3′-大豆苷元磺酸钠对心肌缺血/再灌注损伤及抗氧化作用的影响

目的利用离体心脏灌流模型,研究3′-大豆苷元磺酸钠对离体心脏缺血/再灌注损伤的保护作用,并探讨其抗氧化作用的机制。方法应用Langendorff离体心肌缺血/再灌注损伤模型,在灌流液中加入高、中、低剂量的3′-大豆苷元磺酸钠,测定再灌注过程中冠脉流量、左心室收缩压的变化;比色法测定心肌组织中LDH、SOD、GSH-Px的活性。结果3′-大豆苷元磺酸钠可使缺血/再灌注后心脏灌流量及左心室收缩压增大,使心肌组织中LDH、SOD、GSH-Px的活性升高。结论3′-大豆苷元磺酸钠对离体心脏缺血/再灌注损伤具有保护作用,其保护机制与其增强抗氧化作用有关。

3'-大豆苷元磺酸钠抗实验性小鼠良性前列腺增生的作用观察

目的:研究3'-大豆苷元磺酸钠(DSS)对实验性小鼠BPH及性激素平衡的影响。方法:40只雄性小鼠随机分为5组:正常对照组、BPH模型组、前列康组(阳性对照)、20mg/(kg.d)DSS组及40mg/(kg.d)DSS组,每组8只。皮下注射丙酸睾酮建立小鼠BPH模型。正常对照组给予橄榄油0.1ml/只,前列康组给予前列康5g/(kg.d),DSS组给予DSS20mg、40mg/(kg.d)灌胃。观察每组处理12d后小鼠前列腺湿重、前列腺指数、前列腺组织形态学变化和性激素水平。结果:DSS治疗12d后,与模型组相比,DSS组小鼠前列腺湿重及前列腺指数出现剂量依赖性的降低(P(0.05或P(0.01),光镜下见增生的腺上皮乳头减少或消失,腺体上皮细胞呈低立方或扁平状;血清T、E2含量和T/E2比值明显降低(P(0.05或P(0.01),40mg/(kg.d)DSS组的结果与前列康组相似。结论:DSS对丙酸睾酮所致小鼠BPH具有显著的拮抗作用,其作用机制在一定程度上与降低小鼠血清T、E2含量及T/E2比值有关。

3'-大豆苷元磺酸钠对心房自律性及收缩性的影响

目的:研究3'-大豆苷元磺酸钠对心房自律性及收缩性的影响。方法:采用豚鼠离体右心房测定3'-大豆苷元磺酸钠对其自律性、收缩幅度、收缩速度、舒张速度的影响。结果:3'-大豆苷元磺酸钠可降低豚鼠离体右心房的自律性,明显降低豚鼠离体右心房的收缩幅度、收缩速度、舒张速度。结论:3'-大豆苷元磺酸钠可抑制豚鼠离体右心房的自律性,明显降低豚鼠离体右心房的收缩幅度、收缩速度、舒张速度,且具有明显的剂量依赖性。

3′-大豆苷元磺酸钠对大鼠脑缺血/再灌注损伤的保护与抗氧化作用的影响

目的:研究3′-大豆苷元磺酸钠对大鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用,并初步探讨其保护机制与抗氧化作用的关系。方法:大鼠大脑中动脉栓塞,制作局灶性脑缺血/再灌注损伤模型,缺血后10min,于舌下静脉给不同剂量的3′-大豆苷元磺酸钠。再灌注24h后,腹腔静脉取血并分离血清,断头取脑,一组前脑做TTC染色,测定脑梗死体积,另一组左脑制成10%的脑组织匀浆。比色法测血清及脑组织匀浆SOD、LDH的活性及MDA的含量。结果:与模型组相比,各剂量的3′-大豆苷元磺酸钠治疗组脑梗死体积减小;血清及脑组织SOD的活性显著升高、MDA含量均降低;血清LDH活性明显降低,组织LDH活性降低。结论:3′-大豆苷元磺酸钠对大鼠脑缺血/再灌注损伤具有一定的保护作用,其保护机制与3′-大豆苷元磺酸钠提高抗氧化作用、增强氧自由基的清除有关。

3′-大豆苷元磺酸钠对大鼠脑缺血/再灌注损伤时IL-6的影响

目的研究3′-大豆苷元磺酸钠对大鼠脑缺血/再灌注损伤时IL-6的影响。方法大鼠大脑中动脉栓塞,制作脑缺血再灌注损伤模型,缺血后10 min,于舌下静脉给不同剂量的3′-大豆苷元磺酸钠。再灌注24 h后,断头取脑,TTC染色,测定脑梗塞体积;取前脑称湿重,烘干后称干重,计算脑组织含水量;取血2 ml,离心后,取血清,放免法测血清IL-6含量。结果与模型组相比,3′-大豆苷元磺酸钠治疗组脑梗塞体积减小,脑组织含水量降低,脑组织IL-6含量降低。结论 3′-大豆苷元磺酸钠对脑缺血再灌注损伤具有明显的保护作用,其保护机制与减少炎性细胞因子IL-6的表达有关。

3′-大豆苷元磺酸钠的体外抗氧化研究

为研究3′-大豆苷元磺酸钠(DSS)的体外抗氧化活性,测定了DSS对超氧自由基(O2-.)、羟基自由基(.OH)和1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH.)的清除能力,及其对Fe2+诱导的脂质过氧化反应和β-胡萝卜素/亚油酸自氧化体系的抑制作用。结果表明,DSS对DPPH.有一定的清除能力,对超氧自由基的清除能力较强,能很好地清除.OH自由基,对脂质过氧化有一定的抑制作用,对β-胡萝卜素/亚油酸自氧化体系有明显的抑制作用。说明DSS的药理作用可能与其较强的抗氧化能力有关。

3′-大豆苷元磺酸钠对离体心肌缺血再灌注时NO ANG Ⅱ及ANP水平的影响

目的:研究3′-大豆苷元磺酸钠(DSS)对离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用及NO、ANG Ⅱ和ANP含量的变化。方法:应用大鼠离体心肌缺血再灌注损伤模型,在灌流液中加入高、中、低剂量的DSS。测定冠脉流量、左心室收缩压及心肌组织NO、ANG Ⅱ和ANP含量的变化。结果:各剂量的3′-大豆苷元磺酸钠均能有效地增加冠脉流量,增强左心室收缩压;三种剂量的DSS均能升高心肌组织NO含量(P<0.05);高剂量的DSS使心肌组织ANG Ⅱ(P<0.05)含量降低,低剂量的DSS使ANP含量升高(P<0.05)。结论:DSS可通过增加NO、ANP的合成,减少ANG Ⅱ的释放,扩张冠脉,增强心肌收缩力,从而对离体心脏缺血再灌注损伤起保护作用。

3′-大豆苷元磺酸钠对家兔胸主动脉条收缩的影响

目的研究3′-大豆苷元磺酸钠(DSS)对家兔胸主动脉条的作用及与Ca2+的关系。方法采用常规动脉条收缩实验方法。结果DSS可使NE、KCl和CaCl2引起的家兔胸主动脉条量-效收缩曲线右移,最大效应降低,与维拉帕米(Ver)相似,是通过钙拮抗来实现的。而DSS与Ver拮抗Ca2+的方式基本相似。可选择性地阻断电压依赖性(VDC)Ca2+通道,而对受体控制性(ROC)Ca2+通道无影响。结论DSS具有选择性阻断VDCCa2+通道。

3'-大豆苷元磺酸钠对离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的利用离体心脏灌流模型,研究3'-大豆苷元磺酸钠对离体心脏缺血再灌注后损伤的保护作用。方法应用大鼠离体心肌缺血再灌注损伤模型,在灌流液中加入高、低剂量的3'-大豆苷元磺酸钠(0.03,0.01mg/L)。测定冠脉流量、心率、左心室收缩压、左心室舒张压的变化。结果3'-大豆苷元磺酸钠可使缺血再灌注后心脏灌流量增大、左心室收缩压增大、左心室舒张压降低、心率减慢。结论3'-大豆苷元磺酸钠可通过扩张冠脉、减慢心率及增强心肌收缩力对离体心脏缺血再灌注损伤起保护作用。

3’-大豆苷元磺酸钠在缺血再灌注损伤时对视网膜抗氧化能力及NOS活性的影响

目的研究3’-大豆苷元磺酸钠(DSS)在大鼠视网膜缺血再灌注损伤时对视网膜抗氧化能力及一氧化氮合酶(NOS)活性的影响。方法24只SD大鼠按随机数字表法分成4组:对照组、视网膜缺血再灌注模型组、低剂量(1mg/kg)及高剂量(2mg/kg)DSS组。颈总动脉夹闭法制作视网膜缺血再灌注模型,比色法测定血清丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)浓度及NOS、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果与对照组相比,模型组血清MDA浓度升高(P<0.05),NO浓度降低、eNOS活性降低(P<0.01)。与模型组比较,低剂量DSS组MDA浓度降低、SOD活性升高(P<0.05);高剂量DSS组GSH-Px活性升高(P<0.05),tNOS活性升高(P<0.05);DSS低剂量组(P<0.05)及高剂量组(P<0.01)NO浓度与模型组比较均升高,低剂量及高剂量DSS组eNOS活性均升高(P<0.05)。结论DSS可通过提高eNOS、SOD及GSH-Px的活性,从而提高视网膜缺血再灌注损伤时的抗氧化能力及NO的释放,降低组织细胞损伤,保护眼功能。

3'-大豆苷元磺酸钠对去卵巢大鼠骨代谢的影响

目的观察3'-大豆苷元磺酸钠对去卵巢大鼠骨代谢的影响。方法选择健康SD雌性大鼠60只,随机分成6组,每组10只:①假手术组;②卵巢切除组(模型组);③卵巢切除加尼尔雌醇组(阳性对照组);④卵巢切除加3'-大豆苷元磺酸钠低剂量组(25μg·kg-1);⑤卵巢切除加3'-大豆苷元磺酸钠中剂量组(50μg·kg-1);⑥卵巢切除加3'-大豆苷元磺酸钠高剂量组(100μg·kg-1)。连续给药6周,末次给药24 h后实验,麻醉后取血清,测定血清中骨钙素、碱性磷酸酶、抗酒石酸酸性磷酸酶和孕酮的含量。结果模型组和3'-大豆苷元磺酸钠高剂量组骨钙素分别为(5.04±0.05)和(4.82±0.05)ng·mL-1;碱性磷酸酶分别为(47.31±0.02)×10-2和(36.90±0.21)×10-2U·mL-1;抗酒石酸酸性磷酸酶分别为(1.72±0.11)和(3.02±0.13)U·L-1;孕酮分别为(49.72±2.00)和(53.41±1.12)ng·mL-1。3'-大豆苷元磺酸钠可明显降低血清中骨钙素及碱性磷酸酶的含量(P<0.01),可明显升高血清抗酒石酸酸性磷酸酶(P<0.05)和血清孕酮含量(P<0.01)。结论 3'-大豆苷元磺酸钠可促进骨形成,从而对骨代谢发挥调节作用。

3'-大豆苷元磺酸钠对大鼠脑缺血再灌注肾脏损伤保护作用的研究

目的观察3'-大豆苷元磺酸钠对大鼠脑缺血再灌注肾脏损伤保护作用的研究。方法取雄性Wistar大鼠32只,随机分为4组,每组8只,分别为假手术组,缺血再灌注组,3'-大豆苷元磺酸钠低、高剂量组。观察大鼠脑缺血再灌注后肾脏病理组织变化及有关指标改变。结果3'-大豆苷元磺酸钠对脑缺血再灌注损伤大鼠肾脏有明显保护作用,且呈一定的剂量依赖性。结论3'-大豆苷元磺酸钠对大鼠心肌缺血再灌注肾脏损伤具有一定的保护作用。

3'-大豆苷元磺酸钠对氧化低密度脂蛋白致内皮细胞损伤的保护作用研究

目的研究3'-大豆苷元磺酸钠(DSS)对氧化低密度脂蛋白诱导脐静脉内皮细胞损伤的保护作用及其机制。方法体外培养脐静脉内皮细胞,将细胞分为空白对照组、氧化损伤对照组(ox-LDL)、氧化损伤加入维生素E对照组(VE+ox-LDL)、氧化损伤加入DSS低、中、高浓度组(DSS-L、DSS-M及DSS-H组)。将ox-LDL作用于预先加入VE及不同浓度DSS预处理24 h的内皮细胞,继续培养24h,MTT法检测细胞活力,比色法检测丙二醛(MDA)及一氧化氮(NO)的含量,检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性。结果预先加入VE、中高浓度的DSS可提升损伤的内皮细胞的活力,可显著降低损伤内皮细胞的MDA及NO的释放,可显著提升损伤细胞的LDH、NOS、SOD和GSH-Px的活性,但低浓度的DSS对上述指标影响不大。结论DSS可减轻ox-LDL对血管皮细胞的氧化损伤,起到一定的抗氧化保护作用。

3’-大豆苷元磺酸钠对小鼠前列腺增生模型的实验研究

目的:研究3’-大豆苷元磺酸钠对小鼠前列腺增生的抑制作用。方法:皮下注射丙酸睾酮,制造小鼠前列腺增生模型,观察小鼠前列腺湿重、前列腺指数、光镜下前列腺形态学的变化,研究3’-大豆苷元磺酸钠对小鼠前列腺增生的抑制作用。结果:3’-大豆苷元磺酸钠能明显抑制由丙酸睾丸酮诱发的小鼠前列腺增生。结论:3’-大豆苷元磺酸钠对丙酸睾丸酮所致小鼠前列腺增生具有显著的拮抗作用。

3'-大豆苷元磺酸钠对谷氨酸引起的PC12细胞损伤的保护作用

目的:探讨3'-大豆苷元磺酸钠对谷氨酸引起的PC12细胞损伤的保护作用。方法:采用谷氨酸诱导PC12细胞损伤模型,加入不同浓度3'-大豆苷元磺酸钠处理,采用MTT法检测PC12细胞活力(细胞成活率),测定乳酸脱氢酶活性及测定超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量。结果:3'-大豆苷元磺酸钠能提高谷氨酸损伤后PC12细胞的存活率;抑制谷氨酸损伤后导致的乳酸脱氢酶活性变化;提高超氧化物歧化酶活性并降低丙二醛含量。结论:3'-大豆苷元磺酸钠对谷氨酸引起的PC12细胞损伤具有明显的保护作用。

RP-HPLC法测定大豆苷元-3′-磺酸钠含量

目的:建立反相高效液相色谱法测定大豆苷元-3′-磺酸钠及其胶囊的含量。方法:采用 Hypersil ODS(250 mm×4.0 mm,5μm)色谱柱,甲醇-10 mmol·L^(-1)磷酸二氢钾溶液(35:65)为流动相,对羟基苯甲醛为内标物,流速0.8 mL·min^(-1),检测波长为254 nm,柱温:30℃。结果:大豆苷元-3′-磺酸钠在1～40μg·mL^(-1)范围内峰面积与其浓度呈良好的线性关系(r=0.9999);样品平均回收率为99.49%。结论:该方法专属性强,结果准确,重现性好,可用于大豆苷元-3′-磺酸钠制剂含量的质量控制。

3'-大豆苷元磺酸钠对肝药酶活性的影响

目的:探讨3'-大豆苷元磺酸钠对肝药酶活性的影响。方法:(1)腹腔注射3'-大豆苷元磺酸钠(0.1 mg/kg、0.2 mg/kg),15 min后,腹腔注射阈上剂量的戊巴比妥钠(2.5 g/L,0.02 mL/g),观察小鼠翻正反射消失时间;(2)腹腔注射3'-大豆苷元磺酸钠(0.1 mg/kg、0.2 mg/kg),15 min后,腹腔注射阈下剂量的戊巴比妥钠(2.5 g/L,0.01 mL/g),观察小鼠翻正反射消失时间;(3)连续腹腔注射3'-大豆苷元磺酸钠(0.1 mg/kg、0.2 mg/kg),连续10 d。取肝脏观察小鼠肝脏系数和肝药酶(肝微粒体细胞色素P450的含量变化)含量的影响。结果:(1)3'-大豆苷元磺酸钠能显著加速阈上剂量戊巴比妥钠的入睡时间和延长戊巴比妥钠的睡眠时间。(2)3'-大豆苷元磺酸钠能显著加速阈下剂量戊巴比妥钠的入睡时间和延长戊巴比妥钠的睡眠时间。(3)3'-大豆苷元磺酸钠能提高小鼠肝药酶含量。结论:3'-大豆苷元磺酸钠对肝药酶具有诱导作用。

3′-大豆苷元磺酸钠对去血清所致海马神经元损伤的保护作用

目的：探讨3’-大豆苷元磺酸钠（3’daidzein suffocatessodium，3’-DSS）对去血清所致海马神经元损伤的保护作用。方法：取新生SD大鼠（0～24h）海马区制成单细胞悬液进行体外培养，待细胞发育成熟后，用去血清的培养基制作海马神经元损伤模型，造模同时给予3’-大豆苷元磺酸钠（3．0、10．0、30．0μmol·L^-1）处理，继续培养24h，采用MTT法检测细胞活性；并观察细胞形态的改变；取培养上清液，测定去血清海马神经元中乳酸脱氢酶（1actate dehydrogenase，LDH）活性。结果：形态学观察模型组海马神经元细胞膜边界相对模糊，细胞皱缩，神经突触回缩，少量细胞贴壁不牢；其上清液中去血清海马神经元中LDH活性升高；MTT法检测结果显示去血清海马神经元活性降低。给予3’-大豆苷元磺酸钠处理后，镜下观察可见细胞膜边界清楚，胞体饱满，神经突触回缩不明显，细胞贴壁良好；去血清海马神经元细胞活性升高，去血清海马神经元LDH活性降低。结论：3’-大豆苷元磺酸钠对去血清所致海马神经元损伤具有显著的保护作用。

3'-大豆苷元磺酸钠对前列腺癌细胞的影响

目的:通过观察3'-大豆苷元磺酸钠对前列腺癌细胞增殖和相关基因表达的影响。方法:将前列腺癌细胞在培养基(含10%小牛血清)中采用开放式单层贴壁培养,采用MTT法对前列腺癌细胞的增殖情况进行分析,对3'-大豆苷元磺酸钠作用后的雄激素非依赖型前列腺癌细胞的存活率、细胞毒作用进行了研究。结果:与对照组相比,3'-大豆苷元磺酸钠对前列腺癌细胞抑制效应具有剂量依赖性,具有诱导前列腺癌细胞凋亡和引起坏死效应,同时诱导前列腺癌细胞的(PTEN基因)表达。结论:3'-大豆苷元磺酸钠具有明显抑制前列腺癌细胞增殖效应。