氨基酸分析仪快速测定尿中3-甲基组氨酸含量

目前尿中3-methylhistidi(?)e(3-MH)含量的测定方法,主要是采用高效液相色谱法和化学比色法测定。但以上两种方法在不同程度上仍存在某些缺陷,前者虽然分析时间短,但分析效果差,且柱前衍生操作繁杂。后者对样品预处理要求较高,测定易受外界条件影响,结果不够稳定。本文采用氨基酸分析仪在原程序的基础上加以改进,使分析时间由过去的210ml(?)缩短到56mi(?)。

产后奶牛血、尿中羟脯氨酸、3-甲基组氨酸和3-MEHIS浓度的研究

用短程序分析法测定了 16头产后中国 -荷斯坦奶牛外周血浆和尿中羟脯氨酸 (HYPRO)和 3-甲基组氨酸 (3- MEHIS)的浓度 ,用以找出胶原蛋白和肌浆球蛋白的代谢与奶牛子宫复旧的关系。试验结果表明 ,产后 6 0～ 90 d奶牛 HYPRO和 3- MEHIS的平均浓度分别为 13.4 7±2 .38和 18.35± 2 .77nmol· m L-1(血中 ) ;138.93± 2 2 .99和 37.0 9± 3.90 nmol· m L-1(尿中 )。而产后第一天血、尿中 HYPRO的浓度分别为 2 8.4 6和 2 84 .30 nmol· m L-1;3- MEHIS的浓度分别为 30 .86和 6 5 .4 8nmol· m L-1。随产后时间延长 ,浓度逐渐下降 ,至产后 5 0 d时 (血中 3-MEHIS为 35 d) ,血、尿中两种氨基酸的浓度均降至正常水平 ,此时 HYPRO的浓度分别为 10 .92nmol· m L-1(血 )和 10 9.18nmol· m L-1(尿 ) ;而 3- MEHIS分别为 17.2 1nmol(血 )和 33.5 1nmol· m L-1(尿 )。血、尿中这两种氨基酸的浓度和复旧子宫角的直径有良好的相关性 ,相关系数分别为 r=0 .81和 r=0 .

异硫氰酸苯酯衍生法测定孵育液中的3-甲基组氨酸与酪氨酸

目的 :探讨用异硫氰酸苯酯 (PITC)衍生法高效液相色谱检测 3 甲基组氨酸 (3 MH)和酪氨酸 (Tyr)。 方法 :将PITC作为高效液相色谱柱前衍生剂 ,干燥后存放在冰箱 ,样品进样后 ,用乙酸钠和乙腈作为二元梯度洗脱5 0min完成分析。 结果 :本实验中建立的方法 3 MH和Tyr均具有良好的线性 ,相关系数分别为 0 9991与 0 .9992 ,回收率为 82 6 %与 87 6 %。 结论 :PITC衍生法高效液相色谱检测 3 MH和Tyr稳定可靠 ,灵敏度高 。

HPLC法测定人尿液中的3-甲基组氨酸

目的采用HPLC法测定人尿液中3-甲基组氨酸(3-MH)的含量。方法尿样经乙腈沉淀蛋白和邻苯二甲醛柱前衍生化,60s内进样,以乙醇胺为内标,测定尿液中的3-MH的含量。结果3-MH的衍生物与尿液中其他杂质的衍生物完全分离。线性范围为10~400μmol·L^(-1)(r=0.9993),平均回收率为94.03%~97.13%(n=5),日内和日间RSD分别<7.80%和8.25%,最低检出浓度达5μmol·L^(-1)。结论该方法灵敏度高,可用于人尿液中3-MH含量的测定。

3-甲基组氨酸三室模型在研究猪骨骼肌蛋白质降解中的应用

3-甲基组氨酸(3MH)主要是动物骨胳肌蛋白分解代谢产物,它不能再用于合成蛋白,因而3MH是研究动物骨胳肌蛋白降解率的一个可行示踪物.将标记的3MH经颈静脉注射,对血液中的同位素丰度进行观测,再根据猪体内3MH代谢特点,构建出猪骨胳肌蛋白降解的三分域模型.本文着重对该模型的的理论基础进行了讨论.

荧光检测法测定人体尿液中3-甲基组氨酸

目的 研究建立人体尿液中 3-甲基组氨酸 (3-MH)分离检测方法。方法 邻苯二甲醛衍生剂与 3-MH形成荧光衍生物 ,用高效液相色谱与荧光检测器系统分析测定尿液 3-MH的含量。结果 3-MH与尿液中其它杂质得到完全分离 ,并有良好的线性关系和回收率。结论 该方法特异性高 ,为临床手术后病人的康复治疗提供了有价值诊断方法。

丙二醇对围产期奶牛氮平衡和尿中3-甲基组氨酸的影响

选用24头体重(683.1±14.9)kg、胎次(2.5±0.2)、上一泌乳期305 d产奶量(7339±18)kg和预产期(24.5±0.2)d的经产奶牛,随机分为4组,从分娩前19 d开始分别在基础日粮中添加丙二醇0、150、300、450 mL/d,研究丙二醇对围产期奶牛氮平衡和尿中3-甲基组氨酸(3-MH)的影响。结果表明:各组奶牛分娩后第7、21、35天沉积氮逐渐增加(P<0.05),但均显著低于分娩前第21和第14天(P<0.05)。而奶牛分娩后第7、21、35天尿中3-MH逐渐增加(P<0.05),均显著高于分娩前第21和14天。分娩前第21天各组奶牛沉积氮和尿中3-MH没有显著差异(P>0.05),日粮添加丙二醇显著提高了奶牛分娩前第14天的沉积氮;与对照组相比,添加丙二醇300、450 mL/d显著提高了奶牛分娩后第7、21天和35天的沉积氮(P<0.05),显著降低了分娩前第14天和产后第7、21、35天尿中3-MH(P<0.05)。本试验结果表明,在日粮中添加丙二醇有益于改善围产期奶牛氮平衡和降低体蛋白质分解代谢,适宜添加量为300 mL/d。

氧自由基清除剂对严重烧伤后尿中3-甲基组氨酸排量的影响

我们以本校烧伤研究所30%Ⅲ度体表烧伤动物模型,选用Wistar大鼠经凝固汽油燃烧18秒,造成30%体表皮肤全层烧伤,饲养于代谢笼。分别收集烧伤后第5、7、9、11天尿液,经酸水解。采用美国贝克曼公司(Beckma)生产的121MB型氨基酸分析仪,按照周成贵等改进的测定尿中3-甲基组氨酸短程序,测定烧伤后尿中3-甲基组氨酸含量。结果:实验组经注射SOD+CAT后,烧伤后第5、7、9、11天尿中3-甲基组氨酸无明显差异,P>0.05。对照组未注入SOD+CAT,其含量显著高于实验组(P<0.01).

AMPK活化对骨骼肌中MAFbx mRNA、MuRF1 mRNA的表达和3-MH含量的影响

通过给SD大鼠注射AMPK激动剂AICAR,提高大鼠骨骼肌中AMPK的活性,探讨AMPK活性变化对骨骼肌蛋白质降解的作用。采用同位素技术测定腓肠肌中AMPK活性的变化;采用实时荧光定量PCR技术,测定腓肠肌中MuRF1、MAFbx基因表达量的变化。结果显示AICAR注射后1、2、7 h,AMPK活性与对照组相比升高,差异有显著性或非常显著性意义(P<0.05或P<0.01);AICAR注射后7 h,AMPK活性开始下降。AICAR注射后1、2 h,MAFbx mRNA、MuRF1 mRNA表达量与对照组相比升高,分别升高2.45、2.23倍和2.67、2.30倍,差异有非常显著性意义(P<0.01);AICAR注射后7 h,MuRF1 mRNA表达量升高了2.01倍,差异有显著性意义(P<0.05);而MAFbx mRNA表达有升高趋势,但差异没有显著性。3-MH质量摩尔浓度各组间差异没有显著性意义。结果说明:(1)大鼠一次性注射AICAR后,能显著提高骨骼肌中AMPK的活性,AMPK活性的升高能促进MAFbx mRNA和MuRF1 mRNA的表达,促进骨骼肌蛋白质的降解;(2)推测在反映骨骼肌蛋白质降解方面,MAFbx mRNA和MuRF1 mRNA比3-MH的敏感度要高。

估测羊骨骼肌蛋白降解率的3-MH三分域模型构建与分析

蛋白降解率的准确测定一直是蛋白质周转代谢研究中的难点问题,本研究根据羊体内3-MeHis代谢和分布特点,以代谢动力学为基础理论,构建了由血液、非蛋白结合和肌肉蛋白结合3-MeHis组成的三分域模型,通过测定血液和尿液中被标记的3-MeHis的丰度,估测出了肌肉蛋白的降解分速率、肌肉3-MeHis库容量等12个变量。

术中输注氨基酸对犬围手术期的节氮作用

目的:探讨杂种犬麻醉手术期间给予氨基酸的节氮作用。方法:健康成年杂种犬18只,随机分为2组(n=9),全麻下行小肠部分切除术,自划皮至关腹分别静脉用0.9%氯化钠溶液(对照组)与18-氨基酸溶液12kJ·kg-1·h-1(氨基酸组)。术后维持麻醉,机械通气下观察24h。监测围术期血糖、手术前后24h尿氮排出量与3-甲基组氨酸排出量,计算氮平衡。结果:两组血糖及术后24h排出氮量均较术前显著升高,组间无显著差异。对照组术后负氮平衡较术前明显加重,氨基酸组则较术前明显减轻,组间有显著差异(P<0.05)。术后对照组24h3-甲基组氨酸排出量较术前明显增加,氨基酸组与术前无显著差异,较对照组显著减少(P<0.05)。结论:术中输注氨基酸并不增加手术日排氮量,可减轻手术日负氮平衡,减少尿3-MH排出量,减少骨骼肌蛋白分解。

纠正酸中毒对尿毒症患者骨骼肌蛋白质分解率的影响

目的:测定尿毒症患者尿3-MEH/Cr的变化及纠正代谢性酸中毒对其影响。方法:采用氨基酸自动分析仪测定尿毒症患者尿中3-MEH排泄量,以尿3-MEH/Cr比值作为骨骼肌蛋白质分解率指标。结果:在代谢性酸中毒情况下,给予低蛋白饮食,3-MEH/Cr比值升高。纠正代谢性酸中毒后3-MEH/Cr比值明显下降(P<0.01)。结论:尿3-MEH/Cr可作为蛋白质营养状况的指标,纠正代谢性酸中毒并限制蛋白质饮食可显著降低尿毒症患者骨骼肌蛋白质分解率。

阿斯匹林和纳络酮联用对感染大鼠蛋白质代谢的调理作用

目的观察联合使用环氧化酶抑制剂阿斯匹林(Asp)和β-内啡肽受体拮抗剂纳络酮(Nal)对腹腔感染大鼠全胃肠外营养(TPN)时蛋白质分解的调理作用。方法将28只成年腹腔感染大鼠随机分成对照组(TPN组,n=9)和实验组(Asp+Nal组,n=12),对照组给予常规TPN,实验组在TPN溶液中加入注射用Asp15mg/(kg·d)和Nal注射液1mg/(kg·d),持续4d。测定实验前后体重、血清总蛋白、白蛋白、尿素氮和肌酐的浓度,测定每日氮平衡和尿3-甲基组氨酸(3-MH)的排出量,计算累积氮平衡和累积尿3-MH排出量。结果实验组血清学指标实验前后变化的差值比对照组显著减少,累积氮平衡显著优于对照组(P<0.01),累积尿3-MH排出量比对照组显著减少(P<0.01)。结论联合使用环氧化酶抑制剂Asp和β-内啡肽受体拮抗剂Nal可以调理腹腔感染大鼠TPN时的蛋白质代谢,减少蛋白质丢失。

丙泊酚或七氟醚复合瑞芬太尼麻醉对机体蛋白质分解代谢的影响

比较丙泊酚或七氟醚复合瑞芬太尼全麻维持,对行经腹会阴联合直肠癌根治术(Miles手术)患者机体蛋白质分解代谢的影响。选择40例将要行Miles手术的患者,年龄25岁~65岁,ASAⅠ级~Ⅱ级,随机分为两组:一组接受丙泊酚复合瑞芬太尼全麻维持(P组,n=20);另一组接受七氟醚复合瑞芬太尼全麻维持(S组,n=20)。尿标本自手术开始切皮(0h)每小时收集一次,检测尿液中3-甲基组氨酸(3-MH)与肌酐(Cr)的比值(3-MH/Cr)。呼吸商(RQ)从手术切皮(0h)以后每小时检测一次。结果P组与S组T2(1h^2h)、T3(2h^3h)的3-MH/Cr值与T0(0h)、T1(0h^1h)相比,明显升高,且P组T2和T3的3-MH/Cr值和RQ均比S组低。丙泊酚脂肪乳中的甘油三酯可能会作为供能物质被机体分解利用,从而减少体内蛋白质的分解。

不同能量水平对北京鸭蛋白质周转代谢的影响

通过研究不同能量水平对肉鸭蛋白质周转的影响,试图从能量水平研究其对肉鸭蛋白质周转代谢的影响规律;探讨应用3-MH(3-甲基组氨酸)排泄量的方法,测定肉鸭蛋白质的周转速率的可能性,测定3-MH在肉鸭骨骼肌及全身的含量。结果表明,能量水平影响肉鸭骨骼肌蛋白质周转率。14日龄时低能组蛋白质合成率(FSR)、蛋白质降解率(FDR)和蛋白质沉积率(FGR)低于对照组。其中,FSR和FGR与对照组差异极显著,FDR与对照组差异显著;高能组(HME)的FDR高于对照组但差异不显著,FSR比对照组低0.4%/d,差异不显著,FGR显著低于对照组;28日龄时低能组FSR、FDR和FGR与对照组差异不显著,而高能组FSR和FGR低于对照组,差异极显著,FDR显著低于对照组。试验证明,肉鸭上采用测定3-MH排泄量的方法测定蛋白质周转是可行的;日粮能量水平影响肉鸭骨骼肌蛋白周转代谢速率;肉鸭早期生长阶段的骨骼肌蛋白质周转代谢强度和蛋白质沉积效率显著高于生长后期。

国际空间站新型尿液分析仪

失重条件下人体生理会发生许多有害的变化，包括空间运动病（SMS），骨丢失和肌肉萎缩。监测和评估这些变化对于编制锻炼计划或提供药物对抗以维持航天员的健康显得日益重要。大多数生理变化都能通过尿液中的化学成分反映出来。例如可以使用3－甲基组氨酸评估肌肉损失量。通过分析尿液中药物代谢情况还可以调整空间运动病对抗药物或骨丢失抑制类药物的用量。

金振口服液氨基酸特征指纹图谱及29种氨基酸同时定量的质量控制方法研究

目的氨基酸自动分析仪建立金振口服液(JOL)氨基酸特征指纹图谱及29种氨基酸(磷酸丝氨酸、牛磺酸、天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、天冬酰胺、谷氨酸、谷氨酰胺、肌氨酸、甘氨酸、丙氨酸、瓜氨酸、α-氨基丁酸、缬氨酸、胱氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、β-丙氨酸、β-氨基丁酸、γ-氨基丁酸、鸟氨酸、赖氨酸、组氨酸、3-甲基组氨酸、精氨酸、羟脯氨酸、脯氨酸)同时定量的分析方法。方法采用日立855-4507型离子交换色谱柱(60mm×4.6mm,3μm);检测波长分别为570、440 nm;流动洗脱泵体积流量0.35 mL/min;衍生泵体积流量0.30 mL/min;反应柱温135℃;以柠檬酸缓冲溶液为流动相进行梯度洗脱,建立JOL氨基酸特征指纹图谱,对29个主要特征峰进行化学成分指认,运用中药指纹图谱相似度软件对16批市售制剂进行相似度评价,同时对29种氨基酸进行含量测定。结果建立了JOL氨基酸特征指纹图谱结合29种氨基酸同时定量的方法;16批市售制剂的指纹图谱与对照指纹图谱的相似度值在0.989~1.000;29种定量成分线性关系良好(R2=1.000),且平均回收率为95.71%~101.87%;16批市售制剂29种氨基酸的质量浓度分别为磷酸丝氨酸15.4572~29.3624μg/mL、牛磺酸64.4234~114.2386μg/mL、天冬氨酸19.0564~32.5490μg/mL、苏氨酸6.704 8~7.841 8μg/mL、丝氨酸22.609 4~39.382 8μg/mL、天冬酰胺61.134 0~115.456 0μg/mL、谷氨酸32.254 6~63.127 2μg/mL、谷氨酰胺5.2238~8.9532μg/mL、肌氨酸4.0810~44.0076μg/mL、甘氨酸12.4030~23.5164μg/mL、丙氨酸33.876 8~44.257 4μg/mL、瓜氨酸3.514 2~9.881 0μg/mL、α-氨基丁酸1.126 4~2.287 8μg/mL、缬氨酸11.584 6~15.469 0μg/mL、胱氨酸1.660 2~4.041 8μg/mL、异亮氨酸4.087 8~5.469 2μg/mL、亮氨酸8.295 2~11.724 0μg/mL、酪氨酸7.492 6~10.761 2μg/mL、苯丙氨酸4.856 4~9.248 0μg/mL、β-丙氨酸2.309 4~6.782 6μg/mL、β-氨基丁酸0.175 0~14.790 6μg/mL、γ-氨基丁酸17.654 4~26.621 8μg/mL、鸟氨酸42.338 4~58.172 6μg/mL、赖氨酸12.994 9~28.498 0μg/mL、组氨酸1.802 6~4.0674μg/mL、3-甲基组氨酸2.6084~4.3840μg/mL、精氨酸107.1416~301.6498μg/mL、羟脯氨酸15.8116~37.8076μg/mL、脯氨酸143.714 6~243.956 6μg/mL。结论氨基酸自动分析仪法测定JOL中氨基酸具有重现性好、结果可靠的优点;且JOL中氨基酸类成分定性定量研究在一定程度上明确了君药山羊角对制剂组方的成分贡献,为构建JOL全方位质量评价体系提供了有益补充。

美国肠内肠外营养学会(ASPEN)第20届年会纪要

1996年1月14～17日在美国首都华盛顿举行了ASPEN第20届年会,来自世界各国的与会代表共3000余人参加了本届年会.会议内容丰富,除科研论文报告,专题报告和科研论文墙报外,还有教育书展及肠内肠外有关产品及研究设备展览.就研究论文报告及论文墙报内容简介如下.一、基础研究主要涉及谷氨酰胺(Gln)、生长因子(Growth Factors)、细胞因子(Cytokines)和短链脂肪酸(SCFA)等研究内容.