3-氨基苯甲酰胺抑制糖尿病大鼠晶状体混浊的实验研究

目的:探讨PARP(聚腺苷二磷酸核糖聚合酶)抑制剂3-氨基苯甲酰胺(3-AB)对糖尿病大鼠晶状体混浊程度的影响及其可能机制。方法:Wistar大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组、3-AB干预组。糖尿病组和3-AB干预组大鼠予以腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型,正常对照组注射等体积柠檬酸盐缓冲液。建模成功后3-AB组每日按照30mg/kg给予3-AB灌胃,正常对照组和糖尿病组则给予等体积9g/L生理盐水(NS)灌胃。观察并记录各组大鼠晶状体混浊进展情况,分别于给药后2,4,8wk处死各组大鼠,取出晶状体检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性以及丙二醛(MDA)和糖基化终末产物(AGE)的含量,并检测晶状体上皮细胞中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达情况。结果:灌胃3wk时糖尿病组和3-AB组大鼠均开始出现不同程度的晶状体混浊,4wk和8wk时糖尿病组晶状体混浊程度比3-AB组重(P<0.01)。3-AB组大鼠晶状体中GSH-Px和SOD活性在2,4,8wk时均高于糖尿病组(均P<0.05),但均低于正常对照组(P<0.01)。3-AB组大鼠晶状体中MDA的含量在2,4,8wk时均低于糖尿病组(P<0.05),但均高于正常对照组(P<0.01)。糖尿病组和3-AB组大鼠晶状体中AGE含量在2,4,8wk时高于正常对照组(均P<0.05),而糖尿病组在2wk和4wk时高于3-AB组(P<0.05),但在8wk时无差异。MMP-2在正常对照组大鼠晶状体上皮细胞几乎无表达,在2,4,8wk时糖尿病组均强于3-AB组(P<0.05)。bFGF在三组大鼠晶状体上皮细胞均呈阳性表达;在2,4,8wk时,糖尿病组和3-AB组均强于正常对照组(均P<0.05),但糖尿病组与3-AB组之间无差异。结论:3-AB对STZ诱导的糖尿病大鼠晶状体混浊具有一定抑制作用,其机制可能是通过减轻STZ诱导的糖尿病大鼠晶状体上皮细胞氧化损伤,降低非酶糖基化水平,抑制晶状体上皮细胞中MMP-2的表达,减轻晶状体上皮细胞外基质降解,从而抑制晶状体混浊。

3-氨基苯甲酰胺影响糖尿病大鼠晶状体上皮细胞NF-κB表达的免疫组化研究

目的观察聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)抑制剂3-氨基苯甲酰胺(3-AB)对早期糖尿病(DM)大鼠模型晶状体上皮细胞中核因子κB(NF-κB)表达的影响。方法采用一次性腹腔注射1%链脲佐菌素(STZ)50 mg/kg建立DM大鼠模型。成模后将大鼠随机分为正常对照组(N组)、糖尿病组(DM组)和干预组(DM+P组)。自建立模型后第3天起,DM+P组每日给予3-AB 30 mg/kg灌胃,N组和DM组每天给予等体积0.9%生理盐水灌胃。分别于给药后2、4、8周处死各组大鼠,取出晶状体,免疫组化SP法检测晶状体上皮细胞中NF-κB P65的表达情况。结果 DM 2、4、8周组大鼠晶状体上皮细胞NF-κB P65表达较相应时间点的N组高;DM+P 2、4、8周组大鼠晶状体上皮细胞NF-κB P65表达较相应时间点的N组高;DM+P 2、4、8周组与相应时间点DM组比较,晶状体上皮细胞NF-κB P65表达降低。结论 PARP抑制剂3-AB可以抑制早期糖尿病大鼠晶状体上皮细胞中NF-κB的表达。

3-氨基苯甲酰胺减轻骨骼肌缺血再灌注损伤的实验研究

目的研究3-氨基苯甲酰胺(3AB)对鼠骨骼肌缺血再灌注损伤的保护作用,以及组织中凋亡和胀亡的存在情况。方法54只SD大鼠随机分为空白对照组、缺血再灌注组、3AB组,持续缺血4 h,再灌注6、24和48 h。检测血浆乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸磷酸激酶(CPK)活性,肌肉内丙二醛(MDA)含量、总超氧化物歧化酶(SOD)活性,进行组织学、免疫组化、超微结构分析。结果3AB组在再灌注24 h和48 h时,在MDA含量下降、SOD活性升高、骨骼肌湿重与干重比值下降、组织学改变范围及免疫组化阳性范围方面,均与缺血再灌注组有明显差异。结论再灌注开始时应用3AB对于缺血再灌注损伤有明显的保护作用,主要体现在再灌注的稍后期阶段(再灌注24 h和48h)。缺血再灌注过程中,凋亡和胀亡是并存的。

3-氨基苯甲酰胺联合顺铂抑制骨肉瘤细胞生长的作用

目的探讨聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶-1[poly(ADP-ribose)polymerase-1,PARP-1]抑制药3-氨基苯甲酰胺(3-aminobenzamide,3-AB)联合顺铂对骨肉瘤细胞U2OS的生长抑制作用。方法 CCK-8法检测单独应用顺铂及与3-AB联合应用时U2OS细胞增殖的抑制情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况并分析细胞周期。结果 3-AB与顺铂联用的半数抑制浓度(IC50)比单独应用顺铂低,增敏比1.76,流式细胞术结果显示3-AB联合顺铂处理后细胞的凋亡率较单纯3-AB、顺铂处理的凋亡率高,细胞周期分析结果示3-AB联合顺铂处理较单纯顺铂处理S期阻滞时间更长。结论 PARP-1抑制药3-AB能增强顺铂对骨肉瘤细胞的增殖抑制及促凋亡作用。

3-氨基苯甲酰胺对大鼠心肌梗死后心力衰竭心肌细胞细胞因子、多聚ADP核糖聚合酶和凋亡诱导因子蛋白表达的影响

目的:研究多聚ADP核糖聚合酶(PARP)阻滞剂3-氨基苯甲酰胺(3-AB)对心力衰竭(HF)大鼠心肌白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及对PARP和凋亡诱导因子(AIF)蛋白表达的影响。方法:结扎135只成年雄性Wistar大鼠冠状动脉前降支6周制备HF模型,随机分为HF组、3-AB治疗组(3-AB组)和Sham组。治疗组应用3-AB治疗(30 mg/kg)。治疗2、4、6周后采用放射免疫法测定大鼠心肌IL-10、TNF-α水平,采用免疫组化方法检测心肌PARP和AIF蛋白表达变化。结果:IL-10水平变化:与Sham组相比,HF组各时间点明显增高(P<0.05),3-AB组较HF组各相同时间点明显降低(P<0.05);TNF-α水平:HF组各时间点均较Sham组明显增高(P<0.05),而3-AB组较HF组各相同时间点明显降低(P<0.05)。PARP蛋白表达:HF组各时间点均较Sham组增加(P<0.05),3-AB组各时间点均较HF组明显减少(P<0.05)。AIF蛋白表达:HF组各时间点较Sham组增加,3-AB组各时间点较HF组明显减少(P<0.05)。结论:3-AB可抑制IL-10、TNF-α的释放;抑制PARP和AIF蛋白表达,从而抑制炎症反应和细胞凋亡,对HF大鼠心肌细胞发挥保护作用。

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂3-氨基苯甲酰胺对重症急性胰腺炎大鼠腺垂体损伤的保护作用

目的 探讨聚腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂3-氨基苯甲酰胺（3-AB）对SAP大鼠腺垂体的保护作用.方法 雄性Wistar大鼠40只,随机分为4组：假手术组（SO组,n=8）、重症急性胰腺炎模型组（severe acute pancreatitis model group,SAP组,n=12）,3-AB预处理组（3-AB组,n=12）和3-AB药物对照组（药物对照组,n=8）.SAP组大鼠胆胰管逆行注射5％牛磺胆酸钠制备重症急性胰腺炎模型,3-AB组造模同SAP组,在造模前30 min股静脉注射3-AB（20 mg/kg）,SO组仅翻动胰腺后关腹,药物对照组仅行股静脉注射3-AB（20 mg/kg）,余同SO组.全自动生化仪检测各组血清淀粉酶及脂肪酶水平.HE染色观察各组胰腺组织及腺垂体病理改变.以PARP抗体及NF-KB抗体行腺垂体免疫组化染色,并对阳性表达行定量分析.电镜下观察腺垂体细胞超微结构改变.结果 与SO组相比,SAP组大鼠血淀粉酶、脂肪酶水平明显升高（P＜0.05）,SAP组胰腺病理评分显著高于SO组（P＜0.05）.3-AB组淀粉酶、脂肪酶及胰腺病理评分显著高于SO组（P＜0.05）,但均较SAP组降低（P＜0.05）.药物处理组上述指标与SO组无差别.SAP组腺垂体光镜下可见损伤严重,3-AB组光镜下腺垂体病理损伤较SAP组减轻.免疫组化示SAP组PARP及NF-KB在细胞核内高表达,3-AB组腺垂体PARP及NF-KB表达较SAP组显著降低（P＜0.05）.电镜下可见3-AB组腺垂体细胞超微结构改变较SAP组减轻.光镜及电镜下,SO组和药物对照组均无明显改变.结论 3-AB可通过抑制PARP及下游NF-KB表达,对重症急性胰腺炎大鼠腺垂体损伤起保护作用.

3-氨基苯甲酰胺诱发中国仓鼠Wg3-h的SCE

用ADP核糖多聚酶的竞争性抑制剂——3-氨基苯甲酰胺(3-aminobenza-mide,3AB)诱发中国仓鼠Wg3-h的姐妹染色体互换(SCE)。结果表明,3AB能间接地抑制DNA连接酶Ⅱ的活力,使BrdU(5-溴脱氧鸟嘧啶核苷)切除DNA后形成的单链断裂或连接延迟,导致SCE。用3AB处理BrdU加入后的第2个细胞周期,能增加诱发SCE的频率。

3-氨基苯甲酰胺对人食管癌细胞放射增敏作用的实验研究

目的探讨多聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP）抑制剂3-氨基苯甲酰胺（3-AB）对人食管癌细胞株CaEs-17的放射增敏作用及其机制。方法利用人食管癌细胞CaEs-17为靶细胞，给予0、2．5、7．5mmol／L3-AB及0、3、6、9、12Gy照射剂量，采用集落形成法及噻唑蓝（MTT）法观察3-AB的放射增敏效应；彗星电泳法、中期染色体分析法分别观察3-AB对放射所致细胞DNA断裂及细胞染色体畸变的影响。结果根据多靶单击数学模型拟合细胞存活曲线，得出2．5、7．5mmol／L3-AB作用于CaEs-17细胞24h的放射增敏比分别为1．21和1．52；MTT实验结果显示3-AB可降低放射细胞的存活分数；3-AB可增加放射所致细胞DNA断裂程度以及放射所致细胞染色单体断裂数。结论3-AB对体外培养人食管癌细胞株CaEs-17有一定放射增敏效应；放射增敏的机制可能与3-AB抑制PARP的功能从而降低细胞对放射所致DNA断裂的修复水平有关。

3-氨基苯甲酰胺衍生物PARP-1抑制剂的设计合成及活性评价

目的设计合成新型结构的聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP-1)抑制剂并评价其对PARP-1的抑制活性。方法基于已有构效关系和药效团特征设计了一系列3-氨基苯甲酰胺类化合物;以3-氨基苯甲酰胺或2-氟-5-氨基苯甲酰胺为起始原料与N-Boc保护的含氮脂环羧酸反应,经缩合、脱除Boc保护基、还原胺化反应合成目标化合物。利用NAD^+化学定量法评价目标化合物对PARP-1的抑制活性。结果合成了30个未见文献报道的3-氨基苯甲酰胺类衍生物,目标化合物的结构经~1H-NMR、LC-MS谱确证,其中20个化合物对PARP-1具有一定的抑制活性(IC_(50)值为0.19~7.58μmol·L^(-1))。结论初步探讨了该类化合物的构效关系,利用分子对接方法探索了目标化合物与PARP-1的作用模式,以期为进一步结构改造提供参考。

2-氨基-5-氰基-N,3-二甲基苯甲酰胺合成方法改进

从3-甲基氨茴酸出发,用氯化亚砜取代光气及其衍生物,通过2种不同的反应途径,高收率地合成了氰虫酰胺的关键中间体2-氨基-5-氰基-N,3-二甲基苯甲酰胺(1)。考察了不同形态的甲胺、反应温度、溶剂以及不同的吡啶衍生物对反应的影响。

3-氨基苯甲酰胺对心肌缺血再灌注大鼠心肌损伤的保护作用研究

目的探究3-氨基苯甲酰胺预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MIRI)的保护作用。方法大鼠通过结扎左前降支血管实现缺血,缺血40 min后将结扎线松解,实现再灌注120 min,建立MIRI模型;取10只为假手术组(只穿线不结扎)。将模型大鼠随机分为模型组、对照组和实验组,每组10只。对照组于缺血40 min后,腹腔注射20 mg·kg^(-1)3-AB,实现再灌注120 min后再次腹腔注射20 mg·kg^(-1)3-AB;实验组于再灌注120 min后腹腔注射20 mg·kg^(-1)3-AB+1 mg·kg^(-1) AG490;模型组和假手术组均腹腔注射等量0.9%NaCl。比较各组血清心肌酶谱水平,心肌细胞凋亡情况,并用蛋白质印迹法检测核酶多腺苷二磷酸核糖聚合酶1(polyadenosine diphosphate ribose polymerase 1,PARP-1)蛋白及Janus激酶2/转录激活因子3(Janus kinase 2/activator of transcription 3,JAK2/STAT3)通路蛋白的表达水平。结果实验组、对照组、模型组和假手术组的乳酸脱氢酶分别为(5061.83±759.13),(4533.79±680.08),(5737.93±860.68)和(4135.26±620.30)U·L^(-1),肌酸激酶同工酶水平分别为(579.77±86.96),(516.58±77.50),(656.87±98.53)和(496.35±75.46)U·L^(-1),心肌细胞凋亡率分别为(19.33±3.68)%,(13.58±2.06)%,(26.96±4.05)%和(9.87±1.47)%,心肌组织PARP-1蛋白相对表达水平分别为0.89±0.15,0.57±0.09,1.12±0.17和0.33±0.05,p-JAK2/JAK2分别为0.50±0.08,0.67±0.11,0.25±0.03和0.96±0.15,p-STAT3/STAT3分别为0.45±0.07,0.80±0.13,0.16±0.03和0.99±0.15。实验组和对照组的上述指标与模型组比较,实验组的上述指标与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论3-氨基苯甲酰胺预处理可通过下调PARP-1表达,促进JAK2/STAT3通路活化,进而抑制心肌细胞凋亡,从而发挥对大鼠MIRI的保护作用。

含七氟异丙基的3-酰氨基苯甲酰胺类化合物的合成及杀虫活性

设计合成了一系列新颖的含七氟异丙基的3-酰氨基苯甲酰胺类化合物,其结构均经核磁共振氢谱、质谱和高分辨质谱确证。初步生物活性测试结果表明,在20 mg/L下,部分化合物对小菜蛾Plutella xylostella具有较高的杀虫活性,其中8j在4 mg/L下对小菜蛾的致死率达100%。

清除2-氨基-5-氰基-N,3-二甲基苯甲酰胺上黏附的铜离子的方法

使用络合剂法脱除2-氨基-5-氰基-N,3-二甲基苯甲酰胺工业产品(染料和药物中间体,简称产品A)中黏附的少量铜离子,以便进一步合成为分散染料。首先通过单因素实验研究络合剂种类及用量、处理时间、温度、溶剂、加料方式等因素对除铜效果的影响,再通过正交试验确定除铜的最优工艺条件。得出处理5 g样品A的最佳工艺为:以氨三乙酸(NTA)为络合剂,其用量n_(NTA)为3 mmol,溶剂(24 mL)体积比V_(甲醇)∶V_水为2∶1,温度40℃、时间1.5 h;采用等离子发射光谱法测定铜的去除率达到96%以上,并且该除铜方法对产品A造成的损失很小。

2-氨基-5-溴-N,3-二甲基苯甲酰胺的合成工艺研究

以3-甲基-2-硝基苯甲酸为原料,经酰氯化、甲胺化、FeO(OH)催化水合肼还原、双氧水/氢溴酸氧化溴化,得到目的产物2-氨基-5-溴-N,3-二甲基苯甲酰胺,目标产物及中间体经1 H NMR进行了结构确证,四步反应总收率为85%。

2-氨基-5-溴-N,3-二甲基苯甲酰胺的电化学合成

在单室电解池中,金属铂片为阴阳电极,稀硫酸为支持电解质,40%氢溴酸为反应物,THF为溶剂,室温,2-氨基-N,3-二甲基苯甲酰胺在1.3~2.0 V电压下恒电流电解可以高产率地合成2-氨基-5-溴-N,3-二甲基苯甲酰胺。经反应条件优化,2-氨基-N,3-二甲基苯甲酰胺电化学溴化的最佳条件为:支持电解质为H2SO4,浓度为10%、40%HBr用量为8.0 mL,电流密度0.4 A,在此条件下反应电压为1.32~1.65 V,溴化产物收率为97.3%,电流效率为88.3%。

3-(2-氧代-2-取代)乙酰氨基苯甲酰胺类PARP-1抑制剂的设计、合成及活性评价

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1[poly（ADP-ribose）polymerase-1,PARP-1]能够催化ADP-核糖单元从烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide,NAD＋）转移至受体蛋白,参与单链受损DNA的修复,是一种潜在的抗癌药物靶点。本文设计并合成了3-（2-氧代-2-取代）乙酰氨基苯甲酰胺类化合物16个,评价了所有目标化合物对PARP-1酶的抑制活性。其中6个化合物对PARP-1显示出了一定的抑制活性（0.23~5.78μmol·L-1）。初步探讨了该类化合物的构效关系,利用分子对接方法探索了目标化合物与PARP-1的作用模式,为进一步结构改造提供了依据。

氯虫苯甲酰胺关键中间体2-氨基-5-氯-N,3-二甲基苯甲酰胺合成方法的改进

[目的]研发适合工业化生产氯虫苯甲酰胺关键中间体2-氨基-5-氯-N,3-二甲基苯甲酰胺的工艺。[方法]以3-甲基-2-硝基苯甲酸为起始原料,经加氢、环合、胺解和氯化4步反应得到目标化合物。[结果]4步反应总收率为77.6%,产品含量为98.3%。[结论]该方法原料廉价易得、操作简单、反应条件温和,具有工业化应用前景。

N-[(吡啶-3-基)亚甲基]-4-氨基苯甲酰胺的合成及晶体结构

以对硝基苯甲酸为起始原料,经氯代、氨解、还原合成了N-[(吡啶-3-基)亚甲基]-4-氨基苯甲酰胺。通过熔点、元素分析、IR、1H NMR对其进行表征。利用Fe粉/醋酸和铁(Ⅱ)酞菁/NaBH4两种还原法,将中间产物分子中的硝基选择性还原为氨基,同时分子内的酰胺键不受影响,并获到了较高的收率。X-射线单晶衍射测定了其晶体结构,结果表明它属于单斜晶系,P21空间群,晶胞参数为:a=0.6324(8)nm,b=0.8739(11)nm,c=1.0281(12)nm,β=91.79(2)°,Z=2,V=0.5679(12)nm3,Dc=1.329g.cm-3,F(000)=240,μ=0.088mm-1,R1=0.0761,WR2=0.2120,S=1.044。

3-酰胺苯甲酰胺衍生物的合成及体外抗肿瘤活性的初步研究

目的合成一类新型3-酰胺苯甲酰胺衍生物并研究其体外抗肿瘤活性。方法以2-甲基-5-氨基苯甲酸和2-氯-5-氨基苯甲酸等为起始原料,经过氨基Boc保护、羧基形成酰胺、脱保护基、酰化等反应得到目标化合物;采用MTT法在前列腺癌细胞PC-3、人卵巢癌细胞SKOV-3、人结直肠癌细胞HCT116、人肝癌细胞Hep-G2、人恶性黑色素瘤细胞A375、人肺癌细胞A549和慢性髓细胞性白血病细胞K562等细胞株上进行了体外抗肿瘤活性的测试。结果与结论合成了9个新型化合物,并经1HNMR、MS确证了化学结构。初步的体外抗肿瘤活性显示:化合物Ⅳh和Ⅳi显示出对白血病细胞有较好的活性。

3-芳酰氨基-4-甲氧基苯甲酰胺类化合物的合成及体外抗血小板聚集活性研究

目的为寻找抗血小板聚集活性更高的药物,参照吡考他胺的构效关系和贝曲西班的官能团特征,设计并合成9个未见文献报道的3-芳酰氨基-4-甲氧基苯甲酰胺类化合物。方法以3-硝基-4-甲氧基苯甲酸为起始原料,与二氯亚砜反应制得中间体3-硝基-4-甲氧基苯甲酰氯,该中间体与不同取代基的苯胺反应生成3-硝基-4-甲氧基苯甲酰胺类化合物,将该类化合物中的硝基分别还原为氨基,然后与4-甲氧基苯甲酰氯反应制得目标化合物4a-4i。目标化合物的结构经1H-NMR、13C-NMR和ESI-MS谱确证。以阿司匹林和吡考他胺为阳性对照药,ADP为诱导剂,采用Born比浊法对目标化合物进行体外抗血小板聚集活性评价;再根据体外抗血小板聚集活性结果,采用CCK-8法对活性较好的目标化合物进行体外细胞毒性测试。结果与结论药理活性实验结果表明,在130μmol·L-1浓度下,4个化合物4a、4c、4g、4i的抗血小板聚集活性优于阳性对照药吡考他胺,其中化合物4c的活性最高。细胞毒性实验结果表明,在10μmol·L-1浓度下,待测化合物几乎没有明显的细胞毒性。构效关系表明,在侧链苯环邻位或对位引入氟原子或溴原子获得的化合物的活性较高。