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基于榛子过敏原2S albumin基因的实时荧光聚合酶链式反应检测方法开发
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作者 孙秀艳 杨莉莉 +3 位作者 张晓波 郑秋月 胡冰 曹际娟 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2023年第18期32-39,共8页
目的开发一种基于2Salbumin基因的实时荧光聚合酶链式反应检测方法(real-timefluorescent polymerase chain reaction,qPCR)用于检测食品中的榛子成分。方法从美国国家生物技术信息中心数据库中检索并选取具有高特异性的榛子2S albumin... 目的开发一种基于2Salbumin基因的实时荧光聚合酶链式反应检测方法(real-timefluorescent polymerase chain reaction,qPCR)用于检测食品中的榛子成分。方法从美国国家生物技术信息中心数据库中检索并选取具有高特异性的榛子2S albumin基因序列的DNA片段进行引物探针设计,建立一种新的用于检测微量榛子成分的实时荧光PCR方法,并对建立的方法的特异性、扩增效率、检出限和稳健性进行验证。结果本方法对检测目标呈现出高特异性,与其余12种非目标样品无交叉反应。扩增效率为99.42%,相关系数r2为0.9941,两者均符合实时荧光PCR方法验证指南要求。该方法检出限(limit of detection,LOD)为每个反应5拷贝(2.5copies/μL),可检测出食品中含有的微量榛子成分。使用正交实验设计评估该方法具有很好的稳健性(P=0.07),可转移到其他实验室及常规分析中使用。结论基于2S albumin基因组分的qPCR检测方法可用于识别食品中潜在的榛子成分,对于预防榛子过敏及开发减敏脱敏榛子食品研究具有很好的技术支撑。 展开更多
关键词 榛子过敏原 实时荧光聚合酶链式反应 2s albumin基因 检出限
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EMS诱变亚麻荠获得2S贮藏蛋白缺失突变体 被引量:4
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作者 苑丽霞 郝敬云 +2 位作者 赵奎 薛金爱 李润植 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2016年第3期11-17,共7页
亚麻荠种子富含大量不饱和脂肪酸和贮藏蛋白。为了获得广泛的育种材料,创建优异的新种质,采用EMS(甲基磺酸乙酯)对亚麻荠种子进行诱变处理。通过EMS不同处理时间(0,8,12,16 h)和不同处理浓度(0,0.2%,0.4%,0.6%,0.8%,1.0%,1.2%)条件下诱... 亚麻荠种子富含大量不饱和脂肪酸和贮藏蛋白。为了获得广泛的育种材料,创建优异的新种质,采用EMS(甲基磺酸乙酯)对亚麻荠种子进行诱变处理。通过EMS不同处理时间(0,8,12,16 h)和不同处理浓度(0,0.2%,0.4%,0.6%,0.8%,1.0%,1.2%)条件下诱变亚麻荠种子,建立了EMS诱变亚麻荠种子的优化体系,以0.8%(V/V)EMS处理成熟种子12 h效果最佳,筛选获得一个亚麻荠2SP1突变体。与野生型相比,该突变体种子贮藏蛋白成分中缺失了2S清蛋白,但是亚麻荠种子含油量和蛋白含量、株型和种子萌发等农艺性状未发生显著变化。这种特殊的亚麻荠2SP1突变体可作为研究种子贮藏蛋白合成机理及培育高营养品质亚麻荠新品种的优异种质资源,也可用于进行相关功能基因组学等的研究。 展开更多
关键词 亚麻荠 2s清蛋白 EMS 突变体(2sP1)
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新疆莎车1号扁桃仁2S-清蛋白的纯化及特性研究 被引量:2
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作者 李述刚 陆健康 +1 位作者 王萍 马美湖 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第17期36-41,共6页
清蛋白是扁桃种仁中主要蛋白质,为揭示扁桃仁主要蛋白质组成及结构特性,以新疆莎车1号(SC-1)扁桃仁为研究对象,对其种仁中2S-清蛋白进行分离纯化和结构特性研究,即经有机溶剂多次沉淀提取,获得扁桃仁清蛋白的粗提物,再经Q Sepharose FF... 清蛋白是扁桃种仁中主要蛋白质,为揭示扁桃仁主要蛋白质组成及结构特性,以新疆莎车1号(SC-1)扁桃仁为研究对象,对其种仁中2S-清蛋白进行分离纯化和结构特性研究,即经有机溶剂多次沉淀提取,获得扁桃仁清蛋白的粗提物,再经Q Sepharose FF分离纯化,获得扁桃仁2S-清蛋白。经高效液相色谱-质谱联用分析表明,纯化后的扁桃仁2S-清蛋白准确分子质量为31.40 k D,其在十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果中显示为18.0 k D和19.5 k D 2个条带,表明其由两个不同的亚基通过二硫键结合而成。扁桃仁2S-清蛋白中谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)和精氨酸(Arg)的含量最高;其二级结构中主要为β-折叠,占65.9%;扁桃仁2S-清蛋白羰基含量为4.45 nmol/mg、活性巯基含量为39.95?μmol/g、总巯基含量为57.11?μmol/g、表面疏水性为23.45?μg;变性温度为43.3℃。研究结果可为新疆扁桃仁的开发利用提供理论依据。 展开更多
关键词 扁桃仁 2s-清蛋白 纯化 结构特性
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芝麻过敏原PCR检测方法 被引量:5
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作者 张文举 许庆金 +1 位作者 邓志瑞 陈沁 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2012年第2期52-55,65,共5页
芝麻是重要的食品过敏原之一,微小剂量即可引起严重的过敏反应。针对芝麻过敏蛋白-2S白蛋白的基因序列设计PCR扩增引物,建立并优化芝麻过敏原检测的普通聚合酶链式反应(PCR)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)方法。结果表明... 芝麻是重要的食品过敏原之一,微小剂量即可引起严重的过敏反应。针对芝麻过敏蛋白-2S白蛋白的基因序列设计PCR扩增引物,建立并优化芝麻过敏原检测的普通聚合酶链式反应(PCR)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)方法。结果表明,两种方法的最低检测限分别为0.1,0.01ng DNA,该方法特异性良好,成本较低,具有一定的应用价值。 展开更多
关键词 芝麻 过敏原 聚合酶链式反应 实时荧光定量聚合酶链式反应 2s白蛋白
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芝麻过敏原及其致敏性消减技术研究进展 被引量:5
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作者 张九凯 于悦 +4 位作者 于宁 康文瀚 胡风欣 邢冉冉 陈颖 《食品科学技术学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第4期5-15,共11页
芝麻是新的“8大类”过敏食物之一,芝麻过敏反应由于其潜在危害性及其日益上升的发病率而越来越引起全世界的普遍重视,因此研究芝麻致敏性消减技术在保障食品安全方面具有重要意义。概述了芝麻主要过敏原(Ses i 1~Ses i 7)的结构和免疫... 芝麻是新的“8大类”过敏食物之一,芝麻过敏反应由于其潜在危害性及其日益上升的发病率而越来越引起全世界的普遍重视,因此研究芝麻致敏性消减技术在保障食品安全方面具有重要意义。概述了芝麻主要过敏原(Ses i 1~Ses i 7)的结构和免疫特性,及其致敏性消减技术原理和研究进展;已报道的芝麻过敏原有7种,属于2S白蛋白、7S类豌豆球蛋白、油质蛋白和11S球蛋白,其中11S球蛋白和2S白蛋白是主要的过敏原蛋白。利用热加工技术消减芝麻致敏性,主要通过煮沸、微波、烘焙等工艺引起过敏原的解聚、变性进而破坏致敏表位;高压、辐照、发酵、酶解等非热加工技术通过氢键、疏水键等化学键的变化、多肽链的断裂引起蛋白结构变化,从而掩盖或直接降解致敏表位。另外,结合其他食品过敏原,对芝麻过敏原的潜在消减技术,包括脉冲电场、冷等离子体、超声波、脉冲光、糖基化改性和复合加工技术等进行了阐述分析。未来需要进一步研究芝麻不同过敏原的致敏表位、不同加工工艺对过敏原结构及致敏性影响、开展血清学、细胞和动物模型等致敏性评价等,以明确芝麻致敏性消减的主要机制,以期为生产低敏或脱敏芝麻产品奠定理论依据与科学指导。 展开更多
关键词 芝麻 过敏原 2s白蛋白 7S类豌豆球蛋白 油质蛋白 11S球蛋白 消减技术
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油菜籽蛋白质的结构、生物活性和理化特性 被引量:8
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作者 成兰英 王梅 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期972-976,共5页
本文主要介绍了油菜籽蛋白质的组成、已经分离所得的2 S清蛋白和1 2 S球蛋白的结构、油菜籽蛋白质和水解产物的生物活性,以及油菜籽蛋白质的理化特性。
关键词 油菜籽蛋白 2s清蛋白 12s球蛋白 生物活性
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