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题名小细胞肺癌2F7单抗ScFv的高效表达及复性研究
被引量:2
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作者
马钢
张毅
胡晶莹
朱明洁
赵新泰
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机构
上海市肿瘤研究所细胞与分子免疫学研究室
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出处
《肿瘤》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第1期3-6,共4页
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基金
国家"863"高新技术项目资助(编号2001AA215141)
上海市自然科学基金项目(02EB14090)
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文摘
目的在大肠杆菌中高效表达小细胞肺癌单抗2F7的单链抗体(ScFv),并获得具有生物学活性的ScFv。方法利用:PCR方法将2F7单抗重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)通过一人工设计的柔性连接肽(Linker)连接,再将单链抗体基因重组到原核表达载体pQE31中,构建单链抗体高效表达载体pQE-2F7-ScFv。将pQE-2F7-ScFv质粒转化大肠杆菌M15后诱导表达,并对表达产物进行纯化和稀释复性。结果 获得了2F7单链抗体的高效表达,表达蛋白大小约27.4kD,以包涵体形式存在。包涵体蛋白在经过变性、纯化和稀释复性后,获得了有功能的单链抗体。结论 成功地构建和表达了小细胞肺癌单抗2F7的单链抗体,并对其进行了纯化和复性,将进一步促进2F7单抗小分子抗体的应用。
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关键词
单抗2f7
SCFV
复性
小细胞肺癌
基因表达
单克隆抗体
单链抗体
临床诊断
免疫治疗
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Keywords
2f7 mab
Single-Chain Fv
Expression
Refolding
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分类号
R734.2
[医药卫生—肿瘤]
R730.51
[医药卫生—肿瘤]
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