IBVD41株主要结构基因及3′端非编码区序列分析

采用反转录及聚合酶链式反应 ( RT-PCR) ,成功地扩增出鸡传染性支气管炎病毒 ( IBV)人工致弱毒D41株 S1基因、M基因、N基因和基因组 3′端非编码区 ( U TR)的 c DNA。序列测定结果表明 :D41株的 S1基因全长 1611bp(从 ATG到 S前体蛋白裂解位点 ) ,编码一条由 53 7个氨基酸组成的多肽 ;M基因全长 678bp,编码一条由 2 2 6个氨基酸组成的多肽 ;N基因全长 12 3 0 bp,编码一条由 410个氨基酸残基组成的多肽 ,3′端 UTR长度为52 5bp,其中高变区 ( HVR)长度为 2 2 5bp。与国内外已报道的一些 IBV标准毒株的相应基因序列进行核苷酸序列同源性分析后发现 :D41株与麻省血清型的毒株同源性最高 ,尤其与国际常用的标准疫苗株 H52和 H12 0的亲缘关系最接近。但它与国内“腺胃型”毒株

改造IFNα-2b基因3′端提高其在大肠杆菌中表达水平

目的 :对人IFNα_2b基因的 5′端进行改造 ,从翻译水平上调控IFNα_2b基因在大肠杆菌中的表达。方法 :采用PCR方法 ,人工合成寡核苷酸引物 ,对人IFNα_2b基因进行了改造 :去除3′端非编码区 ,并增加原核系统强终止密码子。将改造后的基因片段分别克隆入原核表达载体pBV32 1,在大肠杆菌中进行表达。对表达产物进行活性效价测定。结果 :3′端删除非编码区 ,表达水平比删除前提高 4倍。结论 :IFNα_2b基因的 3′端非编码区对其在原核系统的表达具有抑制作用 ,删除该区可提高表达水平。