高效液相色谱测定发酵液中1,3-二羟基丙酮(DHA)方法的建立

建立了简单且准确的测定1,3-二羟基丙酮(DHA)的高效液相色谱(HPLC)方法。以AlltimaC18(5μm,250×4.6mm)为分离柱,5%甲醇水溶液(0.05%H3PO4调pH至3.0),流速为1ml/min,用紫外检测器在200nm处检测DHA。结果测得DHA标准样品的保留时间为6.2min,并测得DHA的线性范围为0.1～10.0g/L,用HPLC法测得以甘油为底物发酵产DHA发酵液中DHA含量为6.2g/L,并证明高效液相色谱法可有效应用于产DHA发酵过程中产物的检测。

1,3-二羟基丙酮结晶母液回收工艺优化研究

1,3-二羟基丙酮(1,3-dihydroxyacetone,DHA)是一种天然存在的酮糖。本研究提出了一种大孔树脂串联纯化DHA结晶母液的新工艺。通过静态吸附实验筛选树脂,其中D001树脂与315树脂串联能有效去除DHA结晶母液中的色素和蛋白质。试验结果表明,经串联纯化后,母液中DHA色素去除率达97.49%,蛋白去除率达97.05%,DHA收率达93.66%。与传统工艺相比,新工艺保证了DHA母液回收总收率,为DHA结晶母液大规模提取纯化提供了新思路。

1,3-二羟基丙酮衍生物的合成

以五氧化二磷为引发剂 ,二甲亚砜氧化 1,3 二芳氧基 (烷氧基 ) 2 丙醇化合物合成了一系列 1,3 二羟基丙酮衍生物 .

苯并噻唑盐催化多聚甲醛合成1,3-二羟基丙酮

在氮气保护下,以多聚甲醛为原料,正丁醇作溶剂,三乙胺作助催化剂,在溴化-3-乙基苯并噻唑盐催化作用下合成了1,3-二羟基丙酮。考察了反应温度、反应时间、三乙胺用量对产物1,3-二羟基丙酮(DHA)收率的影响,得出的优选工艺参数为:60 mmol多聚甲醛,3 mmol催化剂和25 mL三乙胺,同时加入10 mL正丁醇,反应温度130℃,反应时间40 min。DHA收率为37%,选择性在95%～98%。产物经过先酯化再水解分离的提纯工艺,质量分数从90%提高到99.8%,分离提纯后得率为72%。产物熔点为73℃;通过IR、1HNMR及紫外可见光谱分析确证了化合物的结构。

弱氧化醋酸杆菌静止细胞氧化活性的研究及1,3-二羟基丙酮的制备

利用在非生长培养基中弱氧化醋酸杆菌(Acebobacter Suboxydans)静止细胞发酵甘油制备1,3-二羟基丙酮(DHA).通过改变培养条件,研究了影响静止细胞氧化特性的因素.结果表明,处于非生长期的弱氧化醋酸杆菌表现出稳定的高氧化活性,DHA转化周期缩短,获得了较高产率.此外考察了弱氧化醋酸杆菌静止细胞在重复利用多批次发酵中的氧化稳定性,经重复利用9个批次后,菌体细胞仍保持较高的氧化活性.当甘油浓度为60 g/L时,DHA总产量可达491.6 g,甘油平均转化率为91%,体积产率为8.97 g/(L·h),较生长细胞培养提高10～15倍.

磷钼蓝光度法测定酸性甘油溶液中1，3-二羟基丙酮

提出了酸性甘油溶液中1,3-二羟基丙酮(DHA)的光度测定的方法。简述了光度法测定DHA的原理,讨论了影响DHA测定的因素和规律。质量浓度在0.60 g·L^(-1)以内,煮沸时间15 min,显色剂用量为2 mL,吸光度与质量浓度呈线性关系。校准曲线回归方程为y=2.308 X—0.0259,r=0.9958,共存的甘油醛、甘油酸、羟基丙酮酸等物质对DHA的测定基本无干扰。

Sn-MCM-22分子筛催化1,3-二羟基丙酮制备乳酸酯

以MCM-22分子筛为原料,采用SnCl4·5H2O对其后处理改性合成了Sn-MCM-22催化剂,用于催化1,3-二羟基丙酮(DHA)与醇反应制备乳酸酯。XRD、SEM、N2吸附-脱附、UV-Vis和Py-IR表征结果显示,Sn以离子形式插入到分子筛孔和SnO2接枝的方式来改性MCM-22,改性催化剂具有强Lewis和Brønsted复合双酸性位点,可有效催化DHA制备乳酸酯。结果表明,选用Sn-MCM-22催化剂催化DHA甲醇溶液(0.25 mol/L),反应温度120℃,反应时间15 h,乳酸甲酯收率达96.3%。该催化剂催化DHA与乙醇、正丙醇、正丁醇反应,相应的乳酸酯收率在86.4%~88.4%之间,催化剂具有良好的循环稳定性。

响应面分析法优化甘油催化生产1,3-二羟基丙酮

对弗托氏葡萄糖酸杆菌(Gluconobacter frateurii)HD924发酵生产1,3-二羟基丙酮(DHA)发酵培养基进行优化。单因素试验结果表明,培养基中CaCO3、玉米浆和甘油浓度对发酵影响显著,利用响应面分析法对培养基成分进行优化,并建立了各因素与DHA产量之间的数学模型。在CaCO32.14 g/L、玉米浆23.26 g/L、甘油106.85 g/L条件下,二羟基丙酮最大估计值为82.09 g/L,优化后的DHA产量比优化前提高了25.76%,与响应面预测极值基本相符。

1α,25-二羟基维生素D_(3)对哮喘小鼠SIRT1、GATA-3表达及气道炎症水平的影响

目的探究1α,25-二羟基维生素D_(3)对哮喘小鼠气道炎症变化的影响及可能机制。方法将24只SPF级BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组、哮喘+1α,25-二羟基维生素D_(3)(哮喘+VD_(3))组,每组8只。哮喘组和哮喘+VD_(3)组小鼠于第1、8、15天给予卵清蛋白(OVA)混悬液0.2 ml致敏,对照组给予生理盐水0.2 ml;哮喘组和哮喘+VD_(3)组于第22~28天使用1%OVA雾化吸入激发,对照组给予等量生理盐水雾化吸入,每次雾化30 min,1次/d,连续激发7 d;哮喘+VD_(3)组每次雾化前30 min给予1α,25-二羟基维生素D_(3)注射液(4μg/kg),对照组和哮喘组给予等量生理盐水。最后一次激发后麻醉处理采集小鼠血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织标本。采用HE染色和PAS染色观察肺组织病理学改变及气道黏液水平的变化;ELISA法检测血清IgE及BALF中炎性因子白细胞介素(IL)-4、IL-5、IL-13水平;免疫组化、Western blotting检测小鼠肺组织中沉默信息调节因子1(SIRT1)和GATA结合蛋白-3(GATA-3)的表达情况。采用Pearson直线相关分析肺组织SIRT1、GATA-3表达水平(SIRT1、GATA-3的平均OD值)与小鼠血清IgE及BALF中IL-4、IL-5、IL-13浓度的相关性。结果与对照组比较,哮喘组小鼠肺组织气管及伴行血管周围炎性细胞浸润明显增多,其中以嗜酸性粒细胞为主,支气管管腔狭窄,气道黏膜上皮增生,气管内黏液分泌增多;哮喘+VD_(3)组小鼠上述改变较哮喘组减轻。与对照组比较,哮喘组小鼠血清IgE和BALF中IL-4、IL-5、IL-13等炎性因子水平及肺组织中GATA-3表达均增高(P<0.05),肺组织中SIRT1表达降低(P<0.05);与哮喘组比较,哮喘+VD_(3)组小鼠血清IgE和BALF中IL-4、IL-5、IL-13水平及肺组织GATA-3表达均降低(P<0.05),肺组织SIRT1表达增高(P<0.05)。相关性分析结果显示,小鼠肺组织SIRT1表达水平与GATA-3表达量、血清IgG及BALF中IL-4、IL-5、IL-13水平均呈负相关(P<0.05);小鼠肺组织GATA-3表达水平与血清IgG及BALF中IL-4、IL-5、IL-13水平均呈正相关(P<0.05)。结论1α,25-二羟基维生素D_(3)可缓解哮喘小鼠的气道炎症,其机制可能是通过上调肺组织中SIRT1的表达,抑制GATA-3的表达,进而降低炎性因子(IL-4、IL-5、IL-13)水平。

微生物合成4-羟基-2,5-二甲基-3(2H)-呋喃酮的研究进展

4-羟基-2,5-二甲基-3(2H)-呋喃酮(HDMF)是一种具有焦糖味的安全优良的甜味香料和增香剂,其阈值低、香势好且特征性强,被广泛应用于食品、烟草等产品中,市场需求量大,尤其是天然来源的HDMF受到人们更多的青睐。然而,天然来源的HDMF产量较低,尚不能满足当前市场的需求。该文从其应用、检测、生产方法、合成HDMF微生物的种类、微生物合成HDMF的机制与关键酶及其发酵培养影响因素进行简述,重点侧重于已报道的具有合成HDMF的微生物种类、微生物合成HDMF的内在机制及其影响其发酵的培养因素,旨在为后续筛选、改造获得优良高产HDMF微生物菌株,并优化微生物发酵条件实现生物法高效制备天然HDMF提供参考。

新型瘦肉型饲料添加剂生物基1,3-二羟基丙酮的开发与应用

综述了瘦肉型饲料添加剂的研究现状,分析了生物基1,3-二羟基丙酮的生产及安全性,并对其前景进行展望。

抗合成酶抗体综合征合并抗3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶还原酶蛋白抗体阳性坏死性肌病1例

目的总结抗合成酶抗体综合征(ASS)合并免疫介导坏死性肌病的疾病特点及治疗经验。方法回顾性分析2022年1月南京医科大学附属宿迁第一人民医院收治的1例ASS合并抗3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶还原酶蛋白(HMGCR)抗体阳性坏死性肌病病人,总结此类病人的临床特点。结果病人主诉咳嗽1周,查肌炎抗体谱:抗组氨酰tRNA合成酶(Jo-1)抗体(+++)、抗SSA/Ro52抗体(+++)、抗HMGCR抗体(+++),诊断:抗合成酶抗体综合征、抗HMGCR抗体阳性坏死性肌病、间质性肺病、低蛋白血症。该病人通过糖皮质激素、免疫抑制剂及丙种球蛋白等治疗后症状缓解。结论不同类型的特发性炎性肌病(IIM)临床表现差异较大,各亚型之间也存在重叠表现,其预后及治疗各不相同。如有两种及以上肌炎的合并,则进展快,预后差,需早期完善肌炎抗体谱检查,明确分型,精准治疗。

6-氟-4-羟基-3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-1(2 H)-羧酸叔丁酯的合成、晶体结构及抗肿瘤活性研究

喹喔啉类化合物由于具有显著的生物活性而被广泛应用于医药、化工领域,特别是抗癌药物研发领域。本文通过四步反应法首次合成了6-氟-4-羟基-3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-1(2 H)-羧酸叔丁酯,经溶液结晶法获得其单晶体。晶体学分析表明,该化合物属单斜晶系,空间群C2/c,晶胞常数a=1.28663(10)nm,b=2.25249(17)nm,c=1.01564(7)nm,Z=8,ρ_(c)=1.359 g·cm^(-3),R=0.0538,R_(w)=0.1406。在B3LYP/6-311+G(2d,p)模式下使用密度泛函理论(DFT)计算了该化合物的最佳结构,与X射线单晶衍射确定的晶体结构基本一致。抗肿瘤活性研究表明其有良好的抗肿瘤作用。此外,通过DFT计算了分子的静电势和前沿分子轨道。

秀珍菇3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶基因的克隆及表达分析

为获得秀珍菇3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)全长基因,并分析该基因在秀珍菇正常状态及热胁迫处理下的表达差异,对秀珍菇进行RNA测序(RNA-seq),经生物信息学分析筛选获得HMGR全长基因(命名为Pphg1),并利用荧光定量PCR(qRT-PCR)的方法,分析该基因在秀珍菇不同温度处理下的表达情况。结果表明,获得的Pphg1全长由4059个核苷酸组成,编码1352个氨基酸,其蛋白分子质量约144.04 kDa。经qRT-PCR检测,该基因在秀珍菇受热胁迫后表达量升高。本研究中首次克隆并获得秀珍菇HMGR基因全长cDNA,推测其与秀珍菇热胁迫应答相关,为阐明秀珍菇体内次生代谢产物合成的分子机制及其分子育种提供科学依据。

介孔磷酸锡催化1,3-二羟基丙酮制备乳酸甲酯

以三嵌段聚合物P123为结构导向剂在水热条件下制备了介孔磷酸锡(SnPO),采用XRD、N2物理吸附、TEM、FT-IR、Raman、XPS和Py-IR对SnPO结构和酸性进行了表征并关联其催化1,3-二羟基丙酮(DHA)制备乳酸甲酯的性能.结果表明:500℃焙烧后的SnPO为层状介孔材料,含有丰富的Lewis(L)酸位点,能够在温和条件下催化DHA制备乳酸甲酯.该反应遵循平行-序列的反应路径,需要Br?nsted(B)酸和L酸的协同参与,且相对高的L∶B值有助于提高乳酸甲酯选择性.此外,SnPO具有足够的结构稳定性,有机物在其表面沉积而导致的失活可以通过500℃空气焙烧进行再生.

复合诱变抗性筛选法选育高转化甘油产1,3-二羟基丙酮菌株

在测定不动杆菌(Acinetobacter sp.)Asp16菌株链霉素最低杀菌浓度的基础上,对菌株进行UV和60 Co诱变处理后,利用链霉素抗性平板筛选获得1株遗传性能稳定、高转化甘油产1,3-二羟基丙酮的突变株Asr168,将突变株在5.0g·L-1酵母膏、140.0g·L-1甘油、7.0g·L-1 CaCO3组成的发酵培养基中于30℃、250r·min-1摇床培养50h,1,3-二羟基丙酮的产量达到136g·L-1,比出发菌株提高200%。表明通过UV和60 Co诱变,结合链霉素抗性平板筛选,可大幅提高不动杆菌转化甘油产1,3-二羟基丙酮的能力。

1,25-二羟基维生素D3在临床医学领域中的研究进展

维生D具有调节钙、磷代谢,影响细胞分化等生理功能。越来越多的研究表明维生素D缺乏与多种疾病的发生与发展相关,例如骨质疏松症、免疫性疾病、帕金森病、动脉粥样硬化、肿瘤等。本文主要就维生素D在临床医学治疗领域的研究进展作一综述。

发酵液中1,3-二羟基丙酮的分离提取研究

对氧化葡萄糖酸杆菌CGMCC1.23突变株GM51发酵得到的1,3-二羟基丙酮(DHA)发酵液,首先采用300mg?L?1天然高分子絮凝剂壳聚糖和3%(w/v)活性炭对DHA发酵液进行预处理,然后浓缩发酵液至含水量为10%～20%范围内,加入体积比为3:1的乙醇醇沉脱盐和蛋白杂质后,蒸发发酵液,于5℃大于90%乙醇水中结晶得到DHA产品。结果表明整个工艺过程中DHA产品的收率为72%,高效液相色谱检测DHA晶体纯度99%。本研究结果对发酵液中DHA大规模分离提取应用提供了可靠的基础。

一种改善糖尿病肾病的新型化合物3-(3,4-二羟基苯基)-2(1H)-喹喔啉酮

目的:糖尿病肾病(Diabetes nephropathy,DN)是导致终末期肾病的主要原因,也是糖尿病最顽固的并发症之一。活性氧(reactive oxygen species,ROS)累积导致的氧化应激促进DN的发展,因此,清除ROS是预防和治疗DN的关键方法。方法:制备了3-芳基喹喔啉酮衍生物。通过测量糖尿病模型鼠的尿蛋白水平、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)水平和肾脏谷胱甘肽(Glutathione,GSH)水平,测定该化合物DN病症改善效果。结果:3-(3,4-二羟基苯基)-2(1H)-喹喔啉酮可降低小鼠的尿蛋白、MDA水平,增加肾脏GSH水平,证实其显著的抗氧化作用,改善蛋白尿,降低氧化应激水平,缓解糖尿病肾病病理症状。结论:以上结果表明该化合物在改善DN引起的肾损伤中具有潜在作用。

Zn(Al)O复合氧化物负载Au催化剂催化氧化甘油制备1,3-二羟基丙酮

以尿素为沉淀剂,采用均匀沉积沉淀法制备了Zn(Al)O复合氧化物负载Au催化剂,并用于无碱条件下催化氧化甘油制备1,3-二羟基丙酮(DHA)反应,值得注意的是随着载体中Zn/Al摩尔比的不同,负载Au催化剂的催化活性和产物DHA的选择性呈现明显差距。结合X射线衍射(XRD)、X射线光电子能谱(XPS)、透射电镜(TEM)、CO吸附傅里叶变换红外光谱(CO吸附FTIR)等表征手段,发现载体Zn(Al)O复合氧化物中Zn/Al摩尔比会影响表面氧物种的含量并进一步会影响催化剂的催化活性和选择性。当Zn/Al摩尔比为7∶1、反应温度为80℃、氧气压力为10bar、反应2h时获得最佳的甘油转化率(58.5%)和DHA的选择性(95.3%)。同时,还考察了反应温度、反应时间、反应压力及载体的焙烧温度对催化性能的影响,并发现反应条件对催化剂的催化活性和选择性均有不同程度的影响。此外,以Au/Zn(Al)O-7∶1催化剂为基准考察了催化剂的稳定性,并通过表征手段分析了催化剂失活的主要原因。