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枯草芽孢杆菌内切葡聚糖酶Ala263位点突变对其活性的影响
被引量:
1
1
作者
陆宁
柳帅
+1 位作者
张玉洁
林凌
《中国酿造》
CAS
2013年第3期122-125,共4页
研究通过对枯草芽孢杆菌内切葡聚糖酶celA进行三级结构模拟分析,发现其263位丙氨酸残基与底物纤维三糖间存在一定的作用;利用定点突变技术celA 263丙氨酸残基位点进行了不同的替换。结果显示野生酶的263位点丙氨酸(A263)突变为酪氨酸(A2...
研究通过对枯草芽孢杆菌内切葡聚糖酶celA进行三级结构模拟分析,发现其263位丙氨酸残基与底物纤维三糖间存在一定的作用;利用定点突变技术celA 263丙氨酸残基位点进行了不同的替换。结果显示野生酶的263位点丙氨酸(A263)突变为酪氨酸(A263Y)、异亮氨酸(A263I)、丝氨酸(A263S)和缬氨酸(A263V)后,其水解圈活性和CMC活力均大幅下降;DNS法测定的CMC活力分别由野生型的133.0U/L下降为A263Y 13.7U/L,A263I 36.1U/L,A263S 29.8U/L和A263V 19.6U/L。通过进一步的蛋白质精细结构模拟解析发现,263丙氨酸残基位点处于该蛋白活性口袋的内表面,为底物通道的结构区域,其羰基与底物糖基吡喃环上的羟基形成了分子间氢键。该氢键的形成可能对维持底物构象,正确引导底物在活性口袋中的定位起重要作用。该研究为诠释蛋白空间结构与其催化活性的内在联系奠定了一定的理论基础。
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关键词
枯草芽孢杆菌
内切葡聚糖酶
263丙氨酸位点
突变
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职称材料
题名
枯草芽孢杆菌内切葡聚糖酶Ala263位点突变对其活性的影响
被引量:
1
1
作者
陆宁
柳帅
张玉洁
林凌
机构
安徽师范大学生命科学学院
出处
《中国酿造》
CAS
2013年第3期122-125,共4页
基金
安徽省自然科学基金资助项目(1208085QC56)
国家级质量工程双语教学示范课程资助项目(教高函[2009]19号)
<现代遗传学>省级教学团队本科生研究性项目(20100215)
文摘
研究通过对枯草芽孢杆菌内切葡聚糖酶celA进行三级结构模拟分析,发现其263位丙氨酸残基与底物纤维三糖间存在一定的作用;利用定点突变技术celA 263丙氨酸残基位点进行了不同的替换。结果显示野生酶的263位点丙氨酸(A263)突变为酪氨酸(A263Y)、异亮氨酸(A263I)、丝氨酸(A263S)和缬氨酸(A263V)后,其水解圈活性和CMC活力均大幅下降;DNS法测定的CMC活力分别由野生型的133.0U/L下降为A263Y 13.7U/L,A263I 36.1U/L,A263S 29.8U/L和A263V 19.6U/L。通过进一步的蛋白质精细结构模拟解析发现,263丙氨酸残基位点处于该蛋白活性口袋的内表面,为底物通道的结构区域,其羰基与底物糖基吡喃环上的羟基形成了分子间氢键。该氢键的形成可能对维持底物构象,正确引导底物在活性口袋中的定位起重要作用。该研究为诠释蛋白空间结构与其催化活性的内在联系奠定了一定的理论基础。
关键词
枯草芽孢杆菌
内切葡聚糖酶
263丙氨酸位点
突变
Keywords
Bacillus subtilis
endoglucanase
263
-alanine
site-directed mutagenesis
分类号
Q556 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
枯草芽孢杆菌内切葡聚糖酶Ala263位点突变对其活性的影响
陆宁
柳帅
张玉洁
林凌
《中国酿造》
CAS
2013
1
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