拟南芥2A6基因正义、反义植物表达载体的构建

利用PCR技术从番茄基因组中扩增了长约1.1kb的E8基因启动子,构建了中间表达载体pCAMBI-AE8;利用RT-PCR方法从拟南芥中扩增了长约1 197bp的2A6基因全长cDNA编码区,将其定向插入pCAMBI-AE8,构建了正义植物表达载体pCAMBIAE8-2A6;同时扩增了长约500bp的cDNA片段,定向插入pCAMBI-AE8,构建了反义植物表达载体pCAMBIAE8-2A6anti.以此为基础,可以进一步研究2A6基因的差异表达对转基因拟南芥角果发育的影响,达到揭示2A6基因功能的目的.

检测CYP2A6基因多态性的PCR技术的基因型方法

综述检测CYP2A6基因多态性的PCR技术的基因型方法。CYP2A6基因多态性存在于白种人、东方人及非洲裔美国人群中 ,包括CYP2A6 1至CYP2A6 12 ,总共 12个变异等位基因。本文列举了检测CYP2A6基因型的不同的DNA来源、引物和限制性内切酶。已开发PCR技术结合诊断性限制性内切酶分析 (RFLP)如两步PCR和一步PCR RFLP方法检测CYP2A6基因型。此外 ,尚有PCR SSCP +RFLP及直接DNA测序方法。

CPY2A6基因多态性在频繁急性加重COPD患者中的临床特点

目的观察CPY2A6基因多态性在频繁急性加重型COPD(AECOPD)患者中的临床特点。方法采用前瞻性队列研究设计。选择2016年4月~2019年4月在我院接受治疗的AECOPD患者,通过检测患者血浆CYP2A6基因型将患者分组为CYP2A6野生型组和CYP2A6缺失型(变异型)。最终133例患者入组,包括CYP2A6野生型108例,CYP2A6缺失型25例。CYP2A6基因检测采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应进行。结果CYP2A6野生型组在吸烟例数、急诊入院例数多于缺失型(P<0.001)。频繁加重后入院次数、死亡率、住院时间、APECHEⅡ评分、当日机械通气和肾替代治疗例数以及伴随疾病在两组间没有统计学差异(P>0.05)。CYP2A6野生型组的血气分析结果波动幅度较大,缺失型患者具有更低PaO2、更高的PaCO2和HCO3^-、高肌酐血症,心率变化幅度较大,与CYP2A6缺失型比较,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论CYP2A6野生型患者在频繁急性加重COPD患者中可能有更紊乱的血气生化指标和生理变化,同时有更高的吸烟率,更多以急诊形式入院。

CYP2A6基因多态性与烟草代谢物的相关性及其与冠心病的关系

目的:探讨药物代谢酶(CYP2A6*1、*2、*3、*4)4型基因多态性与烟草代谢物的相关性及其与冠心病的关系。方法:随机选取湖南地区汉族经冠状动脉造影确诊的冠心病患者205例,包括吸烟者129例,不吸烟者76例;正常对照208例,包括吸烟者78例,不吸烟者130例。应用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)对4组对象的CYP2A6基因型分布频率进行分析。结果:正常对照组与冠心病组CYP2A6基因型的分布频率无显著性差异;吸烟组与不吸烟组CYP2A6*2和CYP2A6*3的分布频率无显著性差异;吸烟组中CYP2A6*1的分布频率大于不吸烟组;不吸烟组中CYP2A6*4分布频率大于吸烟组;吸烟组冠心病发病率大于不吸烟组。结论:吸烟是冠心病的危险因素。吸烟者和不吸烟者的冠心病发病率有显著差异。CYP2A6基因多态性与烟草代谢物相关的冠心病可能存在相关性。