目的:观察不同滴度谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)成人隐匿性自身免疫性糖尿病(LADA)患者25羟维生素D3[25(OH)D3]水平及T淋巴细胞亚群的变化,探讨其与胰岛β细胞功能的关系。方法:在成人糖尿病(DM)患者中筛查获得GADA阳性患者,根据GADA滴度水...目的:观察不同滴度谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)成人隐匿性自身免疫性糖尿病(LADA)患者25羟维生素D3[25(OH)D3]水平及T淋巴细胞亚群的变化,探讨其与胰岛β细胞功能的关系。方法:在成人糖尿病(DM)患者中筛查获得GADA阳性患者,根据GADA滴度水平分为低滴度组和高滴度组,对照组为普通2型糖尿病(T2DM)患者。检测空腹血糖(FBG)、血脂、肝肾功能,糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血清C肽(FCP)、25(OH)D3和T淋巴细胞亚群(CD3^(+)、CD4^(+)和CD8^(+))。计算胰岛素抵抗指数[Homa-IR(CP)]和胰岛功能指数[Homa-islet(CP)]。结果:与T2DM组比较,高滴度组体重指数(BMI)、25(OH)D3水平、FCP、餐后2 h C肽(2 hCP)、Homa-IR(CP)和Homa-islet(CP)均降低,差异有统计学意义(P<0.05),同时合并有较低的总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、尿酸(UA)水平,差异有统计学意义(P<0.05);低滴度组也表现出BMI、25(OH)D3水平、FCP、2 hCP、Homa-IR(CP)和Homa-islet(CP)降低,伴低TC水平,差异有统计学意义(P<0.05)。高滴度组CD4^(+)/CD8^(+)T比值高于低滴度组,差异有统计学意义(P<0.05),LADA患者CD4^(+)/CD8^(+)比值与GADA滴度呈正相关(r=0.37,P<0.01),25(OH)D3水平与Homa-islet(CP)呈正相关(r=0.32,P=0.02)。结论:低25(OH)D3水平及T淋巴细胞亚群比例失衡与胰岛β细胞功能损伤有关并参与LADA病程的进展。展开更多
目的探讨25-OH维生素D(25-OH vitamin D,25-OH-VD)对新生儿感染性肺炎(neonatal infectious pneumonia,NIP)的抗炎作用及其作用机制。方法选取2022年1月~2023年1月成都市妇女儿童中心医院收治的65例NIP患儿,根据病情严重程度,分为轻症组...目的探讨25-OH维生素D(25-OH vitamin D,25-OH-VD)对新生儿感染性肺炎(neonatal infectious pneumonia,NIP)的抗炎作用及其作用机制。方法选取2022年1月~2023年1月成都市妇女儿童中心医院收治的65例NIP患儿,根据病情严重程度,分为轻症组(n=34)和重症组(n=31),另选取同期60例健康新生儿为对照组。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清25-OH-VD,白细胞介素-2(inteleukin-2,IL-2)、γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和IL-1β水平;蛋白免疫印迹法检测外周血单个核细胞中维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)、细胞核转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)/Yes相关蛋白(nucleus-Yes-associated protein,n-YAP)和细胞核转录共激活因子PDZ结合基序(nucleus-transcriptional coactivator with PDZ-binding motif,n-TAZ)通路相关蛋白表达。脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激人肺上皮细胞构建NIP体外模型,分为Control组、LPS组和LPS+VD组;CCK-8检测细胞活力;qRT-PCR检测各组细胞中细胞色素P450家族成员28B1(recombinant cytochrome P45027B1,CYP27B1)和VDR的mRNA表达;免疫细胞化学法检测各组细胞YAP阳性细胞核数;免疫荧光检测各组细胞YAP/TAZ复合物核转位;蛋白免疫印迹法检测各组细胞炎性因子相关蛋白表达。结果与对照组相比,轻症组和重症组患儿血清中IL-2(1.91±0.18μg/L,2.63±0.27μg/L vs 1.05±0.12μg/L),IFN-γ(1.73±0.13μg/L,2.18±0.19μg/L vs 1.03±0.07μg/L),TNF-α(1.79±0.08μg/L,2.38±0.13μg/L vs 0.97±0.04μg/L)和IL-1β(2.18±0.07μg/L,2.59±0.11μg/L vs 0.96±0.02μg/L)含量以及TGF-β(1.67±0.21,2.43±0.42 vs 1.02±0.04),n-YAP(2.08±0.11,4.23±0.37 vs 0.99±0.02)和n-TAZ(2.47±0.42,4.21±0.58 vs 1.03±0.05)蛋白表达逐渐升高,25-OH-VD(12.57±2.21μg/L,7.85±2.03μg/L vs 16.76±1.02μg/L)含量和VDR(0.73±0.09,0.51±0.06 vs 1.03±0.08)蛋白表达逐渐降低,差异具有统计学意义(F=18.983~56.782,均P<0.001)。细胞实验结果显示,与Control组相比,LPS组细胞存活率在12h(76.23%±0.73%vs 116.72%±2.14%),24 h(57.23%±0.94%vs 125.76%±1.67%)和48 h(41.23%±0.56%vs 138.56%±1.35%)时显著降低(t=10.342,26.562,37.821);YAP阳性细胞数(47.35±3.47个vs 12.46±1.34个)和YAP/TAZ复合物核转位率(2.56%±0.32%vs 1.01%±0.06%)升高(t=46.362,26.921);IL-2(2.03±0.09 vs 1.03±0.08),IFN-γ(2.07±0.21 vs 1.02±0.04),TNF-α(2.18±0.11 vs 0.99±0.02)和IL-1β(3.17±0.42 vs 1.03±0.05)的蛋白表达水平升高(t=28.341,26.713,31.235,47.823),差异具有统计学意义(均P<0.001),而两组间CYP27B1和VDR mRNA表达差异无统计学意义(t=0.872,0.786,均P>0.05)。与LPS组比较,LPS+VD组在12 h(85.23%±0.36%),24 h(79.82%±0.63%),48 h(76.28%±0.72%)的细胞存活率和CYP27B1(4.42±0.14),VDR mRNA(5.13±0.56)表达升高,YAP阳性细胞核数(24.41±3.23个)和YAP/TAZ复合物核转位率(1.47%±0.26%)降低,IL-2(1.21±0.06),IFN-γ(1.13±0.42),TNF-α(1.03±0.37)和IL-1β(1.61±0.58)蛋白表达降低,差异具有统计学意义(t=7.263,19.892,23.145,27.872,26.982,14.762,13.623,18.273,25.314,27.873,22.134,均P<0.01)。结论血清25-OH-VD水平与NIP严重程度相关,外源性给予VD补充可通过调控TGF-β介导的YAP/TAZ核转位机制发挥抗炎作用,减轻NIP损伤。展开更多
文摘目的:观察不同滴度谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)成人隐匿性自身免疫性糖尿病(LADA)患者25羟维生素D3[25(OH)D3]水平及T淋巴细胞亚群的变化,探讨其与胰岛β细胞功能的关系。方法:在成人糖尿病(DM)患者中筛查获得GADA阳性患者,根据GADA滴度水平分为低滴度组和高滴度组,对照组为普通2型糖尿病(T2DM)患者。检测空腹血糖(FBG)、血脂、肝肾功能,糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血清C肽(FCP)、25(OH)D3和T淋巴细胞亚群(CD3^(+)、CD4^(+)和CD8^(+))。计算胰岛素抵抗指数[Homa-IR(CP)]和胰岛功能指数[Homa-islet(CP)]。结果:与T2DM组比较,高滴度组体重指数(BMI)、25(OH)D3水平、FCP、餐后2 h C肽(2 hCP)、Homa-IR(CP)和Homa-islet(CP)均降低,差异有统计学意义(P<0.05),同时合并有较低的总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、尿酸(UA)水平,差异有统计学意义(P<0.05);低滴度组也表现出BMI、25(OH)D3水平、FCP、2 hCP、Homa-IR(CP)和Homa-islet(CP)降低,伴低TC水平,差异有统计学意义(P<0.05)。高滴度组CD4^(+)/CD8^(+)T比值高于低滴度组,差异有统计学意义(P<0.05),LADA患者CD4^(+)/CD8^(+)比值与GADA滴度呈正相关(r=0.37,P<0.01),25(OH)D3水平与Homa-islet(CP)呈正相关(r=0.32,P=0.02)。结论:低25(OH)D3水平及T淋巴细胞亚群比例失衡与胰岛β细胞功能损伤有关并参与LADA病程的进展。
文摘目的探讨25-OH维生素D(25-OH vitamin D,25-OH-VD)对新生儿感染性肺炎(neonatal infectious pneumonia,NIP)的抗炎作用及其作用机制。方法选取2022年1月~2023年1月成都市妇女儿童中心医院收治的65例NIP患儿,根据病情严重程度,分为轻症组(n=34)和重症组(n=31),另选取同期60例健康新生儿为对照组。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清25-OH-VD,白细胞介素-2(inteleukin-2,IL-2)、γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和IL-1β水平;蛋白免疫印迹法检测外周血单个核细胞中维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)、细胞核转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)/Yes相关蛋白(nucleus-Yes-associated protein,n-YAP)和细胞核转录共激活因子PDZ结合基序(nucleus-transcriptional coactivator with PDZ-binding motif,n-TAZ)通路相关蛋白表达。脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激人肺上皮细胞构建NIP体外模型,分为Control组、LPS组和LPS+VD组;CCK-8检测细胞活力;qRT-PCR检测各组细胞中细胞色素P450家族成员28B1(recombinant cytochrome P45027B1,CYP27B1)和VDR的mRNA表达;免疫细胞化学法检测各组细胞YAP阳性细胞核数;免疫荧光检测各组细胞YAP/TAZ复合物核转位;蛋白免疫印迹法检测各组细胞炎性因子相关蛋白表达。结果与对照组相比,轻症组和重症组患儿血清中IL-2(1.91±0.18μg/L,2.63±0.27μg/L vs 1.05±0.12μg/L),IFN-γ(1.73±0.13μg/L,2.18±0.19μg/L vs 1.03±0.07μg/L),TNF-α(1.79±0.08μg/L,2.38±0.13μg/L vs 0.97±0.04μg/L)和IL-1β(2.18±0.07μg/L,2.59±0.11μg/L vs 0.96±0.02μg/L)含量以及TGF-β(1.67±0.21,2.43±0.42 vs 1.02±0.04),n-YAP(2.08±0.11,4.23±0.37 vs 0.99±0.02)和n-TAZ(2.47±0.42,4.21±0.58 vs 1.03±0.05)蛋白表达逐渐升高,25-OH-VD(12.57±2.21μg/L,7.85±2.03μg/L vs 16.76±1.02μg/L)含量和VDR(0.73±0.09,0.51±0.06 vs 1.03±0.08)蛋白表达逐渐降低,差异具有统计学意义(F=18.983~56.782,均P<0.001)。细胞实验结果显示,与Control组相比,LPS组细胞存活率在12h(76.23%±0.73%vs 116.72%±2.14%),24 h(57.23%±0.94%vs 125.76%±1.67%)和48 h(41.23%±0.56%vs 138.56%±1.35%)时显著降低(t=10.342,26.562,37.821);YAP阳性细胞数(47.35±3.47个vs 12.46±1.34个)和YAP/TAZ复合物核转位率(2.56%±0.32%vs 1.01%±0.06%)升高(t=46.362,26.921);IL-2(2.03±0.09 vs 1.03±0.08),IFN-γ(2.07±0.21 vs 1.02±0.04),TNF-α(2.18±0.11 vs 0.99±0.02)和IL-1β(3.17±0.42 vs 1.03±0.05)的蛋白表达水平升高(t=28.341,26.713,31.235,47.823),差异具有统计学意义(均P<0.001),而两组间CYP27B1和VDR mRNA表达差异无统计学意义(t=0.872,0.786,均P>0.05)。与LPS组比较,LPS+VD组在12 h(85.23%±0.36%),24 h(79.82%±0.63%),48 h(76.28%±0.72%)的细胞存活率和CYP27B1(4.42±0.14),VDR mRNA(5.13±0.56)表达升高,YAP阳性细胞核数(24.41±3.23个)和YAP/TAZ复合物核转位率(1.47%±0.26%)降低,IL-2(1.21±0.06),IFN-γ(1.13±0.42),TNF-α(1.03±0.37)和IL-1β(1.61±0.58)蛋白表达降低,差异具有统计学意义(t=7.263,19.892,23.145,27.872,26.982,14.762,13.623,18.273,25.314,27.873,22.134,均P<0.01)。结论血清25-OH-VD水平与NIP严重程度相关,外源性给予VD补充可通过调控TGF-β介导的YAP/TAZ核转位机制发挥抗炎作用,减轻NIP损伤。