3-乙酰基-11-羰基-β-乳香酸在大鼠体内的代谢途径研究

目的研究3-乙酰基-11-羰基-β-乳香酸(AKBA)在大鼠体内的代谢途径。方法大鼠ig AKBA60 mg/kg后,收集胆汁、尿液及粪便,应用高效液相色谱-四级杆-离子阱质谱(HPLC-QTRAP-MS)技术分析AKBA在大鼠体内的代谢途径。结果共检测到除原形药物外的15个代谢产物,提示AKBA在大鼠体内的主要代谢途径为去乙酰化、单羟基化、脱氢化及葡萄糖醛酸结合物。结论 AKBA在大鼠体内经历了广泛的I相、II相代谢,产生的代谢产物主要通过粪便及胆汁排泄;利用QTRAP技术的自动切换扫描(IDA)软件及增强型产物离子(EPI)扫描功能,能够快速得到高质量的MS2谱图,为AKBA代谢产物的鉴定提供了有效的检测手段。

高效液相色谱法测定筋骨痛消液中11-羰基-β-乙酰乳香酸和川续断皂苷Ⅵ的含量

目的:建立筋骨痛消液中11-羰基-β-乙酰乳香酸和川续断皂苷Ⅵ的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法测定筋骨痛消液中11-羰基-β-乙酰乳香酸和川续断皂苷Ⅵ的含量,色谱柱为Agilent Eclipse Plus C18(4.60 mm×250 mm, 5μm),以0.05%磷酸-乙腈(20∶80)为流动相在254 nm波长下测定11-羰基-β-乙酰乳香酸;以水-乙腈(70∶30)为流动相在212 nm波长下测定川续断皂苷Ⅵ,随机挑选10批次筋骨痛消液,并对其含有的11-羰基-β-乙酰乳香酸和川续断皂苷Ⅵ分别进行测定。结果:11-羰基-β-乙酰乳香酸在0.010 2~1.020 5 mg·mL^(-1)(r=0.999 9)线性关系良好,平均加样回收率为99.11%,RSD为1.50%(n=9),10批次样品中的平均含量为1.435 3 mg·mL^(-1);川续断皂苷Ⅵ在0.010 2~1.020 0 mg·mL^(-1)(r=0.999 9)线性关系良好,平均加样回收率为99.21%,RSD为2.17%(n=9),10批次样品中的平均含量为0.816 3 mg·mL^(-1)。结论:该方法结果准确,灵敏度高,重复性好,可用于筋骨痛消液的质量控制。

乳香提取物调控Wnt/β-catenin信号通路抑制结直肠癌细胞侵袭转移的作用机制研究

目的研究乳香提取物对人结肠癌细胞HCT-116增殖和侵袭转移的影响及可能的作用机制。方法体外培养人结肠癌细胞珠HCT-116,使用不同浓度乳香提取物乙酰基-11-酮基-β-乳香酸(AKBA)分别作用于细胞相同时间后,以CCK-8实验、Transwell细胞侵袭实验、划痕实验检测其对细胞增殖和侵袭转移的影响,以Western blotting、荧光定量PCR等方法探究其对细胞侵袭转移相关蛋白、mRNA表达的影响。结果AKBA可抑制人结肠癌细胞HCT-116的增殖、迁移能力,且呈剂量依赖(P<0.05);AKBA可抑制C-Myc、β-catenin的蛋白和mRNA表达,且呈剂量依赖(P<0.05)。结论AKBA可以抑制人结肠癌细胞HCT-116的增殖和迁移,诱导细胞凋亡。这可能与其调控Wnt/β-catenin信号通路相关。

乙酰基-11-酮基-β-乳香酸对大肠癌裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制

目的:探讨乙酰基-11-酮基-β-乳香酸(AKBA)对大肠癌裸鼠移植瘤生长的影响及其可能机制。方法:建立大肠癌裸鼠模型,将30只大肠癌模型裸鼠采用随机数字法分为模型组和AKBA组,每组15只。AKBA组裸鼠给予AKBA(60 mg·kg-1)灌胃,每天1次,模型组每天给予等量生理盐水灌胃,均持续给药3周,每天测量裸鼠体重和肿瘤体积。3周后取裸鼠移植瘤组织进行HE染色,采用免疫组化法测定移植瘤组织中β-连环蛋白表达水平,采用蛋白质印迹法测定移植瘤组织中细胞周期蛋白D1、细胞核增殖抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-7(MMP-7)蛋白水平,采用逆转录-聚合酶链反应测定移植瘤组织中细胞周期蛋白D1、PCNA、MMP-2和MMP-7 mRNA水平。结果:干预后两组裸鼠的体重比较,差异无统计学意义(P>0.05)。移植瘤体积AKBA组小于模型组(P<0.05)。模型组移植瘤HE染色可见明显的细胞异型,肿瘤细胞形成排列不规则、大小不等的腺样结构,核分裂象多见,有微血管形成;AKBA组移植瘤细胞异型性变小,腺样结构增加,血管减少。AKBA组裸鼠移植瘤组织中,β-连环蛋白阳性表达率低于模型组(P<0.05),细胞周期蛋白D1、PCNA、MMP-2、MMP-7蛋白和mRNA水平均低于模型组(P<0.05)。结论:AKBA可抑制大肠癌裸鼠移植瘤的生长,其机制可能与AKBA下调Wnt/β-连环蛋白信号通路有关。

3-乙酰基-11-酮-β-乳香酸的抗炎作用及其衍生物的化学修饰

乳香酸（Bas）是乳香提取物中的活性成分，乳香酸在治疗炎症方面的疾病如类风湿关节炎、慢性支气管炎、哮喘以及慢性发炎性肠道疾病（溃疡性结肠炎和克罗恩病）已经显示出显著的药理活性。数据表明，3-乙酰基-11-酮-β-乳香酸（AKBA）被认为在各种乳香酸中是最强大的。AKBA被发现和确认为5-脂肪氧合酶（5-LOX）强大的抑制剂；AKBA的其他药理活性研究发现，它还充当了p38-MAP激酶强大的抑制剂。为了得到更多的AKBA，它的衍生物BA、KBA、ABA经过一系列化学修饰乙酰化和烯丙基氧化转化为AKBA，从而AKBA的量根据乳香树种和相应树脂质量从0．1％～3．0％上升到25％～35％。

HPLC法测定冠脉宁片(胶囊)中11-羰基-β-乙酰乳香酸及松香酸检查

目的 建立HPLC法测定冠脉宁片（胶囊）（乳香、没药、血竭等）中11-羰基-β-乙酰乳香酸和掺伪物松香中松香酸的含有量.方法 冠脉宁片（胶囊）和松香的乙醇提取物的分析采用Agilent TC-C18 （4.6 mm×150 mm,5 μm）色谱柱,以乙腈-0.1％甲酸（75∶25）为流动相;检测波长为251 nm（11-羰基-β-乙酰乳香酸）,241 nm（松香酸）.同时采用液-质联用方法对松香酸进一步确证.结果 松香酸的检出限为0.3 μg/mL;松香酸和11-羰基-β-乙酰乳香酸线性范围分别为3.036 ～ 303.6 μg/mL和3.068～306.8 μg,/mL; 11-羰基-β-乙酰乳香酸和松香酸回收率分别为98.16％和104.22％.结论 本研究建立的HPLC方法可用于冠脉宁片（胶囊）中11-羰基-β-乙酰乳香酸的测定及掺伪松香中松香酸的检查.

西黄丸中11-羰基-β-乙酰乳香酸含量测定及松香酸检查方法研究

目的建立HPLC法测定西黄丸中11-羰基-β-乙酰乳香酸含量及检查掺伪物松香中松香酸的方法,为评价西黄丸质量和监测掺伪掺假问题提供有效手段。方法采用Agilent ZORBAX-SB C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸(82∶18)为流动相;检测波长:251nm(11-羰基-β-乙酰乳香酸)、241nm(松香酸)。同时采用液-质联用(HPLC-MS)方法,对检测出松香酸的样品进行了进一步确证。结果松香酸的检出限为0.11mg.g-1;线性方程:Y乳香酸=1.2779×104 X-4.8896×103(r=0.9994)Y松香酸=2.5069×104 X+4.8678×103(r=0.9995);线性范围:松香酸为1.254～50.16μg.mL-1;11-羰基-β-乙酰乳香酸为1.217～48.67μg.mL-1;回收率:11-羰基-β-乙酰乳香酸为101.5%;松香酸为103.1%。结论本研究建立的HPLC方法稳定可靠,简便易行,可用于西黄丸中11-羰基-β-乙酰乳香酸的含量测定及松香酸的检查。

头孢西丁钠关键中间体7-α-甲氧基-3-去乙酰基头孢噻吩苄星盐的一步法合成研究

为实现头孢西丁钠关键中间体7-α-甲氧基-3-去乙酰基头孢噻吩苄星盐的一步法合成,以头孢噻吩酸为原料,一锅中进行7-α-甲氧化和3位去乙酰基,不需要拿出中间体,并以溶液状态直接和N,N′-二苄基乙二胺二乙酸成苄星盐得到产品。一步法工艺简化了操作,提高了收率,减少了三废,具有工业化应用前景。

11-羰基-β-乙酰乳香酸(AKBA)调节基质金属蛋白酶-1,-2,-9的活性(英文)

目的:降低创面的高MMPs活性是治疗慢性皮肤溃疡的新途径。本研究主要观察11-羰基-β-乙酰乳香酸(AKBA,中药乳香的一种活性成分)对MMP-1、MMP-2和MMP-9活性的调节作用。方法:人间质胶原酶(MMP-1)或者明胶酶A(MMP-2)被醋酸氨基苯汞(p-aminophenylmercuric acetate,APMA)激活后,与不同浓度的AKBA共同孵育1h,通过底物裂解法观察其活性的改变。MMP-9在中性粒细胞(polymorphonuclear neu-trophils,PMNs)中含量丰富,因此以大鼠腹腔PMN作为MMP-9的来源。PMN裂解产物与不同浓度的AKBA共同孵育1h,通过明胶酶谱法观察其中MMP-9活性的改变。我们建立了3个细胞模型:由TNF-α活化的人皮肤成纤维细胞模型;PMA活化的THP-1细胞模型和成纤维细胞-THP-1共培养细胞模型。AKBA与这3个细胞模型共同孵育24h后,用ELISA法检测细胞上清中MMP-1、MMP-2和MMP-9的含量,用明胶酶谱法检测细胞上清中MMP-2、MMP-9的活性。结果:AKBA在0.1-0.8mmol/L浓度范围内对MMP-1、MMP-2的活性有抑制作用,IC50分别为0.18mmol/L和0.27mmol/L;在0.05-0.85mmol/L浓度范围内对MMP-9活性表现出不同程度的抑制作用(P<0.01),其抑制作用呈浓度依赖性。AKBA促进成纤维细胞分泌MMP-2,但是,对THP-1细胞分泌MMP-9表现出抑制作用。在共培养细胞模型中,AKBA对MMP-1、MMP-2和MMP-9的分泌均表现出抑制作用。结论:AKBA作为乳香的一种活性成分,它对MMPs活性的直接抑制作用和对MMPs分泌的抑制作用可能是中药乳香治疗慢性皮肤溃疡的机制之一。

西黄丸中11-羰基-β-乙酰乳香酸的鉴别及含量测定

目的:建立西黄丸中11-羰基-β-乙酰乳香酸的定性定量检验方法。方法:采用薄层色谱法和高效液相色谱法建立西黄丸中乳香类成分11-羰基-β-乙酰乳香酸的方法。结果:运用建立的薄层色谱法检测12个生产厂家提供的17批西黄丸,均含有11-羰基-β-乙酰乳香酸,但含量差别大,运用高效液相色谱法对其进行含量测定,其中11-羰基-β-乙酰乳香酸含量最低为0.27%,最高为1.05%。结论:建立薄层色谱法和高效液相色谱法可用于西黄丸中11-羰基-β-乙酰乳香酸的定性定量检验,可作为西黄丸现行法定检验标准中乳香显微鉴别的有益补充。

11-羰基-β-乙酰乳香酸对盐酸异丙肾上腺素诱导大鼠心肌缺血的保护作用

目的:研究11-羰基-β-乙酰乳香酸(AKBA)对盐酸异丙肾上腺素(ISO)诱导大鼠心肌缺血损伤的保护作用机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、AKBA低剂量组、AKBA高剂量组。皮下注射ISO 100 mg·kg-1诱导心肌缺血损伤模型后,测定各组大鼠心电图ST段变化,检测血清的肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌钙蛋白I(c Tn I)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量变化,观察心肌组织病理性改变,检测心肌细胞的凋亡情况。结果:AKBA高剂量组大鼠心电图ST段移位显著低于模型组;AKBA高剂量组能显著降低大鼠血清中心肌酶的CK-MB、c Tn I、LDH;AKBA高剂量组降低大鼠血清中MDA,升高SOD活力;AKBA高剂量组的心肌组织病理损伤小于模型组;AKBA高剂量组抑制心肌缺血损伤中的心肌细胞的凋亡。结论:AKBA组能有效抑制ISO所致心肌缺血损伤,抑制心肌细胞凋亡,对心肌具有保护作用。

Z-没药甾酮联合11-羰基-β-乙酰乳香酸对脑缺血再灌注损伤模型大鼠的改善作用研究

目的:研究Z-没药甾酮(Z-GL)联合11-羰基-β-乙酰乳香酸(AKBA)对脑缺血再灌注损伤模型大鼠的改善作用。方法:将雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和Z-GL+AKBA低、高剂量组(二者低、高剂量均分别为25、50 mg/kg),每组10只。除假手术组外,其余各组均采用线栓法复制大脑中动脉闭塞/再灌注损伤模型。各给药组大鼠均于再灌注后灌胃相应药物,假手术组和模型组大鼠灌胃等容二甲基亚砜,每12 h给药1次,连续7 d。采用改良Longa评分法评价各组大鼠的神经功能缺损情况,采用苏木精-伊红染色法观察各组大鼠脑组织的病理学变化,采用TTC法检测其脑梗死面积并计算脑梗死百分比,采用TUNEL法检测其脑组织中在体细胞凋亡情况,采用免疫荧光染色法、免疫印迹法分别检测其脑组织中CD34、血管内皮生长因子(VEGF)、Delta样配体4(DLL4)的表达情况。结果:与假手术组比较,模型组大鼠脑组织皮层细胞数量减少且排列不规则,可见明显梗死区,并伴有新生血管明显减少;其神经功能缺损评分和脑梗死面积百分比均显著升高,TUNEL阳性细胞数显著增多,CD34、VEGF、DLL4的表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,各给药组大鼠上述症状均有明显改善,其神经功能缺损评分和脑梗死面积百分比均显著降低,TUNEL阳性细胞数显著减少,CD34、VEGF、DLL4的表达水平均显著升高,且Z-GL+AKBA高剂量组神经功能缺损评分、脑梗死面积百分比、TUNEL阳性细胞数均显著低于或少于低剂量组,CD34、DLL4的表达水平均显著高于低剂量组(P<0.05或P<0.01)。结论:Z-GL和AKBA联用可减轻脑缺血再灌注损伤模型大鼠的神经功能缺损,改善其脑损伤;这种作用可能与促进血管新生以及上调VEGF、DLL4蛋白的表达有关,并具有一定的剂量依赖性。

应用近红外光谱定量分析模型测定乳香中11-羰基-β-乙酰乳香酸含量

目的:用近红外光谱技术快速测定市售药材乳香中11-羰基-β-乙酰乳香酸含量。方法:根据乳香在4 894.45~4 466.33 cm^(-1)、5 750.69~5 499.99 cm^(-1)内的近红外吸收光谱,应用偏最小二乘法(PLS)建立校正模型,采用二阶导数预处理方法时能最有效地提取光谱的信息。结果:11-羰基-β-乙酰乳香酸的校正集相关系数为0.930 0,校正集标准偏差(RMSEC)为0.473,预测集相关系数为0.990 1,预测集标准偏差(RMSEP)为0.261。结论:近红外光谱技术快速简便,适合中药乳香指标成分的快速分析。

相转移催化合成11-脱氧甘草次酸-3-位酯类衍生物

以甘草次酸为原料 ,经还原制得 1 1 -脱氧甘草次酸 ,然后在聚苯乙烯固载化聚乙二醇 40 0( PS- PEG- 40 0 )的催化下。合成了七种具有潜在药理活性和应用前景的 1 1 -脱氧甘草次酸 - 3-位酯类衍生物。合成方法简单 ,产率较高 。

三环己基锡-2-(1,2-亚乙二硫)亚甲基-3-羰基-5-芳基-4-戊烯酸酯的结构研究

合成了 3个三环己基锡 -2 -( 1 ,2 -亚乙二硫 )亚甲基 -3-羰基 -5 -芳基 -4 -戊烯酸酯化合物 .用 IR,1 H NMR,1 3 C NMR和 1 1 9Sn NMR光谱及 X射线衍射对所合成的化合物进行了表征 .结果表明标题化合物为四配位。

高效液相色谱和质谱法对产酸克雷伯氏菌SG-11生物合成吲哚-3-乙酸代谢途径的研究

产酸克雷伯氏菌 (Klebsiellaoxytoca)SG 1 1是从水稻根面分离的植物根际促生细菌 ,具有生物固氮能力。利用HPLC和GC MS对该菌的代谢产物进行了定性定量分析 ,结果表明该菌能产生较高浓度的吲哚 3 乙酸(IAA) ;对其代谢途径的研究结果证明 ,该菌以吲哚 3 丙酮酸代谢途径合成IAA。

N-(3-吲哚甲酰基)-β-丙氨酸甲酯的合成和表征

以吲哚为原料,与Cl3CCOCl在n(吲哚)∶n(Cl3CCOCl)=1∶1 1,乙醚为溶剂,室温反应2h条件下,制得3 三氯乙酰基吲哚(Ⅱ),Ⅱ再与β 丙氨酸甲酯(Ⅰ)进行缩合,条件为:乙腈为溶剂,n(3 三氯乙酰基吲哚)∶n(β 丙氨酸甲酯)=1∶1,室温反应16h,合成了标题产物(Ⅲ),摩尔总收率为62 9%。通过1HNMR,IR,MS和元素分析表征了产物的结构。

N-叔丁氧羰基哌啶-3-乙酸的合成研究

以甘氨酸为起始原料经过酯化、还原胺化、狄克曼缩合、脱羧、魏悌希(Wittig)反应、催化氢化反应合成N-叔丁氧羰基哌啶-3-乙酸,通过正交实验法探索了原料配比、反应温度、反应时间对Wittig的影响.结果表明反应的最佳工艺条件为:原料配比n(N-苄基-3-哌啶酮):n(磷酰基乙酸三乙酯)=1:1.2、反应温度0℃、反应时间为8 h.,中间产物N-苄基-3-哌啶亚基乙酸乙酯的产率74.2%,N-叔丁氧羰基哌啶-3-乙酸的产率为26.4%.采用1HNMR对产物的结构进行了表征.

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定中药制剂中松香酸、11-羰基-β-乙酰乳香酸及苏丹红Ⅰ~Ⅳ的含量

建立了快速检测中药制剂中松香酸、11-羰基-β-乙酰乳香酸、苏丹红Ⅰ～Ⅳ的超高效液相色谱-串联质谱方法。样品以甲醇为提取溶剂，经ZorbaxSB—C18色谱柱分离，以乙腈-0．1％甲酸水溶液为流动相梯度洗脱，流速为0．3mL／min；采用电喷雾离子源（ESI），正离子多反应监测（MRM）扫描方式检测；基质匹配标准曲线法定量。结果表明，6种化合物分别在3．0～100μg／L（苏丹红Ⅰ，Ⅱ）及30～1000μg/L（松香酸、11-羰基-β-乙酰乳香酸及苏丹红Ⅲ，Ⅳ）范围内线性关系良好，相关系数均大于0．99，方法检出限为0．7～8．6μg·kg^-1，定量下限为2．2—25．1μg·kg^-1低、中、高3个加标水平下各化合物的平均回收率为76．5％～94．9％，相对标准偏差（RSD）为2．3％-9．9％。采用酸化提取液的方法解决了苏丹红Ⅲ和Ⅳ的光学异构现象带来的计算误差。通过对目标化合物碎片离子的研究以及质谱裂解规律的总结，为其定性鉴别和定量分析提供了参考。该方法操作简便、准确、快速、灵敏，适合掺假中药制剂中松香酸及苏丹红含量的检测。

高效液相色谱法、气相色谱法及气相色谱-质谱法对西黄丸中11-羰基-β-乳香酸的鉴别及含量测定比较

目的比较高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)及气相色谱-质谱法(GC-MS)对西黄丸中11-羰基-β-乳香酸的鉴别及含量测定。方法分别采用高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)及气相色谱-质谱法(GC-MS)对西黄丸中11-羰基-β-乳香酸进行研究,比较三种方法的精密度、准确度、相关系数和检出限。结果HPLC线性范围、精密度RSD、稳定性RSD、重复性RSD、回收率和RSD依次为0.22~2.18μg、0.55%、1.29%、1.01%、100.98%和0.61%;GC线性范围、精密度RSD、稳定性RSD、重复性RSD、回收率和RSD依次为0.19~2.04μg、0.52%、1.17%、0.95%、99.82%和0.59%;GC-MS线性范围、精密度RSD、稳定性RSD、重复性RSD、回收率和RSD依次为0.20~2.11μg、0.54%、1.23%、0.98%、99.95%和0.60%。结论 HPLC、GC、GC-MS三种方法均可有效鉴别和检测西黄丸中11-羰基-β-乳香酸,且HPLC相对于GC、GC-MS,在操作上更为快捷简便。