大鼠睾丸间质细胞的原代培养、鉴定与功能监测

目的:采用改良方法对大鼠睾丸间质细胞进行分离、纯化和原代培养,以得到更高纯度和稳定的间质细胞原代培养体系。方法:采用酶消化法分离大鼠睾丸间质细胞,再用Percoll连续密度梯度离心除去生精细胞、支持细胞等杂细胞,实现进一步纯化;用3β-HSD特异性染色法鉴定间质细胞,同时采用放射免疫法测定间质细胞睾酮分泌活性。结果:培养的间质细胞纯度达到95%以上,每个睾丸可获取间质细胞约1×106个;通过3β-HSD特异性染色鉴定,该间质细胞胞质呈蓝黑色,而且细胞具有分泌睾酮的活性。结论:酶消化后以Percoll连续密度梯度离心可分离得到高纯度且具有睾酮分泌活性的间质细胞,操作简单易行,实验方法稳定。

种公鸡睾丸间质细胞的分离培养与鉴定

【目的】旨在探明一种有效的体外分离、纯化公鸡睾丸间质细胞的方法,以得到纯度高且较稳定的睾丸间质细胞原代培养体系。【方法】采用胶原酶消化法结合差速离心法得到原代睾丸间质细胞,再利用差速贴壁法及传代弃掉未贴壁细胞,实现进一步纯化。采用3β-HSD染色法鉴定其纯度。【结果】该方法能够得到高细胞活率和纯度(>90%)的公鸡间质细胞,并通过试验检测证实分离、纯化的睾丸间质细胞生长状态良好,具备睾酮分泌能力。【结论】通过该方法成功分离并纯化公鸡睾丸间质细胞,其存活率为96.08%±0.85%,纯度可达97.73%±0.43%。