HPC2基因与宫颈癌关系的研究

目的 :研究宫颈癌的发生与HPC2基因的关系 .方法 :利用PCR方法 ,以宫颈癌组织和Hela细胞基因组DNA为模板扩增人HPC2基因片段 ,将此基因片段插入pGEM Teasy载体 ,限制性内切酶酶切鉴定 ,测定序列 .结果 :从宫颈癌组织和Hela细胞中成功扩增了HPC2基因 ,Blast分析发现其C端一段保守序列具有多态性 .结论

人宫颈癌HPC2基因的克隆及其原核和真核表达载体的构建

目的:构建人宫颈癌HPC2基因的原核及真核表达载体,进一步研究该基因在宫颈癌发生中的作用。方法:从人宫颈癌HeLa细胞中提取总RNA。用RT-PCR方法扩增出人宫颈癌HPC2全序列基因,插入pT7 b lue载体。酶切鉴定及序列分析后,构建人HPC2基因的原核及真核表达载体。结果:成功扩增出人宫颈癌HPC2基因;并构建pGEX4T1-HPC2原核表达载体及pCMV-F lag-HPC2真核表达载体。结论:人HPC2基因的原核及真核表达载体的构建为深入研究HPC2基因与宫颈癌的发生奠定了基础。

HPC2突变体真核表达载体的构建

目的构建在哺乳动物细胞表达的HPC2真核表达突变载体,并在U2OS细胞中表达。方法从人U2OS细胞中克隆HPC2 cDNA片段,并利用Gateway技术构建pcDNA3.2/V5/HPC2质粒。将质粒用脂质体瞬时转染U2OS细胞,细胞裂解后用Western blot分析HPC2的表达情况。设计突变引物,以HPC2质粒为模板进行PCR,将PCR产物连接并转化扩增,得到特定位点突变的pcDNA HPC2质粒。结果 PCR、酶切、测序均表明pcDNA-V5/HPC2突变质粒构建成功,并可在U2OS细胞中表达。结论成功构建了pcDNA-V5/HPC2突变真核表达载体,为研究HPC2的功能提供了有力的工具。

HPC2真核表达载体的构建及其在HEK293细胞中的表达

目的构建在哺乳动物细胞中表达的HPC2真核表达载体,并分析其在HEK293细胞中的表达。方法从重组pcDNA3/HPC2载体上将HPC2cDNA序列亚克隆至带有flag标记的真核表达载体pcDNA3-flag上,经PCR、酶切和测序鉴定,将重组质粒pcDNA3-flag/HPC2用脂质体瞬时转染HEK293细胞,细胞裂解后,用Westernblot分析并观察HPC2在HEK293细胞中的表达情况。结果PCR、酶切和DNA测序结果均表明重组质粒pcDNA3-flag/HPC2构建正确,并可在HEK293细胞内高效表达。结论成功构建了pcDNA3-flag/HPC2真核表达载体,该载体能在哺乳动物细胞中有效表达,为进一步研究HPC2的功能提供了重要的实验材料。

ICAM-1、HPC2及GATA3在宫颈癌中的表达及其临床意义

目的探究细胞间黏附因子-1(ICAM-1)、人多梳蛋白2(HPC2)及GATA结合蛋白3在宫颈癌中的表达及其临床意义。方法选择接受治疗的80例宫颈癌患者为研究组,另选取同期治疗的78例良性宫颈病变为良性病变组,选取80例健康个体为对照组,分别检测其ICAM-1、HPC2及GATA3水平,对比3组个体ICAM-1、HPC2及GATA3水平。将宫颈癌患者按照病理检测结果区分为Ⅰ~Ⅱ期组(36例)与Ⅲ~Ⅳ期组(44例),对比2组患者血清ICAM-1、HPC2及GATA3水平。最后对宫颈癌患者实施为期18个月的随访,对比死亡组(32例)与存活组(48例)患者血清ICAM-1、HPC2及GATA3水平。结果(1)研究组血清ICAM-1、HPC2及GATA3水平高于良性病变组,良性病变组高于对照组,组间对比差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)Ⅲ~Ⅳ期组宫颈癌患者血清ICAM-1、HPC2及GATA3水平明显高于Ⅰ~Ⅱ期组(P<0.05)。(3)死亡组宫颈癌患者血清ICAM-1、HPC2及GATA3水平明显高于存活组(P<0.05)。结论ICAM-1、HPC2及GATA3在宫颈癌患者中呈现明显的高表达,同时ICAM-1、HPC2及GATA3水平与宫颈癌患者临床分期及预后有密切的联系。

葡甘聚糖对2型糖尿病的疗效分析

目的观察葡甘聚糖(魔芋的主要成份)对2型糖尿病患者的血糖、血脂以及血压等的影响,同时观察葡甘聚糖用于2型糖尿病患者的耐受性。方法随机选择124例2型糖尿病患者在不改变原有治疗的情况下给予葡甘聚糖,并与随机同期选择124例2型糖尿病患者对照,12周后评价葡甘聚糖改善血糖、血脂以及血压等效果。结果治疗12周后,服用葡甘聚糖的糖尿病患者空腹血糖(FPG)水平下降(1.26±1.71)mmol/L(P<0.001)、餐后2小时血糖(2hPG)水平下降(2.15±2.18)mmol/L(P<0.001)、HbAlc水平下降(0.97±1.14)%(P<0.001)、总胆固醇(TC)水平下降(0.31±0.76)mmol/(P<0.001)、低密度脂蛋白(LDL-C)水平下降(0.32±0.85)mmol/l(P<0.01)。患者经过12周服用葡甘聚糖治疗,有1.6%的患者发生轻度胃肠道不良反应,未发生相关的严重不良事件。结论葡甘聚糖有显著改善2型糖尿病人高血糖的作用,能减少和延缓葡萄糖的吸收,并有助于改善糖尿病患者血脂代谢异常,有较好的安全性和耐受性。

人多梳蛋白2不同功能片段真核表达载体的构建及表达

目的:构建HPC2不同截短功能片段的真核表达载体,并检测各片段在骨肉瘤U2OS细胞中的表达。方法:以质粒pcDNA3.2-V5/HPC2为模板,分别设计各片段PCR引物进行扩增,EcoR I酶切鉴定PCR产物,正确的PCR产物进行连接后转化到DH5α感受态细胞中并涂板筛选,从而得到带有V5标签的不同截短动能片段的表达载体,提取质粒并转染U2OS细胞,Western blot法鉴定目标蛋白的表达。结果:测序及酶切的结果均表明HPC2不同功能片段的真核表达载体构建成功,并能够在U2OS细胞中表达。结论:成功构建了HPC2不同功能域片段的真核表达载体。

新单克隆抗体HPC2与N-cadherin联合区分胰腺导管腺癌和胆管癌

胰腺导管腺癌和胆管癌的区分是一个很复杂的诊断问题。转移性胰腺导管癌和原发性胆管癌的形态非常类似，因此在肝脏活检区别二者具有挑战性。因外科治疗和预后显著不同，故区别二者非常重要。对辅助这些诊断的一组免疫组化标记的评估认为，除N—cadherin（标记胆管腺癌）外，很少能提供良好的敏感性和特异性组合。

HPC2蛋白在HPV16感染的宫颈癌细胞中调控作用初探

目的探讨人多梳蛋白2(HPC2)对宫颈癌细胞siha生长的影响及其与E7基因的调控关系。方法设计siRNA干扰序列,分别沉默siha细胞中E7基因和HPC2基因。检测E7基因沉默后的siha细胞株中HPC2基因及蛋白表达情况,并检测细胞增殖和细胞凋亡率。结果 siha细胞E7基因沉默后,HPC2mRNA和蛋白的表达降低,细胞增殖受抑制,凋亡增加,与HPC2基因沉默后的效应相似。结论 HPC2可能在siha细胞中参与了增殖、凋亡的调控,其表达可能与E7基因密切相关。