磷脂酰肌醇-3-激酶抑制剂相关高血糖症1例并文献复习

目的探讨因使用阿培利司(Alpelisib,ALP)导致磷脂酰肌醇-3-激酶抑制剂(Phosphatidylinositol-3-Kinase Inhibitor,PI3Ki)相关高血糖症患者的临床特点。方法回顾分析1例确诊为PI3Ki相关高血糖症患者的临床资料,并复习相关文献。结果本例患者具有雌激素受体阳性(HR+)、人表皮生长因子受体2-阴性(HER2-)、PIK3CA突变乳腺癌病史,接受阿培利司治疗后,出现高血糖伴高胰岛素血症,入院予以二甲双胍、达格列净以及胰岛素治疗后,血糖控制可。结论PI3Ki相关高血糖症是阿培利司治疗最常见的副作用,建议使用阿培利司前行糖尿病危险因素筛查,并于治疗中密切监测血糖,尽早识别,及时干预,避免严重并发症发生。

磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂对分化的HL-60细胞凋亡的诱导

目的 探讨磷脂酰肌醇 3 -激酶 (phosphatidylinositol 3 -kinase ,PI3 -K)抑制剂对分化的人急性粒细胞白血病HL -60细胞生存的影响。方法 流式细胞仪检测分化抗原CD11b的表达 ,以确定分化程度 ;DNA梯形条带电泳确定凋亡 ;流式细胞仪分选分化与未分化细胞 ,并检测凋亡。结果 1μmol/L全反式维甲酸 (all-transretinoicacid ,ATRA)ATRA处理HL -60细胞 12 ,2 4,48h后 ,CD11b的阳性率分别为 2 0 2 % ,3 1 1% ,64 5 % ;经ATRA处理过的HL -60细胞中加入PI3 -K的抑制剂wortmannin( 1μmol/L) 2h ,在琼脂糖凝胶电泳上可见凋亡细胞特征性的“梯形”带 ;流式细胞仪分选出分化与未分化细胞后 ,在分化细胞中加入wortmannin( 1μmol/L) 2h ,PI染色流式细胞仪直方图上可见亚二倍体峰。结论 全反式维甲酸诱导分化的HL -60细胞的生存是依赖于PI3

磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂抗肿瘤临床研究进展

对磷脂酰肌醇3-激酶(Phosphatidyl inositol 3-kinase,PI3K)抑制剂作为抗肿瘤药物的临床研究进展作一综述。PI3K在细胞生长,增殖和凋亡等过程中起重要调节作用,与乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌等肿瘤的发生发展密切相关。因此,PI3K已成为很有前途的癌症治疗靶标,超过10多种PI3K抑制剂作为抗肿瘤药物已进入临床研究。

磷脂酰肌醇-3激酶抑制剂LY294002增加紫杉醇对肺癌裸鼠移植瘤的治疗作用

背景与目的目前越来越多的证据表明PI3K/AKT的异常活化参与人类肿瘤的发生发展,因此针对PI3K/AKT路径有望成为肿瘤治疗的策略。此研究旨在观察PI3K抑制剂LY294002联合紫杉醇对肺癌裸鼠移植瘤的抗肿瘤作用,初步探讨其可能的作用机制,为临床有效治疗肺癌提供实验资料。方法将实验动物随机分为3组,即肺癌模型组、紫杉醇治疗组及LY294002与紫杉醇联合治疗组。皮下接种A549肺腺癌细胞建立肺癌裸鼠皮下移植瘤模型,定期测量动物体重及肿瘤直径;应用免疫组织化学方法分析CyclinD1及bcl-2,bax蛋白水平的表达。结果LY294002与紫杉醇联合治疗组对肺癌裸鼠移植瘤抑制作用较对照组及紫杉醇治疗组均明显增强(P<0.01);瘤组织bax蛋白表达水平较对照组及紫杉醇治疗组均增强(P=0.021,P=0.001),而bcl-2蛋白表达水平较对照组明显降低(P=0.014)。CyclinD1表达较对照组及紫杉醇治疗组均明显降低(P=0.000,P=0.002)。结论LY294002可显著增强紫杉醇对肺癌的治疗作用。LY294002增强bax、抑制CyclinD1表达可能是肿瘤细胞增殖受抑的重要原因。

磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂LY29400联合吲哚-3-甲醇对人甲状腺未分化癌细胞FRO增殖的抑制作用

目的:研究磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂LY29400(简称LY)联合吲哚-3-甲醇(I3C)对人甲状腺未分化癌细胞FRO增殖的抑制作用。方法:取对数生长期FRO细胞,分为空白对照组、I3C(250μmol/L)组、LY(10μmol/L)组和联用(I3C 250μmol/L+LY 10μmol/L)组,药物作用24、48、72 h。采用MTT法测定并计算各组细胞的增殖抑制率;流式细胞术检测作用48 h后的细胞凋亡率;Western blot法检测作用48 h后半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)蛋白的表达;免疫组化法检测作用48 h后Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果:细胞增殖抑制率随药物作用时间的延长而明显升高,联用组各时间点间差异具有统计学意义(P<0.05)。与I3C组和LY组比较,联用组细胞的增殖抑制率、细胞凋亡率和Caspase-3、Bax蛋白表达均增强,Bcl-2蛋白表达和Bcl-2/Bax均降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:LY与I3C联用对FRO细胞的增殖具有协同抑制作用,其机制可能与下调Bcl-2表达、上调Bax表达、激活Caspase级联反应诱导细胞凋亡有关。

糖原合成酶激酶-3β及其抑制剂研究进展

综述糖原合成酶激酶-3β与2型糖尿病、阿尔茨海默病、肿瘤等疾病发生发展的关系及其抑制剂的研究和开发。糖原合成酶激酶是普遍存在于真核细胞中的一种多功能丝氨酸/苏氨酸激酶,参与多条细胞信号传导通路,其作用主要包括调节糖原的合成代谢、细胞的分化与增殖以及基因表达,它的活性异常与多种疾病的发生发展有着密切的关系,已成为备受关注的药物靶点。

糖原合成酶激酶-3抑制剂在骨质疏松性疾病治疗中的作用研究进展

骨质疏松症是一种全身性代谢性疾病,其主要特征为骨密度降低,易引发骨质疏松性骨折等疾病。糖原合成酶激酶-3抑制剂能够抑制糖原合成酶激酶-3活性,从而促进Wnt信号转导通路及其下游基因、蛋白的表达,主要通过促进骨髓间充质干细胞、成骨细胞增殖和分化的同时抑制破骨细胞活性,共同调节骨细胞微环境来实现对骨质疏松性疾病的治疗。现就糖原合成酶激酶-3抑制剂在骨质疏松性疾病治疗过程中的作用研究进展做一综述。

磷脂酰肌醇3-激酶γ抑制剂AS605240对系统性红斑狼疮患者外周血T细胞增殖、黏附和趋化的调控研究

目的:研究磷脂酰肌醇3-激酶γ(PI3Kγ)抑制剂AS605240对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血T淋巴细胞增殖、黏附和趋化的影响,并初步探讨其机制。方法:搜集SLE患者35例,健康人17例为正常组,外周血T细胞分离采用Rosettsep T细胞提取试剂盒;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖,Transwell小室检测T细胞趋化性,丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)活性检测采用免疫印迹法。结果:AS605240显著抑制SLE患者外周血T细胞体外增殖、黏附活性,并呈浓度依赖关系,当AS605240浓度达到10^(-5)mol/L时差异有统计学意义(P<0.01),AS605240显著抑制SLE患者外周血T细胞体外趋化活性(P<0.01);SLE患者外周血T细胞AKT磷酸化水平显著高于正常组(P<0.05),AS605240处理组T细胞的AKT活性显著降低(P<0.05)。结论:P13Kγ抑制剂AS605240显著降低SLE患者外周血T细胞增殖、趋化和黏附活性,与抑制AKT异常活化相关。

磷酸肌醇3-激酶δ抑制剂Idelalisib的合成工艺研究

目的磷酸肌醇3-激酶δ抑制剂Idelalisib的合成工艺研究。方法以2-氟-6-硝基苯甲酸为起始原料,通过缩合、硝基还原、缩合、脱水环合脱保护、取代和重结晶最终得到目标产物Idelalisib。结果本路线共5步反应,反应总收率为40.1%,终产品HPLC含量质量分数为99.9%。目标产物和部分中间体结构均经MS、1H-NMR和13C-NMR确证。结论该路线具有原料易得,反应条件温和,对环境污染较小,操作简单等优点,适合工业化生产。

GSK3β抑制剂对糖尿病肾病大鼠CTGF和ICAM-1的影响

目的观察糖原合成激酶-3β(GSK3β)抑制剂对糖尿病肾病大鼠的肾脏保护作用,探讨其可能机制。方法将实验大鼠随机分为正常对照组(NC组)、GSK3β抑制剂(CI)、糖尿病模型组(DM组)和糖尿病GSK3β抑制剂治疗组(DI)。糖尿病大鼠GSK3β抑制剂治疗组干预治疗后,处死大鼠,检测24 h尿蛋白、血清肌酐(Scr);肾脏组织切片行PAS染色,观察大鼠肾脏病理改变;用免疫组化(IHC)方法检测结缔组织生长因子(CTGF)在肾脏中的表达,测量血清中细胞间黏附分子(ICAM)-1含量。结果 GSK3β抑制剂可以减轻糖尿病大鼠肾脏病理功能改变。与NC组相比,DM组大鼠CTGF蛋白表达增强(均P<0.01);血清中ICAM-1水平升高(均P<0.01)。与DM组相比,DI组大鼠CTGF蛋白表达下降(均P<0.01);血清中ICAM-1水平下降(均P<0.01)。结论 GSK3β抑制剂可以通过抑制糖尿病大鼠肾脏纤维化,降低结缔组织生长因子(CTGF)表达,减轻糖尿病大鼠肾脏病理改变。通过抑制炎症反应,降低血清中ICAM-1含量,发挥肾脏保护作用。

二苯乙烯苷调控PI3K/AKT信号通路干预SH-SY5Y细胞凋亡的机制研究

目的:探讨二苯乙烯苷(TSG)经PI3K/AKT通路对冈田酸诱导的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)凋亡的影响及调控机制。方法:CCK-8法筛选OA最佳浓度,将SH-SY5Y细胞分为对照组、模型组、TSG组、LY294002组和LY294002+TSG组。通过CCK-8法和TUNEL法检测各组细胞增殖和凋亡情况;Western blotting法和qRT-PCR法检测PI3K、P-PI3K(Y607)、AKT、P-AKT(Ser473)、Bcl-2、Bax蛋白及mRNA表达情况,通路及凋亡蛋白相对表达量以P-PI3K(Y607)/PI3K、P-AKT(Ser473)/AKT、Bcl-2/Bax灰度比值表示。结果:OA最佳处理浓度为40 nmol/L。与对照组相比,模型组细胞活力降低,细胞凋亡率升高,通路及凋亡蛋白、PI3K、AKT、Bcl-2 mRNA表达水平降低,Bax mRNA表达水平升高(均P<0.05);与模型组相比,TSG组细胞活力升高,细胞凋亡率降低,通路及凋亡蛋白、PI3K、AKT、Bcl-2 mRNA相对表达水平升高,Bax mRNA表达水平降低(均P<0.05),LY294002组细胞活力降低,细胞凋亡率升高,P-PI3K(Y607)/PI3K蛋白表达水平显著降低(P<0.05)、P-AKT(Ser473)/AKT、Bcl-2/Bax蛋白表达水平较明显降低,但未有统计学意义,PI3K、AKT、Bcl-2 mRNA表达水平降低,Bax mRNA表达水平升高(均P<0.05);与LY294002组相比,LY294002+TSG组细胞活力升高,细胞凋亡率降低,通路及凋亡蛋白相对表达水平、PI3K、AKT、Bcl-2 mRNA升高,Bax mRNA表达水平降低(均P<0.05)。结论:二苯乙烯苷可能通过干预PI3K/AKT信号通路,进而调节Bcl-2、Bax等凋亡因子的表达,从而缓解冈田酸诱导的SH-SY5Y细胞凋亡。

GSK-3β抑制剂对体外培养多囊卵巢综合征患者卵巢颗粒细胞睾酮分泌过多的影响

目的探讨糖原合成酶激酶-3(GSK-3)抑制剂SB216763改善多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵巢颗粒细胞睾酮(T)分泌异常的作用机制。方法将行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的20例不孕妇女按发病原因分为三组,其中不孕原因为输卵管及男方因素的非PCOS患者8例为对照组,PCOS不孕患者12例平均分为PCOS组和GSK-3β抑制剂组,每组6例。对照组及PCOS组患者的卵巢颗粒细胞进行体外培养48 h,利用放射免疫法检测细胞上清液中的雌二醇(E2)、孕酮(P)、T的水平。GSK-3β抑制剂组用浓度为5、10、25、50、100μmol/L的GSK-3β抑制剂SB216763对体外培养的PCOS患者卵巢颗粒细胞进行干预,后继续培养48 h,检测细胞上清液中的E2、P、T的水平。结果 (1)PCOS组与对照组患者相比其卵巢颗粒细胞中T分泌明显升高(P<0.01),而P和E2的表达变化不大(P>0.05)。(2)GSK-3β抑制剂组PCOS患者卵巢颗粒细胞给予不同浓度的GSK-3β抑制剂SB216763作用后,与PCOS组相比,T平明显下降(P<0.05)。(3)GSK-3β抑制剂SB216763浓度为5μmol/L时对PCOS患者卵巢颗粒细胞T分泌的抑制作用最明显(P<0.01)。结论 PCOS患者卵巢颗粒细胞T分泌异常增高,GSK-3β抑制剂SB216763能够抑制其T的过多分泌。

GSK-3β抑制剂对糖尿病肾病大鼠肾组织病理、NF-κB及TGF-β1的影响

目的探讨糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)抑制剂对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织病理、核因子-κB(NF-κB)及转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响。方法将36只SD大鼠分为Tz组(DN模型)、Ty组(GSK-3β抑制剂干预)和Wt组(正常大鼠)各12只,观察比较3组大鼠24 h尿蛋白水平。采用苏木精-伊红(HE)染色观察肾组织结构改变情况,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测NF-κB mRNA表达水平,免疫组织化学(免疫组化)检测TGF-β1阳性表达情况,Western blot法检测NF-κB、TGF-β1蛋白的表达情况。结果Tz组及Ty组大鼠24 h尿蛋白水平均高于Wt组,Ty组大鼠24 h尿蛋白水平低于Tz组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Wt组大鼠肾组织内细胞结构、形态较完整,未观察到增生、肥大的细胞;Tz组大鼠肾小球、系膜基质生长异常,毛细血管管腔、肾小管管腔凹陷、阻塞,伴有间质水肿;Ty组大鼠肾小球和肾小管病变程度较Tz组有明显好转。Tz组、Ty组NF-κB、TGF-β1 mRNA水平高于Wt组,Ty组NF-κB、TGF-β1 mRNA水平低于Tz组,差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫组化检测结果显示,Tz组TGF-β1阳性表达最高,Wt组TGF-β1阳性表达最低,Ty组TGF-β1阳性表达较Tz组明显降低,但高于Wt组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Tz组及Ty组NF-κB、TGF-β1蛋白表达水平高于Wt组,Ty组NF-κB、TGF-β1蛋白表达水平低于Tz组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论GSK-3β抑制剂能减缓糖尿病肾病大鼠肾损伤程度,降低肾组织中NF-κB和TGF-β1的表达。

基于中草药活性成分的GSK-3β抑制剂的分子模拟

使用分子对接和分子动力学方法,研究了一类中草药活性成分抑制糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)的机理。结果表明:筛选出的芦丁、杨酶酮、二氢丹参酮I和人参皂苷Rb1能够与GSK-3β良好地结合,其中芦丁、杨酶酮和二氢丹参酮I主要结合于GSK-3β的ATP结合口袋区域,人参皂苷Rb1主要结合于GSK-3β的T-loop区域,配体和蛋白之间形成的氢键的数目和存活率是影响结合能力的主要因素,氢键的形成主要取决于配体中的含氧和含氮基团。基于这些有效成分进行结构设计可能获得GSK-3β的高效抑制剂。

抗肾癌药物吡啶杂环类PI3K抑制剂的三维定量构效关系研究

目的:研究抗肾癌药物吡啶杂环类磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂的三维定量构效关系(3D-QSAR),为新型抗肾癌药物的设计与研发提供参考。方法:收集30个吡啶杂环类PI3K抑制剂分子的结构和活性值[即半数抑制浓度的负对数(p IC50)]数据,使用Sybyl-X 1.1软件进行分子叠合后,构建比较分子力场分析(Co MFA)和比较分子相似性分析(Co MSIA)模型,对PI3K抑制剂分子的立体场、静电场、疏水场、氢键供体场和氢键受体场进行考察;使用Sybyl-X 1.1软件进行分子对接,对PI3K抑制剂分子与受体靶标蛋白的作用机制进行分析;使用Py MOL V1.5软件设计新的PI3K抑制剂分子,并利用Co MFA和Co MSIA法对其活性进行预测。结果:Co MFA和Co MSIA模型的交叉验证系数分别为0.617、0.601,拟合验证系数分别为0.969、0.974,外部验证复相关系数分别为0.656、0.670。在Co MFA模型中,立体场和静电场的贡献值分别为56.2%、43.8%;在Co MSIA模型中,立体场、静电场、疏水场、氢键供体场、氢键受体场的贡献值分别为41.0%、31.3%、21.1%、2.4%、4.2%。分子叠合后,在公共骨架R1取代基附近引入空间位阻较小、正电性及亲水性较强的基团均可有助于增强分子活性。分子对接结果显示,PI3K抑制剂分子与受体靶标蛋白中的关键氨基酸ALA805、VAL882、THR887共形成了3个氢键,长度分别为1.84、1.99、1.99?。根据上述信息共设计了6个新分子,其中2个活性较高的分子的预测p IC50分别为3.211、3.247(Co MFA法)和3.238、3.222(Co MSIA法)。结论:新建Co MFA和Co MSIA模型具有良好的预测能力和统计学稳定性。分子立体场对分子活性的贡献值大于静电场,同时疏水场对分子活性的影响也不容忽视。吡啶杂环类PI3K抑制剂与受体靶标蛋白具有较强的氢键作用。3D-QSAR可为后续新的PI3K抑制剂分子的设计、改造及药物研发提供参考。

PI3K信号通路及其抑制剂抗恶性肿瘤的研究进展

磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphoinositide 3-kinases,PI3K)介导的信号通路是细胞内重要信号转导通路之一,该通路调节细胞的增殖、分化、凋亡等活动。因此,PI3K被认为与人类的多种恶性肿瘤的发生、发展、转归密切相关。本文对PI3K信号通路的组成、功能及其抑制剂抗恶性肿瘤的研究进展作一综述。

PI3K抑制剂在淋巴瘤中的研究进展

磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB/Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的异常活化与包括恶性淋巴瘤在内的众多肿瘤的发生发展密切相关。目前,针对该通路的分子靶向治疗成为肿瘤领域的研究热点,部分PI3K抑制剂已进入淋巴瘤的临床试验中。PI3K抑制剂包括广谱PI3K抑制剂、选择性PI3K抑制剂及PI3K/mTOR双重抑制剂。由于淋巴瘤发病机制的复杂性,单靶点的PI3K抑制剂疗效往往有限,需联合化疗或其他靶向药物以提升抗肿瘤疗效。未来,应筛选出能预测PI3K抑制剂疗效的指标,使其成为淋巴瘤治疗的有效途径。

分子靶向药物PI3K抑制剂的研究进展

本文通过文献检索和归纳总结,介绍了抗癌靶点分子PI3K及靶向药物PI3K抑制剂的研究进展。PI3K在肿瘤发生中起着关键性作用,因此PI3K抑制剂已成为当前抗癌新药开发的热点。迄今为止,已有包括ZSTK474在内的近20种新型PI3K抑制剂因具有较好的抗肿瘤效果和较低的毒性而被批准进入临床试验。PI3K抑制剂与其他药物的联合治疗试验也已取得较好效果。PI3K抑制剂有望在不远的将来成为一类新型分子靶向药物。

PI3K抑制剂对正常人外周血单个核细胞糖皮质激素抵抗的作用

慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonarydisease，COPD）是以气流受限为特征的全身慢性进行性疾病，炎症是重要的发病机制之一，糖皮质激素作为一种有效的抗炎药物，在炎症性疾病的治疗中起着至关重要的作用，但由于COPD患者体内存在糖皮质激素抵抗，使激素对COPD慢性炎症的疗效较差[1]。

GSK-3β抑制剂Tideglusib对成骨细胞增殖与成骨相关基因表达的影响

目的:研究特异性糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)抑制剂Tideglusib对小鼠成骨细胞MC3T3-E1增殖和成骨相关基因表达的影响。方法:采用CCK-8法测定梯度浓度(0~2000 ng/L)Tideglusib培养1、2、3 d时MC3T3-E1细胞的增殖活性,筛选有效浓度;采用荧光显微镜观察有效浓度Tideglusib培养8 h时MC3T3-E1细胞的黏附铺展形态;采用实时定量PCR仪检测有效浓度Tideglusib培养7、14 d时MC3T3-E1细胞中Runt相关转录因子2(Runx2)、Osterix(OSX)、碱性磷酸酶(ALP)、骨桥蛋白(OPN)、骨钙素(OCN)等成骨相关基因的表达水平,Western blot法检测其Runx2、OCN的蛋白表达水平。结果:与对照组相比,10、20 ng/L浓度Tideglusib具有促进MC3T3-E1细胞的增殖和黏附作用;10、20 ng/L浓度Tideglusib可上调Runx2、OSX、OPN、OCN的基因表达水平,并增强Runx2、OCN的蛋白表达水平。结论:Tideglusib能够促进体外成骨细胞的增殖、黏附以及成骨相关基因的表达。