基于UPLC-Q/TOF-MS分析淫羊藿炮制前后黄酮组分的变化规律

目的基于UPLC-Q/TOF-MS技术建立淫羊藿炮制前后指纹图谱,对其全成分进行分析并找出标志性化学成分,以明确淫羊藿炮制前后黄酮组分的变化规律。方法采用UPLC-Q/TOF-MS技术,在正离子模式下采集淫羊藿生品及炮制品样品数据,并在此基础上根据正交-偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)整体探究9个不同产地、批次的淫羊藿炮制前后化学成分的差异。结果从淫羊藿生品及炮制品中寻找并鉴定出9个标志性化学成分,即8-乙烯-山柰酚、淫羊藿素、淫羊藿次苷I、淫羊藿素-3-O-葡萄糖苷、异戊醇基箭藿苷B、1,3-异戊二烯基朝藿定C、1,3-异戊二烯基-箭藿苷B-7-O-葡萄糖醛酸、3-O-(4-乙酰氧基)鼠李糖-2-O-(间二乙酰氧基)葡萄糖-淫羊藿苷及其同分异构体。结论淫羊藿炮制后黄酮组分结构发生变化,次级糖苷增加,多级糖苷减少,淫羊藿黄酮组分总体向低糖苷组分转化,进一步阐明了淫羊藿加热炮制后黄酮组分的变化规律。

一测多评法测定五味健脑合剂中7种成分的含量

目的建立能同时测定五味健脑合剂中2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、6-姜辣素和8-姜酚含量的一测多评法(QAMS)。方法采用Agilent TC-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);柱温:30℃;以乙腈-1 mL·L^(-1)磷酸为流动相,梯度洗脱;流速:1.0 mL·min^(-1);检测波长分别为320(检测2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷)和270 nm(检测朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷、6-姜辣素和8-姜酚);以淫羊藿苷为内参物,测定2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、6-姜辣素和8-姜酚的相对校正因子(RCF),利用RCF计算指标性成分的含量,并与外标法(ESM)测定结果进行对比,验证QAMS的可行性。结果 7种成分分别在7.68~192.00,2.86~71.50,4.69~117.25,7.87~196.75,5.46~136.50,1.83~45.75和0.67~16.75μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r≥0.999 1),平均回收率(RSD值)分别为99.31%(0.97%),98.50%(1.25%),98.19%(1.35%),100.04%(0.67%),97.99%(1.40%),96.94%(1.29%)和97.26%(0.91%),ESM和QAMS法测定结果无明显差异。结论 QAMS评法操作便捷、结果准确、重复性好,可用于五味健脑合剂中7种成分的同时测定。

淫羊藿中不同部位及单体化合物对Aβ_(25-35)诱导的SH-SY5Y细胞损伤的影响

目的通过比较淫羊藿Epimedium brevicormon不同洗脱部位及其单体化合物对Aβ_(25-35)诱导的SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用,筛选淫羊藿活性部位和活性成分。方法淫羊藿提取物经大孔树脂柱、硅胶柱、Sephadex LH-20及制备液相的分离纯化,得到不同洗脱部位和单体化合物。运用Aβ_(25-35)体外诱导的神经细胞损伤模型,采用Hoechst33342和PI双染法,对淫羊藿的不同洗脱部位和成分进行活性筛选。结果与模型组比较,除淫羊藿95%乙醇部位外,所有洗脱部位及其中的单体化合物山柰酚-3-O-[α-L-鼠李糖基(1→6)-β-D-半乳糖苷]-7-O-α-L-鼠李糖苷、淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B均对Aβ_(25-35)所致SH-SY5Y细胞损伤有显著保护作用。结论淫羊藿对Aβ_(25-35)诱导的SH-SY5Y细胞损伤具有保护作用,其二氯甲烷-甲醇(5∶1)部位作用最强,其次是30%乙醇部位、50%乙醇部位。