高真空扩散泵油275^#生产工艺改进

简述了高真空扩散泵油275#的生产工艺,分析了水解釜材质和精馏系统存在的问题,提出了改造意见,并比较了改造效果。结果表明,将水解釜材质由搪瓷更换成不锈钢后,既节约原材料消耗,又减少水洗过程中的物料损失和排污量,从而大幅度降低了产品的生产成本;精馏系统装置经过改造后,产品中的三甲基五苯基三硅氧烷含量比改造前生产的产品高出15个百分点,提高到84%以上;且产能翻一番。

微小扇头蜱microRNA文库建立及miR-275靶蛋白Vg-2的生物信息学分析

【目的】建立饱血状态雌性微小扇头蜱的microRNA文库,鉴定所含microRNA的种类,分析miR-275靶蛋白Vg-2的二、三级结构,检测其信号肽、跨膜结构域、磷酸化及糖基化位点,预测其优势抗原表位。【方法】以雌性、饱血状态的微小扇头蜱为研究对象,通过高通量测序技术建立其microRNA文库,利用软件miRDP及检索miRBase数据库,鉴定饱血状态雌性微小扇头蜱所含的microRNA种类;运用在线软件EXPASY、PRABI与SWISS-MODEL等分析Vg-2蛋白质理化性质,推断其二、三级结构;运用在线软件SignalP 5.0、TMHMM、NetPhos 3.1及NETCGlyc 1.0检测该蛋白的信号肽、跨膜结构域、磷酸化与糖基化位点;利用在线软件ABCpred Prediction、Scratch、IEDB和NetCTL预测Vg-2蛋白的B、T细胞优势抗原表位。【结果】获得成熟的microRNA 383个,其中67个为已被鉴定和注释的microRNA,316个为新发现的microRNA;微小扇头蜱的Vg-2基因序列全长5040 bp,共编码1679个氨基酸;Vg-2蛋白为亲水性酸蛋白,分子大小为189.89 kDa,理论等电点(pI)为6.08,其二级结构以无规则卷曲为主要结构成分,而其三级结构却以β-折叠为主要结构成分;Vg-2蛋白存在268个磷酸位点,20个糖基化位点,无信号肽和跨膜结构域,拥有58个B细胞优势抗原表位和8个T细胞优势抗原表位。【结论】在饱血状态雌性微小扇头蜱体内含有383个microRNA,受miR-275调控的Vg-2蛋白为结构不稳定的亲水性酸蛋白,具有良好的抗原性与免疫源性。

275 nm波长UVC光的皮肤安全性研究

目的探索275 nm C波段紫外线(Ultraviolet C,UVC)光照射对皮肤细胞和血管内皮细胞生存、生长的影响,以及其长期和短期照射对裸鼠皮肤的影响,以确定其安全性。方法设计275 nm UVC-LED光源,分别对人类永生化表皮细胞和人脐静脉内皮细胞进行不同时间的照射,观察不同照射剂量对其生存生长的影响;对裸鼠皮肤进行不同时间的照射,观察外观变化,并收集照射区域组织进行免疫组化分析。结果低剂量275 nm UVC光直接照射细胞时,有一定的皮肤相关细胞安全性。但是高剂量的275 nm UVC光照射会对细胞产生较大伤害。同时,不论是低剂量还是高剂量照射275 nm UVC光均不会诱导裸鼠皮肤DNA损伤和表皮损伤。结论275 nm UVC光具有一定的皮肤安全性,有一定的临床应用前景。

组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275诱导骨髓瘤细胞株U266凋亡过程中Survivin的表达

背景与目的:组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitors,HDACi)是一类具有抗肿瘤活性的新型药物,主要通过诱导细胞凋亡发挥作用。本实验研究HDACi(MS-275)对人骨髓瘤细胞系U266细胞增殖和凋亡的影响及其与Survivin表达的关系。方法:将不同浓度的MS-275作用于U266细胞不同时间后,用台盼蓝拒染法观察药物对细胞活力的影响;通过瑞氏-姬姆萨染色观察药物作用后细胞形态学的变化;用流式细胞仪分析细胞周期;用Western blot检测Survivin、P21和Cdk4等的蛋白表达,以及凋亡信号通路中Caspase-3活化及蛋白聚ADP核糖聚合酶[poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]的裂解情况。结果:MS-275呈时间和剂量依赖性抑制U266细胞增殖,阻断细胞周期于G0/G1期。MS-275作用U266细胞48h时的IC50为1.39μmol/L;2μmol/L的MS-275作用U266细胞24h后,G0/G1期细胞占66.39%,36h后G0/G1期细胞占89.80%。瑞氏-姬姆萨染色显示细胞形态发生明显变化。Western blot检测结果显示,MS-275作用U266细胞后,Survivin和Cdk4表达下降,P21表达增加,Caspase3被裂解活化,其底物蛋白PARP发生剪切。结论:MS-275抑制人多发性骨髓瘤细胞系U266增殖并诱导细胞凋亡,可能与下调Survivin蛋白的表达有关。

MS-275与姜黄素联用阻断细胞生存信号通路诱导前列腺癌细胞凋亡

目的探讨小剂量姜黄素和组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275联用诱导前列腺癌细胞系DU145凋亡的作用机制。方法 DU145细胞分为对照组,MS-275组(分别用1、2、4、8μmol/L的MS-275单独处理细胞24、48h)、姜黄素组(分别用10、20、40、80μmol/L的姜黄素处理细胞24、48h)、MS-275+姜黄素组(1μmol/LMS-275+20μmol/L姜黄素处理细胞24、48h)。采用MTT比色法测定药物单用或联用对细胞的杀伤效应,流式细胞术分析细胞周期的改变,Westernblotting检测细胞内蛋白表达水平的变化。结果 MS-275和姜黄素单用都能够呈剂量和时间依赖性地杀伤DU145细胞;小剂量MS-275(1μmol/L)+姜黄素(20μmol/L)联用时能够协同杀伤细胞,两种药物联合处理细胞48h后,细胞的生存率仅为45.9%;细胞周期检测表明MS-275和姜黄素联用导致细胞出现明显的亚G1峰,提示DU145细胞被诱导凋亡;Western blotting结果证实联合用药48h后,细胞内生存信号蛋白激酶Akt和ERK的磷酸化水平下降,同时凋亡标志蛋白PARP发生剪切。结论 MS-275和姜黄素联用可以协同杀伤DU145细胞,并通过抑制细胞内Akt和ERK生存信号通路的活性来诱导细胞凋亡。

组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275对人宫颈癌SiHa细胞增殖及凋亡的影响

目的:观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275对人宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的机制。方法:以MS-275(0、5、10、20μmol/L)作用于人宫颈癌SiHa细胞,MTT法检测细胞的增殖,流式细胞术检测细胞的凋亡,Western blotting法检测细胞内乙酰化组蛋白H4(acetylhistone4,Ac-H4)水平,RT-PCR检测p21和p53 mRNA的表达。结果:MS-275作用后,人宫颈癌SiHa细胞增殖受到抑制、细胞凋亡增加,20μmol/L MS-275作用下,细胞增殖率仅为(13.95±8.91)%,凋亡率高达(38.38±1.78)%,显著高于其他各组(P<0.01)。MS-275作用后,细胞内Ac-H4水平增加(P<0.01),p21和p53 mRNA表达增加(均P<0.01)。结论:MS-275可抑制人宫颈癌SiHa细胞的增殖,诱导SiHa细胞凋亡;上调p21和p53表达、提高组蛋白乙酰化水平可能是其作用机制之一。

天门·天宫·兜率天宫——敦煌第275窟弥勒天宫图像的来源

四川、陕北、河西本土汉晋以西王母为主神的天门图像、长江流域汉晋佛像和犍陀罗弥勒天宫等,促成了敦煌第275窟北凉弥勒天宫图像的出现,在敦煌北魏洞窟流行并影响云冈。中土早期弥勒天宫图像的形成是犍陀罗佛像与汉地西王母神灵信仰传统的契合,也是佛教艺术中国本土化的早期例证。

MAX274/275有源滤波器的应用研究

介绍MAX274/275有源滤波器的特性及电路参数的设计和测控应用实例。

莫高窟第275窟的年代方案

第275窟可以置于莫高窟自身、吐鲁番——河西早期石窟两个序列中进行比附。比附状况显示,第275窟与吐鲁番——河西十六国晚期石窟面貌差异大,与莫高窟北魏洞窟联系紧密,第275窟年代为北魏早期较为合理。这一年代推断与北魏攻占河西后敦煌独盛、余地皆衰的历史背景吻合。

240/275系列柴油机的发展和展望

较详细地介绍了我国重要的中速柴油机——240／275系列柴油机的发展,给出了240／275系列柴油机的型谱和重要技术参数,及同国外同类产品的比较。指出了240／275系列柴油机的发展方向。

HDAC抑制剂MS-275诱导人肺腺癌细胞系A549基因表达谱分析

目的研究HDAC抑制剂MS-275对人肺腺癌A549细胞基因表达谱的影响,探讨MS-275抗肿瘤的分子机制。方法运用制备的包含8064个人类基因的cDNA芯片检测MS-275诱导人肺腺癌A549细胞基因表达谱的变化。结果MS-275(2μmo·lL-1)处理A549细胞16h后,cDNA芯片分析筛选出MS-275对A549细胞的影响基因803个,其中上调基因440个,下调基因363个,其中包括许多与细胞凋亡、细胞分化、DNA修复等相关基因如p21、DR6。结论MS-275通过外源性凋亡信号、内源性凋亡信号和细胞周期阻滞等多种分子机制诱导A549细胞凋亡。

U266细胞在组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275诱导下凋亡观察

目的:研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275对人多发性骨髓瘤U266细胞的增殖和凋亡的影响.方法:台盼蓝拒染法观察MS-275对细胞活力的影响;瑞氏—姬姆萨染色观察药物对细胞形态学变化;流式细胞仪分析细胞周期;West-ernBlot检测凋亡信号通路中Caspase-3,Caspase-8,Caspase-9活化及蛋白聚ADP核糖聚合酶[poly(ADP-ribose)polymer-ase,PARP]裂解情况.结果:MS-275呈时间和剂量依赖性抑制U266细胞增殖,阻断细胞周期于G0/G1期.MS-275作用48h的IC50为1.39μmol/L;2μmol/LMS-275作用细胞24h后,G0/G1期64.57%;36h占82.20%.瑞氏—姬姆萨染色显示细胞发生明显变化.WesternBlot检测表明MS-275作用U266细胞后,Caspase-3,Caspase-8,Caspase-9被裂解活化,其底物蛋白聚ADP核糖聚合酶发生剪切,细胞发生凋亡.结论:MS-275可抑制细胞增殖,并使细胞阻滞在G0/G1期,通过激活细胞内外2条凋亡级联信号通路诱导U266细胞凋亡.

MS-275增强顺铂致肝癌细胞凋亡效应的实验研究

目的:探讨MS-275与化疗药物顺铂(cisplatin,DDP)联合应用对肝癌细胞系HLE增殖的抑制效果。方法:通过MS-275联合化疗药物顺铂处理培养的肝癌细胞系HLE,体外细胞毒性实验(MTT)法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术(FCM)检测细胞周期和凋亡率。结果:MTT结果显示:0.5μmol/LMS-275与6.25μg/ml DDP联合应用后5d,HLE细胞增殖抑制率达(97.86士5.62)%,明显高于单用MS-275组的(51.75±2.31)%和DDP组的(43.48士2.39)%(P<0.05)。流式细胞术结果显示:MS-275与DDP联合应用明显导致细胞S期减少,G_2/M期阻滞;MS-275联合DDP组细胞凋亡率为(17.46士2.57)%,明显高于单用MS-275组的(7.62士0.59)%和DDP组的(7.36±0.47)%(P<0.05)。结论:MS-275与DDP联合应用能显著提高对肝癌细胞系HLE增殖的抑制作用。

MS-275联合低剂量顺铂对小鼠肝癌移植瘤生长抑制作用的研究

目的:探讨MS-275与顺铂联合应用对小鼠H22肝癌移植瘤的抑制作用及其机制。方法:将接种H22细胞的荷瘤小鼠随机分为对照组、MS-275组、顺铂组、顺铂+MS-275联合治疗组;15d后处死小鼠,通过称量各小鼠H22移植瘤的质量,计算抑瘤率;电镜观察荷瘤小鼠肿瘤组织超微结构改变;应用免疫组化(SP法)检测半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)和血管内皮生长因子(VEGF)表达及微血管密度(MVD)。结果:联合治疗组对移植瘤抑制力最强,抑瘤率达66.8%,电镜下可见较为典型的细胞凋亡形态学改变;MS-Z75与顺铂联合治疗组可上调Caspase表达,下调VEGF表达并减低MVD,其与对照组比较均具有统计学差异(P<0.05)。结论:MS-275与顺铂联合应用,能明显抑制小鼠肝癌移植瘤生长,这种作用可能与诱导肝癌细胞凋亡及抑制癌内新血管生成有关。

组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275对U266细胞增殖的影响

目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275对人多发性骨髓瘤细胞U266增殖的影响。方法将不同浓度的MS-275以不同时间作用于U266细胞,用台盼蓝拒染法观察药物对细胞活力的影响;瑞氏-姬姆萨染色观察药物对细胞形态学变化;流式细胞仪分析细胞周期;Western Blot检测P21、Cdk4、Acetyl-histone H3及PARP等的蛋白表达。结果MS-275呈时间和剂量依赖性抑制U266细胞增殖,阻断细胞周期于G0/G1期,细胞发生明显变化。出现P21表达增加,Cdk4表达下降,同时出现PARP的裂解。结论组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275具有抑制人骨髓瘤细胞U266增殖作用,使细胞阻滞在G0/G1期,最终诱导U266细胞凋亡。

组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275对卵巢癌SKOV3细胞增殖凋亡的影响

目的探讨MS-275对卵巢癌SKOV3细胞增殖凋亡的影响及其作用机制。方法 MTT法检测MS-275和顺铂单药及联合用药对SKOV3细胞增殖的影响,并计算半抑制浓度IC50;流式细胞术检测MS-275和顺铂单药及联合用药对SKOV3细胞凋亡的影响;Western-Blot法检测各组BCL2、survivin及p21蛋白的表达。结果 MS-275和顺铂两单药均可抑制SKOV3的增殖,各浓度组具有统计学差异(P<0.05),联合用药时可显著降低顺铂半抑制浓度(P<0.05);同时两单药组可促进SKOV3细胞凋亡(P<0.05),联合用药时凋亡作用更显著(P<0.05);MS-275和顺铂可显著抑制SKOV3细胞BCL-2和survivin蛋白的表达,增强p21的表达(P<0.05)。结论 MS-275抗SKOV3细胞增殖,促进其凋亡及增强顺铂敏感性的机制可能与抑制HDAC活性,抑制BCL-2和survivin蛋白表达,促进p21蛋白表达有关。

组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275在体外抑制胃癌细胞的实验研究

背景与目的:组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitors,HDACis)对于很多肿瘤细胞具有选择性的诱导凋亡及分化作用,而对正常细胞的细胞毒性作用很低,这一选择性杀伤作用使HDACis成为目前抗肿瘤分子靶向药物的研究热点。本文研究了HDACis MS-275对人胃癌细胞SGC-7901、人胃黏膜正常细胞GES-1和张氏肝细胞(CHANG-LIVER)的选择性作用及机制,为HDACis的临床应用提供了理论依据。方法:不同终浓度MS-275处理SGC-7901细胞、GES-1和张氏肝细胞,用WST-1方法检测药物对细胞的生长抑制作用;AnnexinV、PI双标流式细胞术检测MS-275对肿瘤细胞SGC-7901和正常细胞的选择性杀伤作用;TUNEL染色观察肿瘤细胞核内凋亡情况。结果:MS-275对胃癌细胞SGC-7901具有明显的生长抑制作用,并且这种作用具有时间及剂量依赖性;MS-275的杀伤作用具有选择性,对正常细胞GES-1和张氏肝细胞并不表现出促凋亡作用;TUNEL染色证明MS-275能诱导SGC-7901细胞核内发生DNA断裂,是细胞发生凋亡的重要指标。结论:MS-275具有体外选择性杀伤胃癌细胞的作用,对正常细胞没有明显的杀伤作用,有希望成为新一代的胃癌临床治疗的肿瘤分子靶向药物。

MS-275对胃腺癌细胞抑制作用及其机制研究

目的采用分子靶向药物治疗胃癌是近年研究热点。探讨组蛋白去乙酰化酶抑制因子MS-275通过多种途径选择性杀伤人胃低分化腺癌细胞株SGC-7901的机制。方法 10-100μmol/L药物浓度梯度的MS-275分别与SGC-7901、人正常胃黏膜上皮细胞株GES-1共培养24 h后,采用WST-1法检测SGC-7901及GES-1细胞存活率,流式细胞仪检测分析SGC-7901细胞线粒体膜电位变化,Western blot、实时荧光定量聚合酶链反应（RTQ-PCR）分别检测处理后胃癌细胞中p21、p27、p57、cyclin B1、cyclin D1基因及相应蛋白表达情况。结果 MS-275可使SGC-7901细胞存活率降低（P〈0.05）,其作用随药物浓度增大更明显,对GES-1细胞无显著影响;MS-275可降低SGC-7901细胞线粒体膜电位（P〈0.05）;MS-275显著提升p21、p27、p57基因及相应蛋白相对含量,同时降低cyclin B1、cyclin D1基因及其蛋白相对含量（P〈0.05）。结论 MS-275可选择性杀伤胃腺癌细胞SGC-7901,这一作用可能是通过线粒体凋亡途径及调控细胞周期相关基因和蛋白表达实现的。

MS-275抑制肝癌细胞HepG2增殖及其相关信号传导机制的体外实验研究

目的研究组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂MS-275诱导人肝癌细胞株HepG2细胞周期阻滞作用,并对其信号传导机制进行初步探讨。方法体外培养人肝癌细胞株HepG2;应用MTT比色法观察MS-275对HepG2的生长抑制作用,应用流式细胞仪检测MS-275对细胞周期的影响;Western印迹分析细胞周期蛋白(Cyclin)D1、p21、p-p38MAPK三种蛋白表达的差异。结果HDAC抑制剂MS-275能抑制肝癌细胞生长,具有时间和剂量的依赖性。可以引起细胞周期G0-G1期阻滞。MS-275可以使HepG2细胞p21蛋白表达提高,CyclinD1蛋白表达降低,在SB203580组两蛋白的表达又恢复到对照组水平。p-p38MAPK蛋白在两组表达均提高。结论MS-275能诱导肝癌细胞株的细胞周期阻滞,这种作用可能是通过p38MAPK信号传导途径介导的,与下调CyclinD1的表达、上调p21的表达有关。

MS-275与表阿霉素合用对乳腺癌MCF-7细胞的影响

目的:研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275和表阿霉素联用诱导乳腺癌细胞株MCF-7细胞周期阻滞和细胞凋亡的影响,并对其机制进行初步探讨。方法:体外培养人乳腺癌细胞株MCF-7;应用MTT法检测表阿霉素单用以及和MS-275联用对细胞存活率的影响;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot分析P21、P53蛋白表达的差异。结果:MS-275和表阿霉素合用较表阿霉素单用能明显降低乳腺癌细胞的存活率,增加细胞的凋亡率,具有剂量的依赖性。单用表阿霉素可以使P21、P53蛋白上调,MS-275和表阿霉素合用较单用两种蛋白上调更加明显。结论:MS-275和表阿霉素合用较单用能增加对乳腺癌细胞MCF-7的细胞毒性。其机制可能和MS-275预处理使染色质的构象发生改变,加强了表阿霉素诱导的P21和P53的表达有关。