钙蛋白酶抑制剂Ⅲ MDL 28170对大鼠甲基汞急性神经毒性的拮抗作用

目的为寻找治疗甲基汞急性中毒作用药物新靶点,探讨钙蛋白酶抑制剂ⅢMDL28170对甲基汞急性神经毒性的拮抗作用。方法大鼠随机分为正常对照组、MDL28170(50mg.kg-1,ip)对照组、甲基汞(10mg.kg-1,ig)中毒模型组与MDL28170干预组(同时ig甲基汞和ip MDL28170)。Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,免疫组织化学法观察脑μ-钙蛋白酶免疫阳性神经元,Western蛋白印迹法检测脑μ-钙蛋白酶表达,TUNEL法观察脑神经元凋亡,免疫荧光染色法观察脑皮质神经元微管相关蛋白2(MAP2)含量。结果大鼠ig给予甲基汞3或7d,中毒模型组出现神经系统损害行为学表现,水迷宫逃避潜伏期明显延长(P<0.01);脑皮质神经元内μ-钙蛋白酶的表达和活性明显升高(P<0.01);脑皮质神经元凋亡显著增加(P<0.01);神经元MAP2含量明显降低。同时给予MDL28170可明显减轻上述改变。结论μ-钙蛋白酶可能参与甲基汞中毒导致的神经细胞凋亡。MDL28170可明显抑制甲基汞的神经毒性损害,可能对甲基汞中毒具有治疗作用。

MDL28170对缺氧缺血新生鼠大脑神经细胞凋亡的影响

目的:探讨卡配因抑制剂-3(MDL28170)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)神经细胞凋亡的影响。方法:建立新生SD大鼠HIBD模型,治疗组于缺养缺血后即刻、2 h、4 h腹腔内注射MDL28170,对照组及手术组同时予生理盐水。缺氧缺血后24 h用免疫组化方法观察大脑皮质及海马CA1区Caspase-3蛋白表达、TUNEL法检测细胞凋亡,观察组织病理改变并计算海马神经元死亡数,透射电镜观察细胞超微结构。结果:缺氧缺血后24 h缺血侧大脑皮质及海马CA1区Caspase-3和TUNEL阳性细胞数较对照组明显增加,透射电镜证实有凋亡细胞;MDL28170可减少阳性细胞数量,抑制神经元死亡,差异有显著性(P<0.05)。结论:MDL28170可通过抑制神经凋亡而对新生大鼠HIBD具有一定保护作用。

钙蛋白酶及其抑制剂对心肌肥厚模型大鼠心肌肥厚作用的研究

目的研究钙蛋白酶calpain及其抑制剂MDL28170与心肌肥厚的关系，探讨心肌肥厚可能的作用机制。方法50只280-350g成年雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组（NC组，n=5）、假手术组（SO组，n=5）、手术组（AO组，n=20）、手术＋治疗组（AO＋T组，n=20）。对AO组及AO＋T组大鼠施行腹主动脉缩窄术建立心肌肥厚大鼠模型。4周后行心脏彩超检查。AO＋T组大鼠MDL28170治疗2周后再行心脏彩超检查。取心脏称重，计算心重指数。Westernblot检测心肌中calpainl、calpain2、caNA的表达。结果心脏彩超证实4周后AO组及AO＋T组大鼠心肌肥厚模型建立成功。药物干预后，AO＋T组大鼠心肌肥厚得到控制，进展延缓，与AO组相比差距明显（P〈0．05）。AO组、AO＋T组大鼠心脏质量、心重指数较NC组和S0组增加，AO组增加更明显（均P〈0．05）。与NC组相比，calpainl、calpain2、CaNA表达量在其余3组均有增加；而AO＋T组与AO组比较calpainl、calpain2、CaNA表达量降低（P〈0．05）。结论钙蛋白酶calpain与心肌肥厚关系密切，CaN途径是其作用机制之一；calpain抑制剂MDL28170对实验条件下的心肌肥厚具有明显阻遏作用。