人血浆中3-甲氧基肾上腺素和3-甲氧基去甲肾上腺素的萃取和浓度检测方法研究

目的:建立固相萃取-高效液相-电化学检测器联用法测定人血浆中3-甲氧基肾上腺素(Metanephrine,MN)和3-甲氧基去甲肾上腺素(Normetanephrine,NMN)浓度的方法。方法:采用固相萃取弱阳离子交换小柱萃取人血浆中的MN和NMN,用HPLC-ECD测定其浓度,并对其方法专属性、回收率进行研究。结果:MN线性相关系数R^(2)=0.9972,NMN线性相关系数R^(2)=0.9996;MN的提取回收率和方法回收率为84.34%和99.10%,NMN的提取回收率和方法回收率为90.55%和100.48%。结论:本课题建立的固相萃取-高效液相色谱-电化学检测器联用检测法检测人血浆中MN和NMN的浓度,操作简单,提取率较高,为临床人血浆中MN和NMN浓度检测提供方法学参考。

血浆游离3-甲氧基肾上腺素和游离3-甲氧基去甲肾上腺素在嗜铬细胞瘤/副神经节瘤临床诊断中的价值研究

目的 探讨血浆游离3-甲氧基肾上腺素(MN)和游离3-甲氧基去甲肾上腺素(NMN)在嗜铬细胞瘤/副神经节瘤(PPGL)临床诊断中的价值。方法 选取65例PPGL患者作为研究组,同期65例高血压非PPGL患者作为对照组。比较两组受试者一般临床资料及血浆游离MN、NMN水平。根据肿瘤不同分化程度将研究组患者分为高分化组(39例)、中分化组(15例)及低分化组(11例),比较3组患者血浆游离MN、NMN水平。相关性分析采用Pearson和Spearman相关分析。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血浆游离MN、NMN水平对PPGL的预测价值。结果 研究组收缩压、舒张压及血浆游离MN、NMN水平均高于对照组;随着PPGL患者肿瘤分化程度降低,血浆游离MN、NMN水平逐渐升高(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,PPGL患者血浆游离MN、NMN水平与收缩压、舒张压均呈正相关;Spearman相关分析结果显示,血浆游离MN、NMN水平与肿瘤分化程度均呈负相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血浆游离MN、NMN水平联合预测PPGL的ROC曲线下面积(AUC)大于二者单独预测的AUC。结论血浆游离MN、NMN水平检测可作为诊断PPGL的重要指标,且与肿瘤分化程度密切相关。

尿去甲基肾上腺素/甲氧基肾上腺素测定对嗜铬细胞瘤的方法学比较

目的:通过对尿儿茶酚胺代谢产物去甲肾上腺素、甲氧基肾上腺素的测定,综合分析其对嗜铬细胞瘤的早期临床诊断价值。方法:利用酶联免疫分析法和传统柱层析法,对正常人和临床诊断为嗜铬细胞瘤及肾上腺占位病变并伴有阵发性高血压患者的24h尿去甲基肾上腺素/甲氧基肾上腺素和3-甲氧基-4-羟基苦杏仁酸(VMA)进行测定。结果:与VMA相比,24h尿去甲基肾上腺素/甲氧基肾上腺素在嗜铬细胞瘤患者中的测定值要显著高于其他肾上腺占位性病变伴高血压患者和正常人群,二者方法学有显著性差异。结论:酶联免疫分析法检测24h尿去甲基肾上腺素/甲氧基肾上腺素具有灵敏度高、特异性好的特点,为临床从肾上腺占位性病变并伴有阵发性高血压患者中筛查嗜铬细胞瘤提供了一种有价值的参考方法。

1-[(4-苄氧基苯基)-2-[2-(4-甲氧基苯基)]乙胺基]乙醇的合成

以对-羟基苯乙酮为原料,经溴代后,与对甲氧基苯乙胺缩合,再经硼氢化钠还原,得到目标化合物。目标化合物的结构通过IR、1 H-NMR(CDCl3)及MS确证,有望得到高活性及高选择性的β3-肾上腺素受体激动剂。

甲氧基肾上腺素类物质、3-甲氧酪胺及嗜铬粒蛋白A在PPGL诊断中的作用

嗜铬细胞瘤和副神经节瘤(pheochromocytoma and paraganglioma,PPCL)是继发性高血压的病因之一,近年来其患病率呈上升趋势。甲氧基肾上腺素类物质(metanephrines,MNs)是儿茶酚胺(catecholamine,CA)的中间代谢产物。目前,血,尿MNs均已被广泛推荐为PPGL诊断的首选生化标志物。此外,3-甲氧酪胺(3-methoxytyramine,3-MT)和嗜铬粒蛋白A(chromogranin A,CgA)也可对PPGL的诊断和鉴别良,恶性提供一定的帮助。了解不同生化检测指标在PPCL诊断中的特点.标本采集的注意事项及方法学选择,将有助于提高临床合理规范应用。

毛细管电泳检测尿儿茶酚胺代谢产物及在诊断嗜铬细胞瘤中的应用

目的探讨毛细管电泳法检测尿儿茶酚胺代谢产物对嗜铬细胞瘤的诊断意义。方法采用毛细管电泳技术检测46例正常人及11例嗜铬细胞瘤患者尿中去甲变肾上腺素(normetanephrine,NMN)、间甲肾上腺素(metanephrine,MN)和3-甲氧基-4羟基苦杏仁酸(vanillylmandelic acid,VMA)含量。结果嗜铬细胞瘤患者与正常人比较NMN和MN有统计学意义(P<0.05);VMA无统计学意义(P>0.05);NMN和MN联合检测阳性率为100%,假阳性率为19.56%;NMN和VMA联合检测阳性率为100%,假阳性率为10.87%。结论毛细管电泳法对NMN和VMA联合检测对于诊断嗜铬细胞瘤有意义。

超高效液相色谱串联质谱法检测晨尿中儿茶酚胺及其代谢产物的价值

目的建立一种稳定、灵敏、可靠且可以同时检测尿儿茶酚胺及其代谢产物的方法。方法采用超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)检测晨尿标本中儿茶酚胺及其代谢产物。采用固相萃取的前处理方法,对液相色谱条件及质谱条件进行优化,并对该方法的检测限、定量下限、线性、精密度、准确度和基质效应及稳定性进行性能验证。检测100例体检健康者晨尿及其中20例体检健康者24 h尿液,根据肌酐检测值对稀释差异进行归一化,考察晨尿与24 h尿液收集这两种不同采样方法之间检测儿茶酚及其代谢产物的相关性,并建立了晨尿检测6种分析物的参考区间。结果6种分析物在相应的浓度范围内均线性关系良好,精密度、准确度、基质效应均<10%,室温放置24 h、4℃放置24 h、4℃放置48 h及—80℃放置7 d稳定性均较好,变化≤6.2%。晨尿与24 h尿液标本检测结果呈正相关(r=0.93~0.97,P<0.0001),6种分析物的参考区间去甲肾上腺素为2.6~140.4μg/g Cr,肾上腺素为0.3~37.2μg/g Cr,多巴胺为43.4~561.8μg/g Cr,3-甲氧酪胺为18.0~165.7μg/g Cr,甲氧基去甲肾上腺素为15.1~241.5μg/g Cr,甲氧基肾上腺素为6.8~192.0μg/g Cr。结论建立了一种方便快速、灵敏、特异的UPLC-MS/MS,一次进样可同时检测晨尿中6种儿茶酚胺及其代谢产物,可为儿茶酚胺的常规检测及临床应用提供一种简单、可靠的新手段。

68例嗜铬细胞瘤和副神经节瘤患者临床特点分析

目的分析嗜铬细胞瘤和副神经节瘤(pheochromocytoma and paraganglioma,PPGL)患者临床特点。方法回顾性分析68例PPGL患者的临床资料,并按照肿瘤位置是否在肾上腺将患者分为嗜铬细胞瘤组(61例)和副神经节瘤组(7例),总结及比较PPGL的临床特点。结果高血压为PPGL最常见的临床表现,除高血压外,嗜铬细胞瘤组伴随症状发生由高到低依次为头痛(65.6%)、心悸(54.1%)、多汗(52.5%)、头晕(41.0%)、恶心(39.3%)、胸闷(23.0%)、腹痛(14.8%)、低血压(8.2%)。2组在年龄、血压峰值、肿瘤直径、糖耐量异常、3-甲氧基肾上腺素(metanephrine,MN)水平及甲氧基去肾上腺素(normetanephrine,NMN)水平方面比较,差异无统计学意义(P>0.05)。副神经节瘤组较嗜铬细胞瘤组更易出现尿蛋白,差异有统计学意义(P<0.05)。MN及NMN值在发病位置、有无症状方面比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。PPGL影像学表现相似。结论PPGL临床表现多样,病程长,少数表现为无症状,临床上需重视临床表现,对MN、NMN升高的患者需进行进一步影像学检查,降低PPGL的漏诊及误诊率。

儿茶酚胺代谢产物检测对嗜铬细胞瘤诊断价值的比较

目的比较24h尿3-甲氧基-4-羟基苦杏仁酸(VMA),5h尿VMA/Cr,血、尿3甲氧基去甲肾上腺素(NMN)和3甲氧基肾上腺素(MN)在嗜铬细胞瘤诊断中的准确性。方法对45例嗜铬细胞瘤患者、111例肾上腺皮质腺瘤患者、145例原发性高血压患者和39例健康体检者的24h尿VMA,5h尿VMA/Cr,血、尿NMN和MN的检测结果进行比较。结果 24h尿VMA检测的敏感性仅为73.3%,低于血NMN+MN的95.6%(P<0.05)、尿NMN+MN的97.8%(P<0.05)和血、尿NMN+MN联合检测的100%(P<0.01)。5h尿VMA/Cr检测的特异性为84.1%,低于24h尿VMA的92.2%、血NMN+MN的93.6%、尿NMN+MN的93.9%和血、尿NMN+MN的联合检测99.7%(P均<0.01);24h尿VMA、5h尿VMA/Cr、血NMN+MN和尿NMN+MN的ROC曲线下面积分别为0.884、0.923、0.972和0.985。结论血、尿NMN+MN检测的敏感性和特异性高,是临床诊断嗜铬细胞瘤较为理想的检测方法。如果两者联合检测将进一步提高诊断的准确性。