秋水仙素处理诱导大青杨2n花粉方法的优化

为提高大青杨生长速度，采用秋水仙素诱导二倍体花粉技术，通过杂交获得大青杨三倍体。采用不同水培时间处理的单因素试验设计，结果表明，在水培4d，温度15℃-28℃，相对湿度85％-95％时，采用0．12％秋水仙素处理大青杨雄花芽效果最好，A4级（d〉50p．m）花粉百分数为4．2％，大花粉粒百分率（d〉37．5μm）达10．9％；利用正交试验设计方法，将0．1％、0．3％、0．5％的秋水仙素用注射、棉浸、棉浸＋DMSO法处理水培2、4、6d的大青杨雄花芽，在雄花枝水培4d时，注射0．3％秋水仙素，诱导获得A3级大花粉粒（37．5μm〈d〈50μm）最多，达10％，表明在雄花枝水培4d时，注射0．3％秋水仙素是诱导大青杨大花粉的有效方法。

秋水仙碱处理诱导银灰杨2n花粉与杂种三倍体创制

【目的】为创制银灰杨杂种三倍体新种质,研究完善银灰杨三倍体育种技术体系,筛选生长迅速、抗逆性强的银灰杨新品种。【方法】本研究以银灰杨、河北杨以及银腺杨为试验材料,在优化秋水仙碱诱导银灰杨花粉染色体加倍技术条件的基础上,开展了秋水仙碱注射处理对2n花粉粒表面结构的影响以及杂交创制杂种三倍体的研究。【结果】减数分裂时期、注射次数、减数分裂时期与注射次数的交互效应均对2n花粉诱导率具有极显著影响。利用0.5%的秋水仙碱溶液对发育至粗线期的花粉母细胞进行11次注射处理是秋水仙碱诱导银灰杨花粉染色体加倍的最佳处理组合,2n花粉平均诱导率最高可达(30.27±8.69)%。与天然2n花粉粒相比,秋水仙碱诱导型2n花粉粒表面结构出现了明显的裂沟,说明秋水仙碱注射处理对2n花粉花粉壁形成具有一定的影响。选取含有一定2n花粉比例的花粉,分别与河北杨、银腺杨雌配子进行授粉杂交,共收获杂种苗木4 955株,检测出三倍体5株,其中,2株三倍体来源于河北杨×银灰杨的杂交组合;另3株三倍体来源于银腺杨×银灰杨的杂交组合。【结论】秋水仙碱能高效诱导银灰杨花粉染色体加倍并获得2n花粉,但是注射会影响2n花粉花粉壁的形成,使得2n花粉粒表面结构产生裂沟。秋水仙碱诱导的2n花粉可以用于授粉杂交,成功获得杂种多倍体植株。