3'-叠氮-3'-脱氧胸苷-α-羟基膦酸酯衍生物的合成

在碱性条件下,抗病毒核苷衍生物3'-叠氮-3'-脱氧胸苷(AZT)-5'-氢亚膦酸二酯与芳香醛加成反应得到4个3'-叠氮-3'-脱氧胸苷-α-羟基膦酸酯类衍生物,通过31PNMR,1HNMR,ESI-MS及元素分析对其结构进行了表征确认.

AZT对肝癌细胞端粒酶活性及相关蛋白表达的影响

背景与目的:端粒酶抑制剂抑制端粒酶活性的机制十分复杂,可能涉及多个蛋白的共同作用。本研究通过3′-叠氮脱氧胸苷(3′-azido-deoxythymidine,AZT)作用于人肝癌细胞SMMC-7721,比较AZT作用后癌细胞端粒酶活性及相关蛋白的变化,探讨AZT抑制端粒酶活性的可能机制。方法:利用噻唑蓝[3(4,5-demethylthiazole-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium-bromide,MTT]实验确定AZT作用的最佳作用时间和浓度;实时荧光定量端粒重复序列扩增法(real-timefluorescentquantitativeTRAPassay,FQ-TRAP法)检测AZT作用后,SMMC-7721细胞端粒酶活性变化;用缺口末端标记技术(terminaldeoxyribonucleotidyltransferse(TdT)-mediatedbiotin-16-dUTPnick-endlabelling,TUNEL)法和流式细胞术检测AZT作用后,SMMC-7721细胞凋亡情况;单细胞激光拉曼光谱技术和蛋白质芯片-飞行时间质谱仪,检测AZT作用后特异蛋白质的变化。结果:AZT抑制癌细胞生长的最佳作用时间为48h,最佳作用浓度为20mmol/L;FQ-TRAP法检测发现,AZT作用后肝癌细胞端粒酶活性与对照组相比受到明显抑制(P=0.0001);TUNEL法观察到AZT诱导肝癌细胞凋亡形态学改变,流式细胞术检测AZT诱导肝癌细胞凋亡率为13.5%;单细胞激光拉曼光谱技术观察到,AZT作用后有7个与蛋白代谢相关的特征峰变化;蛋白质芯片-飞行时间质谱仪检测发现,AZT作用后有24个蛋白分子在癌细胞中高表达,8个蛋白分子在癌细胞中低表达,32个差异蛋白均属于小分子蛋白。结论:AZT可抑制SMMC-7721细胞端粒酶活性,诱导凋亡与相关特异小分子蛋白有关。

An Experimental Model for Screening Anti-AIDS Drugs with Bovine Immunodeficiency Virus

The assays for bovine immunodeficiency virus (BIV) induced syncytium formation and BIV long terminal repeat (LTR) directed luciferase (Luc) gene expression were applied to screen and evaluate anti AIDS drugs. Frequency of the syncytium formation and BIV LTR directed Luc activity were in proportion to the number of input BIV infected cells. AZT inhibited the syncytium formation and the BIV LTR directed Luc gene expression level. Its inhibitory effects were dosedependent with the IC 50 being 0.24 and 0.052 mmol / L, respectively.