高效液相色谱法同时测定桑菊感冒片中绿原酸、木犀草苷和3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸含量

目的：建立高效液相色谱法同时测定桑菊感冒片中绿原酸、木犀草苷和3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸含量,以提高原质量标准。方法：样品用50%甲醇溶液提取,采用Phenomenex C18色谱柱（5μm,4.6mm×250mm）分离;流动相为0.1%磷酸-乙腈,梯度洗脱;流速为1.0mL.min-1;检测波长为348nm。结果：绿原酸、木犀草苷、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸分别在2.8128～140.6400μg.mL-1、0.9580～47.9023μg.mL-1、0.9879～49.3944μg.mL-1范围具有良好的线性;加标回收率分别为99.1%、100.9%、100.1%;RSD分别为1.5%、1.8%、1.8%（n=9）。结论：该方法简单易行,准确性和重复性好,可用于桑菊感冒片的质量控制。

RP-HPLC同时测定颜复康胶囊中绿原酸、3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸、迷迭香酸和黄芩苷的含量

目的建立了同时测定颜复康胶囊中绿原酸、3，5-O-双咖啡酰基奎宁酸、迷迭香酸、黄芩苷含量的反相高效液相色谱法（reversedphasehighperformanceliquidchromatography，RP—HPLc）。方法色谱柱：依利特C18柱（200mm×4．6nlin，5Ixm），流动相：乙腈（A）一体积分数为0．05％的磷酸水溶液（B）（梯度洗脱），流速：1．0mL·min一，柱温：30℃，检测波长：330am。结果绿原酸、3，5-0-双咖啡酰基奎宁酸、迷迭香酸、黄芩苷的线性分别为5．12～40．96（r=0．9996）、3．93～31．41（r=0．9997）、0．89～7．12（r=0．9996）、10．30～82．44mg·L。（r=0．9991），4种成分的平均加样回收率为99．7％～101．8％，RSD为2．8％～4．0％（n=6）。结论建立的含量测定方法可用于颜复康胶囊的质量控制。

苦丁茶冬青苦丁茶提取物与3,5-双咖啡酰奎尼酸对肠道微生物体外发酵的影响

制备苦丁茶冬青苦丁茶的水提物和醇提物,并通过HP-20大孔树脂层析和半制备色谱分离纯化得到苦丁茶多酚中含量较高的3,5-双咖啡酰奎尼酸(3,5-dicaffeoylquinic acid,3,5-diCQA)组分。运用体外厌氧发酵和荧光原位杂交技术,探究了苦丁茶提取物和3,5-diCQA对肠道微生物菌群的影响,并测定了发酵体系中短链脂肪酸和乳酸的含量。结果表明,苦丁茶冬青苦丁茶水提物、醇提物和3,5-diCQA能促进双歧杆菌、乳酸菌/肠球菌的生长,同时抑制溶组织梭状菌、普雷沃勒氏菌的生长;与空白对照相比,它们还能促进甲酸、乙酸和丙酸的生成,但对丁酸的合成没有影响。因此,苦丁茶冬青苦丁茶及3,5-diCQA具有一定的调节肠道微生态的作用。

四季抗病毒合剂制备中3个有机酸转移率的研究

目的建立测定菊花与四季抗病毒合剂中绿原酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸,以及鱼腥草中绿原酸含量的方法,并探讨其在菊花与鱼腥草药材至四季抗病毒合剂制剂间的转移率。方法采用超快速液相色谱(UFLC)法;选取3批菊花与鱼腥草药材,每批对应5批制剂。结果 3批菊花药材中,绿原酸含量分别为2.110 21,2.131 03,2.191 12 mg/g,1,3-二咖啡酰奎宁酸含量分别为1.414 22,1.203 72,1.312 66 mg/g,3,5-二咖啡酰奎宁酸含量分别为7.210 98,7.310 54,7.284 53 mg/g。3批鱼腥草药材中,绿原酸的含量分别为0.721 11,0.754 31,0.760 53 mg/g。每批菊花与鱼腥草药材对应5批制剂中,绿原酸的平均含量分别为0.249 62,0.254 07,0.261 73 g/L,RSD分别为0.70%,1.47%,1.60%;1,3-二咖啡酰奎宁酸的平均含量分别为0.120 61,0.105 20,0.112 46 g/L,RSD分别为0.39%,1.46%,0.20%;3,5-二咖啡酰奎宁酸的的平均含量分别为0.168 49,0.169 41,0.173 32 g/L,RSD分别为0.78%,0.66%,2.16%;15批制剂中绿原酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸在药材至四季抗病毒合剂制剂间的转移率分别为73.58%,71.76%,19.54%,RSD分别为1.26%,1.38%,1.73%。结论该含量测定方法简便、准确、重复性好,可作为药材与四季抗病毒合剂中绿原酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸的定量方法。绿原酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸的转移率高,表明制剂制备工艺有利于该有效成分的溶出,为制剂疗效提供了理论依据。

金银花中3种有机酸的反相高效液相色谱法定量分析

目的 :建立用反相高效液相色谱内标法梯度洗脱同时测定金银花中绿原酸、咖啡酸、 3,5 -二咖啡酰奎尼酸含量的方法 ,并对 4个产地 3种金银花中上述 3种化合物进行定量分析。方法 :采用岛津CLC -ODS柱 (6 0mm× 15 0mm) ,甲醇 - 10 %的磷酸氢二钠和醋酸缓冲液流动相不同比例进行梯度洗脱 ,内标物为水杨酸 ,检测波长 30 4nm。结果 :西南地区金银花药材主流商品灰毡毛忍冬、细毡毛忍冬干燥花蕾中绿原酸、咖啡酸、 3,5 -二咖啡酰奎尼酸含量高于山东、河南产金银花。结论 :本法灵敏快速 。

HPLC法测定金花解毒活血胶囊中3种化学成分的含量

目的同时测定金花活血解毒胶囊中秦皮乙素、木犀草苷和3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的含量。方法采用Iner Sustain C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸为流动相,梯度洗脱;检测波长为350nm;流速为1.0mL·min^-1;进样量为10μL;柱温为35℃。结果秦皮乙素、木犀草苷和3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的线性范围分别为0.06216~0.6216μg(r=1.0000)、0.01822~0.1822μg(r=1.0000)、0.05090~0.5090μg(r=0.9999);提取回收率分别为98.2%(RSD为0.9%,n=6)、95.3%(RSD为2.1%,n=6)和96.4%(RSD为1.3%,n=6)。结论本法操作简便、安全、结果准确,可用于金花解毒活血胶囊的质量控制。

3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的稳定性和抗氧化活性研究

目的考察影响化合物3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸稳定性的因素并对3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的体外抗氧化活性进行初步研究。方法采用HPLC考察3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸在不同溶剂、pH、温度、光照条件下的稳定性;采用UV测定3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的体外抗氧化活性(清除DPPH自由基)。结果溶剂的种类、pH值、温度、光照条件对3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸稳定性具有一定影响。3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸具有较强的体外清除DPPH自由基活性,其活性与Vc相当[3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸和Vc的IC_(50)值分别为(372.56±1.04)μg·mL^(-1)和(294.54±1.03)μg·mL^(-1)]。结论在该化合物的分离纯化及其分析检测时,不能采用纯有机溶剂为溶剂,应在中性或酸性条件下,低温、避光操作。3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸作为抗氧化剂在制药、食品、化妆品以及精细化工行业具有广阔的应用前景。

HPLC法测定杏香兔耳风中绿原酸和3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的含量

目的：建立杏香兔耳风药材中绿原酸和3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的含量测定方法。方法：采用HPLC法,使用Dis-covery C18柱（250mm×4.6mm,5μm）,以乙腈-0.05%甲酸水溶液为流动相,流速1.0mL.min^-1,梯度洗脱,检测波长为328nm。结果：绿原酸进样量在0.60～3.00μg范围内呈线性关系（r=0.9996,n=5）,平均回收率为100.8%;3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸进样量在1.30～6.52μg范围内呈线性关系（r=0.9997,n=5）,平均回收率为99.4%。结论：本方法操作简便、可靠,重复性好,专属性强,可作为杏香兔耳风药材质量控制方法。

HPLC-DAD法测定野菊花栓中绿原酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷和蒙花苷

目的建立高效液相色谱法联合二极管阵列检测器(HPLC-DAD)法同时测定野菊花栓中绿原酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷和蒙花苷。方法采用HPLC-DAD法,Thermo Hypersil GOLD C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:0.05%磷酸–乙腈,梯度洗脱;检测波长:327 nm;体积流量:0.8 m L/min;柱温:35℃;进样量:10μL。结果绿原酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷和蒙花苷分别在0.105~2.100μg(r=0.999 9)、0.165~3.300μg(r=0.999 8)、0.081~1.620μg(r=0.999 7)、0.060~1.200μg(r=0.999 6)、0.317~6.340μg(r=0.999 5)与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.19%、99.54%、99.34%、98.83%和99.26%,RSD值分别为0.87%、1.04%、1.06%、1.29%、0.91%。结论该方法简便、准确、重复性好,可用于野菊花栓中有机酸和黄酮类多成分的质量控制。

HPLC同时测定银菊浸膏中绿原酸、木犀草苷、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸含量

目的建立同时测定银菊浸膏中绿原酸、木犀草苷、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸含量的高效液相色谱法,优选最佳提取溶剂。方法色谱条件：Ultimate PLUS C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,以乙腈（A）-0.1%磷酸水溶液（B）为流动相梯度洗脱,流速1.0 m L·min^-1,柱温40℃,波长348 nm,比较不同提取溶剂对浸膏中3种成分的影响。结果绿原酸、木犀草苷、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸分别在0.077-1.920,0.082-3.288,0.141-5.624μg内线性关系良好,平均加样回收率为100.8%（RSD=2.3%）,101.5%（RSD=0.7%）,97.6%（RSD=0.6%）;银菊浸膏乙醇提取显著优于水提取,且40%乙醇提取最佳。结论该法简便、准确,可用于银菊浸膏提取工艺优选与质量控制。

HPLC测定灯盏花不同部位绿原酸、灯盏乙素、3,5-二咖啡酰奎宁酸和4,5-二咖啡酰奎宁酸含量

目的:建立同时测定灯盏花不同部位中绿原酸、灯盏乙素、3,5-二咖啡酰奎宁酸及4,5-二咖啡酰奎宁酸4种有效成分含量的高效液相色谱方法。方法:采用Agilent Zorbax SB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈(A)-0.3%磷酸水溶液(B),梯度洗脱(0～10 min,12%～15%A,10～32 min,15%～15%A,32～33 min,15%～20%A,33～50 min,20%～22%A),流速1 mL.min-1,检测波长335 nm与327 nm,柱温30℃。结果:绿原酸(1)、灯盏乙素(2)、3,5-二咖啡酰奎宁酸(3)及4,5-二咖啡酰奎宁酸(4)分别在0.050 1～1.002,0.165 9～3.318,0.049 7～0.994,0.048 7～0.974μg呈良好线性关系(r>0.999 6);灯盏花药材中4种有效成分的平均回收率(n=6)分别为98.53%,99.68%,98.78%,99.06%,RSD分别为0.94%,0.49%,1.1%,0.81%。结论:该方法简便、准确,分离效果好,可用于灯盏花药材的质量评价。

金银花花蕾中3,5-二咖啡酰奎宁酸对α-葡萄糖苷酶抑制作用的研究

本研究探讨金银花花蕾中3,5-二咖啡酰奎宁酸(3,5-DCQA)对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。通过色谱方法从金银花花蕾50%甲醇提取物中分离获得3,5-DCQA,并用质谱与核磁等光谱分析对其化学结构进行鉴定。分别选取大鼠小肠I型及酿酒酵母、面包酵母、嗜热脂肪芽孢杆菌的II型α-葡萄糖苷酶研究3,5-DCQA对不同α-葡萄糖苷酶抑制活性的选择性,结果表明该物质对α-葡萄糖苷酶的抑制作用与酶的来源有关,并选择性地抑制小肠α-葡萄糖苷酶的麦芽糖水解活性。动力学实验结果揭示3,5-DCQA非竞争性地抑制小肠麦芽糖酶活性(Ki:0.22 m M)。此外,物质结构与活性关系(SAR)的研究显示,3,5-DCQA中咖啡酰氧基团数目与活性有关,其中所含两个咖啡酰氧基团对α-葡萄糖苷酶的抑制活性起关键性作用。因此金银花花蕾中的3,5-DCQA可用于辅助降低餐后高血糖类功能食品的开发与利用。

灯盏细辛药效物质基础3,5-二咖啡酰奎宁酸对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤的保护作用

目的研究3,5-二咖啡酰奎宁酸对大鼠实验性局灶性脑缺血-再灌注损伤模型的保护作用。方法采用线栓法阻塞大鼠脑中动脉(MCAO)制备局灶性脑缺血-再灌注损伤模型,观察3,5-二咖啡酰奎宁酸对模型大鼠状态、神经行为学的影响,以及对脑梗死比率及血清中丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOs)的影响。结果 3,5-二咖啡酰奎宁酸剂9.13、18.25mg/kg时均能明显降低模型大鼠脑梗死的比率(P<0.05),降低血清中MDA水平(P<0.01),增强T-SOD、CAT、GSH-Px的活性(P<0.05)。结论 3,5-二咖啡酰奎宁酸对脑缺血-再灌注损伤有较好的保护作用,其作用机制可能与抗自由基生成有关。

一测多评法同时测定野菊花中5种有机酸

目的通过一测多评法同时测定野菊花Chrysanthemum indicum L.中5种有机酸的含有量。方法该植物70%乙醇提取液的分析采用Agela Venusil XBP C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相甲醇-0.2%磷酸,梯度洗脱;体积流量0.8 m L/min;检测波长326 nm;柱温20℃;进样量5μL。以绿原酸为内标,建立其他4种有机酸的相对校正因子。结果绿原酸、咖啡酸、3,4-二咖啡酰奎尼酸、3,5-二咖啡酰奎尼酸和4,5-二咖啡酰奎尼酸分别在0.007 92～0.158 4、0.000 368～0.007 36、0.010 2～0.204、0.010 08～0.201 6、0.009 92～0.198 4μg范围内线性关系良好,平均加样回收率（RSD）分别为98.26%（1.48%）、96.30%（2.26%）、98.35%（2.08%）、99.16%（1.84%）、98.26%（2.10%）。相对校正因子重复性良好,一测多评法与外标法所得结果相近。结论该方法简便快速,准确可靠,可用于野菊花的质量评价。

UPLC测定川芎地上部分中的3种活性成分

目的研究川芎地上部分中3种活性成分的含量及其在生长过程中的变化。方法采用UPLC法分别测定川芎茎及叶中绿原酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、Z-藁本内酯的含量。采用Waters BEH C_（18）色谱柱（50 mm×2. 1 mm,1. 7μm）,流动相为乙腈-0. 1%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速0. 4 mL·min（-1）,柱温35℃,检测波长325 nm。结果绿原酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、Z-藁本内酯的线性范围分别为0. 78～113. 64 ng（r=0. 9999）、0. 37～94. 38 ng（r=0. 9999）、0. 52～67. 08 ng（r=0. 9998）,3个化合物的平均回收率分别为103. 54%、100. 44%、103. 15%,RSD分别为1. 35%、1. 98%、2. 91%。结论所用方法准确、简便、重复性好,适用于川芎地上部分中绿原酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、Z-藁本内酯的含量测定;川芎茎及叶中3种成分在生长过程中的变化趋势基本相同,约在五月中旬达到最高含量。

高效液相色谱法测定广西不同产地楠藤中5种成分的含量

目的:采用高效液相色谱法同时测定广西区内不同产地楠藤中绿原酸、隐绿原酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸及4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸5种成分的含量。方法:色谱柱为Kromasil C18(4.6mm×250mm,5μm);以乙腈(A)-0.4%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱:0～15 min,89%B;15～25 min,89%～80%B;25～50 min,80%B;流速1.0mL·min-1;检测波长328nm;柱温30℃。结果:5种成分在各自进行范围内均呈良好的线性关系,平均加样回收率在98.92%～102.71%之间;广西区内不同产地的楠藤样品中5种成分的总含量在0.418%～1.580%,不同地区的总含量有一定的差异。结论:该高效液相色谱法快速、准确,可用于楠藤中5种咖啡酰基奎宁酸类成分的含量测定;楠藤中该5种成分含量具在一定的地域差异性。

不同干燥方式对祁菊花品质的影响

目的 考察不同干燥方式对祁菊花品质的影响,为祁菊花的采收加工提供依据。方法 采用7类共25种干燥方式对祁菊花鲜品进行干燥得到25种样品,以其外观性状及含水量为淘汰指标,去除不合格样品;以6种有效成分(绿原酸、木犀草苷、3,5-O-咖啡酰基奎宁酸、槲皮素、木犀草素、黄芩苷)的含量为指标,结合主成分分析(PCA)及偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA),以及PCA综合得分排名及每类干燥方式所得的最佳样品,综合选择6种实验样品;以氧化相关酶(多酚氧化酶、过氧化物酶)活性、稳定性及花瓣表面微观形态为指标,对上述6种样品进行质量评价。结果 PCA与PLS-DA结果表明,不同干燥方式所得样品的质量存在明显差异,绿原酸、3,5-O-咖啡酰基奎宁酸、黄芩苷这3种成分可能是导致样品产生差异的主要原因,100℃蒸汽杀青1 min后再以50℃烘干4 h所得样品中有效成分的综合得分最高。经微波功率800 W杀青1 min后再以50℃鼓风干燥4 h与100℃蒸汽杀青1 min后再以50℃烘干4 h这2种联合干燥方式处理的祁菊花中氧化相关酶完全失活,稳定性优于其他干燥方式所得样品;花瓣表面微观形态观察结果显示,以微波功率400 W烘干6 min所得样品与上述2种样品的完整度、平整度最高。结论 从成品质量及干燥效率来看,以100℃蒸汽杀青1 min后再以50℃烘干4 h是祁菊花的最佳干燥方式。

RP-HPLC法同时测定防暑清热饮中5种活性成分的含量

目的建立RP-HPLC法同时测定防暑清热饮中绿原酸、木犀草素-7-O-β-D-葡糖苷、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、蒙花苷和广藿香酮含量的方法。方法采用ZORBAX-SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.2%磷酸溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,检测波长为327 nm,柱温为30℃。结果绿原酸、木犀草素-7-O-β-D-葡糖苷、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、蒙花苷和广藿香酮线性关系良好(r≥0.9996),平均加样回收率(RSD)分别为102.03%(1.63%)、102.38%(1.51%)、102.39%(1.23%)、103.14%(1.87%)和104.01%(2.33%)。结论本实验建立的测定方法简单、准确、重复性好,能够有效控制该制剂的质量。

二咖啡酰奎宁酸与人血浆阿司匹林酯酶的分子对接

目的考察二咖啡酰奎宁酸类化合物对人血浆阿司匹林酯酶活性的影响。方法 HPLC法测定华法林与人源白蛋白的复合物(PDB ID:1H9Z)表征的阿司匹林酯酶活性。在药物设计平台Maestro(version 8.5)上选用虚拟筛选模块Glide比较二咖啡酰奎宁酸与靶点蛋白活性的差异。运用同源建模和分子对接技术探究药物相互作用模式。结果实验组与对照组酶活性间没有统计学差异。分子对接结果显示1,3-二咖啡酰奎宁酸与阿司匹林酯酶间存在较好的结合抑制效应。结论 1,3-二咖啡酰奎宁酸对阿司匹林酯酶有微弱的抑制作用,3,4-二咖啡酰奎宁酸和3,5-二咖啡酰奎宁酸对阿司匹林酯酶影响不明显。

基于UPLC指纹图谱和化学计量学评价不同产地青蒿药材质量

目的建立4个产地15批青蒿药材的超高效液相色谱法(UPLC)指纹图谱及2种成分的定量分析方法,以评价不同产地青蒿药材质量。方法采用UPLC进行测定,建立15批青蒿药材指纹图谱,通过超高效液相色谱-质谱联用技术对指纹图谱共有峰进行鉴定,并进行相似度评价,采用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)对不同产地青蒿药材的差异性成分进行分析,并对2个差异性成分东莨菪内酯和3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的含量进行测定。结果15批青蒿药材指纹图谱共标识出22个共有峰,通过质谱分析指认出10种化学成分。相似度评价结果显示,15批样品指纹图谱相似度为0.870~0.972,其中12批样品指纹图谱相似度>0.9。PCA将15批样品划分为两类,其中重庆产地为一类,其他产地为一类,OPLS-DA共确定10个差异标志物。含量测定结果显示,重庆产地样品东莨菪内酯和3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸含量明显高于其他产地样品。结论采用指纹图谱、化学计量学、含量测定相结合,能有效区分不同产地青蒿药材,为其质量评价提供依据。