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缺氧后处理中CYP2J3/EETs系统对心肌凋亡的影响 被引量:3
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作者 赵艳芝 张冬梅 +5 位作者 于刚刚 曾翔俊 王红霞 芦玲巧 张立克 王岩梅 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1132-1137,共6页
目的:观察缺血后处理中心肌细胞内源性细胞色素P450表氧化酶2J3/环氧二十碳三烯酸系统(CYP2J3/EETs)对心肌细胞凋亡的调节作用机制。方法:取Wistar乳鼠(12-24 h)心脏做原代心肌细胞培养。实验分为7组:对照组、缺氧/复氧组、缺氧后处理组... 目的:观察缺血后处理中心肌细胞内源性细胞色素P450表氧化酶2J3/环氧二十碳三烯酸系统(CYP2J3/EETs)对心肌细胞凋亡的调节作用机制。方法:取Wistar乳鼠(12-24 h)心脏做原代心肌细胞培养。实验分为7组:对照组、缺氧/复氧组、缺氧后处理组、CYP2J3转染组、空质粒组、6-(2-炔丙基氧苯基)己酸(PPOH,一种CYP2J3抑制剂)组、二甲基亚砜(DMSO)溶剂组。除对照组外,其它各组均进行缺氧/复氧处理。用MTT法检测心肌细胞活力,高压液相色谱法检测心肌细胞培养液中11,12-EET浓度,Western blotting检测心肌细胞中caspase-3蛋白的表达,caspase-3活性检测试剂盒检测caspase-3蛋白的活性。结果:缺氧后处理组心肌细胞活力和11,12-EET浓度明显高于缺氧/复氧组(P<0.01),CYP2J3转染组比后处理组明显增高(P<0.01),PPOH组比后处理组明显下降(P<0.01)。后处理组caspase-3蛋白的表达及活性低于缺氧/复氧组(P<0.01),CYP2J3转染组caspase-3蛋白表达及活性低于后处理(P<0.01),而PPOH组caspase-3蛋白表达及活性高于缺氧后处理组(P<0.01)。结论:在缺氧后处理中CYP2J3/EETs可能通过抑制caspase-3蛋白的表达及活性来影响细胞凋亡,从而对心肌起保护作用。 展开更多
关键词 缺氧后处理 缺氧/复氧损伤 心肌细胞 细胞色素P450表氧化酶2j3 环氧二十碳三烯酸 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
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补肾活血汤对去卵巢大鼠心肌微血管和CYP2J3的影响 被引量:3
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作者 王玉珍 刘海涛 +2 位作者 宋欢欢 张玉芬 马静 《心脏杂志》 CAS 2015年第5期540-546,共7页
目的观察补肾活血汤(AED)对去卵巢大鼠心肌中细胞色素P4502J3蛋白(CYP2J3)表达、心肌微血管数目和血清雌二醇(E2)水平的影响。方法 48只成年SD雌鼠随机分为8组:正常对照组(Control组)、假手术组(Sham组)、去卵巢组(OVX组)、AED高剂量组(... 目的观察补肾活血汤(AED)对去卵巢大鼠心肌中细胞色素P4502J3蛋白(CYP2J3)表达、心肌微血管数目和血清雌二醇(E2)水平的影响。方法 48只成年SD雌鼠随机分为8组:正常对照组(Control组)、假手术组(Sham组)、去卵巢组(OVX组)、AED高剂量组(AED-H组)、AED低剂量组(AED-L组)、17β-雌二醇干预组(OVX/ERT组)、雌激素受体拮抗剂ICI182780干预组(AED-H/FET组及AED-L/FET组)。各组大鼠在处死前进行血液流变性指标的检测;Q-PCR和Western blot检测心肌CYP2J3的表达变化,免疫组化染色法检测心肌微血管数目变化,心脏B超检测心肌血流动力学变化,放射免疫法检测血清E2水平改变。结果 OVX组心肌微血管计数明显下降(P<0.01),而OVX/ERT组与AED-H组心肌微血管计数改善明显;OVX组大鼠心肌CYP2J3 mRNA和蛋白表达明显下降,而OVX/ERT组与AED-H组的CYP2J3 mRNA和蛋白表达下降不明显;OVX组大鼠的全血黏度、血浆黏度及红细胞压积较Sham组大鼠增高,而OVX/ERT组及AED-H组全血黏度、血浆黏度及红细胞压积明显下降。OVX组大鼠的红细胞变形指数、红细胞刚性指数和红细胞电泳时间均明显增高(P<0.01),但在OVX/ERT组及AED-H组较OVX组大鼠明显下降(P<0.05)。OVX组血流动力学各项指标均降低(P<0.05),而与补充雌激素组相同,AED-H组左室射血分数改善明显。OVX组大鼠血清E2含量显著下降(P<0.05),高剂量、低剂量AED均可使OVX组大鼠E2含量显著升高(P<0.05)。结论 AED能增加心肌微血管数目,改善心肌血流动力学,其作用可能与增加OVX大鼠循环雌激素水平及促进CYP2J3蛋白表达有关。 展开更多
关键词 补肾活血汤 CYP2j3 心肌微血管 血流动力学 大鼠
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pcDNA3.1(+)-CYP2J3真核表达载体的构建及在大鼠心肌细胞的表达 被引量:1
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作者 马立权 曾翔俊 +4 位作者 王红霞 油红捷 芦玲巧 张立克 郑少鹏 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2009年第2期195-198,共4页
目的克隆大鼠CYP2J3基因,与pcDNA3.1(+)真核表达质粒载体连接,转染大鼠心肌细胞检测其表达。方法提取大鼠肝脏组织总RNA,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和重叠延伸聚合酶链式反应(OE-PCR)的方法扩增大鼠CYP2J3基因,与双酶切的pcDNA3.... 目的克隆大鼠CYP2J3基因,与pcDNA3.1(+)真核表达质粒载体连接,转染大鼠心肌细胞检测其表达。方法提取大鼠肝脏组织总RNA,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和重叠延伸聚合酶链式反应(OE-PCR)的方法扩增大鼠CYP2J3基因,与双酶切的pcDNA3.1(+)连接,构建pcDNA3.1(+)-CYP2J3真核表达载体。转染大鼠心肌细胞,用RT-PCR的方法鉴定其在大鼠心肌细胞的表达。结果得到CYP2J3基因全长序列和真核表达载体pcDNA3.1(+)-CYP2J3。RT-PCR结果显示,转染pcDNA3.1(+)-CYP2J3后的大鼠心肌细胞CYP2J3基因有稳定表达。结论克隆大鼠CYP2J3基因、pcDNA3.1(+)-CYP2J3真核表达载体构建及在大鼠心肌细胞的表达均获成功,为进一步研究CYP2J3基因在细胞中的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 CYP2j3 载体构建 心肌细胞 转染
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裸质粒与脂质体介导转染方法对大鼠平滑肌细胞CYP2J3基因表达的影响 被引量:1
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作者 常静 曾翔俊 +5 位作者 王红霞 穆晶 刘琨 王瑛 李珊珊 张立克 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2009年第4期481-485,共5页
目的比较脂质体介导法和裸质粒直接转染法导入CYP2J3基因表达的效率。方法将CYP2J3真核表达质粒导入原代培养大鼠平滑肌细胞,用半定量RT-PCR方法检测CYP2J3 mRNA表达,Western blotting方法测定CYP2J3蛋白表达,高效液相色谱法测定培养液1... 目的比较脂质体介导法和裸质粒直接转染法导入CYP2J3基因表达的效率。方法将CYP2J3真核表达质粒导入原代培养大鼠平滑肌细胞,用半定量RT-PCR方法检测CYP2J3 mRNA表达,Western blotting方法测定CYP2J3蛋白表达,高效液相色谱法测定培养液11,12-EET含量。实验分为裸质粒转染组(2J3)、脂质体介导转染组(L2J3)和对照组,转染后24h和48h收集细胞。结果转染后24h,2个转染组CYP2J3 mRNA表达均较对照组明显增高,差异有统计学意义(P<0.01);L2J3组蛋白含量较对照组低,差异有统计学意义(P<0.01),2J3组蛋白含量较L2J3组高,差异有统计学意义(P<0.05)。培养液11,12-EET含量在3组间差异无统计学意义。转染后48h2个转染组CYP2J3 mRNA表达较24h时弱,但仍较对照组高,脂质体转染组较裸质粒转染组CYP2J3 mRNA表达增强;2J3组及L2J3组蛋白含量均较对照组低,差异有统计学意义(P<0.01);2个转染组培养液中11,12-EET浓度较对照组高,脂质体转染组表达高于裸质粒转染组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论裸质粒直接转染能成功导入CYP2J3基因并表达产物。 展开更多
关键词 细胞色素P450单氧化酶 CYP2j3 裸质粒 基因转染 环-二十碳三烯酸
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缺血后处理对在体大鼠缺血-再灌注心肌细胞色素P450表氧化酶2J3/环氧二十碳三烯酸系统的影响 被引量:5
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作者 于刚刚 芦玲巧 +4 位作者 曾翔俊 王红霞 常静 王晶 张立克 《中国微循环》 2009年第4期231-235,共5页
目的观察缺血后处理拮抗心肌缺血-再灌注损伤时内源性细胞色素P450表氧化酶2J3/环氧二十碳三烯酸(CYP2J3/EET)系统的变化。方法复制在体大鼠心肌缺血-再灌注损伤及缺血后处理模型。雄性Wistar大鼠(250~300)g随机分为三组:假手术组(Sham... 目的观察缺血后处理拮抗心肌缺血-再灌注损伤时内源性细胞色素P450表氧化酶2J3/环氧二十碳三烯酸(CYP2J3/EET)系统的变化。方法复制在体大鼠心肌缺血-再灌注损伤及缺血后处理模型。雄性Wistar大鼠(250~300)g随机分为三组:假手术组(Sham)、缺血-再灌注组(I-R)、缺血后处理组(IPo)。动脉插管测定心功能指标,采用TTC染色法测定心肌梗死范围,采用RT-PCR法检测心脏细胞色素P450表氧化酶亚型2J3(CYP2J3)mRNA表达,采用Western blot方法测定心肌组织CYP2J3蛋白水平的变化,高效液相色谱法测定11,12-EET含量。结果与I-R组相比IPo组左室收缩末压(LVESP)、左室内压最大上升/下降速率(±LVdp/dtmax)均显著升高;心肌梗死面积减少20.76%(P<0.01);与Sham组及I-R组相比IPo组CYP2J3 mRNA、CYP2J3蛋白及11,12-EET含量明显升高(P<0.05)。结论IPo可减轻在体心肌I-R损伤同时上调心脏CYP2J3/EET系统;提示CYP2J3/EET系统可能与IPo拮抗心脏I-R损伤作用相关。 展开更多
关键词 缺血后处理 缺血-再灌注损伤 心脏 细胞色素P450表氧化酶2j3 环-二十碳三烯酸
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缺氧后处置心肌细胞CYP2J3/EETs变化及PPOH对其的影响
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作者 赵艳芝 王新芳 +4 位作者 马立权 王宇童 张立克 王岩梅 刘扬 《山东医药》 CAS 2012年第39期15-17,共3页
目的探讨缺氧后处置心肌细胞内源性细胞色素P450表氧化酶2J3/环二十碳三烯酸系统(CYP2J3/EETs)变化及细胞色素氧化酶抑制剂PPOH对其的影响。方法取Wistar乳鼠(12~24 h)心脏做原代心肌细胞培养并分为对照组、缺氧/复氧组、缺氧后处置组... 目的探讨缺氧后处置心肌细胞内源性细胞色素P450表氧化酶2J3/环二十碳三烯酸系统(CYP2J3/EETs)变化及细胞色素氧化酶抑制剂PPOH对其的影响。方法取Wistar乳鼠(12~24 h)心脏做原代心肌细胞培养并分为对照组、缺氧/复氧组、缺氧后处置组、二甲基亚砜组、PPOH抑制剂组,分别行相应处理后。MTT法检测心肌细胞活力,Western Blotting法检测CYP2J3蛋白表达,HPLC法检测心肌细胞培养液中11,12-EETs浓度。结果心肌细胞活力、CYP2J3蛋白表达、11,12-EETs浓度,缺氧/复氧组明显低于对照组,缺氧后处置组明显高于缺氧/复氧组,PPOH组心肌细胞活力、CYP2J3蛋白表达、11,12-EETs浓度比缺氧后处置组明显下降。结论缺氧后处置可通过升高CYP2J3/EETs缓解心肌缺氧/复氧损伤。PPOH可抑制缺氧后处置中CYP2J3升高,从而减弱缺氧后处置的心肌保护作用。 展开更多
关键词 缺氧后处置 缺氧 复氧损伤 心肌细胞 细胞色素P450表氧化酶2j3 环二十碳三烯酸
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CYP2J3基因转染对在体大鼠心肌缺血-再灌注损伤的影响
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作者 芦玲巧 于刚刚 +2 位作者 张冬梅 曾翔俊 张立克 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第A10期1988-1988,共1页
关键词 CYP2j3 基因转染 大鼠 空载体质粒 重组质粒 心肌梗死面积 左室内压 缺血期 血流动力学变化 直接注射
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CYP2J3基因经静脉转染大鼠的组织分布
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作者 常静 芦玲巧 +4 位作者 王红霞 王晶 马立权 郑少鹏 张立克 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2008年第12期1251-1254,共4页
目的观察CYP2J3基因转染后大鼠心、肝、肺、肾及胸主动脉CYP2J3基因表达和11,12-EET的含量。方法经大鼠阴茎背静脉快速注射质粒复制大鼠转基因模型。将36只雄性Wistar大鼠(280~300g)随机分为空白对照组、pcDNA3.1质粒和pcDNA3.1-CYP2J... 目的观察CYP2J3基因转染后大鼠心、肝、肺、肾及胸主动脉CYP2J3基因表达和11,12-EET的含量。方法经大鼠阴茎背静脉快速注射质粒复制大鼠转基因模型。将36只雄性Wistar大鼠(280~300g)随机分为空白对照组、pcDNA3.1质粒和pcDNA3.1-CYP2J3重组质粒注射组,分别于14和28d取材。用半定量RT-PCR法检测CYP2J3mRNA表达,高效液相色谱法测定11,12-EET含量。结果pcDNA3.1-CYP2J3重组质粒组28d时各组织CYP2J3基因表达强于对照组和pcDNA3.1质粒组;各组织11,12-EET含量增高(P<0.05)。结论以pcDNA3.1质粒作为非病毒性载体,可增强目的基因CYP2J3在心、肺、肝、肾及胸主动脉的表达。 展开更多
关键词 细胞色素P450单氧化酶 CYP2j3 质粒 基因转染 EETS
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研究Cyp2j3基因对H9C2大鼠心肌细胞保护作用以及相关机制
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作者 周咏梅 贺涛 《临床和实验医学杂志》 2018年第16期1691-1695,共5页
目的探讨Cyp2j3基因通过STAT3信号通路对H9C2心肌细胞增殖凋亡的影响及机制。方法 H9C2大鼠心肌细胞分为正常对照组(对照组,常氧条件下培养)、pc DNA3.1组(转染空载体pcDNA3.1)、单纯缺氧复氧组(I/R+pcDNA3.1组,转染pc DNA3.1后,缺氧10 ... 目的探讨Cyp2j3基因通过STAT3信号通路对H9C2心肌细胞增殖凋亡的影响及机制。方法 H9C2大鼠心肌细胞分为正常对照组(对照组,常氧条件下培养)、pc DNA3.1组(转染空载体pcDNA3.1)、单纯缺氧复氧组(I/R+pcDNA3.1组,转染pc DNA3.1后,缺氧10 h后复氧2 h)和单纯缺氧复氧+pc DNA3.1-Cyp2j3组转染Cyp2j3的过表达载体后,缺氧10 h后复氧2 h)。Western bloting检测过表达Cyp2j3的效果;噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞活力;乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测各组细胞的LDH活性;流式细胞术检测各组细胞的凋亡率;Western bloting检测增殖相关蛋白Ki67、凋亡相关蛋白含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)及信号转导与转录因子3(STAT3)信号通路STAT3和磷酸化的STAT3的蛋白表达。结果转染pc DNA3.1-Cyp2j3后的H9C2细胞Cyp2j3的蛋白表达显著升高;I/R+pc DNA3.1组和I/R+pcDNA3.1-Cyp2j3组细胞的OD值及Ki67、Bcl-2和pSTAT3的蛋白表达均显著低于pcDNA3.1组,LDH活性、细胞凋亡率及Caspase3蛋白表达均显著高于pcDNA3.1组(P<0.05),而I/R+pc DNA3.1-Cyp2j3组细胞的OD值及Ki67、Bcl-2和p-STAT3的蛋白表达均显著高于I/R+pc DNA3.1组,LDH活性、细胞凋亡率及Caspase3蛋白表达均显著低于I/R+pcDNA3.1组(P<0.05)。结论过表达Cyp2j3基因可通过激活STAT3信号减弱缺氧复氧引起的H9C2细胞增殖降低、LDH活性和凋亡增加,从而对心肌细胞起保护作用。 展开更多
关键词 H9C2大鼠心肌细胞 Cyp2j3基因 STAT3信号通路 增殖 凋亡
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大鼠细胞色素P450-2J3基因的克隆及其在293细胞中的表达
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作者 闫哲 王明太 +1 位作者 李仁立 汪道文 《中原医刊》 2006年第7期6-9,共4页
目的克隆大鼠CYP2 J3基因并构建pcDNA 3.1(+)-CYP2 J3真核表达载体,检测其在293细胞中的表达。方法提取大鼠肝脏组织总RNA,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和重叠延伸聚合酶链反应(OE-PCR)扩增大鼠CYP2 J3基因,克隆入真核表达载体pcDNA ... 目的克隆大鼠CYP2 J3基因并构建pcDNA 3.1(+)-CYP2 J3真核表达载体,检测其在293细胞中的表达。方法提取大鼠肝脏组织总RNA,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和重叠延伸聚合酶链反应(OE-PCR)扩增大鼠CYP2 J3基因,克隆入真核表达载体pcDNA 3.1(+)。脂质体转染293细胞,用W estern b lotting鉴定其在293细胞表达。结果运用RT-PCR和OE-PCR获得CYP2 J3基因开放读码框架(ORF)全长序列,经酶切鉴定正确。测序结果与基因Gen Bank提交序列完全一致并成功构建真核表达载体pcDNA 3.1(+)-CYP2 J3。W estern b lotting结果显示,转染pcD-NA 3.1(+)-CYP2 J3后的293细胞能稳定有效表达CYP2 J3蛋白。结论大鼠CYP2 J3基因的成功克隆以及pcDNA3.1(+)-CYP2 J3载体的成功构建,为CYP2 J3基因的功能研究和相关疾病的研究提供了可行的工具。 展开更多
关键词 CYP2j3 基因克隆 聚合酶链反应 转染 基因表达 重叠延伸聚合酶链反应
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Cardioprotection of Shenfu preparata on cardiac myocytes through cytochrome P450 2J3 被引量:17
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作者 Yong Xiao Zeng-chun Ma +5 位作者 Yu-guang Wang Hong-ling Tan Xiang-ling Tang Qian-de Liang Cheng-rong Xiao Yue Gao 《Journal of Integrative Medicine》 SCIE CAS CSCD 2013年第5期327-336,共10页
To evaluate whether Shenfu injection (SFI) protects against cardiac myocyte injury induced by Fupian injection (FPI) in vitro. METHODS: H9c2 cells were separately treated with FPI, Renshen injection (RSI) and S... To evaluate whether Shenfu injection (SFI) protects against cardiac myocyte injury induced by Fupian injection (FPI) in vitro. METHODS: H9c2 cells were separately treated with FPI, Renshen injection (RSI) and SFI. Cell viability, lactate dehydrogenase (LDH) release, spontaneous beating rate of primative cardical cells, caspase-3/7 activity, cell apoptosis, and cytochrome P450 2J3 (CYP2J3) mRNA expression were analyzed. RESULTS: The viability of H9c2 cells treated with SFI (37 and 75 mg/mL) was significantly higher than that of H9c2 cells treated with FPI (25 and 50 mg/mL) (P〈0.05, P〈0.01, respectively). LDH activity of H9c2 cells treated with SFI (75 mg/mL) was significantly decreased (P〈0.01) compared with that of H9c2 cells treated with FPI (50 mg/mL). SFI (150 mg/mL) significantly attenuated FPI (100 mg/mL)-induced spontaneous beating rate decrease in primary myocardial cells after 4-hour treatment. Compared with FPI (12 and 25 mg/mL), SFI (18 and 37 mg/mL) treatment could effectively reverse the change of caspase-3/7 activity (P〈0.01 and P〈0.01, respectively). Compared with FPI (6 and 25 mg/mL), apoptotic cells decreased significantly (P〈0.05, P〈0.01, respectively) when H9c2 cells were incubated with SFI (9 and 37 mg/mL). The expression of CYP2J3 mRNA was down-regulated by FPI, while RSI and SFI could up-regulate the expression of CYP2J3 (P〈0.01), which suggested the potential mechanism of protection of RSI against cardiac myocyte damage induced by FPI treatment. CONCLUSION: These observations indicate that SFI has the potential to exert cardioprotective effects against FPI toxicity. The effect was possibly correlated with the activation of CYP2J3. 展开更多
关键词 Shenfu decoction cardiotonic agents cytochrome P450 2j3 plant extracts in vitro
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细胞色素2J3基因转染对大鼠胸主动脉球囊损伤后血管狭窄程度的影响及其机制探讨 被引量:1
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作者 宗哲 付研 +5 位作者 李大鹏 程晋 王磊 李建中 常静 张立克 《微循环学杂志》 2012年第1期17-19,22,I0001,共5页
目的:观察细胞色素2J3(CYP2J3)基因转染对实验大鼠胸主动脉球囊损伤后狭窄程度的影响,分析上调CYP2J3/环-二十碳三烯酸(CYP2J3/EETs)系统拮抗血管损伤后狭窄的作用及其机制。方法:建立胸主动脉球囊损伤模型的同时分别经鼠尾静脉注入生... 目的:观察细胞色素2J3(CYP2J3)基因转染对实验大鼠胸主动脉球囊损伤后狭窄程度的影响,分析上调CYP2J3/环-二十碳三烯酸(CYP2J3/EETs)系统拮抗血管损伤后狭窄的作用及其机制。方法:建立胸主动脉球囊损伤模型的同时分别经鼠尾静脉注入生理盐水、CYP2J3重组质粒和pcDNA3.1质粒(均为3ml/kg体重),分别为动脉损伤盐水组、动脉损伤CYP2J3组(动脉损伤2J3组)、动脉损伤pcDNA3.1组(动脉损伤3.1组);另取18只大鼠作为假手术组,不进行球囊损伤手术,只经鼠尾静脉注射与手术组相同量的生理盐水(假手术盐水组)、CYP2J3重组质粒(假手术2J3组)和pcDNA3.1质粒(假手术3.1组),每组均为6只大鼠。术后第28天取各组大鼠胸主动脉,分别检测动脉环相对管腔面积(RLA)、CYP2J3mRNA表达水平及11,12-EET含量。结果:动脉损伤各组RLA均小于对应假手术组(P<0.05或P<0.01),动脉损伤2J3组RLA大于动脉损伤盐水组及动脉损伤3.1组(P<0.01)。假手术2J3组CYP2J3mRNA表达高于假手术盐水组及假手术3.1组(P<0.05),动脉损伤各组CYP2J3mRNA表达及11,12-EET水平均高于对应假手术组(P<0.05或P<0.01),动脉损伤2J3组11,12-EET水平高于动脉损伤盐水组。结论:动脉损伤时CYP2J3/EETs系统上调可能是防止狭窄的重要机制。 展开更多
关键词 胸主动脉球囊损伤 血管狭窄程度 基因转染 细胞色素 术后血管再狭窄 血管阻塞性疾病 大鼠 心脑血管疾病
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诃子、甘草与制草乌合用调控心脏代谢酶CYP2J3减毒机制 被引量:1
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作者 李晗 宋玲 +5 位作者 高云航 陈腾飞 侯红平 彭博 叶祖光 张广平 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第17期88-95,共8页
目的:基于心脏细胞色素P450(CYP450)系统分别考察诃子、甘草与制草乌及有效成分鞣花酸、甘草苷与乌头碱合用的减毒机制。方法:在体内实验方面,大鼠随机分为空白组,制草乌组(0.25 g·kg^(-1)),诃子组(0.25 g·kg^(-1)),甘草组(0.... 目的:基于心脏细胞色素P450(CYP450)系统分别考察诃子、甘草与制草乌及有效成分鞣花酸、甘草苷与乌头碱合用的减毒机制。方法:在体内实验方面,大鼠随机分为空白组,制草乌组(0.25 g·kg^(-1)),诃子组(0.25 g·kg^(-1)),甘草组(0.25 g·kg^(-1))和诃子+甘草+制草乌合用组(0.25 g·kg^(-1)+0.25 g·kg^(-1)+0.25 g·kg^(-1),以制草乌为标准),给药8 d后测定大鼠肌酸激酶(CK)与乳酸脱氢酶(LDH),观察大鼠心脏组织的病理学改变,并选择实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞色素P2J3(CYP2J3) mRNA和蛋白表达水平的变化;在体外实验方面,设空白组、乌头碱组、鞣花酸组、甘草苷组与乌头碱+鞣花酸+甘草苷合用组,利用高内涵分析技术检测其对细胞数目、DNA含量、活性氧(ROS)和线粒体膜电位(MMP)的影响,同时检测CYP2J3 mRNA和蛋白表达水平的变化。结果:体内实验中,与空白组比较,制草乌组大鼠血清中CK、LDH水平均明显升高(P<0.05,P<0.01),合用组CK、LDH活性降低;同时病理染色结果显示诃子和甘草可减轻制草乌导致的心脏损伤;Real-time PCR结果显示,与空白组比较,制草乌可下调CYP2J3 mRNA转录水平(P<0.05),与诃子、甘草合用后可上调该亚型的表达(P<0.01);蛋白翻译水平与mRNA转录水平基本一致。体外实验中,高内涵分析结果显示,与空白组比较,乌头碱组的细胞数量、DNA含量与MMP的荧光值显著降低(P<0.01),合用组的细胞数量、DNA含量与MMP的荧光值也明显降低(P<0.05,P<0.01),但其相应荧光值均高于乌头碱组;与空白组比较,乌头碱下调CYP2J3 mRNA转录水平(P<0.05),合用组能够逆转乌头碱下调CYP2J3 mRNA的能力(P<0.05)。结论:诃子、甘草与制草乌合用减毒机制主要是鞣花酸、甘草苷与乌头碱合用后,上调了CYP2J3表达,促进花生四烯酸(AA)代谢生成环氧二十碳三烯酸(EETs),进而降低心脏损伤的作用,且这种作用可能起始于转录环节。 展开更多
关键词 制草乌 诃子 甘草 细胞色素P450(CYP450) 细胞色素P2j3(CYP2j3)
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人参皂苷Re对H9c2心肌细胞CYP450酶的影响 被引量:16
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作者 马增春 肖勇 +7 位作者 赵佳伟 王宇光 谭洪玲 梁乾德 汤响林 肖成荣 杨凌 高月 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期494-498,共5页
目的观察人参皂苷Re对H9c2心肌细胞色素P450酶的影响,旨在发现人参皂苷Re对心肌细胞作用的分子机制。方法实验分对照组、人参皂苷Re各剂量组(1、5、10、50、100μmol·L^(-1))处理组,人参皂苷Re作用6、24、36、48及60 h后提取RNA或... 目的观察人参皂苷Re对H9c2心肌细胞色素P450酶的影响,旨在发现人参皂苷Re对心肌细胞作用的分子机制。方法实验分对照组、人参皂苷Re各剂量组(1、5、10、50、100μmol·L^(-1))处理组,人参皂苷Re作用6、24、36、48及60 h后提取RNA或蛋白进行测定。利用实时定量PCR法检测H9c2心肌细胞CYP2C11、CYP2J3、CYP4A1、CYP4A3、CYP4F4及ANP mRNA的表达;采用Western blot法检测心肌细胞CYP4A1和CYP2J3蛋白的表达。结果人参皂苷Re明显上调心肌细胞CYP2C11、CYP2J3 mRNA的表达至正常对照的1.6、1.8倍,明显下调CYP4A1、CYP4A3及CYP4F4 mRNA的表达至正常对照的0.4、0.15、0.3倍。人参皂苷Re明显上调ANP基因表达水平至正常对照的3.2倍。随着药物浓度的增加,人参皂苷Re对CYP4A1蛋白表达产生明显的下调作用,而对CYP2J3蛋白产生明显的上调作用。结论人参皂苷Re可影响心肌细胞的CYP450酶和ANP基因的表达。 展开更多
关键词 人参皂苷RE 心肌细胞 利钠肽 细胞色素P450酶 CYP2j3 CYP4A1
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苯扎贝特改善实验性糖尿病小鼠心肌肥厚作用及可能机制 被引量:1
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作者 张杰 丁淑梅 +3 位作者 邱红梅 黄波 吴芹 蒋青松 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期764-771,共8页
目的观察苯扎贝特(BEZ)对糖尿病小鼠心肌肥厚的治疗作用及其对环氧廿碳三烯酸(EET)的影响。方法小鼠高糖高脂饮食喂养4周后,连续5 d ip给予STZ 40 mg·kg^(-1),7 d后测量小鼠空腹血糖(FBG)值。随机选取FBG≥11.1 mmol·L^(-1)... 目的观察苯扎贝特(BEZ)对糖尿病小鼠心肌肥厚的治疗作用及其对环氧廿碳三烯酸(EET)的影响。方法小鼠高糖高脂饮食喂养4周后,连续5 d ip给予STZ 40 mg·kg^(-1),7 d后测量小鼠空腹血糖(FBG)值。随机选取FBG≥11.1 mmol·L^(-1)的小鼠,继续给予高糖高脂饮食4周后,分为模型组、BEZ 25 mg·kg^(-1)(约为临床常用剂量1/3)组和BEZ 75 mg·kg^(-1)(与临床常用剂量相当)组,ig给药,1次/d,持续4周。每周监测小鼠体质量(BM)及FBG。实验结束时,取血检测甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCH)和14,15-EET含量。以心肌肥厚指数(LVHI)、左心室/体质量比(LV/BM)和心房肽(ANF)表达为心肌肥厚检测指标,HE和Masson染色观察左心室组织病理学改变。逆转录定量PCR和Western印迹法分别检测左心室心肌组织中ANF mRNA和细胞色素P450表氧化酶2J3(CYP2J3)蛋白表达。结果小鼠FBG持续≥11.1 mmol·L^(-1),提示糖尿病形成。4周后,糖尿病小鼠的LVHI,LV/BM和ANF mRNA表达增加(P<0.01),心肌结构损伤,出现心肌肥厚。实验结束时,TG和TCH含量增加(P<0.01);同时,左心室心肌组织CYP2J3表达下调,血清14,15-EET含量减少(P<0.01)。给予BEZ 25和75 mg·kg^(-1)治疗后,FBG均降低,TG和TCH亦减少(P<0.05);但只有BEZ 75 mg·kg^(-1)组小鼠心肌肥厚改善,CYP2J3表达和14,15-EET水平升高(P<0.05)。结论临床相当剂量的BEZ对糖尿病小鼠心肌肥厚有保护作用,该作用可能与CYP2J3-EET激活有关。 展开更多
关键词 苯扎贝特 糖尿病 心肌肥厚 环氧廿碳三烯酸 细胞色素P450表氧化酶2j3
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普罗地芬加重大鼠胸主动脉球囊成形术后动脉狭窄
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作者 王晶 丁宁 王宇 《基础医学与临床》 CSCD 2015年第1期22-25,共4页
目的观察普罗地芬(Skf525A)对大鼠胸主动脉球囊成形术后动脉狭窄程度的影响,探讨内源性细胞色素P450表氧化酶2J3(Cytochrome P450 epoxygenases,CYP2J3)/环氧-二十碳三烯酸(epoxyeicosatrienoic acids,EET)系统与血管损伤后动脉狭窄的... 目的观察普罗地芬(Skf525A)对大鼠胸主动脉球囊成形术后动脉狭窄程度的影响,探讨内源性细胞色素P450表氧化酶2J3(Cytochrome P450 epoxygenases,CYP2J3)/环氧-二十碳三烯酸(epoxyeicosatrienoic acids,EET)系统与血管损伤后动脉狭窄的关系。方法 Wistar雄性大鼠随机分为4组:假手术组(sham组),胸主动脉球囊损伤组(I组),用普罗地芬干预上述两组分别为:sham+Skf及I+Skf组。HE染色观察胸主动脉相对管腔面积(RLA)及内膜增生指数(IPI),用RT-PCR法检测胸主动脉CYP2J3 mRNA表达,用高效液相色谱分析法测定胸主动脉11,12-环氧-二十碳三烯酸(11,12-EET)含量。结果与sham组相比,I组RLA明显缩小,IPI明显增高(P<0.01),CYP2J3 mRNA的表达和11,12-EET含量均明显升高(P<0.01);Skf525A处理后明显缩小I组RLA及明显增加胸主动脉IPI,而明显降低CYP2J3 mRNA的表达和11,12-EET含量(P<0.01).结论 CYP2J3/EETs系统具有拮抗血管损伤后狭窄的作用。 展开更多
关键词 Skf525A CYP2j3 11 12-EET
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S355J2G3低合金钢焊接接头的组织和力学性能 被引量:4
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作者 崔岩 鲁二敬 +2 位作者 吴晓明 张艳辉 吴昊 《机械工程材料》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期38-41,共4页
通过拉伸、冲击、弯曲、硬度和金相等试验对S355J2G3低合金钢MAG焊焊接接头的力学性能与显微组织进行了研究。结果表明:采用G38 3G3Si1焊丝对S355J2G3低合金钢进行焊接时,可获得拉伸、弯曲和冲击性能均良好的焊接接头;接头硬度的分布较... 通过拉伸、冲击、弯曲、硬度和金相等试验对S355J2G3低合金钢MAG焊焊接接头的力学性能与显微组织进行了研究。结果表明:采用G38 3G3Si1焊丝对S355J2G3低合金钢进行焊接时,可获得拉伸、弯曲和冲击性能均良好的焊接接头;接头硬度的分布较均匀,最高不大于380HV;焊缝组织为沿柱状晶晶界析出的块状先共析铁素体,晶内为细小密集的针状铁素体和少量珠光体;热影响区组织主要为先共析铁素体、针状铁素体、珠光体和少量的粒状贝氏体;母材为均匀细小分布的铁素体和珠光体。 展开更多
关键词 S355J2G3低合金钢 焊接接头 力学性能 显微组织
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S355J2G3钢疏松缺陷控制 被引量:2
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作者 郑辉 付宪强 谢奎龙 《特钢技术》 CAS 2013年第3期20-22,共3页
S355J2G3钢锻件低倍质量要求很严,通过提高钢水纯净度,改进绝热板质量,控制过热度、注速,以及锻造加热温度及保温时间等措施,大幅度降低了疏松缺陷的发生。
关键词 S355J2G3钢 锻件 疏松
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不同焊接顺序的汽车用S355J2G3钢工字梁焊接结构变形和残余应力的有限元预测 被引量:7
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作者 郭三爱 《热加工工艺》 CSCD 北大核心 2013年第9期192-195,共4页
基于焊接热弹塑性有限元分析理论,采用焊接专用有限元分析软件对不同焊接顺序的汽车用S355J2G3钢工字梁焊接结构手工MAG焊接过程进行了数值仿真,获得不同焊接顺序下焊接结构的变形和残余应力分布。模拟时,选择双椭球焊接热源模型,考虑... 基于焊接热弹塑性有限元分析理论,采用焊接专用有限元分析软件对不同焊接顺序的汽车用S355J2G3钢工字梁焊接结构手工MAG焊接过程进行了数值仿真,获得不同焊接顺序下焊接结构的变形和残余应力分布。模拟时,选择双椭球焊接热源模型,考虑了材料热物理性能与温度的非线性关系,以及相变潜热对温度场的影响。重点研究了焊缝及临近焊缝区域焊接残余应力和变形的分布特征,并进行了理论分析。 展开更多
关键词 S355J2G3钢 焊接变形 残余应力 有限元分析
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煤矸石混合料路面基层施工工艺研究 被引量:2
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作者 李彩惠 张亚鹏 +2 位作者 王海燕 钱大卫 康东起 《河北工程大学学报(自然科学版)》 CAS 2013年第3期54-56,共3页
为探索煤矸石混合料这一新型材料作为路面基层填料的施工工艺,以邢台某矿公路工程为依托,在分析研究煤矸石混合料自身特点的基础上,制定"J3Z4N2法"铺筑试验路段并应用于整条道路,分析研究煤矸石混合料路面基层关键施工工艺和... 为探索煤矸石混合料这一新型材料作为路面基层填料的施工工艺,以邢台某矿公路工程为依托,在分析研究煤矸石混合料自身特点的基础上,制定"J3Z4N2法"铺筑试验路段并应用于整条道路,分析研究煤矸石混合料路面基层关键施工工艺和注意事项,通过现场对控制指标的检测,证明"J3Z4N2法"铺筑整条道路各项指标均能达到规范标准。 展开更多
关键词 煤矸石混合料 路面基层 施工工艺 J3Z4N2法
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