猪链球菌靶向DC重组蛋白DC3pep-SDZ对斑马鱼的免疫保护性分析

为了探究本课题组前期构建的由猪链球菌(SS)的分泌型DNA核酸酶A(SsnA)、二氢硫辛酰胺脱氢酶(DLDH)和高亲和力锌摄取系统蛋白(ZnuA)3个毒力因子的优势细胞表位和树突状细胞靶向肽(DC3pep)串联而成的重组蛋白DC3pep-SDZ(SsnA-DLDH-ZnuA)对致病型SS攻击斑马鱼的免疫保护效果,本试验表达和纯化重组蛋白DC3pep-SDZ和SDZ,分别免疫AB系野生型斑马鱼,攻击致病型2、3和9型SS(SS2、SS3和SS9),计算存活率,采用苏木精-伊红(H.E.)染色法观察斑马鱼脑组织病理变化,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析SS3感染斑马鱼后脑组织炎性细胞因子表达量变化。结果显示,诱导表达的重组蛋白DC3pep-SDZ和SDZ分子质量分别为44和42 kDa,2个蛋白均以可溶的形式表达。SS2、SS3和SS9攻击斑马鱼后,重组蛋白DC3pep-SDZ组和重组蛋白SDZ组斑马鱼存活率分别为50.0%、65.0%和60.0%,45.0%、47.3%和45.0%,两组间差异不显著(P>0.05),但与PBS对照组相比差异均极其显著(P<0.001)。H.E.染色镜检结果显示,重组蛋白DC3pep-SDZ组的斑马鱼被3种分型SS攻击后脑组织均无明显病理变化。RT-qPCR结果显示,重组蛋白DC3pep-SDZ组促炎细胞因子:与PBS对照组相比较IL-6、TNF-α和IFN-γmRNA表达量分别极显著(P<0.01)、极其显著(P<0.001)和极显著(P<0.01)下调,与重组蛋白SDZ组相比较IL-6和TNF-αmRNA表达量分别极显著(P<0.01)和显著下调(P<0.05);重组蛋白DC3pep-SDZ组抗炎性细胞因子:与PBS对照组相比较IL-10和TGF-β1 mRNA表达量分别极显著(P<0.01)和极其显著(P<0.001)上调,与重组蛋白SDZ组相比较TGF-β1 mRNA表达量显著上调(P<0.05)。结果表明,重组蛋白DC3pep-SDZ较SDZ具有更好的免疫原性,能产生SS2、SS3和SS9交叉免疫保护作用,同时还能够有效缓解斑马鱼感染SS3后的脑部炎症。

基于3DCS的制动踏板结构稳健性优化

在某车型小批量试制过程中,出现制动踏板与加速踏板相对高度超差问题,影响用户驾驶体验。建立了制动踏板3DCS公差模型,对装配过程中的公差累积进行了仿真,通过Monte Carlo、HLM、Geo-Factor 3种不同求解算法对关重影响因子和贡献度进行了溯源。结果表明,制动踏板几何因子影响系数(Geo-Factor值)高达1.74,结构稳健性差。结合成本、质量和空间布置,对制动踏板基座结构进行了优化。仿真结果显示,Geo-Factor值为1.12,结构稳健性提高35.6%。制作30套快速样件进行了实车验证,Minitab统计结果表明,制动踏板和加速踏板的相对高度满足评价标准。

基于3DCS的剪刀门外观间隙设计与运动仿真

文章围绕新车型上剪刀门与翼子板间隙尺寸开发设计展开,利用CATIA软件的数字样车技术(DMU)运动仿真模块与三维偏差分析软件3DCS建立仿真模型,通过DMU尺寸分析、DMU结合3DCS静态分析、3DCS Mechanical运动分析三种仿真方法模拟剪刀门运动过程的尺寸偏差,计算设计状态下剪刀门与翼子板的最小运动间隙。结果表明,剪刀门与翼子板间隙设计值(4.0±1.0)mm可以在保证尺寸设计精致性的同时避免运动干涉。最后,文章对三种分析方法的优劣性与适用范围进行了总结,并且通过实车验证了理论仿真的可靠性。

基于3DCS的动力电池包装配偏差分析

为达到最佳的底盘空间利用效果,某车型创新性地将电池包的安装点设置在底盘结构件上,但此安装方式在小批量生产验证阶段偶发安装错孔等干涉风险,因此该文采用3DCS软件建立了电池包装配合车的仿真模型,并对问题场景进行了仿真分析,结果表明分析值与实际统计结果基本吻合,证明了模型真实可靠。为有效解决装配干涉问题,建议采用单边双限位销等措施提高扭梁安装支架合车装配定位的稳健性,以显著减少正态分布带宽(6σ)值;同时,对尺寸链环上贡献度较高的零部件进行尺寸规格优化,以进一步降低装配错孔风险;将以上优化措施应用于实际生产中,并持续监控约1000辆下线车辆,期间未发生电池包安装错孔等装配问题,改善效果明显,可有效满足产线生产要求。

基于3DCS的前大灯区域装配偏差建模及优化

汽车前大灯区域是体现汽车整体造型的重要组成部分,前大灯组件的装配质量直接影响到整体的性能以及外观质量。然而,前大灯区域的设计与调整面临着一系列挑战,特别是在与周围零件的匹配方面,这直接影响整车感官质量。为了解决这一问题,文章利用公差分析软件3DCS对前大灯组件进行了三维公差仿真分析。通过比较分析结果,能够识别到装配关键要素,进而优化产品结构和公差,改进装配工艺。实践表明,对超差率较大的零部件公差及定位方式进行修改后,装配质量显著上升。因此,该方法可以用来指导前期的设计开发工作,提高设计稳定性,在装配方案设计初期具有指导意义。

紫草素联合肿瘤细胞裂解物刺激DC疫苗的抗肿瘤效果

目的:探讨紫草素(SK)联合肿瘤细胞裂解物(TCL)刺激的DC疫苗的抗肿瘤效果。方法:体外制备SK和TCL刺激的正常小鼠源的DC疫苗,流式细胞术检测DC表面CD80、CD86的荧光强度。流式细胞术检测与SK+TCL刺激的DC共培养后的正常小鼠脾T细胞中T-bet和RORγt的表达,ELISA检测共培养上清液中IFN-γ、IL-12P70和TNF-α的含量。建立Lewis肺癌3LL细胞荷瘤小鼠模型,分为PBS(1 mL)+TCL(5×10^(5)个细胞/100μL)、SK-L(1.25 mg/kg)+TCL、SK-M(2.5 mg/kg)+TCL、SK-H(5 mg/kg)+TCL、紫杉醇(PTX 2 mg/kg)+TCL疫苗组。疫苗接种结束后10 d,检测移植瘤体积和小鼠生存率,LDH法检测脾CTL的杀伤能力。结果:SK+TCL刺激的DC疫苗表达出高水平CD80、CD86(均P<0.01);DC与T细胞共培养液上清中IL-12P70、IFN-γ、TNF-α含量均显著上升(均P<0.01),T细胞中T-bet和RORγt的表达显著性上调(均P<0.01)。成功构建Lewis肺癌荷瘤小鼠模型,SK-H+TCL刺激的DC疫苗治疗显著延缓了的移植瘤生长并提高了小鼠的存活率,且可强烈诱导脾CTL的杀伤能力(均P<0.01)。结论:SK+TCL刺激的DC疫苗可激活DC至成熟状态,上调T细胞中T-bet和RORγt的表达,启动Th1效应细胞,SK体内治疗Lewis肺癌荷瘤小鼠具有良好的抗肿瘤效果。

有关HST高锁螺栓安装的3DCS容差分析

随着装配制造技术的不断提高,复合材料壁板正逐步取代铝合金成为机翼气动外形结构的主材料,新型号飞机的气动外形要求也随之提高。现有某型号机型外翼在装配过程中主要表现出外形精度高、复材制件多、制孔精度要求高等特点,特别是其钉头齐平度要求极高。本文以3DCS容差分析软件选以典型的HST沉头高锁螺栓,配合现有高锁螺栓安装规范文件进行分析,探究了目前现有高锁螺栓安装文件所规定容差参数能得到的齐平度极限,并给出锪窝相关优化。

DCS系统不同通讯方式在巴西MZBA3000t/d熟料生产线的设计和应用

1项目介绍巴西MZBA3 000 t/d熟料生产线是合肥水泥研究设计院有限公司负责总体设计的一条水泥熟料生产线,该项目位于巴西东北部城市莫索罗境内,其自动化控制系统主要由中央控制室的操作管理层和现场电气控制室的现场控制层以及工业通讯网络等组成。因该熟料生产线广泛应用了各种类型的控制设备,智能设备和仪表:包括生料质量控制系统,电动机控制和保护单元,总线型仪表等,所以在自动控制系统组态中,充分利用西门子系统在硬件配置、软件编程上的特点。

基于3DCS的薄板件装配偏差建模分析

薄板件作为机械类产品的通用性构件,被广泛应用于制造加工行业。薄板件在实际装配过程中产生的偏差难以控制,对整个装配体系的总偏差影响巨大。文中基于3DCS偏差仿真软件对某型号前纵梁薄板组件的装配偏差进行蒙特卡洛模拟分析,并根据3DCS对各尺寸链的偏差分析结果,讨论薄板组件装配偏差与各主要因素间的偏差关系,并根据该工艺仿真模型对安装孔的干涉问题进行了调整,这对预测多工位装配体系装配偏差和偏差的数量及其来源起到了重要参考作用。

基于3DCS的电动汽车底盘一体化尺寸控制研究

文章以总装车间电动汽车底盘一体化合装的尺寸控制为研究对象,对白车身、合装托盘、车体吊具以及底盘相关零件(前副车架、动力电池、后桥)的装配基准和装配公差进行分析,结合三维偏差分析软件3DCS,探索电动汽车底盘一体化合装的尺寸控制策略,提高底盘一体化合装的装配精度及一致性,从而提升车辆整车性能。

基于超级电容储能的HL-3装置中性束逆变型高压电源模块设计

高压电源是中性束注入加热系统的重要组成部分,决定着束能量和引出束流的品质。随着电压等级的逐步提高,脉冲阶梯调制(Pulse Step Modulation,PSM)高压电源无法满足实验要求。为了实现中性束调制注入功率的快速切换,提出一种基于超级电容储能的逆变型高压电源。采用超级电容储能方式,降低所需电网容量,减小对电网的冲击。采用软开关技术的直流(DC)-直流(DC)谐振变换器结构,提高电源的响应速度,减小开关器件的开关损耗。设计电源模块电路拓扑,根据电源性能指标要求完成系统建模计算。建立充电电路和主回路的电力仿真软件PSIM(Power SIMulation)仿真模型,对电源性能指标进行仿真验证。最后搭建了逆变电源模块测试样机,进行了阶跃响应、电压纹波和软开关性能指标测试。仿真及实验验证结果表明:设计的电源模块能够实现1 600 V/50 A的稳定输出,满足6 MW/120 kV设计要求。

基于3DCS的三维尺寸公差的分析与优化

针对工程实践中所面临的公差分配与优化问题,采用矢量的概念建立三维尺寸链的向量环模型,探索基于等值分配公差基础上采用"二分"法思想进行优化的改进方案。通过某型号汽车虚拟装配过程中后蒙皮与尾灯安装在白车身上的具体实例,应用基于3DCS的三维尺寸公差分析与优化仿真给出了既能满足产品的设计性能需求又简单易行且经济性较好的符合工程实践的公差优化改进方案,验证了改进方案较原有相等公差分配方法具有较大的优越性,能够解决工程实践中企业所面临的实际问题。

基于3DCS的大型客机主起落架收放机构容差分析

为了提高起落架的装配准确度,保证起落架的装配性能,以正在研发的大型民机主起落架为原型,对起落架容差的改进设计进行了研究。以传统容差设计为基础,建立了容差分析的数学模型,运用尺寸链分析方法进行理论分析;同时基于3DCS软件,建立了容差分析的仿真模型,并对起落架进行了容差仿真分析。通过理论分析与仿真分析的结果对比,改进了容差设计。基于传统设计方法的容差设计结果通常情况下并不是最优解,可通过3DCS软件仿真分析对传统容差设计结果进行改进设计。

小鼠Foxp3基因慢病毒载体构建及其在DC2.4细胞的表达

目的:构建小鼠Foxp3基因的慢病毒载体,体外感染树突状细胞DC2.4,制备Foxp3+DC细胞,为进一步研究其免疫调节作用奠定基础。方法:将小鼠Foxp3基因克隆到慢病毒pGC-FU载体,通过PCR和测序鉴定获得连接正确的克隆。将鉴定后的重组表达质粒pGC-FU-Foxp3与pHelper1.0质粒和pHelper2.0质粒共转染293T细胞,制备携带Foxp3基因的慢病毒Lentivirus-Foxp3。Lentivirus-Foxp3感染体外培养的DC细胞,流式细胞术(FCM)检测感染后的DC细胞Foxp3表达。结果:构建的慢病毒载体pGC-FU-Foxp3经PCR鉴定和测序正确,包装慢病毒Lentivirus-Foxp3滴度为2×108TU/mL。慢病毒Lentivirus-Foxp3感染DC2.4细胞后Foxp3表达明显增加。结论:成功构建了小鼠Foxp3基因的慢病毒表达载体,慢病毒Lentivirus-Foxp3能有效感染DC细胞。

3DC/C复合材料的弯曲行为

采用三点弯曲方法测试了化学气相浸渗法(CVI)工艺制备的三维编织碳/碳复合材料(3DC/C复合材料)的性能,借助于偏光显微镜和扫描电镜研究了材料的组织结构和断口形貌,分析了密度及编织结构对材料性能和断裂模式的影响。结果表明:材料密度对弯曲强度、模量影响很大,并随试样密度的增加,3DC/C复合材料的材料的破坏模式从“假塑性”向“脆性”模式转化,“假塑性”破坏模式表现出纤维束间的剪切破坏,“脆性”破坏模式表现出纤维束的拉伸断裂。

基于Taguchi正交试验与3DCS的车灯前罩装配销孔定位布局稳健设计

提出了一种基于Taguchi正交试验与3DCS的车灯前罩装配销孔定位布局稳健设计方法。分析了车灯前罩销孔定位坐标参数对装配偏差的影响,确定了车灯前罩销孔定位设计参数水平。以销孔定位坐标值为设计参数,以各零件制造偏差和销孔定位偏差为噪声因素,制定销孔定位布局Taguchi正交试验的内外表。以转向灯罩和车大灯罩之间的装配间隙值作为衡量装配质量的指标,建立表征装配质量的稳健性评价函数,提出了车灯前罩装配销孔定位布局稳健设计的信噪比计算方法。基于3DCS对车灯前罩三维几何模型进行装配偏差仿真,分析不同销孔定位方案下装配质量对各偏差因素的稳健性,确定销孔定位布局稳健设计方案。

血清DcR3在急性呼吸窘迫综合征预后评估中的价值

目的:探讨血清Dc R3(Decoy receptor 3)在急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)预后评估中的价值。方法:采纳前瞻性巢式病例对照研究设计方案。观察42例急性呼吸窘迫综合征患者30 d预后,21例全因死亡患者纳入死亡组,21例存活患者纳入存活组。分析0~24 h血清Dc R3与ARDS病情严重程度、MODS、全因死亡的关系。结果:30天全因死亡率为50.0%。轻、中、重度ARDS死亡率分别为23.1%、60.9%、66.7%。轻、中、重度ARDS患者血清Dc R3浓度分别为1.8(1.3~2.9)ng/mL、2.4(1.2~4.8)ng/mL、4.0(2.9~5.5)ng/mL,P=0.048。死亡组与存活组血清Dc R3浓度分别为3.1(2.4~5.5)ng/mL、1.8(1.1~2.7)ng/mL,P=0.014。并发MODS与未并发MODS患者基线血清Dc R3浓度分别为3.6(2.4~5.5)ng/mL、1.8(1.1~2.9)ng/mL,P=0.011。Cox回归分析显示Dc R3≥2.7 ng/mL(HR=2.557,95%CI=1.016~6.432,P=0.046)、并发MODS(HR=4.667,95%CI=1.751~12.443,P=0.020)、氧合指数≤165 mm Hg(HR=2.737,95%CI=1.049~7.141,P=0.040)是ARDS患者30 d死亡的独立预后预测因子。结论:血清Dc R3浓度高低与ARDS病情严重程度相关。ARDS患者早期血清Dc R3浓度增高与发生MODS以及30 d全因死亡风险增高有关。

DC、CIK、CD3AK细胞免疫治疗对恶性肿瘤患者凝血功能变化的影响

目的:探讨DC、CIK、CD3AK细胞免疫治疗前、后的晚期恶性肿瘤患者凝血功能、D-二聚体及血小板的变化。方法:选择DC、CIK、CD3AK细胞免疫治疗的61例晚期恶性肿瘤患者,在采集细胞前1天内及DC、CIK、CD3AK细胞免疫治疗后的3天内行凝血功能、D-二聚体及血小板的检测。比较DC、CIK、CD3AK细胞免疫治疗前、后的凝血功能、D-二聚体及血小板的差异。结果:DC、CIK、CD3AK细胞免疫治疗后D-二聚体、FDP均较前升高(P<0.05),差异有统计学意义;PT、PT_INR较治疗前有所升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:DC、CIK、CD3AK细胞免疫治疗3天内D-二聚体及FDP水平升高,在一定程度上加重晚期肿瘤患者高凝状态或血栓形成的风险。

紫杉醇联合洛铂新辅助化疗治疗局部晚期宫颈癌的疗效及其对患者血清DcR3及Survivin的影响

目的观察紫杉醇联合洛铂新辅助化疗治疗局部晚期宫颈癌的疗效,探讨其对患者血清诱捕受体3(Dc R3)及凋亡抑制基因(Survivin)水平的影响。方法选择2014年8月1日至2015年8月1日我院妇产科行子宫切除手术的局部晚期宫颈癌患者78例,按照随机数表法将其分为观察组和对照组各39例。对照组患者直接进行常规的子宫全切除手术治疗,观察组患者术前先进行两个疗程(连续四周)的紫杉醇联合洛铂新辅助化疗,再进行子宫全切除手术。术前检测两组患者的病理情况,术后1个月检测两组患者体内血清中Dc R3和Survivin水平,比较两组患者的临床疗效以及消化道、骨髓抑制等不良反应情况。结果治疗前,两组患者血清Dc R3和Survivin水平比较差异均无统计学意义(P>0.05),治疗后,观察组患者的Dc R3和Survivin水平分别为(69.75±11.87)pg/m L和(76.26±14.26)ng/m L,均明显低于对照组的(79.52±14.35)pg/m L和(87.32±15.17)ng/m L,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组患者的总有效率为82.05%(32/39),高于对照组的71.79%(28/39),但差异无统计学意义(P>0.05);观察组患者的消化道反应Ⅰ级和骨髓抑制Ⅰ级发生率分别为51.28%(20/39)和15.38%(6/39),均高于对照组的30.77%和2.56%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论局部晚期宫颈癌患者术前给予2~3个疗程的紫杉醇联合洛铂新辅助化疗有助于降低患者血清中的Dc R3和Survivin水平,临床疗效显著。

CpG ODN协同MAGE-3抗原肽致敏DC疫苗对膀胱癌细胞BIU-87的抑制作用

目的:探讨含未甲基化胞嘧啶鸟嘌呤(CpG)序列的细菌寡核苷酸(CpG oligodeoxynucleotide,CpG ODN)免疫佐剂在增强黑色素瘤抗原基因-3(melanoma antigen gene-3,MAGE-3)抗原肽致敏DC抗膀胱肿瘤细胞的作用及其分子机制。方法:采用Ficoll法从健康志愿者HLA-A2型外周血中分离单个核细胞,常规方法诱导培养制备成熟DC。MTT法检测不同方式(MAGE-3、CpG ODN、MAGE-3+CpG ODN和无关抗原对照)致敏DC对T淋巴细胞增殖和CTL对靶细胞BIU-87的杀伤作用。CpG ODN+MAGE-3抗原肽致敏DC抗裸鼠BIU-87膀胱癌细胞移植瘤治疗7、11 d测定移植瘤质量变化,MTT和Western blotting法分别检测移植瘤细胞的增殖水平及其凋亡蛋白表达的变化。结果:CpG ODN+MAGE-3抗原肽致敏DC能够促进T淋巴细胞增殖(P<0.05),并显著提高活化T淋巴细胞的CTL对靶细胞BIU-87的杀伤活性(P<0.05)。体内实验表明,致敏DC治疗7、11 d的各组移植瘤质量均明显降低(均P<0.05),移植瘤的增殖能力下降也较明显(P<0.05);与其他致敏DC方式相比较,尤以CpG ODN+MAGE-3致敏DC组在治疗11 d时的移植瘤质量降低非常显著(P<0.01),且明显促进荷瘤小鼠脾脏单个核细胞的增殖能力(P<0.01);该组在治疗第3天起移植瘤组织Bcl-2表达水平明显降低、Bax水平明显升高(均P<0.05或P<0.01)。结论:CpG ODN能促进MAGE-3抗原肽致敏DC对膀胱癌BIU-87细胞的抑制作用,为膀胱癌DC疫苗的临床应用提供了实验依据。