2,2-二苯基-1-苦肼基-高效液相色谱法快速筛选亚麻籽抗氧化活性成分

为了更加迅速地筛选到亚麻籽复杂提取物中的抗氧化活性物质及其活性强弱,以开环异落松树脂酚二葡萄糖苷(SDG)、开环异落叶松树脂酚(SECO)和肠二醇(ED)3种木酚素为研究对象,建立了抗氧化活性能力筛选的2,2-二苯基-1-苦肼基-高效液相色谱法(DPPH-HPLC法)。液相色谱条件为:流动相为乙腈和水,经反相色谱柱Waters XBridge C18分离,检测波长为280 nm。DPPH-HPLC法的步骤是:将单一或者混合抗氧化剂分别与DPPH混合,放置20 min,作为待测液,将同样量的相应抗氧化剂作为对照液,分别进行液相色谱分析获得其含量,计算出相应的抗氧化剂清除率(SRA),活性顺序为:SDG>SECO>ED。结合超高效液相色谱-飞行时间质谱联用法,鉴定出亚麻籽中5种抗氧化物,筛选其抗氧化能力分别为:SDG异构体(5)>SDG(4)>7α-[(β-D-glupyranosyl)oxy]-1-methoxyisolariciresinol(1)>(6R,7R,8S)-1-Methoxyisolariciresinol(2)>蜀葵苷元二葡萄糖苷(3)。结果表明,建立的DPPH-HPLC法能够有效完成复杂亚麻籽提取物的抗氧化活性物质筛选。

1,1-二苯基-2-2苦基肼基游离基法测定调脾护心方及其不同组分清除自由基的能力

目的研究调脾护心方的清除自由基活性及其成分。方法分别采用乙醇或水加热提取调脾护心方成分,并用石油醚、氯仿、醋酸乙酯和正丁醇依次进行萃取,利用1,1-二苯基-2-2苦基肼基游离法(DPPH法)进行清除自由基活性实验,同时与合成抗氧化剂维生素C进行对照。结果各组分均有一定的清除自由基作用,且调脾护心方水提物的醋酸乙酯萃取部分具有最高的清除自由基活性。结论调脾护心方中的多酚类成分是主要的抗氧化活性成分,值得进一步研究。

山奈酚-铜配合物的合成、表征及其抗氧化活性的研究

以山奈酚和二水合氯化铜为原料,合成山奈酚-铜金属配合物,通过紫外光谱、红外光谱、核磁共振氢谱及差热-热重分析对其结构进行表征,并采用DPPH法测定了配合物清除自由基的能力。结果表明:相比山奈酚,配合物的紫外光谱和红外光谱的吸收峰均发生明显红移;核磁共振氢谱中3-OH信号消失,其他质子信号均向高场移动;差热-热重分析显示山奈酚和Cu^(2+)的配位比为1,且配合物中含三分子的配位水;在6种设定的实验浓度内(1.0~3.5 mol/L),山奈酚和配合物清除DPPH·半抑制浓度(IC_(50))分别为1.63×10^(-4)、1.51×10^(-4)mol/L。Cu^(2+)是通过与山奈酚3位羟基和4位羰基的氧原子结合生成配合物,山奈酚与铜形成配合物后,对DPPH自由基的清除率有提高。

应用均匀设计-高通量筛选技术评价丹参有效单体成分抗氧化及海马神经细胞保护作用的最佳配伍

目的:通过均匀设计-高通量筛选(uniform design-high throughput screening,UD-HTS)技术,对丹参多种有效单体成分进行多因素多水平配伍组合样品抗氧化及海马神经细胞保护作用的筛选。方法:具有生物活性的丹参多种有效单体(脂溶性7种和水溶性7种)。按照均匀设计方案,得到各单体之间不同浓度配比的组合样品,通过抗2,2-二苯基-1-苦肼基自由基(2,2-Di(4-tert-octylphenyl)-1-picrylhydrazyl,DPPH)氧化法和细胞学实验检测各组合样品药物活性。结果:通过初筛和复筛,得到A13、PA两个抗氧化及海马神经细胞保护作用最佳配伍组合样品。结论:均匀设计-高通量筛选技术可快速筛选出药效较好的组合样品,适合多因素多水平配比的大规模药物筛选。

HPLC-DPPH快速发现重楼果壳总黄酮中抗氧化成分及其活性初步验证

目的:以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)为底物,利用HPLC快速发现重楼果壳总黄酮中的抗氧化物成分,为重楼果壳资源的利用提供研究基础。方法:对重楼果壳用70%乙醇水提取进行总黄酮提取富集后,利用DPPH与重楼果壳总黄酮进行反应,采用HPLC分析反应前后色谱峰的变化,通过制备色谱、高分辨质谱、核磁共振等鉴定潜在的抗氧化成分,并进行其抗氧化活性验证。结果:与DPPH反应后,发现一个色谱峰消失,利用制备色谱对该消失的色谱峰进行制备纯化,利用质谱和核磁共振数据,鉴定为槲皮素-3-O-龙胆二糖苷,该化合物首次从重楼属植物中分离得到,在重楼果壳总黄酮中的含量为3.28%。对其抗氧化活性进行验证,发现其对DPPH自由基半数清除率(IC50)为0.0340 mg·ml^(-1),与维生素C(IC50=0.0240 mg·ml^(-1))的抗氧化活性相当。结论:该法快速从重楼果壳中发现抗氧化活性成分槲皮素-3-O-龙胆二糖苷,为重楼果壳总黄酮的进一步开发提供研究基础。

HPLC-Q-TOF MS/MS偶联DPPH添加法测定甘草黄酮类成分体外代谢产物的抗氧化活性

目的:运用HPLC-Q-TOF MS/MS偶联1,1-二苯基-2-苦基肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)添加法对6个甘草黄酮类化合物的肝微粒体代谢产物进行抗氧化活性筛选。方法:将肝微粒体与6个化合物共孵育,经HPLC-Q-TOF MS/MS鉴定代谢产物;孵育样品中加入DPPH,通过比较前后代谢产物峰面积的变化,判断不同代谢产物的抗氧化活性。结果:加入DPPH孵育后,6个化合物代谢产物的峰面积均有不同程度的减少,有的甚至消失,通过计算除了甘草查尔酮A的代谢产物Lico A-M1和Lico A-M2外,其他黄酮类化合物的代谢产物被氧化的程度均大于90%。结论:刺甘草查尔酮,甘草查尔酮B,甘草查尔酮A,5-(1,1-dimethylally)-3,4,4'-trihydroxy-2-methoxychalcone,glycycourmarin和glyurallin B这6个化合物在经过大鼠肝微粒体体外代谢后,其代谢产物仍然具有一定的抗氧化活性。

芫荽茎叶精油成分及清除DPPH自由基能力研究

以乙醚为溶剂,采用索式萃取法萃取新鲜芫荽茎叶,以0.252%产率获得芳香精油。利用GC-MS分析仪对精油进行了分析,检测出60种成分,解析了占精油94.200%的41种成分,其中,酯类化合物57.755%,烷烃类化合物11.300%,醛类化合物16.168%,芳香族化合物8.077%。该精油对DPPH(1,1-D:phenyl-2-picrylhy-drazyl)自由基的清除率最高达62.7%,水蒸气蒸馏获得精油的清除率为84.2%。

用清除DPPH自由基法评价药黑豆色素的抗氧化能力

通过对DPPH·体系的吸收光谱和稳定性研究,确定DPPH·乙醇溶液的检测波长为517nm;体系中加入不同抗氧化剂反应30min趋于稳定;用上述方法评价纯化前后的药黑豆色素(MBSP1和MBSP2)对DPPH·清除率和浓度之间的关系,以VC作对照,HSC50值作为评价指标,并对MBSP2进行抗氧化动力学分析和FT-IR分析。结果表明,药黑豆色素对DPPH·具有明显的清除作用,VC、MBSP1和MBSP2三者的HSC50值分别为0·63、1·09、0·88mg/mL,同时药黑豆色素的抗氧化能力与其花色苷含量呈正相关。FT-IR结果表明,药黑豆色素是一种以矢车菊素为主要结构的花色苷类化合物。

不同纯度茶多酚和茶黄素的抗氧化活性（英文）

采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除实验和氧化损伤酵母细胞实验模型,对不同纯度的茶多酚和茶黄素的抗氧化活性进行比较研究。结果表明,茶多酚和茶黄素均对DPPH自由基具有一定的清除能力。氧化损伤酵母细胞实验结果表明,茶多酚和茶黄素对酵母细胞氧化损伤具有一定的保护作用,且在一定浓度范围内其保护能力呈剂量依赖关系。98%茶多酚对DPPH自由基清除率最高;60%茶黄素和90%茶多酚对H2O2氧化损伤酵母细胞保护作用相当;60%茶黄素对紫外氧化损伤酵母细胞保护作用最强。茶多酚和茶黄素具有一定的体外和细胞抗氧化活性,且不同方法测得的抗氧化活性存在一定的差异。

玫瑰花苞抗自由基能力的检测

对玫瑰花苞抗多种自由基能力进行检测。通过正交试验分析溶剂浓度、料液比、处理时间以及提取温度等对玫瑰花苞提取物清除自由基能力的影响。结果表明玫瑰花苞浸出液对DPPH·(2,2-二苯代苦味酰基苯肼)、ABTS+·(2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐)的清除率可达90%以上,对超氧阴离子自由基(O2-·)的清除率随处理条件变化明显,对羟基自由基(·OH)的清除率低于10%。对4种自由基的清除能力从大到小依次为:ABTS+·、DPPH·、O2-·、·OH。玫瑰花苞提取物对各种自由基具有清除能力。

松口蘑深层发酵上清液抗氧化活性研究

通过1,1-二苯基-2-苦肼基自由基(DPPH)体系来研究体外松口蘑深层发酵上清液的抗氧化活性。将松口蘑深层发酵上清液通过石油醚和乙酸乙酯分为不同种类萃取物,研究各萃取部位抗氧化活性。结果表明,松口蘑发酵上清液乙酸乙酯萃取物自由基清除率最强(52.4%),且自由基清除率随浓度增加而增强;其他萃取部分的抗氧化能力递减顺序为:发酵液(33%)>乙酸乙酯萃余液(20.3%)>石油醚萃余液(14.6%)>石油醚萃取液(5.2%)。定性试验初步验证上清液乙酸乙酯萃取物中抗氧化成分可能为黄酮、酚类、有机酸等。

核桃楸不同药用部位的抗氧化活性比较

目的筛选核桃楸抗氧化的有效药用部位。方法对核桃楸叶、树皮、根皮及果皮应用乙醇进行回流提取,采用体外清除1,1-二苯基-2-苦肼基自由基(DPPH)自由基能力研究核桃楸各药用部位乙醇提取物的抗氧化活性,筛选并确定核桃楸抗氧化的有效药用部位。结果核桃楸树皮、根皮活性强于维生素E而弱于维生素C,其他部位活性顺序依次为核桃楸叶、核桃楸果皮。结论核桃楸树皮、根皮系抗氧化有效药用部位;核桃楸叶是一种可持续再生资源,可以为天然抗氧化剂的新来源,并有潜力针对多种疾病进行深度开发。

诃子提取物清除自由基活性研究

考察了诃子提取物及其色谱纯化物(a、b、c)清除自由基的活性能力,进行了1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH.)清除试验。结果表明,甲醇提取物、乙酸乙酯提取物及其色谱纯化物均具有清除自由基活性的能力,甲醇粗提物活性略高于等体积1 mg/mL TBHQ,而其色谱纯组分c的活性最高,约为1 mg/mL TBHQ的1.2倍,且略高于茶多酚;乙酸乙酯组分色谱纯组分a,b抑制率分别为其粗提取物的1.6和1.1倍。色谱纯成分经显色反应、UV和H1NMR检测后被确认为诃黎勒酸衍生物或诃子单宁水解碎片,此为诃子提取物作为烟用自由基清除剂提供了有效的理论依据。

牡丹嫁接品种活性成分的测定及抗氧化活性的研究

[目的]旨在探究嫁接后牡丹体内活性物质的含量和抗氧化活性的变化,为开发牡丹在天然抗氧化剂和医药保健等相关领域的应用提供一定的理论和实验基础。[方法]本研究以洛阳红、凤丹白和洛阳红嫁接品种、凤丹白嫁接品种的牡丹根为材料,研究了95%乙醇提取物在1,1-二苯-2-苦味肼(DPPH)自由基体系、卵黄脂蛋白不饱和脂肪酸(PUFA)体系、邻苯三酚自氧化体系中的抗氧化活性,对比分析不同品种牡丹的抗氧化效果。[结果]嫁接品种提取液中芍药苷、牡丹酚含量均明显低于其他两个牡丹品种;其中,"凤丹白"的活性成分含量最为丰富。嫁接品种提取液抗卵黄脂蛋白PUFA过氧化的效果明显优于其他两个牡丹品种,在高浓度下清除DPPH自由基的能力较强,且其抗氧化能力与提取液浓度之间呈现出良好的剂量依赖效应,但其对O2-·的清除能力却明显弱于其他两个牡丹品种。[结论]牡丹根提取液有较好的抗氧化能力,嫁接后,牡丹体内活性成分含量及抗氧化活性等方面均有一定程度的变化。

第一过渡金属对槲皮素的化学改性及抗氧化活性

通过对槲皮素的化学改性,合成了槲皮素的第一过渡系生命元素的配合物,并对槲皮素配合物的溶解性、总抗氧化能力、清除O2.-自由基和DPPH.自由基的活性进行了比较研究。研究结果表明,槲皮素配合物的在水中的溶解性优于槲皮素;槲皮素配合物的总抗氧化能力强弱为:槲皮素<槲皮素铁(II)<槲皮素铬(II)<槲皮素镍(Ⅱ)<槲皮素钴(Ⅱ)<槲皮素锰(Ⅱ)<槲皮素铜(Ⅱ)<槲皮素锌(Ⅱ);清除O2-自由基的能力为:槲皮素<槲皮素铁(II)<槲皮素铬(II)<槲皮素镍(Ⅱ)<槲皮素锰(Ⅱ)<槲皮素铜(Ⅱ)<槲皮素钴(Ⅱ)<槲皮素锌(Ⅱ);清除DPPH.自由基的能力为:槲皮素<槲皮素铁(II)<槲皮素镍(Ⅱ)<槲皮素铬(II)<槲皮素铜(Ⅱ)<槲皮素钴(Ⅱ)<槲皮素锰(Ⅱ)<槲皮素锌(Ⅱ)。槲皮素经化学改性的产物比槲皮素有更好的生物活性。

龙芽草抗氧化及抗炎活性的体外研究

龙芽草(Agrimonia pilosa Ledeb.)为我国传统中草药,是一种多年生草本植物.该试验采用分光光度法和酶联免疫法,分别测定了龙芽草粉末及水煮液抗氧化及抗炎活性的体外试验指标,包括1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH)自由基清除能力、总抗氧化能力和类黄酮的含量,旨在了解其抗氧化及抗炎活性.结果表明,无论是龙芽草粉末或是水煮液,均具有较高的体外DPPH清除能力,当其料液比为1:5的清除率最高(即其水煮液的清除率为94.11%、粉末的为87.23%);随着浓度的降低,其清除率有所下降.在料液比相同的情况下,龙芽草水煮液的DPPH自由基清除力比其粉末强一些.同时,龙芽草有较好较高的总抗氧化能力,且其水煮液的总抗氧化能力比其粉末强.其中,当龙芽草水煮液样品的料液比为1:99时,其总抗氧化能力最高.龙芽草的类黄酮含量丰富(51.53 mg/g),表明其具有较好抗炎活性.

闽南地区19株野生茶树主要活性成分研究

为进一步开发、利用闽南野生茶树资源,采用传统醇提法提取泉州市境内19株野生茶树叶片中的总黄酮,分析不同野生茶树叶片总黄酮含量及其抗氧化活性、儿茶素类物质含量及其种类变化。结果表明,19株野生茶树的总黄酮含量差异较大,部分野生茶树之间差异显著;19株野生茶树的总黄酮提取液对DPPH自由基均具有较强的清除能力,有15株野生茶树对·OH自由基清除能力呈现较高水平,部分野生茶树群体间对DPPH和·OH的清除率存在显著性差异,处于同一生长环境的不同野生茶树的清除率也存在较大差异,其中TK-2对DPPH和·OH的消除能力均为最强;19株野生茶树在儿茶素组成上差异较大,表现出丰富的多样性,都不属于高EGCG的种质资源;HL-1、ST-1、ST-3、ST-5的茶叶品质相对较好,HL-1、HL-2、HL-3和HL-4可作为儿茶素提取的优质原料品种。综上,研究表明分布于闽南地区19株野生茶树的黄酮含量、儿茶素含量,以及抗氧化活性有显著差异,且表现出单株特异性,研究结果可为合理开发利用和选育优良品种提供优良材料。

甘草饮片中抗氧化活性成分的快速筛选及鉴定

目的:建立在线检测甘草饮片中抗氧化活性成分的方法,并对其进行鉴定。方法:通过检测1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)清除率来评价甘草饮片的抗氧化活性;采用在线高效液相色谱-紫外-1,1-二苯基-2-三硝基苯肼法(HPLC-UV-DPPH)筛选甘草饮片中的抗氧化活性成分;采用高效液相色谱-飞行时间高分辨质谱法(HPLC-TOF/MS)获取质谱数据并采用Qualitive Analyst B 06.00 Build 6.0.633.0软件进行分析,通过对比分析甘草的紫外吸收光谱、在线图谱、质谱信息及各化合物的保留时间、精确分子量,结合参考相关文献初步鉴定抗氧化活性成分,并进行验证。结果:8批甘草饮片的DPPH清除率为55.71%~60.17%,均可筛选出7种抗氧化活性成分,经鉴定分别为阿佛洛莫生、8-异戊烯基柚皮素、黄羽扇豆魏特酮、半甘草异黄酮B、3′,4′-二甲氧基-3-羟基-6-甲基黄酮、甘草宁E和甘草宁H。经验证,在线反应产生的倒峰峰面积与饮片的DPPH清除率呈正相关。结论:所建方法简单、准确,可用于快速筛选并鉴定甘草饮片的抗氧化活性成分,倒峰峰面积可用于评价甘草饮片的抗氧化活性成分大小。

酪醇酯类衍生物的合成及生物活性

以酪醇为原料,对其醇羟基进行了结构修饰,合成了25种酪醇衍生物.化合物的结构经核磁共振波谱和高分辨质谱分析确证.体外抗氧化实验结果表明,在实验浓度下大部分化合物表现出一定的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)清除活性,化合物3k和3y具有良好的DPPH清除活性,其中化合物3y的清除活性高于对照药奎诺二甲基丙烯酸酯(Trolox);在实验浓度下大部分化合物表现出一定的2,2'-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)清除活性,化合物3k,3x和3y具有良好的ABTS清除活性,其中化合物3y的清除活性高于Trolox;在实验浓度下大部分化合物对铁离子-2,4,6-三(2-吡啶基)三嗪(Fe3+-TPTZ)复合物表现出一定的铁离子还原抗氧化能力(FRAP),化合物3k,3w和3y具有良好的Fe3+-TPTZ复合物还原能力,其中化合物3y的还原能力高于Trolox.

DPPH检测碱提香菇菌丝体多糖的抗氧化性能研究

[目的]探讨碱提香菇菌丝体粗多糖抗氧化能力的影响因素。[方法]按Sevag法去除粗多糖中蛋白质,以考马斯亮蓝法、苯酚-硫酸法和DPPH法分别测定碱提香菇菌丝体粗多糖在脱蛋白过程中多糖含量、蛋白含量和清除自由基能力的变化。[结果]碱提香菇菌丝体水溶性多糖经Sevag洗脱后,多糖含量降低了33.10%;蛋白含量降低了97.08%;自由基清除率降低了74.38%。[结论]碱提香菇菌丝体多糖具有较高的抗氧化能力,并与其糖蛋白浓度成正相关,过分脱除香菇菌丝体多糖提取物结合态蛋白会降低其抗氧化活性。