3β-羟基甾体脱氢酶/Δ^4-Δ^5异构酶(3β-HSD)是哺乳动物体内广泛存在的一类参与甾体激素代谢的氧化还原酶,且具有异构酶活性。3β-HSD催化3β-羟基甾体的脱氢及随后的Δ^5-3-甾酮产物的异构化反应,以产生α,β-非饱和酮,...3β-羟基甾体脱氢酶/Δ^4-Δ^5异构酶(3β-HSD)是哺乳动物体内广泛存在的一类参与甾体激素代谢的氧化还原酶,且具有异构酶活性。3β-HSD催化3β-羟基甾体的脱氢及随后的Δ^5-3-甾酮产物的异构化反应,以产生α,β-非饱和酮,3β-HSD在甾体激素代谢中起着重要作用。本文以胎羊肝为材料,首次获得了山羊胎肝的3β-HSD的cDNA,并进行了3β-HSD在肝脏组织的表达分析。参照牛,啮齿类的3β-HSD CDNA的高同源区设计引物,以2-3月雌性胎羊肝脏mRNA为模板,经RT-PCR获得416 bp cDNA片段(Fig.a),然后以其为探针筛选胎羊肝λgt10cDNA文库最后获得3-端缺失的3β-HSD cDNA克隆,并推导了其氨基酸序列(Fig.s)。同源分析表明山羊胎肝3β-HSD的氨基酸序列与牛卵巢,人I型3β-HSD的同源性分别为96%,78%和73%(Fig.3),提取雌性胎羊,雄性胎羊及母体羊肝脏的总RNA,同时做RT-PCR,表明3β-HSD在不同个体肝脏中的表达存在差异,雌性胎羊和母体孕羊肝脏中都有3β-HSD的表达,而在雄性胎羊肝脏中,则未检测到表达信号(Fig.4)。展开更多
文摘3β-羟基甾体脱氢酶/Δ^4-Δ^5异构酶(3β-HSD)是哺乳动物体内广泛存在的一类参与甾体激素代谢的氧化还原酶,且具有异构酶活性。3β-HSD催化3β-羟基甾体的脱氢及随后的Δ^5-3-甾酮产物的异构化反应,以产生α,β-非饱和酮,3β-HSD在甾体激素代谢中起着重要作用。本文以胎羊肝为材料,首次获得了山羊胎肝的3β-HSD的cDNA,并进行了3β-HSD在肝脏组织的表达分析。参照牛,啮齿类的3β-HSD CDNA的高同源区设计引物,以2-3月雌性胎羊肝脏mRNA为模板,经RT-PCR获得416 bp cDNA片段(Fig.a),然后以其为探针筛选胎羊肝λgt10cDNA文库最后获得3-端缺失的3β-HSD cDNA克隆,并推导了其氨基酸序列(Fig.s)。同源分析表明山羊胎肝3β-HSD的氨基酸序列与牛卵巢,人I型3β-HSD的同源性分别为96%,78%和73%(Fig.3),提取雌性胎羊,雄性胎羊及母体羊肝脏的总RNA,同时做RT-PCR,表明3β-HSD在不同个体肝脏中的表达存在差异,雌性胎羊和母体孕羊肝脏中都有3β-HSD的表达,而在雄性胎羊肝脏中,则未检测到表达信号(Fig.4)。