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香猪CYP3A29基因3′-UTR结构变异及其与肌肉雄激素水平的关联分析 被引量:1
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作者 梁小芬 冉雪琴 +3 位作者 牛熙 李升 黄世会 王嘉福 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期3199-3209,共11页
【目的】探究猪特有的细胞色素P450超家族3A亚族成员29(cytochrome P4503A 29,CYP3A29)基因3′-UTR区核苷酸结构变异(structural variation,SV)对该基因表达的影响,解析该结构变异与香猪肉质性状形成的关系。【方法】以香猪、大白猪为... 【目的】探究猪特有的细胞色素P450超家族3A亚族成员29(cytochrome P4503A 29,CYP3A29)基因3′-UTR区核苷酸结构变异(structural variation,SV)对该基因表达的影响,解析该结构变异与香猪肉质性状形成的关系。【方法】以香猪、大白猪为研究对象,应用UCSC、miRBase、PITA、RBPsuite等软件预测CYP 3 A 29基因3′-UTR区结构变异区间所包含的重复元件、miRNA和RBP结合位点;采用PCR方法对结构变异位点进行基因分型;计算群体基因型频率、基因频率及Hardy-Weinberg平衡状态;采用实时荧光定量PCR检测该变异对CYP 3 A 29基因表达的影响;利用ELISA法检测香猪肌肉组织中CYP3A29蛋白含量和雄激素(T、DHT)水平,并使用SPSS 17.0软件对T、DHT含量与不同基因型进行Pearson相关性分析。【结果】生物信息学分析显示,CYP 3 A 29基因3′-UTR的结构变异区全长303 bp,该变异区存在1个长为241 bp的短散在元件(short interspersed element,SINE),属于Pre0_SStRNA家族,位于Chr3:6819917―6820161,含有33个miRNAs和13个RBPs结合位点。基因分型显示,该结构变异在香猪、大白猪群体中呈现出丰富的多态性,表现为II基因型(插入型)、ID基因型(杂合型)、DD基因型(双缺失)。基因型群体分布频率显示,香猪中的D等位基因频率高于大白猪,该结构变异在香猪中处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05),在大白猪中处于Hardy-Weinberg不平衡状态(P<0.05)。实时荧光定量PCR和ELISA结果显示,CYP 3 A 29基因ID基因型个体mRNA表达量和蛋白含量均显著高于II和DD基因型(P<0.05)。相关性分析结果显示,香猪不同基因型个体CYP3A29基因含量与肌肉组织中T浓度呈显著相关(P<0.05),与DHT浓度不相关(P>0.05)。香猪ID基因型个体T浓度显著高于DD和II基因型(P<0.05),DD基因型个体DHT浓度显著高于ID和II基因型(P<0.05)。【结论】CYP 3 A 29基因3′-UTR区长度为303 bp的结构变异在香猪群体中具有多态性,以缺失型D等位基因为主,即该结构变异在香猪中缺失SINE元件,导致CYP 3 A 29基因表达上调,进而影响香猪肌肉组织中T浓度。CYP 3 A 29基因3′-UTR结构变异与香猪肉质性状具有相关性。 展开更多
关键词 香猪 CYP 3 A 29基因 结构变异 雄激素 肉质
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应用荧光定量PCR方法研究RPL29基因在通城猪和长白猪不同时期胚胎骨骼肌中的表达 被引量:4
2
作者 唐中林 邓宏 +6 位作者 李勇 张兴举 杨述林 牟玉莲 储明星 马月辉 李奎 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1007-1012,共6页
为了研究蛋白合成相关基因RPL29在骨骼肌发育中的作用,采用SYBRGreen染料建立该基因的实时荧光定量PCR(QPCR)分析方法,并分析该基因在猪胚胎骨骼肌中的表达变化。以不同浓度稀释样本为标准品,建立标准曲线方程:y=-3.303X+43.07... 为了研究蛋白合成相关基因RPL29在骨骼肌发育中的作用,采用SYBRGreen染料建立该基因的实时荧光定量PCR(QPCR)分析方法,并分析该基因在猪胚胎骨骼肌中的表达变化。以不同浓度稀释样本为标准品,建立标准曲线方程:y=-3.303X+43.077(决定系数R^2=0.999)。分析表明:该方法具有较大的检验范围(PCR扩增Q值13~35),很好的扩增效率为100%,熔解曲线显示产物特异的单峰,其Tm值为86.5℃。本研究以H3F3A基因为内参,用所建立的实时定量PCR方法,分析RPL29在妊娠33、65和90d的通城猪和长白猪胚胎骨骼肌中的表达变化。研究发现:RPL29基因在通城猪和长白猪胚胎骨骼肌发育过程中分别呈现下调和上调表达模式;妊娠33d时,通城猪中的表达水平高于长白,而妊娠90d时在长白猪中高表达;妊娠65d时两品种间无显著差异。结果显示RPL29基因可能与猪骨骼肌的生长发育有关,并可能影响产肉性状。 展开更多
关键词 RPL29基因 荧光定量PCR 骨骼肌 表达分析
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TRIM29基因表达在非小细胞肺癌临床病理诊断中的意义 被引量:5
3
作者 周志毅 杨国仪 +5 位作者 孙荣超 杨树东 夏钰弘 虞敏红 吴光斌 梁加贝 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第25期3143-3145,3152,共4页
目的探讨TRIM29基因表达与非小细胞肺癌临床病理的关系及意义。方法用免疫组化Envision二步法检测251例非小细胞肺癌手术治疗患者癌组织(其中肺鳞癌127例、肺腺癌124例)和癌旁组织的TR IM 29蛋白表达,分析其与临床病理因素的关系。结果 ... 目的探讨TRIM29基因表达与非小细胞肺癌临床病理的关系及意义。方法用免疫组化Envision二步法检测251例非小细胞肺癌手术治疗患者癌组织(其中肺鳞癌127例、肺腺癌124例)和癌旁组织的TR IM 29蛋白表达,分析其与临床病理因素的关系。结果 251例非小细胞肺癌的癌组织TR IM 29表达明显高于癌旁正常肺组织,TR IM 29表达与肺鳞癌组织分级、TNM分期及淋巴结转移呈正相关,与肺腺癌肿块大小、组织分级、TN M分期及淋巴结转移呈正相关,TRIM29在肺鳞癌及腺癌中表达差异具有显著性,低分化肺鳞癌TRIM29表达强度明显高于低分化肺腺癌(以上均P<0.01)。结论建议在常规肺癌病理诊断中组合免疫标记TRIM29,可提高病理诊断的正确率,对临床的分期及治疗具有参考价值。 展开更多
关键词 TRIM29基因 非小细胞肺癌 免疫组织化学 临床病理
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细粒棘球绦虫(中国大陆株)诊断抗原P-29基因的表达、纯化及免疫原性初步分析 被引量:4
4
作者 师志云 李昭宇 +4 位作者 卜阳 王娅娜 李宗吉 马锐 赵巍 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1065-1067,共3页
目的对细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)诊断抗原P-29(diagnostic antigen P-29)重组质粒进行原核表达、纯化,并初步分析重组蛋白的免疫原性。方法从重组质粒EgP-29/pGEM-T中获取诊断抗原P-29基因,亚克隆于表达载体pET-28a构... 目的对细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)诊断抗原P-29(diagnostic antigen P-29)重组质粒进行原核表达、纯化,并初步分析重组蛋白的免疫原性。方法从重组质粒EgP-29/pGEM-T中获取诊断抗原P-29基因,亚克隆于表达载体pET-28a构建基因工程菌株,并表达、纯化重组蛋白,经Western-blot、ELISA分析重组蛋白的免疫原性。结果成功构建原核重组表达载体EgP-29/pET-28a/BL21(DE3)plysS,并纯化出浓度较高的重组蛋白。ELISA检测显示,用表达、纯化的重组蛋白免疫小鼠,诱导产生了特异性抗体IgG,Western-blotting鉴定该抗体能识别重组抗原及天然抗原原头蚴。结论重组蛋白具有良好的免疫原性。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 诊断抗原P-29基因 蛋白表达 纯化 免疫原性
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单纯疱疹Ⅱ型病毒UL29基因shRNA表达载体的干扰效应 被引量:7
5
作者 黄畅 潘晓瑜 +1 位作者 袁俊杰 吕延成 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第5期691-694,共4页
目的:应用RNA干扰技术,针对单纯疱疹Ⅱ型病毒(HSV-2)UL29基因构建短发夹RNA重组表达载体,观察其对HSV-2的干扰效应。方法:针对HSV-2 UL29基因筛选出4条拟干扰靶位点序列,分别设计、合成4组靶向UL29基因shRNA的基因真核表达载体。通过脂... 目的:应用RNA干扰技术,针对单纯疱疹Ⅱ型病毒(HSV-2)UL29基因构建短发夹RNA重组表达载体,观察其对HSV-2的干扰效应。方法:针对HSV-2 UL29基因筛选出4条拟干扰靶位点序列,分别设计、合成4组靶向UL29基因shRNA的基因真核表达载体。通过脂质体转染到HEK293细胞。再将HSV-2接种到HEK293细胞中。采用终点滴定法检测病毒滴度,RT-PCR检测shRNA对转录水平的影响,Western-blot检测shRNA对蛋白质表达水平的影响。结果:终点滴定法结果显示UL29shRNA各组均可不同程度降低病毒感染滴度,与空白组(未转染重组表达载体)比较差异显著(P<0.01)。RT-PCR结果显示,与空白组比较,4组抑制率分别为28.80%、59.95%、66.08%、36.27%,差异均具有显著性(P<0.05),shRNANC(不针对任何基因的序列)与空白组相比差异无显著性,其中以UL29shRNA1461组效果为最佳。Western-blot检测表明UL29shRNA各组ICP8蛋白表达水平比阴性对照组明显降低。结论:UL29shRNA能有效干扰HSV-2UL29基因的表达,抑制HSV-2在HEK293细胞中的复制。 展开更多
关键词 疱疹病毒2型 RNA干扰 SHRNA UL29基因
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UL27、UL29基因shRNA表达载体的构建及对HSV-2的干扰效应研究 被引量:2
6
作者 吕延成 潘晓瑜 +1 位作者 黄畅 丁娟 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期202-209,共8页
探讨Ⅱ型单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus type 2,HSV-2)UL27、UL29基因联合靶向siRNA对HSV-2复制的影响。构建UL27、UL29基因的siRNA的重组表达载体并转染293细胞,通过实时荧光定量PCR技术和蛋白质印迹方法检测UL27、UL29基因的表达... 探讨Ⅱ型单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus type 2,HSV-2)UL27、UL29基因联合靶向siRNA对HSV-2复制的影响。构建UL27、UL29基因的siRNA的重组表达载体并转染293细胞,通过实时荧光定量PCR技术和蛋白质印迹方法检测UL27、UL29基因的表达,终点滴定法检测细胞上清液中的各组病毒滴度,MTT法检测细胞的存活率。结果显示:(1)成功构建短发夹RNA(shRNA)重组表达载体。(2)转染后48 h,与空白组(空载体)相比,UL27 shRNA75组对UL27基因mRNA的抑制率为75.17%(P<0.05),UL29 shRNA1461组对UL29基因mRNA抑制率为66.08%,具有显著性差异(P<0.05)。UL27 shRNA75联合UL29 shRNA1461联合干扰组对UL27基因抑制率约为91.28%,UL29基因表达抑制率约为80.40%,与空白组比较具有显著性差异(P<0.05)。(3)终点滴定法结果显示单干扰组和联合干扰组可不同程度降低上清液中的病毒感染滴度,与空白组比较差异性显著(P<0.01)。(4)Western blot检测目的基因蛋白,单干扰组与联合干扰组可不同程度降低目的基因蛋白的表达,其中UL27shRNA75+UL29 shRNA1461联合干扰组能显著抑制相应的蛋白表达水平,蛋白表达量明显减少,与单干扰组相比具有显著差异(P<0.05)。(5)经MTT法检测,UL27 shRNA75、UL29 shRNA1461、UL27 shRNA75+UL29 shRNA1461联合干扰组的细胞存活率明显提高,差异有显著意义(P<0.05)。构建的pGPU6/GFP/Neo-UL27、pGPU6/GFP/Neo-UL29重组表达载体,能在体外细胞水平上不同程度的干扰HSV-2 UL27、UL29基因表达,UL27、UL29联合干扰效率更高,抑制HSV-2在HEK293细胞中复制。 展开更多
关键词 RNA干扰 短发夹RNA Ⅱ型单纯疱疹病毒 UL27基因 UL29基因
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细粒棘球蚴中国大陆株诊断抗原P-29基因的克隆和序列分析 被引量:6
7
作者 师志云 王娅娜 +4 位作者 马锐 于晶晶 于辛酉 高岭 赵巍 《宁夏医学院学报》 2007年第4期337-339,共3页
目的获得细粒棘球蚴(E.granulosus)诊断抗原(diagnostic antigen)P-29基因并进行序列分析。方法从包虫病患者体内获取细粒棘球蚴原头蚴提取总RNA,根据GenBank公共数据库检索出细粒棘球蚴诊断抗原P-29基因的已知序列设计一对引物,通过RT-... 目的获得细粒棘球蚴(E.granulosus)诊断抗原(diagnostic antigen)P-29基因并进行序列分析。方法从包虫病患者体内获取细粒棘球蚴原头蚴提取总RNA,根据GenBank公共数据库检索出细粒棘球蚴诊断抗原P-29基因的已知序列设计一对引物,通过RT-PCR技术扩增出细粒棘球蚴中国大陆株诊断抗原P-29基因,将其重组到pGEM-T载体后进行序列测定和分析。结果成功扩增出细粒棘球蚴中国大陆株诊断抗原P-29基因,测序表明该片段由717bp组成,与已发表基因核苷酸序列相比,同源性为100%,推导编码氨基酸序列同源性为100%。结论成功克隆细粒棘球蚴中国大陆株诊断抗原P-29基因序列,可做为包虫病重组抗原的候选基因。 展开更多
关键词 细粒棘球蚴 诊断抗原P-29基因 克隆 序列分析
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UL54和UL29基因干扰对HSV-2复制的影响 被引量:1
8
作者 吕延成 潘晓瑜 +1 位作者 黄畅 丁娟 《遵义医学院学报》 2014年第4期384-386,392,共4页
目的利用RNAi技术同时沉默Ⅱ型单纯疱疹病毒的UL54和UL29基因,探讨双基因干扰对HSV-2复制的影响。方法采用pGPU6/GFP/Neo质粒分别构建UL54、UL29基因的shRNA重组表达质粒,单独或同时转染HEK293细胞,通过实时荧光定量PCR和蛋白质印迹方... 目的利用RNAi技术同时沉默Ⅱ型单纯疱疹病毒的UL54和UL29基因,探讨双基因干扰对HSV-2复制的影响。方法采用pGPU6/GFP/Neo质粒分别构建UL54、UL29基因的shRNA重组表达质粒,单独或同时转染HEK293细胞,通过实时荧光定量PCR和蛋白质印迹方法检测UL54、UL29基因的表达,终点滴定法检测培养细胞上清液中病毒感染滴度;MTT法测定细胞的存活效率。结果转染后48h后,与空白组相比,各干扰组均可不同程度降低上清液中的病毒滴度,提高细胞存活率,降低目的基因mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。与单干扰组相比,双基因干扰组能更有效降低病毒滴度并提高细胞存活率(P<0.01),增加了对UL54和UL29基因mRNA的抑制率,降低了蛋白的表达(P<0.01)。结论 pGPU6/GFP/Neo-UL54、pGPU6/GFP/Neo-UL29重组表达质粒同时转染细胞可抑制HSV-2的复制,采用双基因干扰比单独基因干扰具有更高的效率。 展开更多
关键词 RNA联合干扰 Ⅱ型单纯疱疹病毒 UL54基因 UL29基因 短发夹RNA
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靶向TRIM29基因的siRNA通过抑制PI3K/AKT信号通路诱导鼻咽癌细胞凋亡 被引量:4
9
作者 任晓晖 王洪波 +1 位作者 郭庆 赵娜 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1445-1450,共6页
目的:探讨沉默TRIM29基因表达对鼻咽癌细胞凋亡及PI3K/AKT信号通路的影响。方法:将人鼻咽癌5-8F细胞分为空白组、阴性对照(NC)组(转染阴性对照siRNA)和si-TRIM29组(转染TRIM29的特异性siRNA),通过CCK-8法检测si-TRIM29转染5-8F细胞0~96 ... 目的:探讨沉默TRIM29基因表达对鼻咽癌细胞凋亡及PI3K/AKT信号通路的影响。方法:将人鼻咽癌5-8F细胞分为空白组、阴性对照(NC)组(转染阴性对照siRNA)和si-TRIM29组(转染TRIM29的特异性siRNA),通过CCK-8法检测si-TRIM29转染5-8F细胞0~96 h的细胞活力。通过流式细胞术及Western blot分别检测si-TRIM29转染5-8F细胞48 h的细胞凋亡率及TRIM29、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9、Bcl-2、Bax、t-AKT和p-AKT的蛋白水平。10μmol/L的PI3K/AKT信号通路特异性抑制剂LY294002及si-TRIM29单独或联用处理细胞,细胞分为空白组、LY294002组和LY294002+si-TRIM29组,流式细胞术检测3组细胞凋亡率。结果:转染TRIM29 siRNA的5-8F细胞TRIM29蛋白表达明显低于空白组(P<0.05)。和空白组比较,si-TRIM29组细胞活力明显降低,凋亡率明显升高,cleaved caspase-3、cleaved caspase-9和Bax蛋白的水平明显升高,Bcl-2和p-AKT蛋白的水平明显降低(P<0.05)。LY294002组的细胞凋亡率高于空白组,而LY294002+si-TRIM29组的细胞凋亡率高于LY294002组(P<0.05)。结论:沉默TRIM29基因表达可通过抑制PI3K/AKT信号通路诱导鼻咽癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 鼻咽癌 TRIM29基因 PI3K/AKT信号通路 细胞凋亡 RNA干扰
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LBD29基因在拟南芥侧根发生过程中的作用 被引量:2
10
作者 王广超 周莹 祝建 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期533-538,共6页
以拟南芥LBD29基因功能缺失突变体lbd29为材料,采用显微及亚显微技术,研究了拟南芥LBD29基因对于中柱鞘细胞分化和侧根发生的影响。结果显示:(1)与野生型相比,lbd29侧根发生晚,侧根数量少;(2)拟南芥根成熟区中柱鞘细胞是由两类分化程度... 以拟南芥LBD29基因功能缺失突变体lbd29为材料,采用显微及亚显微技术,研究了拟南芥LBD29基因对于中柱鞘细胞分化和侧根发生的影响。结果显示:(1)与野生型相比,lbd29侧根发生晚,侧根数量少;(2)拟南芥根成熟区中柱鞘细胞是由两类分化程度不同的细胞组成,侧根原基形成前,位于木质部极中柱鞘的侧根原基建成细胞(founder cells)首先经历了脱分化,进而分裂形成侧根原基;(3)突变体中柱鞘细胞生长素响应不敏感,具有一定程度的脱分化障碍。以上结果初步表明,LBD29基因可能通过生长素响应通路调控中柱鞘founder cells的脱分化及分裂,从而影响侧根发生。 展开更多
关键词 拟南芥LBD29基因 侧根发生 中柱鞘细胞形态结构
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Arhgap29基因多态性与宁夏地区人群非综合征型唇腭裂的相关性 被引量:2
11
作者 周子铃 马坚 +4 位作者 侯宇转 于丽丽 丁小艳 韩龙 黄永清 《宁夏医科大学学报》 2020年第6期559-564,共6页
目的探讨编码Rho-GTP酶激活蛋白29基因(Arhgap29)多态性变异与宁夏地区人群非综合征型唇腭裂(NSCL/P)的相关性。方法收集宁夏医科大学总医院口腔颌面外科NSCL/P患儿504例及该地区同期出生的正常新生儿455例。对Arhgap29基因上23个常见SN... 目的探讨编码Rho-GTP酶激活蛋白29基因(Arhgap29)多态性变异与宁夏地区人群非综合征型唇腭裂(NSCL/P)的相关性。方法收集宁夏医科大学总医院口腔颌面外科NSCL/P患儿504例及该地区同期出生的正常新生儿455例。对Arhgap29基因上23个常见SNP位点进行基因分型、H-W平衡检验、病例对照分析、连锁分析和单倍型分析。结果对照组样本中23个SNP位点的基因型分布符合H-W平衡(P>0.05),即对照组样本具有代表性。病例对照研究显示,23个SNP位点中有4个基因位点[rs3814019(等位基因P=0.0053;基因型P=0.019),rs72964308(等位基因P=0.0295;基因型P=0.019),rs7540684(等位基因P=0.0125;基因型P=0.041)和rs17396055(等位基因P=0.0393;基因型P=0.022)]基因型和等位基因型频率在病例组与对照组比较差异有统计学意义(P均<0.05)。连锁分析表明23个SNP共形成2个连锁block,每个block分别有2个单倍型组合在病例组和对照组差异有统计学意义(P均<0.05)。结论 Arhgap29基因多态性变异与宁夏地区非综合征型唇腭裂的发病存在相关性。 展开更多
关键词 Arhgap29基因 非综合征型唇腭裂伴或不伴腭裂 单核苷酸多态性
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P53和TRIM29基因在非小细胞肺癌中的表达及其在临床病理诊断中的意义 被引量:4
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作者 杨春梅 贺建清 +3 位作者 杨明金 王静 付道芳 杜月君 《解放军医药杂志》 CAS 2019年第5期22-25,共4页
目的探讨P53和TRIM29基因在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及在其临床病理诊断中的意义。方法将2015年1月—2017年12月我院诊治的104例NSCLC患者的临床资料进行回顾性分析,并取其癌组织和相应癌旁正常组织标本,分为癌组织组和癌旁组织组,... 目的探讨P53和TRIM29基因在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及在其临床病理诊断中的意义。方法将2015年1月—2017年12月我院诊治的104例NSCLC患者的临床资料进行回顾性分析,并取其癌组织和相应癌旁正常组织标本,分为癌组织组和癌旁组织组,每组104例。比较癌组织组和癌旁组织组的TRIM29表达,探讨TRIM29、P53表达与临床病理因素相关性。结果癌组织组和癌旁组织组TRIM29、P53表达存在显著差异性(P<0.01)。肺鳞癌和肺腺癌组织中TRIM29表达情况与癌旁组织存在显著差异性(P<0.01)。肺腺癌及肺鳞癌中,TRIM29表达与临床分期、组织病理分级、淋巴结转移、P53表达均呈正相关性(P<0.01)。结论 NSCLC癌组织中P53和TRIM29基因较癌旁正常组织呈明显高表达,TRIM29表达与临床分期、组织病理分级、淋巴结转移及P53表达呈正相关性,临床可通过检测P53和TRIM29水平提高病理诊断准确率。 展开更多
关键词 非小细胞肺 基因 P53 基因 TRIM29 基因表达 临床病理诊断
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TRIM29基因表达在非小细胞肺癌临床病理诊断中的意义 被引量:3
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作者 刘娜 《中国医药科学》 2015年第18期143-145,共3页
目的研究TRIM29在非小细胞肺癌中的表达情况并探讨其临床诊断价值。方法采用免疫组化检测依兰县人民医院2011年1月~2015年1月间收治的113例非小细胞肺癌手术治疗患者癌组织中TRIM29表达情况。结果 TRIM 29在肺鳞癌与肺腺癌中阳性率较高... 目的研究TRIM29在非小细胞肺癌中的表达情况并探讨其临床诊断价值。方法采用免疫组化检测依兰县人民医院2011年1月~2015年1月间收治的113例非小细胞肺癌手术治疗患者癌组织中TRIM29表达情况。结果 TRIM 29在肺鳞癌与肺腺癌中阳性率较高,均有明显高表达,差异具有统计学意义(P〈0.05),并且TRIM 29在肺鳞癌中表达强度明显高于在肺腺癌中表达,差异显著,具有统计学差异(P〈0.05)。TRIM 29表达与肺鳞癌组织分级、TNM分期及淋巴结转移呈密切正相关性(P〈0.05),与肿瘤大小无关(P〉0.05)。TRIM 29表达与肺腺癌肿块大小、组织分级、TNM分期及淋巴结转移呈密切正相关性(P〈0.05)。且在非小细胞肺癌中TRIM 29表达与患者的性别、年龄无关(P〉0.05)。结论 TRIM29基因表达在非小细胞肺癌病理诊断中有重要意义,可提高病理诊断的正确率。 展开更多
关键词 TRIM29基因 非小细胞肺癌 病理 诊断
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二苯乙烯苷对衰老睾丸间质细胞Ttc29基因的影响
14
作者 段豫磊 艾珈屹 +2 位作者 王乐 牛嗣云 郑立双 《承德医学院学报》 2020年第2期91-94,共4页
目的:探讨二苯乙烯苷对衰老间质细胞Ttc29基因的影响。方法:原代培养大鼠睾丸间质细胞,采用自由基氧化损伤建立间质细胞衰老模型,通过β-半乳糖苷酶染色检测衰老间质细胞百分比,运用甲基化PCR法及荧光定量PCR法检测Ttc29基因甲基化程度... 目的:探讨二苯乙烯苷对衰老间质细胞Ttc29基因的影响。方法:原代培养大鼠睾丸间质细胞,采用自由基氧化损伤建立间质细胞衰老模型,通过β-半乳糖苷酶染色检测衰老间质细胞百分比,运用甲基化PCR法及荧光定量PCR法检测Ttc29基因甲基化程度和转录水平,染色质免疫共沉淀检测Ttc29基因启动子区H3K27me3和H3K9me3组蛋白的富集程度。结果:与正常组相比,衰老组衰老细胞阳性率明显升高(P<0.05);二苯乙烯苷可明显降低衰老细胞阳性率(P<0.05)。衰老间质细胞较正常间质细胞Ttc29基因甲基化程度显著升高,mRNA表达水平显著降低(P<0.05),且二者呈负相关关系(P<0.05)。二苯乙烯苷可显著降低衰老间质细胞Ttc29基因甲基化程度和mRNA的表达水平(P<0.05)。Ttc29基因启动子区域未检测到H3K27me3和H3K9me3的富集。结论:二苯乙烯苷可通过改变Ttc29基因的甲基化水平和mRNA的表达水平抑制间质细胞衰老。 展开更多
关键词 二苯乙烯苷 睾丸间质细胞 衰老 Ttc29基因 甲基化
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亚洲璃眼蜱唾液腺一新基因(GP_(29))的原核表达及产物鉴定
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作者 程天印 周金林 +2 位作者 周勇志 施启顺 林矫矫 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1194-1197,共4页
将吸血诱导的亚洲璃眼蜱唾液腺差异表达基因GP29的开放性阅读框插入pGEX-4T-1,转化BL21,表达出一相对质量为53 ku的蛋白,其大小与预计结果一致。蛋白质的肽质量图谱和“1381.7511”肽段序列两方面的结果证明,SDS-PAGE胶板上相对质量为53... 将吸血诱导的亚洲璃眼蜱唾液腺差异表达基因GP29的开放性阅读框插入pGEX-4T-1,转化BL21,表达出一相对质量为53 ku的蛋白,其大小与预计结果一致。蛋白质的肽质量图谱和“1381.7511”肽段序列两方面的结果证明,SDS-PAGE胶板上相对质量为53 ku的蛋白就是由目的基因表达的GST融合蛋白。该蛋白与SwissPROT库中的任何蛋白均有较大差别,可能是一个新功能分子。 展开更多
关键词 亚洲璃眼蜱 GP29基因 GST-融合蛋白 肽质量 肽序列
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根癌农杆菌介导TA29-Barnase基因转化甘蓝型油菜的研究 被引量:41
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作者 何业华 熊兴华 +8 位作者 官春云 李栒 林良斌 陈社员 刘忠松 李文彬 钟军 刘春林 周小云 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期615-620,共6页
经比较影响农杆菌介导Barnase嵌合基因转化甘蓝型油菜的各种因素后 ,建立了高效稳定的转基因实验体系。按该体系 ,甘蓝型油菜“湘油 15”子叶柄预培养 2 0h ,OD60 0 为 0 5农杆菌菌液感染后共培养 3d ,在MS +2mg·L-1AgNO3 +4 5mg&... 经比较影响农杆菌介导Barnase嵌合基因转化甘蓝型油菜的各种因素后 ,建立了高效稳定的转基因实验体系。按该体系 ,甘蓝型油菜“湘油 15”子叶柄预培养 2 0h ,OD60 0 为 0 5农杆菌菌液感染后共培养 3d ,在MS +2mg·L-1AgNO3 +4 5mg·L-1BA +10mg·L-1Km +30 0mg·L-1Carb培养基上进行选择 ,转化率为 8 8% ,PCR检测和Southern杂交检测证明外源基因已整合了甘蓝型油菜基因组中。 展开更多
关键词 根癌农杆菌介导 TA29-Barnase基因 基因转化 甘蓝型油菜 雄性不育
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TA29-barnase基因转化菜心 被引量:13
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作者 曹必好 孟成民 +1 位作者 雷建军 陈国菊 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期881-886,共6页
利用根癌农杆菌导入法,以菜心带柄子叶为外植体,对TA29-barnase基因转化菜心进行研究。获得转化植株,进行PCR、Southern blotting杂交和半定量RT-PCR检测,表明目的基因已经整合到转化植株中,并且目的基因在转基因植株花蕾中得到表达,但... 利用根癌农杆菌导入法,以菜心带柄子叶为外植体,对TA29-barnase基因转化菜心进行研究。获得转化植株,进行PCR、Southern blotting杂交和半定量RT-PCR检测,表明目的基因已经整合到转化植株中,并且目的基因在转基因植株花蕾中得到表达,但是表达水平在不同转基因植株间存在差别;转基因植株开花后,均表现雄性不育,不能产生花粉或产生没有活力的少量花粉,自交不能结实;用未转化植株正常花粉对雄性不育植株进行授粉,能够正常结实;保持系(未转化植株)与不育株杂交后代中雄性不育株与可育株的比例为1:1,在杂交后代植株子叶期,喷洒10mg/L的PPT可以完全杀死可育株;利用其他菜心品种为父本与不育株进行杂交,获得的F1植株在生长势和产量方面表现优势,表明开展菜心优势育种具有一定的潜力。 展开更多
关键词 菜心 TA29-barnase基因 雄性不育
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拟南芥rd29A基因启动子克隆及其在马铃薯抗胁迫转基因中的应用 被引量:17
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作者 张宁 司怀军 王蒂 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期159-164,共6页
从拟南芥 (Arabidopsisthaliana)基因组中用PCR技术分离了rd2 9A基因上游 82 4bp的调控序列 ,序列分析表明 ,该片段与已报道的rd2 9A启动子有 99 39%的同源性 ,包括缺水诱导表达元件DRE、ABA作用元件ABRE等顺式作用元件。将此片段与GUS... 从拟南芥 (Arabidopsisthaliana)基因组中用PCR技术分离了rd2 9A基因上游 82 4bp的调控序列 ,序列分析表明 ,该片段与已报道的rd2 9A启动子有 99 39%的同源性 ,包括缺水诱导表达元件DRE、ABA作用元件ABRE等顺式作用元件。将此片段与GUS基因连接构建了植物表达载体pBIrd ,用农杆菌介导法获得了转基因马铃薯植株。对转基因植株进行GUS基因Northern杂交和GUS活性组织染色的分析结果是一致的 ,未受诱导处理的转基因植株GUS基因有微弱表达 ,而 4℃低温逆境、10 0 μmol LABA、缺水和 2 5 0mmol LNaCl胁迫处理 2 4h均可诱导GUS大量表达 ,且rd2 9A启动子驱动的GUS基因表达无组织特异性。 展开更多
关键词 拟南芥 rd29A基因启动子 基因马铃薯 低温 ABA 缺水 NACL
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甘蓝转TA29-Barnase基因植株的花器特征及育性分离的初步研究 被引量:9
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作者 朱玉英 龚静 +7 位作者 吴晓光 杨红娟 沈革志 王新其 殷丽青 陆桂华 王江 宛新杉 《上海农业学报》 CSCD 2001年第1期79-82,共4页
利用分子生物学方法 ,将控制作物育性的基因 (TA 2 9 Barnase)转化甘蓝生物体 ,培育出了甘蓝雄性不育植株。带有TA 2 9 Barnase基因的雄性不育植株的园艺学性状与未转化植株相同 ,并且其性状在后代中稳定不变 ;不育植株的花朵表现雄蕊... 利用分子生物学方法 ,将控制作物育性的基因 (TA 2 9 Barnase)转化甘蓝生物体 ,培育出了甘蓝雄性不育植株。带有TA 2 9 Barnase基因的雄性不育植株的园艺学性状与未转化植株相同 ,并且其性状在后代中稳定不变 ;不育植株的花朵表现雄蕊完全退化 ,但蜜腺和雌蕊健全 ,能接受外来花粉 ,杂交结实率较高 ;同时 ,雄性不育植株的不育性在后代中出现分离 ,不育株率占 12 .5%~ 85.7% ;此外 。 展开更多
关键词 甘蓝育种 TA29-BARNASE基因 基因植株 雄性不育 花器 育性分离
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转rd29A基因国槐试管苗对盐胁迫的生理响应 被引量:2
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作者 王珍珍 夏阳 +3 位作者 陈学森 燕丽萍 庞彩红 刘翠兰 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2009年第8期117-120,共4页
以转rd29A基因国槐株系及其受体亲本植株为材料,在NaCl胁迫下,分别在处理后不同时间测定了耐盐生理指标。结果表明:在0.6% NaCl胁迫下,国槐植株内可溶性糖含量、脯氨酸含量,丙二醛(MDA)含量以及相对电导率都随NaCl胁迫时间的延长而增加... 以转rd29A基因国槐株系及其受体亲本植株为材料,在NaCl胁迫下,分别在处理后不同时间测定了耐盐生理指标。结果表明:在0.6% NaCl胁迫下,国槐植株内可溶性糖含量、脯氨酸含量,丙二醛(MDA)含量以及相对电导率都随NaCl胁迫时间的延长而增加;与受体亲本植株材料相比,转基因株系的可溶性糖和细胞膜稳定提高,丙二醛、脯氨酸含量降低。说明转rd29A基因的国槐植株耐盐性得到提高。 展开更多
关键词 转rd29A基因国槐 NACL胁迫 生理指标
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