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羊瘙痒因子263K毒株感染金黄地鼠后鼠脑组织中检出PrP-res蛋白及其神经病理学研究 被引量:26
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作者 孙宪锋 董小平 +4 位作者 张宝云 侯星生 胥爱源 赵同兴 洪涛 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期48-53,共6页
羊瘙痒病是累及山羊及绵羊的可传播海绵状脑病。为了观察羊瘙痒因子 (Scrapie)的病原特征及病理组织改变特点 ,将羊瘙痒因子 2 6 3K毒株颅内接种至金黄地鼠。经过 81~ 110天的潜伏期 ,89%的动物发病 (17/19只 )。对发病地鼠的神经病理... 羊瘙痒病是累及山羊及绵羊的可传播海绵状脑病。为了观察羊瘙痒因子 (Scrapie)的病原特征及病理组织改变特点 ,将羊瘙痒因子 2 6 3K毒株颅内接种至金黄地鼠。经过 81~ 110天的潜伏期 ,89%的动物发病 (17/19只 )。对发病地鼠的神经病理学检测发现 ,海绵状空泡变性的检出率为 5 9% ,淀粉样斑的检出率为 17 6 %。利用免疫组化和蛋白酶消化后的Westernblotting检测证实 ,10 0 %的发病地鼠的脑组织中都出现蛋白酶抗性朊蛋白 (PrP res)。17只发病地鼠脑组织提取物中 ,PrP res的泳动位置和分子量大小完全一致 ,出现两条分子量在 2 5kD~ 31kD的反应带。尝试应用快速玻片印迹法检测病变组织中的PrP res,结果显示 ,与常规固定包埋切片的免疫组化检出效果相似。这提示脑组织印片法可成为临床检测克 雅氏病 (Creutzfeldt Jacobdisease ,CJD)患者脑组织活检标本中PrP res的快速、有效的方法。羊瘙痒因子 2 6 3K成功感染金黄地鼠再次证明 ,金黄地鼠是TSE感染因子良好的动物模型 ,发病率高 ,潜伏期短 ,发病动物PrP res的检出率明显高于典型病理改变的检出率。新生成的PrP res的电泳类型与接种的TSE因子有关 ,与宿主的个体差异无关 ,提示TSE感染因子的确存在“株”的现象。 展开更多
关键词 羊瘙羊因子263k 可传播性海棉状脑病 神经病理学分析 蛋白酶抗性朊蛋白 羊瘙痒病
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羊瘙痒因子263K经颅内注射感染仓鼠后半数致死量(LD_(50))的测定 被引量:9
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作者 石琦 张宝云 +4 位作者 高晨 韩俊 高永军 周玉玲 董小平 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期252-255,共4页
目的测定羊瘙痒因子263K经颅内注射感染仓鼠后的LD50。方法将感染羊瘙痒因子263K的仓鼠脑组织用生理盐水制成10%(w/v)脑组织匀浆,梯度稀释后感染仓鼠,观察仓鼠的发病情况。以Reed-Muench公式计算LD50,用West-ern blot方法检测观察期结... 目的测定羊瘙痒因子263K经颅内注射感染仓鼠后的LD50。方法将感染羊瘙痒因子263K的仓鼠脑组织用生理盐水制成10%(w/v)脑组织匀浆,梯度稀释后感染仓鼠,观察仓鼠的发病情况。以Reed-Muench公式计算LD50,用West-ern blot方法检测观察期结束后发病及仍存活的仓鼠脑组织、脾组织中抵抗蛋白酶K的PrPSc。结果当颅内接种稀释度由低到高变化时,仓鼠发病的潜伏期及病程同时也由短到长发生变化。发病仓鼠脑组织中可以检测到PrPSc,但是PrPSc的量在不同的组之间无太大差别。观察期结束后,仍存活的仓鼠脑组织中未检测到具有PK抗性的PrP信号。结论本实验室保存的羊瘙痒因子263K经颅内注射感染仓鼠的LD50为9.2-log10LD50i.c.units/0.001g brain,即当对仓鼠颅内接种10μl羊瘙痒因子263K的10-9.2稀释液时,50%的仓鼠会死亡。 展开更多
关键词 羊瘙痒因子263k 半数致死量 颅内注射
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羊瘙痒因子263K感染的金黄仓鼠脑中PrP^(Sc)的动态沉积特点 被引量:5
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作者 韩俊 高建梅 +5 位作者 李冰玲 肖新莉 高晨 张宝云 马贵平 董小平 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期26-30,共5页
目的 观察羊瘙痒因子 2 63K感染的金黄仓鼠脑中PrPSc的沉积特点。方法 颅内接种羊瘙痒因子 2 63K感染金黄仓鼠 ,分别于接种后第 2 0天、40天、50天、60天和 70天取脑组织 ,用免疫组化法检测PrPSc的沉积 ,HE染色观察病理变化 ,Westernb... 目的 观察羊瘙痒因子 2 63K感染的金黄仓鼠脑中PrPSc的沉积特点。方法 颅内接种羊瘙痒因子 2 63K感染金黄仓鼠 ,分别于接种后第 2 0天、40天、50天、60天和 70天取脑组织 ,用免疫组化法检测PrPSc的沉积 ,HE染色观察病理变化 ,Westernblot检测蛋白酶抗性PrPSc。结果 颅内接种 2 63K后第 2 0天 ,脑组织中即可检测到耐热和耐蛋白酶K的PrPSc的沉积 ,呈散在分布 ;第 40天可见细胞内PrPSc的沉积 ,第 50天脑组织中出现灶性、颗粒状、细胞内PrPSc的沉积 ,累及部位扩大 ,第60 - 70天可见弥漫性呈桑葚状、斑块状沉积物。PrPSc主要沉积于大脑皮质Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ层 ,海马锥体细胞层 ,小脑皮质颗粒层。HE染色结果显示大脑皮质海绵样病变在接种后 40天出现 ,随着接种时间的延长而加剧。Westernblot检测显示PrPSc在接种后 40天即可检出 ,PrP总量和PrPSc含量随着接种时间的延长而增加。结论 随着接种时间延长 ,羊瘙痒因子 2 63K感染的金黄仓鼠脑中PrPSc沉积累及的范围、程度扩大 ,IHC检测脑组织中PrPSc的沉积早于临床症状的出现 ,甚至其它检测方法的检出。 展开更多
关键词 羊瘙痒因子263k感染 金黄仓鼠 PrP^sc 动态沉积特点 免疫组化 海绵样病变
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羊瘙痒因子263K经灌胃感染仓鼠动物模型的建立 被引量:1
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作者 张瑾 陈岚 +6 位作者 肖新莉 张宝云 韩俊 高建梅 姜慧英 刘勇 董小平 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期119-123,共5页
目的 胃肠感染是大多数动物类传染性海绵状脑病(TSE)传播的最主要途径。建立羊瘙痒因子263K灌胃感染仓鼠动物模型,并研究其发病特征。方法 Scrapie 263K毒株低剂量和高剂量经灌胃途径接种金黄仓鼠,在终末期取脑组织,用HE染色观察病理... 目的 胃肠感染是大多数动物类传染性海绵状脑病(TSE)传播的最主要途径。建立羊瘙痒因子263K灌胃感染仓鼠动物模型,并研究其发病特征。方法 Scrapie 263K毒株低剂量和高剂量经灌胃途径接种金黄仓鼠,在终末期取脑组织,用HE染色观察病理变化,免疫组化法检测PrPSc 的组织沉积特点, Western blot 检测PrPSc 分子特征。结果 低剂量灌胃组仅一只动物发病,高剂量组所有接种动物均发病,潜伏期较颅内注射组明显延长。在脑组织中观察到典型的病理改变;PrPSc免疫组化检测显示弥漫性沉积于脑组织,主要累及脑干、大脑皮层深层、小脑,基本与病理学改变累及的区域一致;Western Blot检测发现感染动物脑提取物出现可抵抗蛋白酶消化的PrPSc条带,与颅内注射组脑组织提取物中PrPSc电泳性状完全一致。结论 羊瘙痒因子263K灌胃可成功引起动物发病,与颅内注射比较,潜伏期、神经病理变化和PrPsc沉积均有不同,可能受到感染途径的影响。 展开更多
关键词 羊瘙痒病 263k 灌胃 PrP^Sc
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羊瘙痒因子263K感染金黄地鼠后生物学特性的检测
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作者 鲁云 赵德明 杨利峰 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第3期112-115,共4页
本次研究将感染羊瘙痒因子263K的脑匀浆通过颅内接种于金黄地鼠,应用临床特征观察、组织病理学观察、免疫组织化学观察以及Western blotting等技术对该毒株的生物学特性进行检测,分析和探讨其对金黄地鼠有无致病性以及致病特点,并为国... 本次研究将感染羊瘙痒因子263K的脑匀浆通过颅内接种于金黄地鼠,应用临床特征观察、组织病理学观察、免疫组织化学观察以及Western blotting等技术对该毒株的生物学特性进行检测,分析和探讨其对金黄地鼠有无致病性以及致病特点,并为国内朊病毒的研究建立263K动物模型。结果表明,根据潜伏期及临床症状、组织病理学特征、免疫组织化学特征和Western blotting检测结果等判断,该毒株在金黄地鼠体内所表现的生物学特性与原毒株基本一致,由此也建立了国内该毒株的金黄地鼠动物研究模型,为进一步深入研究朊病毒疾病打下重要的基础。 展开更多
关键词 263k 生物学特性 朊病毒 羊痒病
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羊瘙痒病263K毒株感染的仓鼠脑中PrP分子形式多样性的动态测定 被引量:3
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作者 高建梅 高晨 +4 位作者 周晓勃 张瑾 韩俊 张宝云 董小平 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期324-329,共6页
正常细胞的朊蛋白(PrPC)代谢和构象的改变是引发动物和人类可传播性海绵状脑病(transmissiblespongiformencephalopathies,TSEs)的根本原因。将羊瘙痒病(scrapie)仓鼠适应株263K颅内接种仓鼠,在接种后的第20、40、50、60、70、80天,通过... 正常细胞的朊蛋白(PrPC)代谢和构象的改变是引发动物和人类可传播性海绵状脑病(transmissiblespongiformencephalopathies,TSEs)的根本原因。将羊瘙痒病(scrapie)仓鼠适应株263K颅内接种仓鼠,在接种后的第20、40、50、60、70、80天,通过Westernblot动态检测仓鼠脑中PrP存在的形式。结果在接种后第40天,在感染动物脑组织中即检测到PrPSc分子,比临床症状出现的时间早(平均潜伏期为66 7±1 1天),且无糖基化形式的PrP分子所占百分比在接种后期增加明显。除了标准分子量大小(30kD~35kD)的PrP分子外,在感染动物脑中存在着高分子量和低分子量形式的PrP分子。定量分析显示,随着接种潜伏期的延长,不同形式PrP分子的含量也在增加,其中低分子量形式的PrP分子与临床症状的出现密切相关。蛋白去糖基化实验表明,在感染动物脑组织中,除了标准分子量大小的PrP蛋白外,还存在一条更小分子量的PrP条带,而正常动物脑组织仅存在标准大小的PrP分子。低分子量形式的PrP分子具有与全长PrP分子相类似的糖基化模式。结果提示,scrapie263K感染的仓鼠脑组织中存在不同分子形式的PrPSc,其PrP分子的代谢可能不同于正常动物。 展开更多
关键词 传染性海绵状脑病 羊瘙痒病毒株 糖基化 PrP分子
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Comparison Study on Clinical and Neuropathological Characteristics of Hamsters Inoculated With Scrapie Strain 263K in Different Challenging Pathways 被引量:7
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作者 JINZHANG LANCHEN +10 位作者 BAO-YUNZHANG JUNHAN XIN-LIXIAO HAI-YANTIAN BIN-LINGLI CHENGAO JIAN-MEIGAO GUI-PINGMA CAI-MINXU YONGLIU XIAO-PINGDONG 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2004年第1期65-78,共14页
Objective To understand the infectious characteristics of a hamster-adapted scrapie strain 263K with five different routes of infection including intracerebral (i.e.), intraperitoneal (i.p.), intragastrical (i.g.), in... Objective To understand the infectious characteristics of a hamster-adapted scrapie strain 263K with five different routes of infection including intracerebral (i.e.), intraperitoneal (i.p.), intragastrical (i.g.), intracardiac and intramuscular (i.m.) approaches. Methods Hamsters were infected with crude- or fine-prepared brain extracts. The neuropathological changes, PrPSc deposits, and patterns of PK-resistant PrP were analyzed by HE stain, immunohistochemistry (IHC) assay and Western blot. Reactive gliosis and neuron loss were evaluated by glial fibrillary acidic protein (GFAP) and neuron specific enolase (NSE) specific IHC. Results The animals inoculated in i.m. and Lp. ways with crude PrPSc extracts showed clinical signs at the average incubation of 69.212.8 and 65.5±3.9 days. Inoculation in i.c. and intracardiac ways with fine PrPSc extracts (0.00035 g) caused similar, but relative long incubation of around 90 days. Only one out of eight hamsters challenged in i.g way with low dosage (0.01 g) became ill after a much longer incubation (185 d), while all animals (4/4) with high dosage (0.04 g) developed clinical signs 105 days postinfection. The most remarkable spongiform degeneration and PrPSc deposits were found in brain stem among the five challenge groups generally. The number of GFAP-positive astrocytes increased distinctly in brain stems in all infection groups, while the number of NSE-positive cells decreased significantly in cerebrum, except i.c. group. The patterns of PK-resistant PrP in brains were basically identical among the five infection routes. Conclusion Typical TSE could be induced in hamsters by inoculating strain 263K in the five infection ways. The incubation periods in bioassays depend on infective dosage, administrating pathway and preparation of PrPSc. The neuropathological changes and PrPSc deposits seem to be related with regions and inoculating pathways. 展开更多
关键词 Transmissible spongifonn encephalopathy SCRAPIE Strain 263k PrP^(Sc) Bioassay NEUROPATHOLOGY Inoculating pathways
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不同剂量羊瘙痒因子263K颅内感染仓鼠临床终末期脑中GFAP表达的研究
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作者 田婵 张宝云 +4 位作者 石琦 韩俊 高晨 韩露 董小平 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期241-243,共3页
目的研究不同剂量羊瘙痒因子263K经颅内注射感染仓鼠后,在发病的终末期星形胶质细胞增生程度是否与注射剂量及潜伏期长短有关。方法以胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)作为星形胶质细胞增生的分子标志物,采... 目的研究不同剂量羊瘙痒因子263K经颅内注射感染仓鼠后,在发病的终末期星形胶质细胞增生程度是否与注射剂量及潜伏期长短有关。方法以胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)作为星形胶质细胞增生的分子标志物,采用Western Blot和免疫组化方法检测感染仓鼠终末期脑匀浆和脑组织病理切片中的GFAP表达,经定量分析比较各感染剂量组间是否存在差异。结果与正常对照相比,不同剂量感染仓鼠发病终末期脑组织GFAP阳性细胞数量和总GFAP含量均明显升高,但各感染剂量组间无显著差异。结论不同感染剂量羊瘙痒因子263K经颅内注射感染仓鼠在发病终末期脑中星形胶质细胞的增生程度相似,与感染剂量及潜伏期无关联性。 展开更多
关键词 朊病毒 羊瘙痒因263k 纤维蛋白
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海防惨案与南京国民政府的交涉 被引量:2
9
作者 张金超 《广东社会科学》 CSSCI 北大核心 2011年第5期147-153,共7页
发生于1927年的海防惨案是民国时期具较大影响的涉侨事件。事发偶然,却是双方长期矛盾的大爆发。案中华侨损失惨重,引起社会各界的强烈关注。南京国民政府通过函商、抗议、会商、派员宣慰等途径积极斡旋,但收效不大。惨案的解决,延宕多... 发生于1927年的海防惨案是民国时期具较大影响的涉侨事件。事发偶然,却是双方长期矛盾的大爆发。案中华侨损失惨重,引起社会各界的强烈关注。南京国民政府通过函商、抗议、会商、派员宣慰等途径积极斡旋,但收效不大。惨案的解决,延宕多年。此案揭示了南京国民政府的初期外交在受制于法国的窘境下,以树立政府的新形象所做的种种努力,其结局促成了侨务局的设置、侨务条例的制订及1935年《中法越南商约》的签订,不失为"革命外交"的重大成果。 展开更多
关键词 K263
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THERMAL CONDUCTIVITY OF THF CLATHRATE HYDRATE FROM 243 K TO 263 K 被引量:5
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作者 HUANG Duzi~(1,2) and FAN Shuanshi~1(~1Center for Gas Hydrate, Guangzhou Institute of Energy Conversion, CAS, Guangzhou, 510070, Guangdong, China ~2 Department of Thermal Science & Energy Engineering, USTC, Hefei, 230036, Anhui, China) 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第z1期71-75,共5页
Using transient plane source technique, we measured THF hydrate thermal conductivity from 243 K to 263 K. The sample THF solution is over saturated in order to avoid the effect of ice. And also to avoid the effect of ... Using transient plane source technique, we measured THF hydrate thermal conductivity from 243 K to 263 K. The sample THF solution is over saturated in order to avoid the effect of ice. And also to avoid the effect of crystal anisotropy, the THF hydrate was crushed to measure. In the test temperature value increases with the temperature increasing. 展开更多
关键词 THF in or IT THERMAL CONDUCTIVITY OF THF CLATHRATE HYDRATE FROM 243 K TO 263 K of that
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