电针对糖尿病模型大鼠海马CA3区神经元Nrf2、HO-1和PSD95表达的影响

目的观察电针对糖尿病模型大鼠海马CA3区核因子E2相关因子(Nrf2)、血红素氧合酶(HO-1)与突触后致密蛋白95(PSD95)表达变化,探讨电针保护糖尿病神经系统损伤的可能机制。方法将雄性Wistar大鼠随机分为正常组、载体组、糖尿病组和电针组,每组8只。采用链脲佐菌素腹腔注射法制备糖尿病大鼠模型。造模成功1周后,电针组电针刺激一侧“足三里”及“胰俞”穴,30分钟/次,1次/天,连续4周。血糖仪检测大鼠空腹血糖水平;尼氏染色法观察大鼠海马CA3区神经元形态;免疫组织化学染色法检测大鼠海马CA3区的Nrf2、HO-1与PSD95的蛋白表达。结果空腹血糖检测结果显示,与正常组和载体组比较,糖尿病组血糖水平升高(P<0.05);与糖尿病组比较,电针组血糖水平降低(P<0.05)。尼氏染色结果显示,与正常组和载体组比较,糖尿病组海马CA3区神经元层次减少,胞核固缩;与糖尿病组比较,电针组海马CA3区神经元层次增加,形态改善。免疫组织化学染色结果显示,与正常组和载体组比较,糖尿病组海马CA3区Nrf2、HO-1与PSD95蛋白表达降低(P<0.05);与糖尿病组比较,电针组海马CA3区Nrf2、HO-1与PSD95蛋白表达升高(P<0.05),且与正常组和载体组表达水平相接近(P>0.05)。结论电针可上调糖尿病模型大鼠海马CA3区Nrf2、HO-1与PSD95的表达,提示其可能通过抑制氧化应激和改善突触可塑性发挥对其对神经元的保护作用。

Exendin-4及内源性GLP-1对大鼠海马CA3区神经元自发放电的调控

目的探究胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体激动剂Exendin-4及内源性GLP-1对海马CA3区神经元自发放电的调控作用。方法利用在体细胞外单细胞电生理记录方法,观察三管微电极微压力注射10μmol/L Exendin-4和10μmol/L Exendin-9-39(GLP-1受体阻断剂)对大鼠海马CA3区神经元自发放电频率的影响。结果在记录到的22个海马CA3区神经元中,Exendin-4使17个神经元放电频率显著增高(t=6.286,P<0.01),平均升高(149.67±18.94)%,与生理盐水组相比差异有显著性(Z=3.571,P<0.01)。在记录到的14个海马CA3区神经元中,Exendin-9-39使10个神经元放电频率显著降低(t=7.968,P<0.01),平均降低(61.90±6.10)%,与生理盐水组相比差异有显著性(Z=3.145,P<0.01)。结论Exendin-4兴奋海马CA3区神经元,内源性GLP-1参与调节海马CA3区神经元自发放电。

大鼠海马CA3区在学习记忆时突触可塑性的变化

目的 :探讨学习记忆的形成和遗忘与突触可塑性的关系。方法 :用水迷宫训练大鼠 2 1天建立空间辨别性学习记忆模型 ,随后停止训练 ,时间分别为 3天、7天及 1 4天 ,用免疫组化方法和图像分析技术 ,检测了突触素在大鼠海马CA3区表达的变化。结果 :对照组大鼠海马CA3区突触素的表达弱 ,免疫反应产物呈点状颗粒 ,沿辐射层长轴分布 ,多形层也有散在分布 ;模型组大鼠突触素染色明显比对照组的深 ,密集的小颗粒呈带状沿辐射层排列 ,在辐射层的底部可见一些大的阳性颗粒 ,随着停止训练时间的延长 ,突触素的表达逐渐减弱。结论 :空间学习记忆导致海马CA3区辐射层新突触的形成 ,而随着空间学习记忆的遗忘 ,又致新形成突触的消退。

海马CA3区突触结构在记忆中的变化

目的探讨突触结构的可塑性变化与记忆保持的关系。方法昆明品系1月龄小白鼠60只,进行一次性被动回避反应学习,在记忆形成前与后的不同时期取脑海马CA3区,用电子透镜检测其突触结构的变化。结果在学习后24h、记忆保持良好(步人潜伏期>300s)时,穿孔突触由学习前占突触总数的6. 3％增加到40.8％(P<0.01,其中轴棘穿孔突触为31.2％,轴树穿孔突触为9.6％);突触活性区长度(>320nm)由学习前占6.2％增至30.8％(P<0.05)。记忆减退(学习后6d)、消退(学习后12d)变化均逐渐减至接近学习前的水平。

百事乐胶囊对慢性应激抑郁模型大鼠海马DG、CA3区神经元再生相关蛋白的影响

目的探讨百事乐胶囊对慢性应激抑郁模型大鼠海马神经再生相关c AMP-CREB-BDNF信号通路的影响。方法将SD大鼠随机分为空白组、模型组、氟西汀组及百事乐高、中、低剂量组,除空白组外,采用慢性温和不可预见性应激加孤养的方式建立大鼠抑郁模型,各组给予相应药物灌胃,连续21 d。开野实验、糖水消耗实验、定位航行实验及空间搜索实验检测大鼠行为学的变化,ELISA检测大鼠血浆中皮质酮含量,免疫组化检测海马DG、CA3区蛋白激酶A(PKA)、脑源性神经营养因子(BDNF)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)的表达。结果与模型组比较,百事乐高、中剂量组大鼠水平或垂直活动次数及蔗糖偏食度升高(P<0.05,P<0.01),百事乐高剂量组大鼠逃避潜伏期、目标象限潜伏时间缩短(P<0.05),百事乐高、中、低剂量组血浆皮质酮浓度降低(P<0.05),百事乐高剂量组海马DG、CA3区PKA、CREB、BDNF表达升高(P<0.05)。结论百事乐胶囊可能通过c AMP-CREB-BDNF信号通路促进海马神经元再生而实现抗抑郁的作用。

大鼠海马CA3区神经元突触的老龄性改变

目的 :观察老龄大鼠海马CA3区神经元突触超微结构的改变 ,探讨老龄动物海马学习记忆功能减退的形态学基础。方法 :应用透射电镜技术 ,观察青年组 (3～ 5月龄 )和老龄组 (2 4～ 2 6月龄 )Wistar大鼠海马神经元的超微结构。结果 :老龄组海马CA3区神经元的主要变化 :突触连接缩短或间断、突触前后膜融合 ;突触小胞大量集聚、小胞大小不等 ;树突棘内棘器远离突触后膜 ,其扁平小囊增多并扩张。结论 :老龄大鼠海马CA3区神经元突触发生了明显的变性改变 ,这可能是导致学习记忆障碍的形态学基础。

GABA及受体拮抗剂对大鼠海马CA3区长时程增强效应的影响

目的探讨GABA在海马CA3区长时程增强(long-term potentiation,LTP)诱导和形成中的作用。方法应用在体电生理研究方法,观察局部给予GABA及GABAA受体拮抗剂bicuculline对海马CA3区LTP诱导和维持的影响;应用高效液相色谱荧光检测技术测定LTP诱导90min后实验侧海马组织GABA含量变化。结果①强直刺激PP纤维诱导LTP90min后,海马组织GABA水平(119.3±10.8)μmol.g-1protein较对照组(206.4±24.7)μmol.g-1protein降低(P<0.01);谷氨酸含量与对照组比差异无显著性(P>0.05)。②强直刺激前5min局部给予GABA200nmol,LTP诱导明显被抑制,相对PS幅值在各个时间点均低于LTP诱导组(P<0.01)而与对照组接近(P>0.05);给予GABAA受体拮抗剂甲基溴化荷包牡丹碱(bicuculline methbromide,BMB)1nmol1min再给予GABA200nmol,发现GABA对LTP的抑制作用减弱,PS幅值高于只给予GABA组(P<0.01)。③强直刺激PP纤维诱导LTP形成30min后,海马CA3区局部给予GABA200nmol,LTP效应被翻转,相对PS幅值在各时间点均低于LTP诱导组(P<0.01)而与对照组接近(P>0.05);给予BMB1nmol1min后再给予GABA200nmol,GABA对LTP效应的抑制作用减弱,PS幅值高于只给予GABA组(P<0.01)而低于LTP组(P<0.01)。④BMB1nmol可使低频测试刺激诱发的场电位PS幅值明显升高,90min内稳定在基础幅值的194.8%±3.6%水平,与强直刺激诱导的LTP组PS幅值接近(P>0.05)。结论GABA可抑制大鼠海马CA3区LTP的诱导和形成。

天敌应激对大鼠海马CA_3区锥体细胞的损害作用

目的探讨天敌应激对大鼠海马CA3 区神经元的损害作用及其神经病理学机制。方法以猫为天敌应激源 ,将 2 8只SD大鼠分为 4组 :单次应激组、2周持续应激组、4周持续应激组及对照组。采用Nissl、Golgi染色法及透射电镜 ,观察CA3 区锥体细胞数量及形态变化 ;采用TUNEL法观察凋亡神经元。结果单次、2周、4周应激组的CA3区锥体细胞数 (62 .17± 8.16,44 .3 3± 12 .45 ,43 .17± 4.49)均较对照组 (75 .3 3± 14 .19)显著减少 (P <0 .0 1)。应激组大鼠CA3区锥体细胞树突长度变短 ,分支节点数减少。应激组的TdT平均灰度均较对照组显著下降 (P <0 .0 1) ,而平均面密度明显升高 (P <0 .0 1)。应激组锥体细胞超微结构发生凋亡特征性改变。结论天敌应激可导致大鼠海马CA3区锥体细胞树突萎缩和神经元丢失 ;神经元凋亡是锥体细胞受损的神经病理学发生机制之一。

下半年Nino3区海表升温对东亚春季大气环流及山东春季降水的影响

通过分析下半年Nino3区(150°~90°W,5°S^5°N)海表温度(SST)升高引起的次年春季500 hPa高度、850 hPa及200 hPa经向风的异常特征,发现下半年Nino3区显著升温,可导致次年春季热带和西北太平洋副热带地区的500 hPa高度场升高,即西太平洋副热带高压偏强、偏西、偏北,东亚大槽偏弱、偏东;巴尔喀什湖至贝加尔湖的高度场降低,即该地区经常有低槽维持;亚洲至西太平洋地区盛行纬向环流。我国东部沿海地区及邻近海域的偏南风加强,而我国东北和华北地区的偏北风偏弱。这种高度场与风场的异常恰与山东4月降水偏多年所对应的异常特征相吻合,即下半年Nino3区显著升温通过影响次年春季大气环流异常,进而影响山东春季降水。资料统计表明,下半年Nino3区显著升温,次年山东及我国中纬度东部地区春季尤其4月的降水往往偏多。

川渝地区降水变化与Nino3区SST的关系及其稳定性分析

根据1960—2006年我国川渝地区120个观测站的月降水资料,分析了降水的空间分布特征,利用相关分析、小波分析和小波凝聚谱等方法,探讨了川渝地区降水与Nino3区SST的关系及其稳定性。结果表明:一致性异常分布是川渝地区降水变化的最主要空间模态,第一模态时间系数与Nino3区SST有着较好的相关关系。这种关系表明,在Nino3区SST暖状态,川渝地区降水偏少;在Nino3区SST冷状态时则情况相反。川渝地区降水和Nino3区SST关系的稳定性分析表明,降水和SST之间在准2 a,4～6 a变化周期上存着较好的相关关系,但这种相关关系并不稳定,存在着年代际变化:1960—1986年呈正相关关系,1987—2006年呈负相关关系。

甘肃小麦禾谷孢囊线虫rDNA-ITS和28SrDNA-D2/D3区序列特征及ITS-RFLP分析

禾谷孢囊线虫是危害禾谷类作物的重要病原,严重威胁我国小麦主产区的小麦产量和品质。利用通用引物对甘肃、河南、安徽禾谷孢囊线虫群体28SrDNA-D2/D3区和rDNA-ITS区进行PCR扩增和序列测定,利用UPG-MA方法分析了甘肃省7个种群、河南1个种群、安徽1个种群的禾谷孢囊线虫群体D2/D3区和ITS区的系统发育关系;用9种限制性内切酶对7个甘肃禾谷孢囊线虫群体的rDNA-ITS区进行了RFLP分析。结果表明:中国甘肃的禾谷孢囊线虫rDNA-D2/D3区片段长度约为780bp,rDNA-ITS片段长度约为1040bp。7个甘肃禾谷孢囊线虫群体、1个河南安阳群体、1个安徽蚌埠群体的D2/D3区和新西兰的H.aucklandica群体亲缘关系很近;其ITS区同澳大利亚的H.australis、北京通州的H.avenae(AY148382)的亲缘关系很接近。RFLP分析表明,9种限制性内切酶酶切禾谷孢囊线虫群体的rDNA-ITS共产生了22个酶切片段,不同酶切的RFLP分布型在7个种群间没有差异。甘肃省禾谷孢囊线虫群体的rDNA-ITS区具有高度的保守性,与中国的C型群体相近,但不同于欧洲的A型群体和印度的B型群体。这是首次报道甘肃CCN种群分子特征。

电针对急性癫痫诱发海马CA3区神经元超微结构的影响

目的研究电针对急性癫痫诱发大鼠海马CA3区神经元超微结构的影响。方法建立氯化锂-匹罗卡品诱导的大鼠急性癫痫模型。电针"百会"和"大椎"穴观察癫痫大鼠海马CA3区神经元超微结构的变化。结果 1电针组与对照组相比,大鼠海马CA3区神经元的超微结构没有明显的改变;2癫痫组与生理盐水组比较,大鼠海马CA3区神经元的超微结构有严重的损伤;3癫痫+电针组与癫痫组比较,大鼠海马CA3区神经元的超微结构有显著的修复。结论电针"百会"及"大椎"穴,可以明显改善急性癫痫所诱发的海马CA3区神经元超微结构的损伤。

大鼠海马CA_3区发育中神经细胞凋亡的研究

目的 观察大鼠海马发育中神经细胞凋亡的特点 ,探讨细胞凋亡与大鼠海马发育和老化的关系。方法 用 TUNEL法结合激光扫描共聚焦显微镜 (LSCM)观察分析细胞凋亡在大鼠海马发育中的表现。结果 各年龄组大鼠海马 CA3区均有数量不等的 TUNEL阳性凋亡细胞 ,细胞核固缩 ,核染色质呈浓染致密的绿色或黄绿色块状及颗粒状荧光。LSCM荧光定量分析 :各年龄组中以成年组荧光强度值最低。结论 大鼠海马 CA3区生长发育中确有细胞凋亡存在 ;各年龄组中以成年组细胞凋亡率最低 ,乳鼠、幼年鼠和老年大鼠海马 CA3区细胞凋亡率较高。表明成年期大鼠海马CA3区细胞数目相对较稳定 ,而在神经系统发育早期及老化阶段细胞数目均发生较大变化。结论 细胞凋亡与神经系统功能的完备有关。

Nino3区海温的变化对黄河流域夏季降水的影响

利用1961—2011年NCEP/NCAR再分析资料和黄河流域45站降水资料,定义了4月和上年10月的Nino3区海温差(△I_(SST3)指数,分析△I_(SST3)指数与夏季海温的关系以及大气环流和夏季黄河流域降水与△I_(SST3)指数的相关情况,得到如下结果:(1)△I_(SST3)升高(降低)时,夏季赤道中东太平洋海温易偏暖(冷),而我国南海到菲律宾半岛海区易偏冷(暖)。(2)500 hPa高度场上,△I_(SST3)与100°E^80°W范围的热带和副热带地区高度呈显著的负相关关系;△I_(SST3)正负异常差值场显示,△I_(SST3)升高(降低)时,夏季热带和太平洋副热带地区的500 hPa高度偏低(高),赤道北侧850 hPa西风(东风)距平异常,西太平洋副热带高压明显偏弱(强),我国东部沿海大陆盛行偏北(南)气流,暖湿气流不活跃(活跃),季风偏弱(强),而中高纬度上,蒙古北部气旋(反气旋)发展,致使河套地区处在反气旋性(气旋性)环流中。(3)△I_(SST3)指数与黄河流域夏季降水呈显著的负相关关系,相关系数为-0.51,当△I_(SST3)正异常时,黄河流域夏季降水易偏少;△I_(SST3)负异常时,黄河流域夏季降水易偏多,且负异常对黄河流域夏季降水的影响更显著。

GABA及其受体拮抗剂对脑缺血大鼠海马CA3区诱发电位的影响

目的 探讨γ-aminobutyric acid(GABA)及其受体拮抗剂对正常及脑缺血大鼠海马CA3区神经元突触传递功能的影响。方法在体记录正常大鼠海马CA3区诱发的群峰电(population spike,PS);结扎大鼠双侧颈总动脉,造成急性不完全性全脑缺血,观察PS幅度变化;采用局部微量给药,观察药物对PS幅度的影响。结果①GABA 100,200 mmol·L-1局部注入后,PS的幅度显著降低.bicuculline 1 mmol·L-1能明显拮抗GABA200 mmol·L-1对PS幅度降低的作用。②Glu 10 mmol·L-1注入后,PS的幅度较注药前显著增加。而Glu 50 mmol·L-1注入后,PS的幅度则较注药前显著降低。③GABA 200 mmol·L-1能显著降低Glu10 mmol·L-1所导致的PS幅度增加,并能减弱Glu 50 mmol·L-1对PS幅度的降低作用。④急性不完全性全脑缺血(结扎双侧颈总动脉)后,PS的幅度显著降低。GABA 200 mmol·L-1能减轻脑缺血所致的PS幅度的降低。结论 GABA对正常大鼠海马神经元突触传递的兴奋性具有一定抑制作用。并能明显改善较大剂量谷氨酸和急性脑缺血对海马CA3区神经元突触传递的影响。

雌二醇对大鼠海马CA3区长时程增强诱导的影响

目的:应用细胞外电生理记录方法,来探讨17β-雌二醇对大鼠海马CA3区长时程增强(LTP)诱导阶段的影响并探讨其可能的机制。方法:应用细胞外电生理技术,刺激大鼠海马穿通纤维,在CA3区记录群体锋电位(populationspike,PS),通过在CA3区分别急性注射17β-estradiol,电压敏感性钙通道(voltage-sensitiveCa2+channels,VSCCS)拮抗剂尼非地平(Nifedipine),和三氯化铝(Alcl3)来观察不同的药物在给予动物高频刺激诱导出的LTP中PS幅值的相应变化。结果:高频刺激前5min给予不同浓度雌激素能抑制海马CA3区LTP的诱导过程:1pmol/L的雌激素使海马CA3区LTP的诱导减弱,药物在1min内开始起作用,持续整个诱导阶段,并且当浓度的加大为10pmol/L和100pmol/L,抑制作用加强,3种浓度雌激素PS的幅值抑制峰值分别是基础值的(118.56±11.97)%,(90.82±9.23)%和(68.10±10.37)%。选择性钙通道阻断剂Nifedipine也明显抑制LTP诱导过程,(112.24±7.59)%,50min时抑制作用达峰值,为基础的(78.92±11.69)%,与雌激素有相互加强的作用。结论:雌激素对诱导阶段LTP抑制作用至少部分的与细胞钙水平降低有关。小剂量的Alcl3(0.25mol/L)对LTP的诱导无明显抑制作用,此剂量与中等浓度(10pmol/L)的雌激素共同作用时有部分增强效应。

人参皂甙降低老龄大鼠海马CA3区神经元酸性磷酸酶活性的光、电镜观察

实验选用健康的Wistar大鼠,应用光、电镜酶细胞化学方法结合图像分析观察了老龄大鼠海马CA3区神经元的酸性磷酸酶的衰老变化,同时对比观察了人参皂甙对上述改变的影响.光镜结果表明:酸性磷酸酶含量老龄组比青年组增加36%,而给药组较老龄组减少20%;电镜结果表明:酸性磷酸酶反应产物面积老龄组比青年组增加5倍,给药组较老龄组减少2.5倍(P<0.01).光、电镜结果均提示老龄时海马CA3区神经元酸性磷酸酶活性增高,而人参皂甙具有降低酸性磷酸酶活性的作用.

谷氨酸及其受体拮抗剂对大鼠海马CA3区诱发电位的影响

目的 探讨谷氨酸及其受体拮抗剂对正常和脑缺血大鼠海马CA3区神经元突触传递功能的影响。方法 在体记录正常大鼠海马CA3区诱发的群峰电位 (populationspike,PS) ;结扎大鼠双侧颈总动脉 ,造成急性不完全性全脑缺血 ,观察PS幅度的变化 ;采用局部微量给药 ,观察药物对PS幅度的影响。结果 ①Glu 5、1 0、2 0nmol注入后 ,PS的幅度均升高 ;当给予Glu 5 0nmol时PS的幅度则显著降低。②急性不完全性全脑缺血 (结扎双侧颈总动脉 )后 ,PS的幅度亦显著降低。③谷氨酸受体拮抗剂MK 80 1 5 0nmol能降低正常大鼠的PS幅度 ,能部分改善脑缺血引起的PS幅度降低 ,并能减弱 1 0nmolGlu升高PS幅度的作用和 5 0nmolGlu降低PS幅度的作用。结论 谷氨酸在一定浓度范围内可增强大鼠海马CA3区的突触传递功能 ,其受体拮抗剂MK 80 1对高浓度谷氨酸和急性脑缺血所致CA3区突触传递功能减弱有明显的改善作用。

三磷酸胞苷二钠对脑缺血大鼠海马CA_3区突触体素表达的影响

目的 研究局灶性脑缺血后海马 CA3 区突触体素的动态表达及其三磷酸胞苷二钠对其干预的影响。方法 选取 SD大鼠 60只 ,随机分为脑缺血后自然恢复组、药物干预组和假手术对照组。采用线栓法建立大脑中动脉脑缺血大鼠模型 ,应用免疫组化技术观察海马 CA3 区突触体素的表达。结果 脑缺血后自然恢复组大鼠突触体素的表达较对照组明显降低 (P<0 .0 1) ;但 7～ 2 1d突触体素的表达逐渐上调 (P<0 .0 1)。应用三磷酸胞苷二钠干预后 ,突触体素表达与自然恢复组相比明显升高。结论 脑缺血损伤后海马 CA3 区突触体素表达减少 ,但机体自身存在着神经元的修复和再生 ;三磷酸胞苷二钠可上调突触体素的表达 ,具有促进缺血神经元的修复、再生及突触重塑作用。

口蹄疫病毒株China/99 P3区一级结构及与参考毒株的比较分析

用RT -PCR法 ,以口蹄疫病毒China/ 99感染的牛舌水泡皮为材料 ,扩增目的cDNA ,与pGEM TEasy载体连接并转化JM1 0 9菌株 ,再经重组质粒电泳、PCR和EcoR1酶切鉴定。序列测定和分析结果表明 ,猪源毒在 3A基因内缺失 1 0个密码子 ,与牛源毒的核苷酸和氨基酸序列差异较大。A G和T C的转换率较高 ,而且A G转换导致氨基酸变异的几率大于T C转换 ,它们是影响氨基酸稳定的因素之一。China/ 99P3区编码产物在第 8、1 2 0、1 2 1、1 2 7、1 32、1 93、493、50 1和 538位具有特征性氨基酸 ,可能与该毒株的表型如毒力等有关。 3A基因突变率较高 ,3B、3C和 3D较低 ,3D最为保守 ,这对维持 3C和 3D蛋白酶和