探讨其可能的机制,为其在结肠炎治疗中的应用提供依据。方法培养结肠癌Caco-2细胞,模拟人小肠上皮细胞单层细胞屏障;将细胞随机分为3组,A组不处理,B组加2%右旋葡聚糖硫酸钠(DSS)1 m L模拟结肠炎损伤,C组先用10-8mmol/L的1,25-(OH)_2VitD_3处理24 h再加入DSS 1 m L,干预后培养1 h。透射电镜下观察Caco-2单层细胞屏障超微结构变化,采用免疫荧光染色法检测紧密连接蛋白claudin-1、zo-1和occludin的表达。结果透射电镜下,A组细胞顶部出现排列整齐、分化良好的微绒毛状结构,相邻细胞间的顶端呈现紧密连接样结构;B组细胞局部微绒毛消失或减少,紧密连接样结构消失;C组细胞微绒毛分化较B组好,相邻细胞间的局部微绒毛消失不明显。免疫荧光染色显示,A组3种紧密连接蛋白荧光条带连续完整,荧光强度高;B组紧密连接蛋白荧光条带断续不完整,荧光强度弱;C组紧密连接蛋白荧光条带较清晰连续,且荧光强度增强。结论 1,25-(OH)_2VitD_3可通过增加细胞间紧密连接蛋白的表达发挥其对肠黏膜屏障的保护作用,为其在结肠炎中的应用提供了理论依据。