尿外泌体miR-29c对器官和非器官局限性膀胱尿路上皮癌临床结局的预测价值

目的 探讨尿外泌体微小RNA(miR)-29c对器官和非器官局限性膀胱尿路上皮癌(BUC)临床结局的预测价值。方法 2017年1月~2022年3月,从我院泌尿外科选取152例BUC病人作为验证集。另外,从我院体检中心选择了126例非癌对照。采用实时荧光定量PCR法检测尿外泌体miR-29c表达水平。结果 验证集BUC病人尿外泌体miR-29c水平低于非癌对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而尿外泌体miR-17-5p水平和miR-590-5p水平比较无明显差异(P>0.05)。尿外泌体miR-29c水平诊断BUC的ROC曲线下面积为0.969(95%CI:0.953~0.986),相应的敏感性和特异性分别为92.1%和90.2%。亚型分析中,非器官局限性BUC病人尿外泌体miR-29c水平较器官局限性BUC病人进一步降低(P=0.009)。预后分析中,尿外泌体miR-29c高表达组病人总生存期、无病生存期和疾病特异性生存期均更长(P<0.05)。结论 尿外泌体miR-29c低水平是BUC病人不利的预后因子,有希望作为器官和非器官局限性BUC不良临床结局的预测标志物。

多发性骨髓瘤组织中miR-29c、miR-195表达水平变化及其与临床病理特征及预后的关系

目的 探讨多发性骨髓瘤(MM)组织中miR-29c、miR-195表达水平变化及其与临床病理特征及预后的关系。方法 选取75例MM患者作为病例组,另选取同期就诊的75例骨髓象检查为正常的非血液系统疾病患者作为对照组。采用实时荧光定量PCR(q-PCR)检测骨髓组织中miR-29c、miR-195表达水平,根据检测平均值将miR-29c、miR-195分为高水平组和低水平组,分析miR-29c、miR-195表达水平与临床病理特征及预后的相关性。结果 病例组骨髓组织miR-29c、miR-195表达水平低于对照组(P<0.05)。miR-29c低水平组中ISS分期Ⅲ期及血清白蛋白水平<35 g/L的患者占比高于高水平组(P<0.05);miR-195低水平组中ISS分期Ⅲ期及血清白蛋白水平<35 g/L的患者占比高于高水平组(P<0.05);miR-29c低水平组的生存期低于高水平组(P<0.05),miR-195低水平组的生存期低于高水平组(P<0.05)。miR-29c、miR-195表达水平与ISS分期呈负相关(P<0.05),与血清白蛋白、生存期呈正相关(P<0.05)。结论miR-29c、miR-195均在MM患者骨髓组织中低表达,且低表达miR-29c、miR-195患者的生存期较短。miR-29c、miR-195表达水平与ISS分期呈正相关,与血清白蛋白、生存期呈负相关。

miR29c下调S100A4蛋白表达参与人胃癌细胞增殖促进凋亡

目的探讨miR-29c对人胃腺癌细胞增殖、凋亡的影响及其与转移相关蛋白S100A4的关系。方法采用细胞培养人胃癌细胞系BGC-823、SGC-7901和人正常胃粘膜上皮GES-1细胞,应用qRT-PCR检测各株细胞miR29c的表达。用hsamiR29c-mimics类似物(miR29c组),hsa-miR29c-inhibitor(阴性对照组)分别转染BGC-823细胞,空白对照组加入转染液,用CCK8及MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测S100A4相关肿瘤相关蛋白的表达。结果与正常胃粘膜上皮细胞GES-1表达率(1.131±0.069)相比,MiR-29c在胃癌细胞BGC823(0.254±0.025),SGC-7901(0.466±0.057)(F=57.5,P<0.05)。BGC823细胞转染miR29c模拟物后MiR-29c的表达量为:4.126±0.231,0.405±0.174,0.557±0.102,差异具有统计学意义(F=850.1,P<0.05)。转染24h、48h、72h后,MiR-29c组细胞的OD450值分别为:1.074±0.127、1.609±0.178、2.008±0.104;阴性对照组为:0.419±0.169、0.477±0.092、0.738±0.153,空白对照组为:0.830±0.305。其中,转染48h、72h后,MiR-29c组明显高于对照组(F=59.46,P<0.05)。细胞转染24h后,miR29c组细胞凋亡率分别是(6.900±0.414)%、(4.490±0.316)%、(3.850±0.243)%,,阴性对照组凋亡率分别是(10.830±0.231)%、(11.940±0.279)%、(13.530±0.941)%,空白对照组凋亡率分别是:(10.190±0.188)%、(11.76±0.569)%、(13.260±0.987),(P<0.001).各组S100A4蛋白的表达分别为0.770±0.028、1.109±0.083、1.024±0.042,(P=0.0021)。结论miR29c在胃癌细胞系中表达降低,通过抑制S100A4抑制人胃癌细胞增殖并促进胃癌细胞凋亡。

miR-29c-3p调控ERLIN2抑制肺腺癌发展的作用

目的:探讨miR-29c-3p在肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)发生发展中的作用。方法:利用公共数据库分析miR-29c-3p和ERLIN2在肺腺癌中的表达及其与临床病理参数的相关性。采用qRT-PCR检测miR-29c-3p在LUAD细胞系和正常支气管上皮细胞系中的表达,CCK8、细胞克隆形成、Transwell和伤口愈合实验评估miR-29c-3p在细胞增殖、迁移和侵袭中的作用,利用生物信息学工具预测miR-29c-3p下游靶基因,并通过双荧光素酶报告基因分析验证靶向关系。结果:miR-29c-3p在肺腺癌组织和细胞中低表达。miR-29c-3p低表达患者的预后较差,miR-29c-3p是肺腺癌患者的独立预后因素,并与淋巴结转移状态和临床分期密切相关。细胞实验表明,抑制miR-29c-3p可促进A549细胞的增殖、迁移和侵袭。生物信息学分析表明,ERLIN2是miR-29c-3p的靶基因,二者表达呈负相关。通过双荧光素酶报告基因测定验证了上述靶向关系。在UALCAN数据库中,ERLIN2在肺腺癌组织中高表达,并与患者年龄、性别、吸烟、肿瘤分期、淋巴结转移和TP53突变状态密切相关,ERLIN2高表达患者总生存率低于低表达患者。结论:miR-29c-3p通过靶向ERLIN2抑制肺腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,是肺腺癌患者的独立预后因素。

基于miRNA-29c/白血病抑制因子轴探讨针刺调节脾虚大鼠肠道炎症机制研究

目的观察针刺调节miRNA-29c/白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)轴改善脾虚大鼠结肠炎症机制,探讨“健脾益气”针刺疗法改善脾虚便溏症状现代作用机理。方法将60只SD雄性大鼠以随机数字表法分为正常组、模型组、非经非穴组、针刺组,每组15只。除正常组外,其余3组采用劳倦过度和不规律饮食复合方法建立脾虚证大鼠模型。造模成功后,针刺组电针“足三里”穴及“脾俞”穴干预治疗,非经非穴组给予电针尾尖作为对照干预,每日1次/20 min,共治疗14 d。治疗结束后,取大鼠结肠组织及全血。qPCR检测大鼠结肠组织miRNA-29/LIF轴相关基因的表达;Western blot检测大鼠白介素-6(interleukin6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)的表达;ELISA检测结肠组织中白介素-1β(interleukin1β,IL-1β)、白介素-18(interleukin18,IL-18)的含量;HE染色法观察大鼠结肠组织病理形态变化;TUNEL染色观察各组结肠组织凋亡情况;流式细胞术观察外周血单个核细胞(PBMC)凋亡状况。结果与正常组相比,模型组大鼠结肠组织LIF的表达水平明显下降(P<0.05),miRNA-29、IL-1β、IL-6、白介素-8(interleukin18,IL-8)、TNF-αmRNA表达以及IL-6、TNF-α蛋白表达水平有所升高(P<0.05);与模型组相比,针刺组大鼠结肠组织LIF表达水平明显升高(P<0.05),miRNA-29c、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-αmRNA表达以及IL-6、TNF-α蛋白表达水平有所降低(P<0.05),非经非穴组差异无统计学意义(P>0.05);与正常组相比,模型组大鼠结肠组织中促炎因子IL-1β、IL-18表达水平明显升高(P<0.05),与模型组相比,针刺组大鼠结肠组织中促炎因子IL-1β、IL-18的表达水平有所降低(P<0.05)。另外HE染色结果显示,针刺治疗可有效减轻结肠黏膜组织中炎症细胞浸润和杯状细胞的损失;TUNEL染色结果显示,针刺可以抑制miRNA-29c/LIF轴,改善脾虚大鼠结肠炎症,抑制结肠黏膜细胞凋亡;流式细胞术结果显示与正常组相比,模型组、非经非穴组大鼠PBMC凋亡率明显升高(P<0.05),与模型组相比,针刺组大鼠PBMC细胞凋亡率有所降低(P<0.05)。结论电针“足三里”“脾俞”穴可以调节miRNA-29c/LIF轴,抑制肠道炎症和促炎症介质的表达,进而抑制血液、结肠黏膜细胞凋亡,提高机体免疫力,从而改善脾虚便溏症状。

MiR-19a、miR-21和miR-29c在多发性骨髓瘤中的表达及临床意义

目的探讨microRNA-19a(miR-19a)、microRNA-21(miR-21)和microRNA-29c(miR-29c)在多发性骨髓瘤(MM)中的相对表达水平及其对MM的临床意义。方法选取2022年5月至2023年7月初诊MM患者的28例作为MM组,另外纳入无恶性血液疾病的健康供者(healthy donor,HD)9例作为对照。采用RT-PCR方法检测骨髓血浆和外周血清中miR-19a、miR-21和miR-29c相对表达水平,通过受试者工作曲线分析3种miRNA的诊断价值。调查入选者的临床资料包括血红蛋白、血清白蛋白、球蛋白、β2-微球蛋白、血清钙、血肌酐、乳酸脱氢酶、M蛋白、血沉、超敏C-反应蛋白、淋巴细胞亚群及临床分期与3种miRNA进行相关性分析。结果MM组血清miR-19a、miR-21及miR-29c相对表达水平相对于HD组均低,而MM组骨髓miR-19a、miR-21及miR-29c表达水平相对于HD组均高,且MM组的骨髓表达水平比血清高(P<0.05)。在MM组血清中,miR-19a、miR-21和miR-29c与超敏C-反应蛋白水平皆呈负相关[(r=-0.6220,P=0.0201)、(r=-0.6659,P=0.0113)、(r=-0.5429,P=0.0479)];miR-21和miR-29c与球蛋白呈正相关[(r=0.5692,P=0.0366)、(r=0.5385,P=0.0500)],miR-21和miR-29c与M蛋白呈正相关[(r=0.5938,P=0.0282)、(r=0.5497,P=0.0449)]。除此之外,miR-21与淋巴细胞亚群的CD_(8)^(+)呈正相关性(r=0.6132,P=0.0224),与CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)呈负相关(r=-0.5780,P=0.0333),miR-29c与CD_(8)^(+)呈正相关(r=0.5516,P=0.0438)。受试者工作曲线分析血清miR-19a、miR-21及miR-29c的曲线下面积分别为0.8492、0.8889、0.8413,三者联合诊断MM的AUC为0.9683;骨髓miR-19a、miR-21及miR-29c的AUC分别为0.8788、0.8636、0.9091,无法计算骨髓中三者联合诊断MM的价值。结论初诊MM患者的miR-19a、miR-21及miR-29c在血清中皆呈低表达,而在骨髓中皆呈高表达,并且不论是在血清还是骨髓中这3个miRNA都可以很好地区分MM和HD,但是血清3个miRNA联合诊断MM更有价值,并且具有成为MM预后生物标志物和治疗靶点的潜力。

尿外泌体miR-27a、miR-27b、miR-29c、miR-200c在早期糖尿病肾病诊断中的价值

目的探讨尿外泌体miR-27a、miR-27b、miR-29c、miR-200c在早期糖尿病肾病(DN)诊断中的价值。方法选取2021年1月—2022年12月金华市人民医院2型糖尿病(T2DM)患者260例,根据其就诊时的微量尿蛋白排泄率(UAER)分为单纯T2DM组(135例)、早期DN组(82例)、临床期DN组(43例)。另选取同期金华市人民医院健康体检者50名作为正常对照组。收集所有研究对象的一般资料,并检测尿外泌体miR-27a、miR-27b、miR-29c、miR-200c和尿液肌酐(UCr)、尿液尿素氮(UUN)、尿液转化生长因子-β1(TGF-β1,以UCr校正)、糖化血红蛋白(HbA_(1c))、血清尿酸(UA)。采用Pearson相关分析评价各项指标之间的相关性。采用多元逐步回归分析评价尿液TGF-β1的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价miR-27a、miR-27b、miR-29c、miR-200c诊断早期DN的效能。结果正常对照组、单纯T2DM组、早期DN组和临床期DN组尿外泌体miR-27a、miR-27b、miR-200c相对表达量依次升高(P<0.001),miR-29c相对表达量依次降低(P<0.001)。单纯T2DM组、早期DN组和临床期DN组UUN、UCr、校正TGF-β1和HbA_(1c)、UA水平均高于正常对照组(P<0.05)。单纯T2DM组、早期DN组和临床期DN组UUN、UCr、UA、校正TGF-β1水平和UAER依次升高(P<0.001)。尿外泌体miR-27a、miR-27b、miR-200c与UCr、校正TGF-β1均呈显著正相关(P<0.01),miR-29c与UCr、校正TGF-β1均呈显著负相关(P<0.001),与UUN、UA均无相关性(P>0.05)。HbA_(1c)、UCr和尿外泌体miR-27a、miR-27b、miR-29c、miR-200c是尿液校正TGF-β1水平的独立影响因素(P<0.01)。尿外泌体miR-27a、miR-27b、miR-29c、miR-200c单项检测和联合检测诊断早期DN的曲线下面积(AUC)分别为0.823、0.855、0.799、0.557、0.923。结论尿外泌体miR-27a、miR-27b、miR-29c、miR-200c联合检测对早期DN有较好的诊断价值。

miR-29c-5p通过上调LRP6调控铁死亡减轻脑梗死缺血再灌注损伤

目的:探究miR-29c-5p在脑缺血-再灌注损伤中调控铁死亡的机制。方法:在这项研究中,雄性SD大鼠接受大脑中动脉闭塞(MCAO)手术,随后恢复血液流动。采用神经功能评分和TTC染色来评估脑组织损伤和梗死体积。采用qPCR方法检测miR-29c-5p的相对表达水平。通过Western Blot检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPx4)、低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP6)的表达水平。采用相应的检测试剂盒检测GSH、Fe和丙二醛(MDA)的含量,并通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-29c-5p的靶基因。结果:随着大鼠缺血再灌注时间的增加,miR-29c-5p的相对表达水平升高,铁死亡加重。此外,agomiR-29c-5p干预也加重了脑组织损伤和铁死亡,而antagomiR-29c-5p干预则使这些影响得到逆转。此外,agomiR-29c-5p和Fer-1联合干预可减轻脑组织损伤和铁死亡。双荧光素酶报告基因实验结果表明,LRP6是miR-29c-5p的靶基因。结论:在本研究中,miR-29c-5p通过负调控LRP6促进铁死亡进而加重大鼠脑缺血-再灌注损伤。

血浆miRNA-21和miRNA-29c水平对非小细胞肺癌的诊断意义

目的:探讨血浆miRNA-21、miRNA-29c水平对非小细胞肺癌(NSCLC)的诊断意义。方法:采用实时荧光定量PCR法检测56例NSCLC患者和47例良性肺病患者血浆miRNA-21和miRNA-29c的相对表达水平。建立受试者工作特征(ROC)曲线,根据ROC曲线下面积判断它们诊断NSCLC的效能。依据ROC曲线分析设定的临界值计算血浆miRNA-21和miRNA-29c诊断NSCLC的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和准确性。并将这些结果与NSCLC患者血清癌胚抗原检测结果进行比较。结果:NSCLC患者血浆miRNA-21水平显著高于良性肺病患者(P<0.001),而血浆miRNA-29c水平明显低于良性肺病患者(P<0.001)。NSCLC患者血浆miRNA-21和miRNA-29c水平与肿瘤的临床(TNM)分期显著相关(P=0.008和P=0.011),血浆miRNA-21水平与肿瘤的分化程度也明显相关(P=0.001)。根据ROC曲线分析取miRNA-21和miRNA-29c诊断NSCLC的临界值分别为4.026和0.985,血浆miRNA-21诊断NSCLC的敏感性和特异性分别为76.8%和76.6%,血浆miRNA-29c诊断NSCLC的敏感性和特异性分别为78.6%和72.3%。血清癌胚抗原诊断NSCLC的敏感性明显低于miRNA-21和miRNA-29c,特异性相似。结论:血浆miRNA-21和miRNA-29c诊断肺癌的效能优于血清癌胚抗原,有可能成为诊断NSCLC的血液标志物。

胶质瘤miR-29c表达异常减少及其对肿瘤细胞增殖的影响

目的：探讨microRNA-29c（miR-29c）在胶质瘤中的表达及其对细胞分裂周期蛋白42（CDC42）的调控作用和对细胞增殖的影响。方法：用锁定寡核苷酸原位杂交法和免疫组织化学法检测60例不同级别胶质瘤及10例非肿瘤对照脑组织中miR-29c和CDC42的表达水平，实时荧光定量RT-PCR、Western blot及MTS法分别检测U87MG细胞中miR-29c瞬时表达、CDC42 mRNA和蛋白表达及其对胶质瘤细胞增殖的影响。结果：各级别胶质瘤的miR-29c表达水平均明显低于非肿瘤对照脑组织，且随肿瘤级别升高而显著降低，各组间的差异均有统计学意义（P〈0.001）。而CDC42表达水平则呈相反趋势，其表达水平随胶质瘤良恶性级别增加相应升高，除Ⅰ～Ⅱ级组与非肿瘤对照组之间外，其余各组间的差异均有统计学意义（P〈0.001）。与对照组相比， miR-29c转染组的CDC42 mRNA（P〈0.001）和蛋白表达水平（P〈0.01）均明显降低。miR-29c转染组细胞的增殖能力明显低于U87MG空白对照组和Scr转染组（P〈0.05）。结论：miR-29c是胶质瘤的抑瘤miRNA，其表达水平可作为评价胶质瘤良恶性级别的重要参考指标。miR-29c在胶质瘤中表达减少解除了其对靶基因CDC42转录后水平的抑制作用，并导致肿瘤细胞无限增殖。表明miR-29c表达异常减少可能是引起胶质瘤发生、发展的关键事件。

miRNA-29c在大鼠脑缺血再灌注神经损伤中的保护作用与机制

目的探讨miRNA-29c在大鼠脑缺血再灌注神经损伤中的保护作用与机制研究。方法 48只雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组,miR-29c NC组,miR-29c inhibitor组,除假手术组外,其余三组均采用拴线法建立大鼠大脑中动脉局灶缺血再灌注损伤模型,并于术后24 h评价大鼠神经行为变化,检测大鼠脑梗死体积,缺血侧脑组织细胞凋亡情况,脑组织中miR-29c表达量,超氧化物岐化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)含量,含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase 3),Caspase 8及Caspase 9活性,及Bcl-2,Bax,Bak1,cleaved caspase 3,cleaved caspase 8与cleaved caspase 9蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组,miR-29c NC组中miR-29c表达量显著提高,大鼠神经行为评分提高,脑梗死体积增加,细胞凋亡率提高,SOD活性降低,MDA含量,Caspase 3,Caspase 8及Caspase 9活性上升,Bcl-2表达量下调,Bax,Bak1,cleaved caspase 3,cleaved caspase 8及cleaved caspase 9表达量上调,差异均具有统计学意义(P<0.01)。与模型组及miR-29c NC组比较,miR-29c inhibitor组miR-29c表达量显著降低,大鼠神经行为评分降低,脑梗死体积百分比减少,细胞凋亡率降低,SOD活性上升,MDA含量,Caspase 3,Caspase 8及Caspase 9活性降低,Bcl-2表达量上调,Bax,Bak1,cleaved caspase 3,cleaved caspase 8及cleaved caspase9表达量下调,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论 miR-29c对大鼠脑缺血再灌注神经损伤具有保护作用,与提高抗氧化能力及调控细胞凋亡相关蛋白表达有关。

非增殖性糖尿病视网膜病变患者血清miR-29c的表达及相关分析

目的 :观察微小RNA-29c(miR-29c)在非增殖性糖尿病视网膜病变(non-proliferative diabetic retinopathy,NPDR)患者血清中的表达水平,探讨其在糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)发病机制中的作用。方法:选择2型糖尿病NPDR患者及无视网膜病变(non-diabetic retinopathy,NDR)患者各30例。收集血清样本,应用荧光定量PCR方法检测血清miR-29c的相对表达水平。应用Pic Tar、Target Scan与Mi Randa软件综合预测miR-29c的靶基因,取三款软件的交集作为最终靶基因。结果:miR-29c在NPDR患者血清中的表达量明显高于NDR组(P<0.05),其表达量与Hb A1c呈显著正相关(r=0.379,P<0.05)。预测miR-29c靶基因集合富集在磷酸肌醇代谢、细胞因子及受体的相互作用、细胞外基质与受体信号作用通路中。结论:NPDR患者血清miR-29c表达显著上调,miR-29c可能通过调控细胞因子的相互作用、磷酸肌醇代谢等途径参与DR的发生发展。

miR-29c通过Tiam1抑制人食管鳞状细胞癌侵袭和转移的研究

目的研究微小RNA(mi R)-29c通过靶向T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(Tiam1)基因对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞侵袭和迁移的影响。方法通过细胞划痕和transwell实验观察mi R-29c过表达的ESCC细胞侵袭迁移能力的变化;通过免疫印迹法和sensor reporter实验研究mi R-29c对Tiam1的调控作用和靶标位点;在细胞"拯救"实验中通过免疫印迹法检测相关蛋白表达量的变化以及用免疫荧光-激光共聚焦显微镜观察细胞形态的改变,研究mi R-29c抑制ESCC细胞侵袭迁移的调节机制。结果细胞划痕实验和transwell实验显示mi R-29c能抑制ESCC细胞的侵袭迁移;通过生物信息学方法预测mi R-29c的靶基因是Tiam1;免疫印迹法和sensor reporter检测结果显示mi R-29c通过与Tiam1 3'-非翻译区(UTR)结合降解Tiam1;细胞功能"拯救"实验的细胞划痕、免疫印迹法和免疫荧光结果显示mi R-29c能抑制Tiam1的表达,导致激活态Rac1-三磷酸鸟苷(GTP)减少,致使细胞运动状态改变,迁移能力减弱;而人工合成的针对Tiam1的特异si RNA分子si Tiam1的干涉作用能"拯救"mi R-29C对ESCC细胞迁移能力的抑制。结论 mi R-29C通过降解Tiam1 m RNA,下调了Rac1的激活水平,导致细胞运动状态变化,从而抑制ESCC细胞的侵袭迁移。

疼痛调控相关miRNAs的筛选及脊髓miR-29c对神经病理性痛大鼠痛阈的影响

目的通过microRNAs(miRNAs)芯片技术筛选疼痛调控相关的miRNAs,观察microRNA-29c(miR-29c)对神经病理性痛大鼠痛阈的影响。方法实验一:雌性SD大鼠,随机分为神经病理性痛组(SNI组)及妊娠神经病理性痛组(PSNI组),测定机械缩足阈值(MWT),观察分娩对疼痛的影响。在SNI组及PSNI组大鼠分娩后MWT差异显著时,取脊髓腰膨大组织,筛选差异表达的miRNAs。实验二:选取目的miRNAs,包被过表达或沉默慢病毒,脊髓内注射干预后观察SNI组大鼠MWT变化。结果与SNI组大鼠比较,PSNI组大鼠分娩后第3天MWT明显升高,脊髓c-Fos蛋白含量明显降低(P<0.05);miRNAs芯片分析共发现71条差异表达的miRNAs,在PSNI大鼠显著上调37条,显著下调34条;选取并包被miR-124a过表达、miR-29c沉默慢病毒注射,miR-29c表达沉默可明显提高SNI组大鼠MWT。结论miR-29c是通过基因芯片筛选获得的miRNA,下调SNI大鼠脊髓miR-29c表达,能够显著改善病理性痛状态。

脑胶质瘤患者血清miR-720、miR-29c表达及临床意义

目的探讨miR-720、miR-29c在脑胶质瘤发生、发展中的作用。方法选取脑胶质瘤患者87例(胶质瘤组),体检健康者50例(对照组),分别采集胶质瘤组手术前后及对照组清晨空腹肘静脉血。采用实时荧光定量PCR法检测血清miR-720和miR-29c表达,分析脑胶质瘤患者血清miR-720、miR-29c表达与其临床病理特征及预后的关系。结果与对照组比较,胶质瘤组术前、术后血清miR-720相对表达量均升高,血清miR-29c相对表达量均降低;与术前相比,胶质瘤组术后血清miR-720相对表达量降低,血清miR-29c相对表达量升高;组间及组内比较P均<0.05。血清miR-720表达与脑胶质瘤肿瘤分化程度呈负相关,血清miR-29c表达与肿瘤分化程度呈正相关(P均<0.05);血清miR-720、miR-29c表达与患者性别、年龄、肿瘤直径、病理类型、肿瘤位置、KPS评分均无关(P均>0.05)。脑胶质瘤组miR-720高表达者与低表达者1年生存率分别为74.37%、92.50%,miR-29c高表达者与低表达者1年生存率分别为92.86%、73.33%(33/45),两者比较P均<0.05。结论 miR-720高表达、miR-29c低表达共同促进脑胶质瘤的发生及发展。血清miR-720、miR-29c具有作为脑胶质瘤生物靶标的潜能。

宫颈癌组织中微小RNA-29c的水平及临床意义

目的探讨微小RNA-29c(miR-29c)在宫颈癌组织中的表达及临床意义。方法收集本院2013年6月至2018年7月经病理确诊的100例宫颈癌患者的组织标本,采用实时定量PCR(QPCR)检测以上组织中的miR-29c水平,分析miR-29c水平与宫颈癌临床病理特征(年龄、FIGO分期、肿瘤大小、分化程度、病理类型、宫旁浸润、间质浸润、LVSI和淋巴结转移)的关系,以114例子宫肌瘤全子宫切除术后的正常宫颈组织作对照。基于Kaplan-Meier plotter在线生存分析数据库(http://kmplot.com/analysis/)分析miR-29c表达与宫颈癌患者临床预后的关系。结果 QPCR检测发现宫颈癌组织中的miR-29c水平为0.326±0.090,低于正常宫颈组织的1.039±0.372,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-29c水平与宫颈癌患者的年龄、病理类型和宫旁浸润无关(P>0.05),但与FIGO分期、肿瘤大小、分化程度、间质浸润、LVSI和淋巴结转移有关(P<0.05),其中FIGO分期较晚(Ⅱ期)、肿瘤较大(>4 cm)、低分化、间质浸润较深(>1/2)、有LVSI和淋巴结转移的miR-29c水平和高表达率均低于FIGO分期较早(Ⅰ期)、肿瘤较小(≤4 cm)、高中分化、间质浸润较浅(>1/2)和无LVSI和淋巴结转移者(P<0.05)。Kaplan-Meier Plotter数据库分析发现,miR-29c高表达在宫颈癌中与良好的预后有关(HR=0.57,95%CI:0.36～0.91,P=0.018)。结论 miR-29c在宫颈癌组织中呈低表达,且与临床分期、血管侵犯和淋巴结转移有关,参与宫颈癌的发生发展,在宫颈癌的防治中有一定价值。

miRNA-29c在鼻咽癌患者中的表达水平及其临床意义

目的:探讨miRNA-29c在鼻咽癌患者血清中的表达及其临床意义。方法:选取50例鼻咽癌患者及50例健康对照组,检测血清中miRNA-29c的表达量并分析其与临床病理资料及复发转移的相关性。结果:与健康人对比,鼻咽癌患者血清中miRNA-29c的表达量更低(P<0.05)。淋巴结转移的病例表达量明显降低,Ⅳ期病例较Ⅱ-Ⅲ期病例表达量降低,EB病毒阳性患者较阴性表达量降低(P<0.05)。与高分化鳞癌相比,低分化和中分化鳞癌组织中miRNA-29c的表达水平均明显下降(P<0.05)。2年内复发转移患者的miRNA-29c表达量更低(P<0.05)。结论:miRNA-29c低表达可能与鼻咽癌的发生、发展、侵袭转移相关。

急性淋巴细胞白血病患儿血清miR-17、miR-29c的表达及临床意义

研究急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿血清中miR-17、miR-29c表达水平及其与患儿生存率的关系。方法:选择 2010年9月~2013年2月在笔者医院初诊为ALL并住院治疗的43例患儿作为病例组,同时期体检健康儿童40例作为对照组。采用RT-PCR检测两组儿童血清中miR-17、miR-29c相对表达量,分析病例组血清miR-17、miR-29c表达水平与患儿初诊白细胞(WBC)计数、免疫分型等临床指标及患儿5年无事件生存率、总生存率的关系。结果:病例组儿童血清中miR-17相对表达量显著高于对照组( P <0.05),miR-29c相对表达量显著低于对照组( P <0.05);病例组血清中miR-17表达水平与患儿初诊WBC计数、免疫分型有关( P <0.05),miR-29c表达水平与患儿初诊WBC计数、免疫分型及泼尼松诱导敏感度有关( P <0.05);病例组患儿5年无事件生存率51.16%,总生存率72.09%;生存组患儿血清miR-17相对表达量显著低于死亡组患儿( P <0.05),miR-29c相对表达量显著高于死亡组患儿( P <0.05);miR-17高表达组患儿5年无事件生存率、总生存率均显著低于miR-17低表达组患儿;miR-29c高表达组患儿5年无事件生存率、总生存率均显著高于miR-29c低表达组患儿。结论:ALL患儿血清中miR-17表达上调,miR-29c表达下调,与患儿预后不良有关。

血清miR-33a、miR-29c、miR-126联合检测对脑动脉粥样硬化的诊断价值

目的探讨血清miR-33a、miR-29c、miR-126联合检测对脑动脉粥样硬化的诊断价值。方法选择2018年1月至2020年1月该院收治的脑动脉粥样硬化患者120例为研究组,同期体检健康者120例为对照组。根据不同脑动脉硬化严重程度将患者分为单动脉组(23例)、双动脉组(53例)、多动脉组(44例)。采用实时荧光定量PCR检测研究组与对照组及不同脑动脉粥样硬化严重程度患者血清miR-33a、miR-29c、miR-126的相对表达水平。采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析血清miR-33a、miR-29c、miR-126对脑动脉粥样硬化的诊断价值。结果研究组血清miR-33a、miR-29c、miR-126的相对表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清miR-33a、miR-29c、miR-126在不同脑动脉粥样硬化严重程度患者中的相对表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。血清miR-33a、miR-29c、miR-126单项检测对脑动脉粥样硬化诊断的灵敏度分别为95.00%、93.00%、92.00%,特异度分别为95.00%、92.00%、91.00%。血清miR-33a、miR-29c、miR-126联合检测对脑动脉粥样硬化诊断的灵敏度为96.67%,特异度为90.00%,准确度为93.33%。结论血清miR-33a、miR-29c、miR-126可作为联合诊断脑动脉粥样硬化的潜在标志物。

血浆miR-192、miR-29c水平对2型糖尿病肾病诊断的临床意义

目的探讨血浆微小RNA 192(miR 192)与微小RNA 29c(miR 29c)联合检测对2型糖尿病肾病的诊断价值。方法选取2017年12月至2018年12月本院收治的166例2型糖尿病患者为研究对象,分为糖尿病无肾损害组(DM组)与糖尿病肾病组(DN组),同时以同时期本院健康体检健康人群60例为正常对照组(NC组)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT PCR)检测各组血浆miR 192、miR 29c的表达水平;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)水平;采用Pearson法分析DN患者血浆miR 192、miR 29c与NGAL的相关性;采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血浆miR 192、miR 29c表达对DN的诊断价值;分析血浆miR 192、miR 29c联合诊断DN的诊断效能。结果与NC组比较,DM组与DN组患者尿NGAL水平、miR 29c的表达水平显著升高(P<0.05),DN组显著高于DM组(P<0.05);与NC组相比,DM组与DN组患者血浆miR 192的表达水平均显著降低(P<0.05),DN组显著低于DM组(P<0.05);miR 192与尿NGAL呈负相关(r=-0.338,P=0.002),miR 29c与尿NGAL呈正相关(r=0.516,P<0.001);miR 192诊断DN的灵敏度52.50%,特异度75.58%;miR 29c诊断DN的灵敏度50.00%,特异度86.05%;联合诊断灵敏度97.50%,特异度95.34%,准确度为96.39%;联合检测时灵敏度与准确度均高于单项检测(P<0.05)。结论血浆miR 192、miR 29c表达异常与2型糖尿病肾病发生发展密切相关,二者联合检测可提高2型糖尿病肾病诊断效能。