衔接蛋白失能同源物2通过抑制NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3对结核性胸膜炎大鼠炎症和氧化应激的影响

目的:探讨衔接蛋白失能同源物2(DAB2)抑制NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)对结核性胸膜炎大鼠炎症和氧化应激的影响。方法:按照随机数字法将60只SPF级雄性SD大鼠分为四组,每组40只。除正常对照组外,结核性胸膜炎组、DAB2组和pcDNA-NLRP3组进行建模处理,以第2天是否抽出胸腔积液为模型建立成功。正常对照组不注射结核分枝杆菌H37RV悬液,DAB2组建模后第2天静脉注射AAV9-DAB2质粒,每天1次,连续注射7 d,DAB2+pcDNA-NLRP3组在注射AAV9-DAB2质粒500μg/L的同时注射pcDNA-NLRP380μl,正常对照组和结核性胸膜炎组的大鼠尾静脉注射0.9%氯化钠溶液。进行各组呼吸功能指标测定,收集胸腔积液,记录积液量,观察3、5、7 d的胸腔积液粘连性情况,HE染色观察胸膜组织病理学情况,Western blot检测胸膜组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)、基质金属蛋白酶1(MMP-1)和MMP-9蛋白表达,荧光探针DCFH-DA分析检测活性氧(ROS)的水平。结果:与正常组相比,结核性胸膜炎组的大鼠的胸腔积液和胸膜厚度明显增加,用力肺活量(FVC)、最大呼气流量(PEF)、用力呼气容积(FEV)0.3和FEV0.3/FVC显著降低,TNF-α、IL-8、MMP-1和MMP-9蛋白表达显著升高,基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP-1)蛋白表达显著降低,丙二醛(MDA)水平升高,超氧化物歧化酶(SOD)水平降低,ROS累积量明显升高(均P<0.001);与结核性胸膜炎组相比,DAB2组大鼠胸腔积液和胸膜厚度显著降低,FVC、PEF、FEV0.3和FEV0.3/FVC明显升高,DAB2组大鼠胸膜组织中的TNF-α、IL-8、MMP-1和MMP-9蛋白表达明显降低,TIMP-1水平明显升高,MDA水平降低,SOD水平升高,ROS累积量明显降低(均P<0.001);与DAB2组相比,DAB2+pcDNA-NLRP3组大鼠胸腔积液和胸膜厚度明显升高,FVC、PEF、FEV0.3和FEV0.3/FVC明显降低,DAB2+pcDNA-NLRP3组的TNF-α、IL-8、MMP-1和MMP-9蛋白表达明显升高,TIMP-1蛋白表达显著降低,MDA水平明显升高,SOD水平显著降低,ROS累积量显著升高(均P<0.001),各组大鼠在3、5、7 d的胸腔积液粘连性评分比较采用重复测量设计的方差分析,结果显示,不同时间点的胸腔积液粘连性评分比较差异具有统计学意义(均P<0.001);各组胸腔积液粘连性评分比较差异具有统计学意义(均P<0.001);各组胸腔积液粘连性评分变化趋势比较差异有统计学意义(均P<0.001);与模型组相比,DAB2组大鼠的胸膜内和肺间质内血管充血症状减轻,有少量的纤维组织增生,上皮样细胞团以及凝固型坏死也明显减少,淋巴细胞和中性粒细胞浸润也明显减少;与DAB2组相比,DAB2+pcDNA-NLRP3组大鼠的胸膜内和肺间质内血管充血症状加重,出现的纤维组织增生,上皮样细胞团以及凝固型坏死也明显增多,淋巴细胞和中性粒细胞浸润也明显增加。结论:DAB2通过抑制NLRP3的活性促进胸腔积液的吸收,降低胸膜厚度和粘连发生率,降低炎症反应和氧化应激水平,缓解结核性胸膜炎的进展。

自噬相关基因微管相关蛋白1A/1B轻链3B在结肠癌中的表达及临床意义

目的:探讨自噬相关基因微管相关蛋白1A/1B轻链3B(MAP1LC3B)在结肠癌中的表达及临床意义。方法:采用癌症基因组图谱(TCGA)数据库中提供的临床和RNA-seq数据,以预测MAP1LC3B水平与结肠癌的关系。再利用免疫组织化学染色(IHC)、Western印迹等技术对人群样本(结肠癌组织40例,癌旁组织20例)中MAP1LC3B表达情况进行检测,验证其表达情况与临床病理参数包括肝转移与否、淋巴结转移与否及组织分化等的关系。结果:MAP1LC3B在结肠癌组织中的表达阳性率为72.5%,明显高于癌旁组织组,差异具有统计学意义(P=0.001);在MAP1LC3B阳性组中,21例(72.41%)合并肝转移(P=0.001),且患者的TNM分期多为Ⅴ期患者,占79.31%,与MAP1LC3B阴性组比较差异具有统计学意义(P=0.001),但MAP1LC3B的表达与结肠癌组织的分化程度(P=0.056)和淋巴结转移情况比较,差异无统计学意义(P=0.265)。与TCGA数据库等分析结果有所差异,但Kaplan-Meier生存分析表明,MAP1LC3B高表达与预后不良显著相关,差异有统计学意义(P<0.01),且MAP1LC3B表达水平与CD8+T细胞的功能最为密切。结论:自噬相关基因MAP1LC3B在结肠癌组织中异常表达,并参与介导了肿瘤的恶性生物学行为,影响患者预后。

溶酶体相关膜蛋白3通过VEGF/AKT通路抑制PC-3细胞增殖、转移及血管生成

目的探索LAMP3对PC-3细胞增殖、迁移及血管生成的影响。方法Western blot(WB)及RT-PCR检测LAMP3在正常前列腺上皮细胞及前列腺癌骨转移细胞中的表达。构建稳定沉默LAMP3的PC-3细胞,分别使用CCK8、划痕试验、Transwell试验检测LAMP3对PC-3细胞增殖、迁移与侵袭的影响。通过ELISA及血管生成试验检测血管内皮生长因子VEGF、基质金属酶MMP9的表达及HUVEC细胞的血管生成,最后使用WB及RT-PCR检测VEGF、AKT/p-AKT的表达。结果LAMP3在前列腺癌细胞中的表达较正常前列腺上皮细胞明显升高,以PC-3细胞最明显(P<0.05)。沉默LAMP3能抑制PC-3细胞的增殖、迁移与侵袭能力,同时能抑制VEGF、MMP9的表达及PC-3细胞诱导的血管生成,差异有统计学意义(P<0.05)。此外,LAMP3能下调PC-3细胞中VEGF、AKT/p-AKT的表达。结论LAMP3能通过调控VEGF/AKT通路影响PC-3细胞的增殖、转移和血管生成,LAMP3可能是前列腺癌骨转移的潜在治疗靶点之一。

白藜芦醇诱导NOD样受体蛋白结构域相关蛋白3炎性体轴致胰腺腺泡细胞凋亡的机制

目的探讨白藜芦醇对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠胰腺腺泡细胞凋亡的影响及对NOD样受体蛋白结构域相关蛋白3(NOD like receptor pyrin domain containing 3,NLRP3)炎性体轴的调节作用。方法将50只大鼠随机分为假手术组、模型组和白藜芦醇低、高剂量组及地塞米松组,每组10只,除假手术组大鼠外,其余组大鼠通过牛黄胆酸钠逆行胰胆管注射制备SAP模型。手术结束5 min后,白藜芦醇低、高剂量组分别腹腔注射白藜芦醇30、60 mg·kg^(-1),地塞米松组大鼠腹腔注射地塞米松2 mg·kg^(-1),每日1次,连续给药3 d,假手术组和模型组大鼠腹腔注射等量生理盐水。检测大鼠血清中淀粉酶和脂肪酶活性,白细胞介素(IL)-1β、IL-18和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)含量,检测胰腺组织病理损伤并进行病理评分,胰腺腺泡细胞凋亡指数以及NLRP3、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1(caspase-1)、B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)的蛋白相对表达量。结果假手术组大鼠胰腺组织结构正常,无水肿、充血或坏死;模型组胰腺间质水肿,肺泡间隔变宽,可见大量炎性细胞浸润,实质出现点状或片状出血或坏死;白藜芦醇低、高剂量组和地塞米松组胰腺组织病变程度均减轻。与假手术组比较,模型组淀粉酶和脂肪酶活性,IL-1β、IL-18和TNF-α含量,组织病理评分,细胞凋亡指数及NLRP3、caspase-1和Bax蛋白的相对表达量均升高,Bcl-2蛋白相对表达量降低(P<0.05);与模型组比较,白藜芦醇低、高剂量组和地塞米松组淀粉酶和脂肪酶活性,IL-1β、IL-18和TNF-α含量,组织病理评分,细胞凋亡指数及NLRP3、caspase-1和Bax蛋白的相对表达量均降低,Bcl-2蛋白相对表达量升高(P<0.05);与白藜芦醇低剂量组比较,高剂量组和地塞米松组淀粉酶和脂肪酶活性,IL-1β、IL-18和TNF-α含量,组织病理评分,细胞凋亡指数及NLRP3、caspase-1和Bax蛋白的相对表达量均降低,Bcl-2蛋白相对表达量升高(P<0.05);与白藜芦醇高剂量组比较,地塞米松组淀粉酶和脂肪酶活性,IL-1β、IL-18和TNF-α含量,组织病理评分,细胞凋亡指数及NLRP3、caspase-1和Bax蛋白的相对表达量均降低,Bcl-2蛋白相对表达量升高(P<0.05)。结论白藜芦醇可减轻SAP大鼠胰腺损伤,抑制胰腺腺泡细胞凋亡,其可能是通过阻碍NLRP3炎性体轴激活发挥作用的。

NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3介导的细胞焦亡对哮喘大鼠炎症水平的调控作用

目的:探讨NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)在哮喘中炎症水平的调控作用机制。方法:从GSE40732和GSE69683数据集中分析哮喘组和对照组之间的差异表达基因(DEGs),并鉴定程序性细胞死亡在哮喘中的水平。在NLRP3敲降大鼠中建立哮喘大鼠模型,通过HE染色和Tunel染色分析肺组织的病理变化和凋亡水平,通过免疫组化检测肺组织中NLRP3的表达,通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot检测NLRP3介导细胞焦亡相关mRNA和蛋白表达的改变。结果:哮喘组和对照组之间鉴定了926个差异表达基因(DEGs),细胞焦亡在哮喘中的水平显著高于对照组。哮喘模型中的炎症、凋亡和NLRP3水平明显高于对照组,而在NLRP3敲降后,哮喘大鼠中的炎症和凋亡水平降低。与对照组比较,NLRP3、Gasdermin D蛋白(GSDMD)、胱天蛋白酶-1(Caspase-1)和Caspase-8在哮喘大鼠模型中的表达升高,高迁移率族蛋白1(HMGB1)的表达降低(均P<0.05),这些异常表达在NLRP3敲降后得到了显著的改善(P<0.05)。结论:NLRP3通过细胞焦亡信号可能在哮喘中发挥促炎促凋亡作用,阻断该通路可能是改善哮喘炎症的潜在治疗策略。

血清补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白3、波形蛋白水平与扩张型心肌病慢性心力衰竭患者预后的关系

目的 探讨血清补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白3(CTRP3)、波形蛋白(VTN)水平与扩张型心肌病慢性心力衰竭患者预后的关系。方法 选取2021年1月至2022年8月河北省邢台市中心医院收治的扩张型心肌病慢性心力衰竭患者179例,根据1年预后分为预后不良组(63例)和预后良好组(116例)。采用酶联免疫吸附试验检测血清CTRP3、VTN水平。单因素和多因素logistic回归分析影响扩张型心肌病慢性心力衰竭患者预后的因素,受试者操作特征曲线分析血清CTRP3、VTN水平对扩张型心肌病慢性心力衰竭患者预后不良的预测价值。结果 随访1年,179例扩张型心肌病慢性心力衰竭患者预后不良发生率为35.20%(63/179)。两组年龄、慢性心力衰竭病程、心功能分级、左室射血分数(LVEF)、CTRP3、VTN比较,差异有统计学意义(P<0.05)。两组性别、吸烟史、饮酒史、合并疾病、收缩压、舒张压、治疗药物、器械辅助治疗比较,差异无统计学意义(P>0.05)。年龄增加[OR(95%CI):1.090(1.007~1.179)]、心功能分级增加[OR(95%CI):3.868(1.405~10.652)]、VTN升高[OR(95%CI):1.101(1.039~1.167)],LVEF增加[OR(95%CI):0.680(0.543~0.850)]和CTRP3升高[OR(95%CI):0.946(0.916~0.978)]为扩张型心肌病慢性心力衰竭患者预后不良的影响因素(P<0.05)。血清CTRP3联合VTN水平预测扩张型心肌病慢性心力衰竭患者预后不良的曲线下面积(0.878)大于血清CTRP3、VTN水平单独预测的0.782、0.787(Z=3.779、3.546,P<0.05)。结论 扩张型心肌病慢性心力衰竭患者血清CTRP3水平降低、VTN水平升高与预后不良密切相关,二者联合预测扩张型心肌病慢性心力衰竭患者预后不良的价值较高。

趋化因子C-C-基元配体4通过激活人单核白血病细胞THP-1源性巨噬细胞NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3炎症小体促进骨关节炎发展实验研究

目的:探讨趋化因子C-C-基元配体4(CCL4)通过激活人单核白血病细胞THP-1源性巨噬细胞中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体促进骨关节炎(OA)发展的潜在作用机制。方法:用CCL4和NLRP3小干扰RNA(siRNA)处理THP-1源性巨噬细胞,然后将预处理的THP-1源性巨噬细胞与软骨细胞共培养。采用流式细胞术检测细胞凋亡和活性氧(ROS);采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、基质金属蛋白酶1(MMP-1)和MMP-13水平;采用胶原降解试验检测胶原活性;采用Western blot分析NLRP3和凋亡相关微粒蛋白(ASC)蛋白的表达。结果:CCL4不会诱导THP-1源性巨噬细胞凋亡,但可上调炎症因子(IL-1β和TNF-α)和炎症相关蛋白(NLRP3和ASC)的表达。将CCL4预处理的THP-1源性巨噬细胞与软骨细胞共培养可以上调软骨细胞中MMP-1和MMP-13的表达,增强胶原酶活性,促进ROS的产生及软骨细胞的凋亡。抑制NLRP3的表达可以部分逆转CCL4对炎症因子的影响,以及与THP-1源性巨噬细胞共培养的软骨细胞相关功能的影响。结论:CCL4处理的THP-1源性巨噬细胞可通过激活NLRP3加速软骨细胞OA的进展。

C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白3、脂蛋白相关磷脂酶A2、可溶性髓样细胞触发受体-1对脑血管狭窄患者术后支架内再狭窄预测价值

目的探讨血清补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白3(CTRP3)、脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、可溶性髓样细胞触发受体-1(sTREM-1)水平在预测脑血管狭窄人群的颅脑动脉支架术后支架内再狭窄(ISR)方面的价值。方法选取2020年5月至2022年6月廊坊市人民医院收治的107例接受颅脑动脉支架成形术的患者。根据患者术后6个月内是否发生ISR分为ISR组(n=26)与NISR组(n=81)。比较两组患者的低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、支架数量、球囊扩张支架的占比、狭窄程度、残余狭窄程度,以及CTRP3、Lp-PLA2、sTREM-1水平。结果ISR组LDL-C、支架数量、球囊扩张支架的占比、狭窄程度、残余狭窄程度、Lp-PLA2水平、sTREM-1水平均高于NISR组,差异有统计学意义(P<0.05);ISR组CTRP3水平低于NISR组,差异有统计学意义(P<0.05)。支架数量多、狭窄程度及残余狭窄程度高、CTRP3水平降低、Lp-PLA2、LDL-C、sTREM-1水平上升为脑血管狭窄病患血管成形术后出现ISR的独立危险因素(P<0.05)。CTRP3、Lp-PLA2、sTREM-1三者联合在脑血管狭窄病患颅脑血管成形术后出现ISR的预测曲线下面积分别为0.840、0.784、0.809、0.899,三者联合预测价值显著高于单一指标。结论CTRP3水平降低,Lp-PLA2、sTREM-1水平升高与脑血管狭窄患者颅脑动脉支架术后发生ISR有关,联合指标检测对脑血管狭窄患者颅脑动脉支架术后发生ISR具有一定预测价值。

老年慢性心力衰竭患者血清卵泡抑素样蛋白1、Dickkopf相关蛋白3水平与心室重构及预后的关系

目的探讨老年慢性心力衰竭(CHF)患者血清卵泡抑素样蛋白1(FSTL-1)、Dickkopf相关蛋白3(DKK3)水平与心室重构及预后的关系。方法选取庐江县中医院2020年3月至2022年3月收治的142例老年CHF患者为研究对象(CHF组),根据纽约心脏协会(NYHA)心功能分级将CHF患者分为Ⅱ级(61例)、Ⅲ级(46例)、Ⅳ级(35例),根据随访结果将CHF患者分为预后不良组(48例)和预后良好组(94例)。另将同期在我院体检健康者142例作为对照组。ELISA法测定血清FSTL-1、DKK3水平;彩色多普勒超声测定患者心功能指标。比较CHF组与对照组、不同心功能分级及不同预后CHF患者血清FSTL-1、DKK3水平;血清FSTL-1、DKK3水平与心功能指标间的关系采用Pearson相关性分析;CHF患者发生预后不良的影响因素采用Logistic回归分析;采用ROC曲线分析血清FSTL-1、DKK3对老年CHF患者预后不良的预测价值。结果CHF组患者血清FSTL-1水平、左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心房内径(LAD)、左心室质量指数(LVMI)高于对照组,左心室射血分数(LVEF)及血清DKK3水平低于对照组,差异有统计学意义(t=35.771、39.686、25.148、14.262、35.767、18.208,P<0.05)。随着NYHA分级的增加,CHF患者血清FSTL-1水平及LVEDD、LAD、LVMI逐渐增加(F=86.720,239.493、114.340、16.883,P<0.05),血清DKK3及LVEF逐渐降低(F=89.083、217.157,P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,血清FSTL-1与LVEDD、LAD、LVMI均呈正相关(r=0.630、0.568、0.404,P<0.01),与LVEF呈负相关(r=-0.642,P<0.01);血清DKK3与LVEDD、LAD、LVMI均呈负相关(r=-0.580、-0.593、-0.467,P<0.01),与LVEF呈正相关(r=0.621,P<0.01)。多因素Logistic回归分析结果显示,心功能分级、LVEF、LVEDD、LAD、LVMI、FSTL-1、DKK3均是CHF患者发生预后不良的影响因素[OR(95%CI)=1.422(1.043~1.938)、0.621(0.401~0.961)、1.353(1.024~1.787)、1.227(1.023~1.472)、1.531(1.159~2.022)、1.472(1.095~1.979)、0.724(0.544~0.964),P<0.05]。ROC曲线结果显示,血清FSTL-1联合DKK3预测老年CHF患者预后不良的敏感度和特异度分别为86.8%、82.4%,AUC为0.959,高于FSTL-1、DKK3单独检测(Z=2.300、2.006,P<0.05)。结论老年CHF患者血清FSTL-1、DKK3水平与心室重构和预后密切相关,两者有望成为临床评估老年CHF患者心室重构情况及预后的生物学指标。

抗衰延年方对D-半乳糖致衰老大鼠海马自噬相关蛋白LC3的影响

[目的]研究抗衰延年方对D-半乳糖所致衰老大鼠海马自噬相关蛋白微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3)的影响。[方法]采用皮下注射D-半乳糖的方法制备大鼠衰老模型,再按随机数字表法将造模成功的21只大鼠分为模型组、抗衰延年方组、吡拉西坦组,每组7只,另将7只健康大鼠设置为正常对照组。抗衰延年方组予抗衰延年方水煎剂灌胃治疗,吡拉西坦组予吡拉西坦灌胃治疗,正常对照组和模型组不予其他干预性治疗。治疗21 d后,采用Morris水迷宫检测各组大鼠的学习和记忆功能,免疫组织化学法和Western blot法检测大鼠海马组织LC3蛋白的表达。[结果]模型组大鼠搜寻平台时间与正常对照组相比明显延长(P<0.05或P<0.01),吡拉西坦组、抗衰延年方组与模型组比较均明显缩短(P<0.05或P<0.01);与正常对照组相比,模型组大鼠穿越平台次数明显减少(P<0.01),吡拉西坦组、抗衰延年方组较模型组明显增加(P<0.05);模型组大鼠脑海马组织LC3蛋白表达较正常对照组升高(P<0.05),吡拉西坦组、抗衰延年方组较模型组降低(P<0.05)。[结论]抗衰延年方可通过降低脑组织LC3蛋白水平,从而达到延缓衰老的目的,其作用效果与吡拉西坦相当。

多发性骨髓瘤中相关自噬蛋白LC3的表达及意义

目的:探讨多发性骨髓瘤(MM)微管相关蛋白1轻链3(LC3)的表达,进一步探讨其与MM疾病的关系。方法:通过前瞻性分析福建医科大学附属南平第一医院初诊的MM患者自噬蛋白LC3含量,通过与正常人群LC3蛋白表达量相比较进而分析MM患者蛋白表达量水平差异。结果:在MM瘤患者中LC3 I、LC3Ⅱ蛋白的表达量显著低于对正常人群,差异有统计学意义(P<0.05),且LC3 I、LC3Ⅱ表达呈正相关(r=0.777,P=0.000)。结论:自噬蛋白LC3可能与MM的发生及发展有一定相关性。

白术内酯Ⅲ介导的肌动蛋白相关蛋白2/3抑制肠上皮间质转化以缓解溃疡性结肠炎的研究

目的:探寻白术内酯Ⅲ(AT-Ⅲ)的关键靶点,探究肌动蛋白相关蛋白2/3(Arp2/3)抑制溃疡性结肠炎(UC)的作用机制。方法:采用有限酶切-质谱法(lip-SMap)筛选大鼠小肠隐窝上皮细胞(IEC-6)特征蛋白,进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,确定AT-Ⅲ的关键靶点。脂多糖(LPS)与IEC-6共孵育模拟UC模型,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;划痕实验测定IEC-6迁移速率;蛋白质印迹法测定上皮钙黏素(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和Arp2/3含量;分子对接评估AT-Ⅲ与关键靶点的结合能力。结果:基于lip-SMap获得的特征蛋白参与调控磷脂酰肌醇3激酶-丝苏氨酸激酶(PI3K-AKT)信号通路和紧密连接(TJ)信号通路;与对照组比较,LPS组中IL-6和TNF-α释放量升高(均P<0.05),迁移速率变快(P<0.05),E-cadherin和Vimentin的表达都有不同程度的影响(均P<0.05);与LPS组比较,LPS+CK666+AT-Ⅲ组显著降低IL-6和TNF-α含量(均P<0.01),有效逆转LPS诱导的细胞迁移变化及E-cadherin和Vimentin表达(均P<0.05);分子对接显示,Arp2/3与AT-Ⅲ有较好的结合活性。结论:Arp2/3作为AT-Ⅲ的关键靶点,可通过上皮细胞-间充质转化(EMT)缓解LPS诱导的UC。

老年肺结核患者外周血中VPS33A水平表达与临床预后的相关性研究

目的检测空泡蛋白分类相关蛋白33A(vacuolar protein sorting-associated protein 33A,VPS33A)在老年肺结核患者外周血中的表达情况,并探讨其与临床预后的相关性。方法收集麻城市人民医院2019年2月~2021年2月收治的95例老年肺结核患者为研究组,另外选取同期健康体检者90例为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测外周血中VPS33A,Toll样受体2(TLR2)表达情况,酶联免疫吸附法(ELISA)检测外周血中白细胞介素-6(IL-6)水平。肺结核患者给予标准化抗结核方案治疗(2HRZE/4HR),治疗后随访12个月,根据患者预后将其分为预后良好组(n=58)和预后不良组(n=37),采用受试者工作特征(ROC)曲线分析VPS33A对患者预后不良的预测价值;Pearson法分析预后不良组血清VPS33A与IL-6,TLR2的相关性;Logistic回归分析老年肺结核患者预后不良的影响因素。结果与对照组比较,治疗前研究组外周血VPS33A(0.87±0.22vs1.02±0.23)水平明显降低,IL-6(22.13±5.36 pg/mlvs18.53±4.68pg/ml),TLR2(1.26±0.25vs0.99±0.21)水平明显升高,差异具有统计学意义(t=6.170,6.682,11.241,均P<0.05);与治疗前研究组比较,治疗后研究组外周血VPS33A(0.95±0.25)水平明显升高,IL-6(19.66±5.44 pg/ml),TLR2(1.11±0.2)水平明显降低,差异具有统计学意义(t-3.336,4.648,6.331,均P<0.05)。预后不良组外周血VPS33A水平(0.71±0.16)显著低于预后良好组(0.97±0.22);IL-6(26.41±7.16pg/ml),TLR2(1.35±0.26)水平显著高于预后良好组(19.40±4.21pg/ml,1.20±0.24),差异具有统计学意义(t=5.555,6.012,2.875,均P<0.05)。经Pearson法分析发现,治疗前外周血VPS33A分别与IL-6,TLR2水平呈负相关(r=-0.649,-0.634,均P<0.05)。ROC曲线分析结果显示VPS33A,IL-6和TLR2预测老年肺结核预后的AUC分别为0.805,0.842和0.882,三者联合AUC为0.971,明显高于三者单独预测(Z=4.010,3.136,2.285,P=0.001,0.002,0.022);Logistic回归分析显示外周血VPS33A,IL-6和TLR2是老年肺结核患者预后不良的影响因素(均P<0.05)。结论VPS33A在老年肺结核患者外周血中的表达下调,对老年肺结核患者预后有较好的预测价值,且是预后不良的影响因素。

膀胱癌组织Beclin1、LC3Ⅱ蛋白的表达及与患者肿瘤特征、预后的相关性分析

目的观察膀胱癌组织中自噬基因Beclin1、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3Ⅱ)蛋白表达状况,并分析两者与预后的相关性。方法选取2020年1月—2021年8月新疆医科大学附属肿瘤医院病理资料完整的110例膀胱癌患者。观察患者膀胱癌组织中Beclin1、LC3Ⅱ蛋白表达状况,记录病理参数,并对患者进行为期1年的随访。统计预后情况,观察不同病理参数及预后的膀胱癌患者膀胱癌组织中Beclin1、LC3Ⅱ蛋白表达,并分析两者与患者预后的相关性。结果膀胱癌组织Beclin1、LC3Ⅱ蛋白高表达率较癌旁组织低,Beclin1、LC3Ⅱ蛋白中低表达率较癌旁组织高(P<0.05)。高组织学分级、T_(2)~T_(4)分期、浸润性、淋巴结转移、预后不良的膀胱癌患者Beclin1蛋白高表达率低于低组织学分级、T_(a)~T_(1)分期、非浸润性、无淋巴结转移、预后良好的患者(P<0.05)。不同性别、年龄、肿瘤直径、血管侵犯的膀胱癌患者Beclin1蛋白表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。高组织学分级、T_(2)~T_(4)分期、浸润性、淋巴结转移、预后不良的膀胱癌患者LC3Ⅱ蛋白高表达率低于低组织学分级、T_(a)~T_(1)分期、非浸润性、无淋巴结转移、预后良好的患者(P<0.05)。不同性别、年龄、肿瘤直径、血管侵犯的膀胱癌患者LC3Ⅱ蛋白表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。经Phi系数相关性分析,Beclin1、LC3Ⅱ蛋白与预后不良均呈负相关(Phi=-0.277和-0.222,均P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示:Beclin1高表达[O^R=3.892(95%CI:1.504,10.072)]、LC3Ⅱ蛋白中低表达[O^R=3.358(95%CI:1.165,9.677)]是预后不良的危险因素(P<0.05)。结论膀胱癌组织中Beclin1、LC3Ⅱ表达与预后密切相关,Beclin1、LC3Ⅱ蛋白中低表达是预后不良的危险因素。

急性冠脉综合征患者血清sST2及NLRP3水平与介入术后无复流-慢血流的相关性分析

目的探讨急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,Acs)患者血清可溶性生长刺激表达基因蛋白2(soluble growth stimulation expression gene 2 protein,sST2),核苷酸寡聚化结构域样受体热蛋白结构域相关蛋白3(nucleotide oligomerization domain like receptor heat protein domain associated protein 3,NLRP3)水平与经皮冠状动脉介入治疗(percutaneous coronary intervention,PCI)术后无复流-慢血流的关系。方法选择2020年1月~2022年12月佳木斯市中心医院收治的97例急性冠脉综合征患者,所有患者均接受PCI治疗,根据术后无复流-慢血流发生情况分为无复流-慢血流组(n=20)和对照组(n=77)。术前检测血清sST2及NLRP3水平,分析影响急性冠脉综合征患者PCI术后无复流-慢血流的因素以及sST2,NLRP3预测急性冠脉综合征患者PCI术后无复流-慢血流的价值。结果无复流-慢血流组血清sST2(14.32±2.65 ng/ml vs 11.02±2.13 ng/ml),NLRP3(68.23±10.17 pg/ml vs 42.05±8.23 pg/ml)水平高于对照组,差异具有统计学意义(t=5.860,12.055,均P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示高血栓负荷(OR:7.791,95%CI:2.834~21.421)、高水平sST2(OR=2.071,95%CI:1.146~3.743)、高水平NLRP3(OR=2.008,95%CI:1.228~3.284)是急性冠脉综合征患者PCI术后无复流-慢血流的危险因素(均P<0.05)。sST2,NLRP3诊断急性冠脉综合征患者PCI术后无复流-慢血流的临界值分别为12.91ng/ml,55.39 pg/ml,曲线下面积分别为0.737,0.686,联合sST2,NLRP3诊断急性冠脉综合征患者PCI术后无复流-慢血流的曲线下面积为0.907,高于单独诊断(Z=2.662,2.856,均P<0.05)。结论急性冠脉综合征患者血清sST2,NLRP3水平增高与PCI术后无复流-慢血流的发生有关,联合检测sST2和NLRP3可提高对术后无复流-慢血流的诊断效能。

乳腺癌组织转移相关蛋白-3表达与腋窝淋巴结转移的相关性

目的 研究乳腺癌组织转移相关蛋白(MTA)-3表达与腋窝淋巴结转移之间的关系。方法 采用回顾性分析方法,以2019年1月至2022年1月入廊坊市人民医院的120例乳腺癌患者为观察对象,将其设为研究组;同时,以同期入院的120例乳腺良性肿瘤患者为观察对象,设为对照组。测定两组患者乳腺组织内MTA-3水平,并比较两组患者MTA-3阳性表达率,分析乳腺癌临床病理特征与MTA-3之间的关系。参考研究组患者是否存在腋窝淋巴结转移划分为非转移组(n=66)与转移组(n=54),分析乳腺癌临床病理特征与腋窝淋巴结转移之间的关系,并分析腋窝淋巴结转移数目、上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)、细胞增殖指数(Ki-67)与MTA-3的相关性。结果 研究组乳腺组织内MTA-3阳性表达率为35.00%,低于对照组(88.33%),差异有统计学意义(P<0.05)。分子分型、腋窝淋巴结转移状态、肿瘤大小、临床分期、组织学分级与MTA-3阳性表达密切相关(P<0.05),年龄、月经状态与MTA-3阳性表达无显著相关性(P>0.05)。转移组与非转移组的分子分型、临床分期、组织学分级比较,差异有统计学意义(P<0.05);转移组与非转移组的年龄、月经状态、肿瘤大小比较,差异无统计学意义(P>0.05)。E-cadherin与MTA-3阳性表达呈正相关(r=0.238,P<0.05),腋窝淋巴结转移数目、Ki-67阳性与MTA-3阳性表达呈负相关(r=-0.194,-0.351,P<0.05)。结论 乳腺癌患者肿瘤组织内MTA-3阳性表达明显下降,与腋窝淋巴结转移有着密切联系,且于乳腺癌发生、转移中起着重要作用,其机制可能与MTA-3提高E-cadherin表达与下调Ki-67表达有关。

血清C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白3预测绝经后女性股骨粗隆间骨折防旋股骨近端髓内钉内固定术后周围再骨折的价值

目的 观察血清C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白3(complement-C1q/tumor necrosis factor-related protein 3,CTRP3)对绝经后女性股骨粗隆间骨折防旋股骨近端髓内钉(proximal femoral nail antirotation,PFNA)内固定术后周围再骨折的预测价值。方法 回顾性收集2019年2月至2022年2月河北省衡水市第四人民医院收治的115例绝经后女性股骨粗隆间骨折患者临床资料。根据术后1年内患者周围再骨折情况分为再骨折组25例和正常组90例。统计血清CTRP3、骨代谢[I型原胶原氨基端延长肽(N-terminal propeptide of type I procollagen,P1NP)、I型胶原C端肽β降解产物(β-C-terminal telopeptide of type I collagen,β-CTx)]、性激素[促卵泡激素、促黄体生成素、雌二醇]指标及骨密度,绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线及曲线下面积(area under curve,AUC)评价血清CTRP3对患者PFNA内固定术后周围再骨折的预测价值。结果 再骨折组血清CTRP3、雌二醇水平、股骨颈骨密度与腰椎骨密度低于正常组,血清P1NP、β-CTx、促卵泡激素水平高于正常组,差异有显著性(P<0.05);两组促黄体生成素差异无显著性(P>0.05)。Pearson相关性分析显示,PFNA内固定术后周围再骨折患者血清CTRP3与雌二醇、股骨颈骨密度与腰椎骨密度均呈显著正相关,与血清P1NP、β-CTx、促卵泡激素水平呈显著负相关。将血清CTRP3作为检验变量,绘制ROC曲线,结果显示,血清CTRP3预测患者PFNA内固定术后周围再骨折AUC=0.832,具有一定预测价值;cut-off值取80.385 ng/ml时,可获得最佳检测效能,敏感度为0.760,特异度为0.744,约登指数为0.504。结论 血清CTRP3水平与绝经后女性股骨粗隆间骨折PFNA内固定术后周围再骨折患者骨代谢、性激素及骨密度有关,血清CTRP3水平可作为绝经后女性股骨粗隆间骨折患者PFNA内固定术后周围再骨折的预测因子。

TMEM59的羧基端片段经与ATG5-ATG16L1-LC3B蛋白相互作用促进自噬

目的研究跨膜蛋白59(TMEM59)诱导自噬、TMEM59诱导自噬的部位及探讨TMEM59诱导自噬的相关通路。方法通过细胞转染、免疫共沉淀、免疫荧光等技术明确TMEM59能否诱导自噬及诱导自噬的部位,自噬流抑制剂处理明确TMEM59诱导自噬的相关通路。结果研究证实在Hela细胞中过表达TMEM59和TMEM59的羧基端片段(CTF)增加自噬标记蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3B)-Ⅱ的水平以及促进自噬流的发生,差异有统计学意义(P<0.05),但过表达TMEM59的氨基端片段(NTF)差异无统计学意义(P>0.05)。过表达TMEM59不会影响自噬激活剂雷帕霉素诱导的LC3B-Ⅱ水平增加,差异无统计学意义(P>0.05),促进因抑制自噬溶酶体融合所导致的LC3B-Ⅱ水平增加,差异有统计学意义(P<0.05)。证实TMEM59、TMEM59-CTF与自噬相关基因蛋白(ATG)5、ATG16L1和LC3B相互作用。结论TMEM59-CTF诱导自噬发生在自噬起始之后和自噬溶酶体形成之前的阶段,与ATG5-ATG16L1-LC3B蛋白相互作用促进自噬。

C1q/TNF相关蛋白3、基质金属蛋白酶3和基质金属蛋白酶9对绝经后女性骨密度的影响

目的探究C1q/TNF相关蛋白3(CTRP3)、基质金属蛋白酶(MMP)-3及MMP-9对绝经后女性骨密度的影响。方法回顾性分析2019年6月至2022年6月江苏省南通市第三人民医院进行体检的92名自然绝经女性的临床资料。根据骨密度T评分将其分为健康组及骨质疏松组,骨质疏松定义为骨密度T评分≤-2.5 SD。比较两组CTRP3、MMP-3及MMP-9水平;CTRP3、MMP-3及MMP-9与骨密度的相关性采用Pearson相关性分析;受试者操作特征曲线评估CTRP3、MMP-3、MMP-9对骨质疏松的预测价值。结果骨质疏松组腰椎、股骨颈骨密度及骨矿含量水平均低于健康组(P<0.05)。骨质疏松组CTRP3水平低于健康组,MMP-3、MMP-9水平高于健康组(P<0.05)。CTRP3与腰椎、股骨颈骨密度呈正相关(r=0.451、0.483,P<0.05);MMP-3与腰椎、股骨颈骨密度呈负相关(r=-0.476、-0.439,P<0.05);MMP-9与腰椎、股骨颈骨密度呈负相关(r=-0.508、-0.449,P<0.05)。CTRP3、MMP-3及MMP-9联合预测的曲线下面积高于各指标单独预测。结论CTRP3、MMP-3及MMP-9水平与绝经后女性骨密度存在相关性,能够影响骨密度水平,且CTRP3、MMP-3、MMP-9联合诊断对于骨质疏松有一定的参考价值。

重症胰腺炎患者血清载脂蛋白B/载脂蛋白A1、微管相关蛋白1-轻链3和细胞间黏附分子-1水平在预测并发感染性胰腺坏死中的价值

目的观察重症胰腺炎(SAP)患者血清载脂蛋白B与载脂蛋白A1比值(ApoB/ApoA1)、微管相关蛋白1-轻链3(MAP1-LC3)及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)水平,并分析其与患者并发感染性胰腺坏死(IPN)的关系和预测价值。方法选取2019年1月至2022年1月于该院收治的172例SAP患者作为SAP组。收集临床资料及外周静脉血标本,检测患者血清ApoB/ApoA1、MAP1-LC3和ICAM-1水平,同期选取该院70例体检健康者作为对照组。比较SAP患者与体检健康者的血清ApoB/ApoA1、MAP1-LC3和ICAM-1水平差异;根据SAP患者后续有无并发IPN分为IPN组和非IPN组。采用单因素及多因素分析比较两组患者临床资料,分析血清ApoB/ApoA1、MAP1-LC3、ICAM-1水平及其他相关因素与SAP患者并发IPN的关系;并通过绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析血清ApoB/ApoA1、LC3和ICAM-1水平用于预测SAP患者并发IPN的价值。结果SAP组血清ApoB/ApoA1、MAP1-LC3、ICAM-1水平均高于对照组(均P<0.05);单因素分析显示,IPN组ApoB/ApoA1、MAP1-LC3及ICAM-1水平均高于非IPN组(均P<0.05),多因素分析显示,ApoB/ApoA1(β=2.309,P=0.027)、MAP1-LC3(β=5.447,P=0.037)及ICAM-1(β=0.039,P=0.045)水平均是SAP患者并发IPN的影响因素。血清ApoB/ApoA1、MAP1-LC3及ICAM-1水平预测SAP患者并发IPN的曲线下面积(AUC)分别为0.761(95%CI:0.683~0.840)、0.765(95%CI:0.681~0.848)、0.882(95%CI:0.829~0.935);灵敏度分别为76.1%、68.7%、71.6%,特异度分别为61.0%、89.5%、91.4%。联合预测的AUC为0.957,灵敏度为85.1%,特异度为96.2%。结论血清ApoB/ApoA1、MAP1-LC3、ICAM-1水平是SAP患者并发IPN的影响因素,并发IPN的患者ApoB/ApoA1、MAP1-LC3和ICAM-1水平更高,这些指标对于预测SAP患者并发IPN具有一定的价值。