比较LC-MS/MS与2D-LC/UV法测定奥氮平的血药浓度

目的用高效液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)和全自动二维液相色谱法(2D-LC/UV)检测奥氮平血药浓度,比较两种方法的一致性和相关性。方法 LC-MS/MS法和2D-LC/UV法分别测定奥氮平低、中、高3个质量浓度质控样本和52份奥氮平血清样本,用Bland-Altman法比较结果的一致性,用Pearson相关性分析和Passing-Bablok回归法分析结果的相关性。结果按照Bland-Altman法计算,96.15%Lo A=(-1.53,3.81),96.15%的差值都位于一致限内,两种方法测定值一致性良好。Passing-Bablok回归方程为OLZLC-MS/MS=1.02×OLZ2D-LC/UV-1.18,Pearson相关系数为0.999(P<0.01),说明两种方法具有良好的相关性。两种方法在检测低血药浓度(<15 ng·mL^(-1))的相对偏差比检测中、高浓度时大。结论 2D-LC/UV法和LC-MS/MS法在检测奥氮平血药浓度时具有良好的一致性和相关性,均可用于常规治疗药物监测(TDM)。

重症感染患者亚胺培南检测方法的建立及临床应用

目的建立适用于检测重症感染患者亚胺培南血药浓度的二维液相色谱法,并应用于临床。方法基于全自动二维液相色谱仪建立亚胺培南血药浓度检测方法,以一维色谱柱Aston SNCB(50 mm×4.6 mm,5μm)萃取分离目标物,再经二维色谱柱Aston SCB(250 mm×4.6 mm,5μm)进一步分离测定。一维流动相为亚胺培南-1D移动相[乙腈-甲醇-水(15∶10∶75,V/V/V)],流速为1.0 mL/min;二维流动相为72%OPI-1有机移动相(色谱级甲醇)-20%BPI-1碱性移动相[水(含20.0 mmol/L的磷酸铵,用三乙胺调pH至7.2)]-8%API-1酸性移动相[水(含20.0 mmol/L的磷酸铵,用磷酸调pH至3.0)],流速为1.0 mL/min;柱温为40℃,紫外检测波长为310 nm,进样量为100μL。洗脱程序:0~3.40 min,一维色谱柱(亚胺培南-1D移动相);3.40~11.00 min,二维色谱柱(72%OPI-1有机移动相-20%BPI-1碱性移动相-8%API-1酸性移动相)。结果亚胺培南检测质量浓度的线性范围为0.171~18.570μg/mL(R^(2)=0.9999),定量下限为0.171μg/mL;回收率在93.47%~106.16%(n=5),日内和日间精密度的RSD均低于15%(n=5)。51例患者的亚胺培南谷浓度为0~19.57μg/mL。结论所建立的方法前处理简单、快捷,进样量大,可用于重症感染患者亚胺培南血药浓度的检测。

基于全自动二维液相色谱的地奈德乳膏体外经皮渗透研究

目的建立乳膏及经皮渗透样品中地奈德的全自动二维液相色谱(2D-LC-UV)测定法,比较新研制的地奈德乳膏与原研制剂的体外经皮渗透性。方法采用ASTON RG C30色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为四氢呋喃-水-乙腈=25:35:40,流速为1.0 m L·min^(-1),检测波长245 nm。体外透皮实验采用改良Franz扩散池,以离体乳猪皮为屏障,以累积渗透量和皮肤滞留量为指标,评价新研制的地奈德乳膏与原研制剂的经皮渗透规律。结果皮肤接收液和皮肤提取液样品中地奈德浓度分别在10~1000ng·m L^(-1)、10~300 ng·m L^(-1)内线性关系良好(r^2=0.999,r^2=0.997)。与原研制剂相比,新研制的地奈德乳膏在2、7、12、24 h的单位皮肤面积累积渗透量和2、24 h皮肤滞留量差异均无统计学意义(P>0.05)。结论所建立的2D-LC-UV方法快速、准确,可用于地奈德乳膏的含量测定及体外经皮渗透规律研究。新研制的地奈德乳膏的经皮渗透特性与原研制剂相似。

二维色谱法测定癫痫患者血清中苯妥英的浓度

目的:采用二维色谱(2D-LC-UV)法测定血清中苯妥英的浓度,用于临床癫痫患者苯妥英血清药物浓度检测。方法:400μL样品进样,在一维色谱柱MVV-1D(4.6 mm×25 mm,5μm)上初步分离,通过萃取柱ASTON MSS C18(4.0 mm×10 mm,3μm)截取保留含有苯妥英的馏分片段,并在二维色谱柱Agilent Extent-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)上进一步分离,最终完成测定。一维色谱流动相为乙腈-水(52∶48,v/v),中间柱流动相为纯水,二维色谱流动相为乙腈-20mmol·L-1乙酸铵(50∶50,v/v,p H=7.0);一维色谱流速为1.0 m L·min-1,二维色谱流速为0.8 m L·min-1;柱温为40℃,紫外检测波长为220 nm。采集10名癫痫患者苯妥英稳态谷浓度血清样本测定。结果:在建立的色谱条件下,苯妥英与各杂质分离良好,线性范围为1.26~80.57μg·m L-1,检测限为1.26μg·m L-1。10名癫痫患者血清苯妥英浓度平均值为17.00μg·m L-1。结论:此法操作适用于苯妥英浓度-药效研究及临床监测。

全自动二维液相色谱系统测定注射用血塞通中人参皂苷Rb_1含量

目的建立全自动二维液相色谱法(2D-LC-UV)测定注射用血塞通中人参皂苷Rb1的含量。方法第一维液相色谱系统色谱柱为Aston SC2色谱柱(4.6×25 mm,5μm,ANAX,中国),流动相为酸性移动相(20.0 mmol/L磷酸二氢钠溶液,用磷酸调p H至3.0)-甲醇(35:65,V/V);第二维液相色谱系统色谱柱为COSMOSIL Packed Column(4.6×250 mm,5μm,Nacalai Tesque,日本);流动相为碱性移动相-酸性移动相-甲醇-乙腈(25:22:20:33,V/V/V/V),通过低压四元泵自动配比;采用"中心切割"模式及中间柱转移目标物,检测波长203 nm,柱温40℃。结果注射用血塞通中人参皂苷Rb1在21.7 min出峰,含量为321.6 mg/g。人参皂苷Rb1的加样回收率为99.75%,RSD为1.42%。结论2D-LC-UV测定注射用血塞通中人参皂苷Rb1的含量,基线平稳且无杂质干扰,分离完全,适用于血塞通的质量评价。

基于全自动二维液相色谱的精神疾病靶症状的氯氮平有效血药浓度实验研究

目的建立全自动二维液相色谱法(2D-LC-UV)测定血清中氯氮平浓度,探讨氯氮平有效血药浓度与不同精神疾病靶症状(精神分裂症阳性、阴性、混合型,双相障碍躁狂相及躁狂症)的关系。方法200μL进样,在一维柱Aston SX1色谱柱(25 mm×4.6 mm,5μm)上初步分离,通过中间柱Aston SCB(10 mm×4.6 mm,5μm)截取保留,并在二维柱Aston SCB(100 mm×4.6 mm,5μm)上进一步分离,直至最终测定。监测2015年7月—2017年6月我院的100例精神分裂症、双相障碍及躁狂症患者的血清中氯氮平的血药浓度,结合临床用药情况及疗效,分析不同靶症状的氯氮平有效血药浓度范围。结果本色谱条件下,氯氮平在64.47~1031.52μg·L^-1内线性关系良好。治疗精神分裂症阳性症状时氯氮平有效血药浓度范围为200~500μg·L^-1,精分症阴性症状有效血药浓度范围为50~200μg·L^-1;精分症混合型有效血药浓度范围为100~450μg·L^-1,双相障碍躁狂相及躁狂症有效血药浓度范围为150~450μg·L^-1。结论所建立的2D-LC-UV方法快速、准确,可用于氯氮平血清药物浓度研究。根据氯氮平有效血药浓度治疗不同的精神疾病靶症状,对临床个体化合理用药具有指导意义。

二维高效液相色谱法测定血浆中氨甲环酸血药浓度方法的建立及其在关节置换术患者中的应用

目的:建立全自动二维色谱法(2D-LC-UV)测定血浆中氨甲环酸浓度的方法,用于临床上行关节置换术患者围术期氨甲环酸治疗药物浓度的监测。方法:待测物在一维柱ASTON SPX(100 mm×4.6 mm,5μm)上初步分离,通过中间柱ASTO N SHC(10 mm×4.6 mm,3μm)截取保留并在二维柱ASTON SX1(150 mm×4.6 mm,5μm)上进一步分离,200μL样品进样,并最终测定。流速均为1.0mL·min^(-1),柱温为40℃,紫外检测波长为220 nm。所建立方法运用于58名行膝关节/髋关节置换术的患者围术期中氨甲环酸血浆样本的检测分析。结果:在所建立的色谱条件下,氨甲环酸与各杂质分离良好,线性范围为5~300μg·mL^(-1),最低检测限为5μg·mL^(-1),批间批间精密度均小于6.6%,提取回收率大于72.4%。58名患者围术期中氨甲环酸首次给药后3个时间点(5 min,30 min和2 h)平均血浆浓度分别为:(103.3±20.4)μg·mL^(-1),(53.0±14.8)μg·mL^(-1)和(22.8±8.3)μg·mL^(-1)。手术中男女之间氨甲环酸血药浓度无显著性差异(P>0.05),而不同手术种类之间(膝关节/髋关节置换术)氨甲环酸血药浓度存在显著性差异(P<0.05)。结论:此法操作简单,准确、精密度好,适用于临床氨甲环酸血浆浓度的监测及浓度-疗效关系研究。

二维色谱法测定人血清中文拉法辛浓度

目的建立二维液相色谱法(2D-LC-UV)测定人血清中文拉法辛血药浓度,并用高效液相串联质谱法(LC-MS/MS)比较该方法的一致性和相关性。方法用二维液相色谱法与高效液相串联质谱法分别测定文拉法辛已知浓度和未知浓度的血清样本,已知浓度样本为低、中、高3个质量浓度(40、300、750 ng·mL^(-1))质控样本,未知浓度样本来自广州医科大学附属脑科医院52份服用文拉法辛患者,并用统计学分析两种方法测得结果的一致性和相关性。结果文拉法辛在两种方法中标准曲线浓度与峰面积均呈良好的线性关系(r>0.995),方法回收率均高于95%;批内、批间的精密度RSD均小于15%;稳定性试验偏差均小于15%;按照Bland-Altman法计算两种方法测出的患者血清样品浓度差值,有98%的样品浓度差值小于5%,说明两种方法的一致性较好,按照Pearson线性回归分析,相关系数为0.999,P<0.01,显示两种方法具有良好的相关性。结论两种方法的方法学参数均符合2020年版中国药典附录9012相关要求,临床实际样品测定一致性良好,均可用于临床血药浓度监测。