正相高效液相色谱法分离3-Boc-氨基哌啶对映异构体

目的建立3-Boc-氨基哌啶对映异构体的正相HPLC分离分析方法,用于R-3-Boc-氨基哌啶中对映异构体R-3-Boc的杂质分析和检查。方法以表面修饰直链淀粉三-(3,5-二甲苯基氨基甲酸酯)的正相硅胶(Chiralpak AD-H)柱为手性固定相,正己烷-异丙醇-二乙胺(体积比93∶7∶0.05)为流动相,流速为1. 0 mL·min-1,检测波长为220 nm,柱温为35℃。结果 3-Boc-氨基哌啶对映异构体在此条件下的分离度为5.0。建立的方法经方法学验证,S型异构体的检测限和定量限分别为6和20 mg·L-1,在20~80 mg·L-1质量浓度内线性关系良好,回收率分别为94.33%、97.06%和97.97%。结论该方法可用于R-3-Boc-氨基哌啶中对映异构体的杂质分析和检查。

(R)-3-Boc-氨基哌啶的工艺优化

(R)-3-Boc-氨基哌啶是一种作为生产阿格列汀,林格列汀的中间体。因其稳定性差,对其合成工艺争议颇大。本文在对(R)-3-Boc-氨基哌啶常见合成工艺总结基础上,以pd/C催化剂对其进行合成,在甲醇溶剂下,反应温度为45℃,反应时间为24小时,催化剂的用量是11.0g/mol的条件下,反应收率最高为89.1%。这种制备工艺制备的成本最低,且所得产物(R)-3-Boc-氨基哌啶的性质稳定,易于保存,方便使用。

绿色生化技术合成3-氨基哌啶双盐酸盐新工艺研究

3-氨基哌啶双盐酸盐是降糖药的重要中间体,目前报道的合成工艺不同程度地存在操作风险,通过对报道的工艺进行综合分析,此次选用容易获得的原料3-羟基哌啶为起始化合物,自行设计了合成新工艺,通过催化加氢、氨基保护、羟基氧化、羰基氨化、氨基保护、盐酸成盐6步反应制备3-氨基哌啶双盐酸盐,其中羟基氧化和羰基氨化两步反应采用了先进的生物酶催化技术。该工艺克服传统工艺使用叠氮化钠存在操作危险、可控性差的缺点,研究出简短、高效的合成工艺,容易在生产上实施应用。

正相高效液相色谱法测定琥珀酸曲格列汀中的(R)-3-氨基哌啶

建立琥珀酸曲格列汀中(R)-3-氨基哌啶测定的正相高效液相色谱分析方法,用于琥珀酸曲格列汀中对起始原料(R)-3-氨基哌啶盐酸盐残留的质量控制。采用CHIRALPAK AD-H(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以正己烷-无水乙醇(80:20)为流动相,等度洗脱,流速为1.0 mL/min;柱温为30℃;检测波长为210 nm。(R)-3-氨基哌啶在0.10~3.03μg/mL范围与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9993;检测限为0.03048μg/mL,加标平均回收率100.5%(n=15)。本文建立的方法准确、灵敏、可靠,适用于琥珀酸曲格列汀中杂质(R)-3-氨基哌啶含量的检测。

3-甲氨基哌啶二盐酸盐的合成

研究了巴洛沙星中间体3-甲氨基哌啶的合成工艺。以烟酰胺为起始原料,经Hofmann降解、甲酰化、LiAlH4还原、Na/EtOH还原和盐酸中和得标题化合物,总收率70%。用核磁共振氢谱对各步反应产物的结构进行了表征,用高效液相色谱分析了产品的纯度。

3-甲氨基哌啶二盐酸盐合成研究

分别讨论了以3-溴吡啶、3-氨基吡啶、烟酰胺为起始原料合成抗生素巴洛沙星关键中间体3-甲氨基哌啶二盐酸盐的方法。选择合理的合成路线直接影响到巴洛沙星的合成收率和生产成本,述评了这些方法在起始原料、操作步骤、反应条件、催化剂、合成收率方面的差异,以此指导巴洛沙星实现工业化生产。并简要介绍了3-甲氨基哌啶二盐酸盐的检测分析方法。

4-苯基-3-氨基哌啶二盐酸盐的合成

以肉桂酸为原料,先后经酯化、Michael加成反应、环合、乙硼烷还原、钯碳催化氢化共5步反应制得目标化合物,其结构经1HNMR和MS确证。该工艺使用原料简单易得、合成路线短、反应条件温和,制备方法简便,总收率54.1%。

N-(3-环己烯-1-基甲基)-4-氨基哌啶的合成

目的:合成强效的5-H1和5-H2受体拮抗剂西尼必利的关键中间体N-(3-环己烯-1-基甲基)-4-氨基哌啶。方法:以N-(3-环己烯-1-基甲基)-哌啶-4-肟为原料,经还原后生成N-(3-环己烯-1-基甲基)-4-氨基哌啶(1)。结果:目标化合物经质谱、核磁共振氢谱确证化学结构,产率达到76%。结论:文章为N-(3-环己烯-1-基甲基)-4-氨基哌啶的工业化生产提供了一条新型的、较为合理的工艺路线。

(R)-3-氨基哌啶双盐酸盐的合成工艺研究

以外消旋的3-哌啶甲酸乙酯为原料,经手性拆分,胺基Boc保护,胺解,Hofman降解,脱保护成盐酸盐共五步反应制得R-3-氨基哌啶双盐酸盐,所得目标化合物经质谱、核磁共振氢谱确认,总收率达43.1%。

药物中间体(R)-3-氨基哌啶二(三氟乙酸)盐的合成

以(R)-2-((苄氧羰基)氨基)-1,5-戊二醇(1)为原料,通过酯化、环合、催化氢化、成盐反应,合成了药物中间体(R)-3-氨基哌啶二(三氟乙酸)盐(5);其结构经1H NMR、13C NMR、IR和元素分析表征。该方法具有成本较低、反应条件温和、易操作等特点,有利于工业化生产。

巴洛沙星中间体3-甲氨基哌啶二盐酸盐的合成

以烟酰胺为原料,经氢化还原得到哌啶酰胺,再经氨基保护—霍夫曼降解—N-烷基化—脱保护基—成盐,得到目标化合物。和其他工艺相比,该合成方法具有原料易得、成本低的优点。

(R)-3-氨基哌啶的合成与应用进展

(R)-3-氨基哌啶是一种手性小分子化合物,可通过化学合成法、手性拆分法或生物转化法进行制备。作为一种重要的药物中间体,(R)-3-氨基哌啶已用于利拉利汀(Linagliptin)、苯甲酸阿格列汀(Alogliptin benzoate)和曲格列汀琥珀酸盐(Trelagliptin succinate)等多种对2型糖尿病有治疗功能的二肽基肽酶Ⅳ(DPP-Ⅳ)抑制剂的合成。

TCL-容量法测定工业3-甲氨基哌啶双盐酸盐的纯度

采用TCL-容量法测定工业3-甲氨基哌啶双盐酸盐的纯度。样品通过薄层色谱预分离后,经消化、蒸馏测定样品中的氮,计算出3-甲氨基哌啶双盐酸盐的含量为98.81%,方法的相对标准偏差为0.087%(n=10)。此方法简便快速,不需昂贵的大型仪器,适应于工业分析。

高效液相色谱法测定3-氨基哌啶二盐酸盐中氨基吡啶类基因毒性杂质的含量

在降血糖药物苯甲酸阿格列汀的合成过程中,有可能因原料的因素而引入氨基吡啶类基因毒性杂质而对上述药物的用药安全性造成影响。为此试验提出了用高效液相色谱法测定3-氨基哌啶二盐酸盐中3种氨基吡啶化合物(4-氨基吡啶、3-氨基吡啶和2-氨基吡啶)的方法。称取试样0.3g,用磷酸盐缓冲溶液(pH 7.0)-甲醇(90+10)混合溶液超声溶解并定容至10.0mL。选择Shim-pack Scepter C18色谱柱作为分离柱,用pH 7.0的磷酸盐缓冲溶液和甲醇(90+10)的混合溶液等度洗脱,流量为0.5mL·min-1,柱温为35℃,检测波长为280nm,进样量10μL。在选定的条件下,上述3种化合物可达到很好的分离,4-氨基吡啶、3-氨基吡啶和2-氨基吡啶间的分离度分别为30.3,8.4,其检出限(3S/N)分别为0.0289,0.0711,0.0702mg·L-1。在3个浓度水平上对3种化合物进行回收试验,测得回收率依次为101%,98.4%,97.2%。重复性和重现性试验所测得3种化合物测定值的相对标准偏差(n=6)分别依次为1.5%,0.90%,0.70%和6.2%,3.0%,2.2%。样品加标溶液和对照品溶液在室温下放置24h内稳定性良好。

3-(p-甲苯基)磺酰氨基-2,6-哌啶二酮(C_(12)H_(14)O_4N_2S)的晶体结构和分子结构研究

采用X-射线单晶衍射和INDO量子化学计算法研究了标题化合物的晶体和分子结构。标题化合物的分子式C_(12)H_(14)O_4N_2S,Mr=282.31,三斜晶系,空间群P,a=7.229(2),b=8.7922(9),c=11.242(1);α=70.339(8)°,β=71.15(2)°,γ=87.88(2)°;V=634.8(7),Z=2,D_c=1.476g/cm^3,R=0.037,R_w=0.037(W=1)。分子的哌啶二酮环中C=O和C—N键长与多肽分子的相应键长相一致。根据INDO计算结果讨论了标题化合物的水解反应活性。

mitoTEMPO通过调控线粒体自噬对慢性肾脏病模型大鼠足细胞损伤的保护作用研究

目的 探讨线粒体靶向的2, 2, 6, 6-四甲基哌啶-1-氧基-4-氨基-2-氧基乙基(mitochondria-targeted 2, 2, 6, 6-tetramethylpiperidin-1-oxyl-4-amino-2-oxyethl,mitoTEMPO)对慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)模型大鼠足细胞损伤的影响及其相关分子机制。方法 18只健康SD大鼠随机分为对照(Control)组、模型组(CKD组)和mitoTEMPO组,每组6只。采用全自动生化分析仪测定肾功能;苏木素-伊红染色检测肾病理结构;免疫组织化学法检测肾脏肌间质蛋白(desmin)和足突蛋白(podocin)表达;透射电镜检测足细胞超微结构;免疫荧光共染检测足细胞线粒体自噬;实时荧光定量PCR检测肾脏炎性因子表达;蛋白免疫印迹法检测Nod样受体家族成员蛋白3(nod-like receptor protein 3,NLRP3)炎症小体,自噬和帕金蛋白(Parkin)/PTEN诱导假定激酶1(PTEN induced putative kinase1,PINK1)通路相关蛋白表达。结果 与Control组比较,CKD组大鼠24h尿蛋白(84.89±8.98 mg/24h vs 5.79±1.39mg/24h),血清肌酐(serum creatinine,Scr)(75.10±10.46μmol/L vs 38.57±4.89μmol/L),尿素氮(urea nitrogen,BUN)(8.96±1.07 mmol/L vs 2.73±0.43mmol/L)水平升高,差异具有统计学意义(t=21.322,7.749,13.233,均P<0.001);肾小球体积增大、系膜增生、大量炎性细胞浸润;足细胞足突融合,基底膜增厚,线粒体嵴断裂和空泡化;desmin阳性区增多,podocin阳性区减少,差异具有统计学意义(t=9.903,7.651,均P<0.001);p62和desmin可见共定位;LC3 II/I,PINK1和Parkin蛋白表达降低(t=16.984,15.105,11.390),IL-1β,TNF-α,NLRP3,cleaved caspase-1和p62蛋白表达升高(t=5.700~21.571),差异具有统计学意义(均P<0.001)。与CKD组比较,mitoTEMPO组24h尿蛋白、Scr和BUN水平降低,差异具有统计学意义(t=12.508,4.712,7.338,均P<0.001);肾脏病理损伤和足细胞情况显著改善;desmin阳性区减少,podocin阳性区增多(t=6.649,7.686,均P<0.001);LC3和COX IV可见共定位;LC3 II/I,PINK1和Parkin蛋白表达升高(t=15.481,20.469,5.801),IL-1β,TNF-α,NLRP3,cleaved caspase-1和p62蛋白表达降低(t=3.477~9.681),差异具有统计学意义(均P<0.001)。结论mitoTEMPO对CKD足细胞损伤可产生保护作用,其机制可能与激活PINK1/parkin通路介导的线粒体自噬来抑制NLRP3炎症小体有关。

新型哌嗪或3-氨基哌啶类化合物的合成及其DPP-4抑制作用

2,3,4-三氟硝基苯与哌嗪发生亲核取代反应、三光气氯甲酰化,最后与胺类化合物缩合制得哌嗪衍生物8a～8e。另用2,3,4-三氟硝基苯与4-乙氧羰基哌啶-3-酮盐酸盐发生亲核取代、烯氨化、还原、氨基酰化、酯水解后与胺类化合物缩合制得17,再经脱保护、成盐或经硝基还原再脱保护、成盐生成3-氨基哌啶衍生物9a～9r。23个新化合物的结构经1H NMR和MS确证,并测定了它们的体外DPP-4抑制活性,其中8b和9m对DPP-4酶具有一定的抑制作用。

快速柱前衍生HPLC法检测曲格列汀中(R)-3-氨基哌啶

以邻苯二甲醛(OPA)和3-巯基丙酸为衍生试剂,建立了柱前衍生高效液相色谱(HPLC)测定曲格列汀中(R)-3-氨基哌啶含量的分析方法。(R)-3-氨基哌啶与衍生剂在碱性(p H 10.5)条件下于室温反应30s,进行柱前衍生,并利用高效液相色谱-质谱对衍生产物进行定性分析。采用YMC-Triart C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm)分离,流动相采用0.05 mol/L乙酸钠(p H 6.0)-甲醇溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长331 nm,柱温30℃。(R)-3-氨基哌啶质量浓度在0.08~2.0μg/mL范围内线性关系良好(r=0.9993),定量限为1.6 ng,加标回收率在98.0%~10^(6).9%之间,相对标准偏差(RSD)为2.8%。该方法可用于曲格列汀中(R)-3-氨基哌啶含量测定。

改进HPLC法测定门冬氨酸鸟氨酸原料药中的有关物质

目的:改进测定门冬氨酸鸟氨酸原料药中有关物质的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Phenomenex Luna NH2(两根串联),流动相为0.02 mol/L磷酸二氢钾缓冲液(p H 5.6)-乙腈(40∶60,V/V),流速为1.0 m L/min,检测波长为205 nm,柱温为35℃,进样量为20μL。结果:马来酸、3-氨基-2-哌啶酮、琥珀酸、苹果酸、富马酸、β-门冬氨酰门冬氨酸检测质量浓度线性范围分别为5.398~26.992μg/m L(r=0.999 1)、5.204~26.021μg/m L(r=0.999 3)、5.149~25.749μg/m L(r=0.999 6)、5.174~25.874μg/m L(r=0.999 3)、5.164~25.823μg/m L(r=0.999 3)、5.194~25.973μg/m L(r=0.999 5);定量限分别为0.22、0.53、51.50、103.50、0.26、8.31 ng,检出限分别为0.13、0.26、10.30、20.70、0.13、2.08 ng;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均不超过2%;加样回收率分别为99.30%~102.31%(RSD=1.02%,n=9)、99.88%~100.89%(RSD=0.37%,n=9)、99.36%~101.53%(RSD=0.70%,n=9)、99.13%~102.65%(RSD=1.15%,n=9)、100.18%~101.45%(RSD=0.38%,n=9)、99.39%~100.81%(RSD=0.58%,n=9)。6批样品均未检出马来酸、琥珀酸和β-门冬氨酰门冬氨酸;3-氨基-2-哌啶酮含量为0.006%~0.056%,苹果酸含量为0.014%~0.071%,富马酸含量为0.000 5%~0.003 4%,最大未知杂质含量为0.013%~0.110%,未知杂质总含量为0.013%~0.120%。结论:该方法操作简便,精密度、稳定性、重复性均较好,可用于门冬氨酸鸟氨酸原料药中有关物质的测定。

阿格列汀合成路线图解

目的通过对已有的苯甲酸阿格列汀及其关键中间体(R)-3-氨基哌啶双盐酸盐的合成方法进行分析,从而找到最适宜于工业化大生产的合成路线。方法对这两种化合物的合成路线进行概括、归纳。结果与结论路线1.2中原料廉价易得,反应条件温和,后处理简单,更加符合工业化生产的要求。