2型糖尿病患者血清hsa-miR-30c-5p水平表达对微血管并发症的预测价值研究

目的探讨2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者血清人微小核糖核酸(homo sapiensmicroRNA,hsa-miR)-30c-5p表达对微血管并发症的预测价值。方法选取2021年5月~2022年9月巴中市中心医院收治的T2DM患者205例为糖尿病组,并根据患者微血管并发症情况将糖尿病组进一步分为并发组(n=124)和未并发组(n=81),另选取同期健康体检者205例为对照组,均采用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcriptionpolymerasechain reaction,RT-PCR)检测受试者血清hsa-miR-30c-5p表达并进行比较。采用多因素Logistic回归分析影响微血管并发症的因素,绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线预测血清hsa-miR-30c-5p表达对T2DM患者发生微血管并发症的价值。结果并发组、未并发组的血清hsa-miR-30c-5p表达分别为0.58±0.06,0.72±0.08,均低于对照组(0.89±0.21),差异具有统计学意义(t=16.038,7.079,均P=0.001);并发组低于未并发组,差异具有统计学意义(t=14.289,P=0.001)。糖尿病病程[OR(95%CI):3.873(2.976~4.770)]、尿酸[OR(95%CI):2.125(1.211~3.040)]、糖化血红蛋白[OR(95%CI):2.680(1.745~3.616)]均为T2DM患者发生微血管并发症的独立危险因素(均P<0.05),葡萄糖目标范围内时间[OR(95%CI):0.491(0.135~0.846)]、血清hsa-miR-30c-5p[OR(95%CI):0.532(0.146~0.817)]均为T2DM患者发生微血管并发症的保护因素(均P<0.05)。血清hsa-miR-30c-5p表达预测T2DM患者发生微血管并发症的敏感度、特异度、曲线下面积(95%置信区间)分别为81.45%,85.19%,0.802(0.741~0.854)。结论T2DM患者血清hsa-miR-30c-5p表达异常降低,且血清hsa-miR-30c-5p为T2DM患者发生微血管并发症的保护因素,对T2DM患者发生微血管并发症具有一定的预测价值。

长链非编码RNA淋巴细胞白血病缺失基因2/微小RNA-30c-5p/丝裂原活化蛋白激酶1轴在食管癌细胞紫杉醇耐药中的作用机制实验研究

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)淋巴细胞白血病缺失基因2(DLEU2)/微小RNA(miR)-30c-5p/丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)轴在食管癌细胞紫杉醇(PTX)耐药中的作用机制。方法:构建EC109/PTX细胞,检测食管癌组织和癌旁正常组织,以及食管癌细胞EC109和KYSE150细胞、食管上皮细胞SHEE和EC109/PTX细胞DLEU2、miR-30c-5p、MAPK1 mRNA表达。取生长良好的EC109/PTX细胞,分为沉默(siRNA)DLEU2组、阴性对照(siRNA NC)组、siRNA DLEU2+miR-30c-5p抑制剂(inhibitor)组、siRNA DLEU2+inhibitor NC组、siRNA DLEU2+过表达(pcDNA)MAPK1组、siRNA DLEU2+pcDNA NC组和空白组。验证miR-30c-5p与DLEU2、MAPK1的靶向关系。检测各组EC109/PTX细胞DLEU2、miR-30c-5p、MAPK1 mRNA表达水平。检测EC109/PTX细胞活性、凋亡情况及对PTX的耐药性。检测谷胱甘肽S-转移酶π(GST-π)、MAPK1、P-蛋白(P-gp)蛋白表达水平。结果:食管癌组织和EC109/PTX细胞miR-30c-5p表达降低,DLEU2、MAPK1 mRNA表达增加(均P<0.05)。DLEU2靶向调控miR-30c-5p,miR-30c-5p靶向调控MAPK1。siRNA DLEU2组miR-30c-5p表达和细胞凋亡率较siRNA NC组、空白组增加,DLEU2和MAPK1 mRNA表达、细胞增殖率、药物半数抑制浓度(IC 50)以及GST-π、MAPK1、P-gp蛋白表达降低(均P<0.05)。siRNA DLEU2+miR-30c-5p inhibitor组miR-30c-5p表达和细胞凋亡率较siRNA DLEU2+inhibitor NC组降低,MAPK1 mRNA表达、细胞增殖率、IC 50以及GST-π、MAPK1、P-gp蛋白表达增加(均P<0.05)。siRNA DLEU2+pcDNA MAPK1组细胞凋亡率较siRNA DLEU2+pcDNA NC组降低,MAPK1 mRNA表达、细胞增殖率、IC 50以及GST-π、MAPK1、P-gp蛋白表达增加(均P<0.05)。结论:干扰lncRNA DLEU2可减弱EC109/PTX细胞对PTX的耐药性,可能与调控miR-30c-5p/MAPK1轴有关。

血清miR-30c-5p和NLGN1联合检测对腹腔镜结直肠癌根治术患者术后复发转移的预测价值

目的:探讨血清微小核糖核酸-30c-5p(miR-30c-5p)和神经角质蛋白1(NLGN1)联合检测对腹腔镜结直肠癌根治术后复发转移的预测价值。方法:选取2021年8月—2022年8月进行腹腔镜结直肠癌根治术的结直肠癌患者112例为病例组,并根据患者术后12个月内是否复发转移分为复发组(n=28)和未复发组(n=84);另选同期进行体检的正常志愿者92例为对照组。qRT-PCR检测血清miR-30c-5p、NLGN1 mRNA水平,多因素Logistic回归分析患者术后复发转移的影响因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-30c-5p、NLGN1 mRNA对患者术后复发转移的预测价值,Pearson法分析miR-30c-5p与NLGN1 mRNA相关性。结果:病例组miR-30c-5p水平显著低于对照组(P<0.05),NLGN1 mRNA水平显著高于对照组(P<0.05);与未复发组相比,复发组miR-30c-5p水平显著降低(P<0.05),NLGN1 mRNA水平显著升高(P<0.05),且未复发组与复发组的组织分化程度之间差异有统计学意义(P<0.05);组织低分化、NLGN1 mRNA水平升高为术后复发转移的危险因素(P<0.05),miR-30c-5p水平升高为术后复发转移的保护因素(P<0.05);血清miR-30c-5p、NLGN1 mRNA及联合预测患者术后发生复发转移的AUC为0.823、0.823、0.902,联合预测显著优于miR-30c-5p(Z=2.031,P=0.042)、NLGN1 mRNA(Z=2.239,P=0.025)单独预测;miR-30c-5p与NLGN1 mRNA水平具有负相关性(r=-0.436,P<0.05)。结论:在腹腔镜结直肠癌根治术后复发转移患者中,miR-30c-5p水平降低,NLGN1 mRNA水平升高,对患者术后复发转移具有一定的辅助预测价值。

miR-30c-5p对人绒毛滋养层细胞线粒体自噬、间充质转化及PEG10水平影响

目的探讨miR-30c-5p对人绒毛滋养层细胞线粒体自噬、间充质转化及PEG10水平影响。方法人绒毛滋养层细胞HTR-8/SVneo分为空白组(HTR-8/SVneo细胞正常培养)、低氧组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养)、miR-30c-5p mimics组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养转染miR-30c-5p mimics)、NC-mimics组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养转染NC-mimics)、miR-30c-5p inhibitor组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养转染miR-30c-5p inhibitor)、NC-inhibitor组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养转染NC-inhibitor)。qRT-PCR检测各组细胞miR-30c-5p表达;Transwell小室检测细胞侵袭数目;划痕试剂盒检测细胞划痕愈合率;相关试剂盒检测ROS水平;免疫印记检测PEG10、Parkin、PINK1蛋白水平。结果空白组、低氧组、miR-30c-5p mimics组、NC-mimics组、miR-30c-5p inhibitor组及NC-inhibitor组的miR-30c-5p表达分别为1.00±0.00、1.00±0.00、1.61±0.15、1.03±0.13、0.75±0.08及0.96±0.10,差异有统计学意义(F=45.750,P<0.05);与空白组相比,低氧组HTR-8/SVneo细胞侵袭数目、划痕愈合率、PEG10、Parkin、PINK1降低,ROS升高,差异均有统计学意义(P<0.05);低氧组与NC-mimics组、NC-inhibitor组比较上述指标,差异均无统计学意义(P>0.05);与低氧组相比,miR-30c-5p mimics组细胞侵袭数目、划痕愈合率、PEG10、Parkin、PINK1降低,ROS升高,差异均有统计学意义(P<0.05),miR-30c-5p inhibitor组细胞侵袭数目、划痕愈合率、PEG10、Parkin、PINK1升高,ROS降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论抑制miR-30c-5p可加快低氧状态下的人绒毛滋养层细胞侵袭及迁移,并通过促进线粒体自噬降低ROS表达,机制与抑制PEG10水平相关。

MicroRNA-30c靶向作用FANCF对乳腺癌细胞药物敏感性的调控效果

探究MicroRNA-30c靶向作用FANCF对乳腺癌细胞药物敏感性的调控。方法 利用脂质体技术将miR-30基因转染到乳腺癌细胞系MCF-7/ADR耐药细胞中。利用 Luciferase报告基因技术明确miR-30家族与FANCF mRNA-3UTR之间的相互关系和作用位点。在此基础上以miR-30家族为研究对象,应用Realtime-PCR技术对miR-30c表达水平差异进行数据分析,进一步研究miR-30家族对 FANCFmRNA的调控作用。用MTS法、AnexinV-PI双染法和 PI单染法测定细胞的增殖调亡和细胞周期。免疫印迹法检测DNA损伤修复途径中FANCF、FANCD2表达。结果 相比于MCF-7细胞,MCF-7/ADR细胞中miR-30c基础表达显著降低(P<0.05)。miR-30c在MCF-7/ADR耐药株中可能通过上调miR-30c而增强其对阿霉素、顺铂的敏感性。结论 MicroRNA-30c靶向作用沉默FANCF后可增加乳腺癌细胞对阿霉素及顺铂的敏感性。

LINC00707靶向miR-30c-5p对ox-LDL诱导的人血管平滑肌细胞增殖、迁移及炎症因子的影响

目的探讨LINC00707对氧化型低密度脂蛋白(oixidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导的人血管平滑肌细胞功能障碍的影响及其作用机制。方法采用ox-LDL诱导人血管平滑肌细胞HVSMCs建立动脉粥样硬化细胞模型,si-NC、si-LINC00707、miR-NC、miR-30c-5p mimic分别转染至HVSMCs后,加入100 mg·L-1 ox-LDL处理细胞,si-LINC00707和anti-miR-NC、si-LINC00707和miR-30c-5p Inhibitor分别共转染至HVSMCs后,加入100 mg·L-1 ox-LDL处理细胞;qRT-PCR法检测LINC00707、miR-30c-5p的表达量;CCK-8法、Transwell实验分别检测细胞增殖及迁移;ELISA法检测IL-6、TNF-α、IL-10的水平;双荧光素酶报告实验检测LINC00707与miR-30c-5p的靶向关系;Western blot检测E-cadherin、N-cadherin蛋白表达量。结果ox-LDL诱导的HVSMCs中LINC00707的表达量升高(P<0.05),miR-30c-5p的表达量降低(P<0.05);转染si-LINC00707或miR-30c-5p mimic后,细胞存活率、N-cadherin蛋白水平和IL-6、TNF-α的水平降低(P<0.05),迁移细胞数减少(P<0.05),E-cadherin蛋白水平和IL-10的水平升高(P<0.05);LINC00707可靶向结合miR-30c-5p;共转染si-LINC00707和miR-30c-5p Inhibitor后,细胞存活率、N-cadherin蛋白水平和IL-6、TNF-α的水平升高(P<0.05),迁移细胞数增多(P<0.05),E-cadherin蛋白水平和IL-10的水平降低(P<0.05)。结论下调LINC00707导致miR-30c-5p表达升高从而抑制ox-LDL诱导的HVSMCs增殖、迁移及炎症反应。

miR-30c-5p通过调节Notch1的表达抑制人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo的迁移、侵袭和管状形成

目的:探讨miR-30c-5p通过调节Notch1表达对人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo迁移、侵袭和管状形成调控的机制,确定其在子痫前期发病中的潜在作用。方法:在体外对人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo进行培养,慢病毒系统构建miR-30c-5p过表达及敲低稳转HTR-8/SVneo细胞系。分为对照组、导入miR-30c-5p过表达质粒组和导入miR-30c-5p敲低质粒组。通过荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞中miR-30c-5p和Notch1基因的表达量,蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞中Notch1蛋白的表达量,划痕愈合实验、Transwell侵袭实验和管状形成实验分别检测各组细胞的迁移、侵袭和管状形成能力。结果:与对照组比较,miR-30c-5p过表达质粒组中细胞的miR-30c-5p基因表达水平升高(P<0.0001),细胞Notch1蛋白表达水平下降(P<0.01),细胞迁移(P<0.01)、侵袭(P<0.001)和管状形成能力(P<0.05)均受到抑制。反之,miR-30c-5p敲低质粒组中细胞的miR-30c-5p基因表达水平下降(P<0.01),细胞Notch1蛋白表达升高(P<0.001),细胞的迁移(P<0.01)、侵袭(P<0.05)以及细胞的管状形成能力(P<0.01)增强。结论:miR-30c-5p能够通过抑制Notch1的表达降低人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo的迁移、侵袭和管状形成能力,参与子痫前期的发病。

circ_POLA2靶向miR-30c-5p对胃癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的:探讨circ_POLA2对胃癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其可能作用机制。方法:qRT-PCR法检测胃癌组织与癌旁组织中circ_POLA2、miR-30c-5p的表达量;Pearson法分析circ_POLA2与miR-30c-5p在胃癌组织中表达量的相关性;体外培养人胃癌细胞HGC-27,根据转染物不同进行分组:si-NC组、si-circ_POLA2组、miR-NC组、miR-30c-5p组、si-circ_POLA2+NC-inhibitor组、si-circ_POLA2+miR-30c-5p-inhibitor组;CCK-8法、Transwell实验依次检测细胞增殖及迁移、侵袭;双荧光素酶实验检测miR-30c-5p与circ_POLA2的靶向关系;免疫印迹法检测蛋白PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、MMP-2、MMP-9表达。结果:与癌旁组织比较,胃癌组织中circ_POLA2的表达量升高,miR-30c-5p的表达量降低;circ_POLA2与miR-30c-5p的表达呈负相关;与si-NC组比较,si-circ_POLA2组miR-30c-5p的表达量升高,细胞存活率、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9水平和p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt比值以及迁移、侵袭细胞数均降低;miR-30c-5p过表达可抑制野生型circ_POLA2的荧光素酶活性;与miR-NC组比较,miR-30c-5p组的细胞存活率、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平和p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt比值以及迁移、侵袭细胞数均降低;与si-circ_POLA2+NC-inhibitor组比较,si-circ_POLA2+miR-30c-5p-inhibitor组的细胞存活率、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平和p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt比值以及迁移、侵袭细胞数均升高。结论:干扰circ_POLA2可通过靶向上调miR-30c-5p表达,抑制PI3K/AKT通路的激活,进而抑制胃癌细胞增殖、迁移及侵袭。

血清miRNA-186,miRNA-30c在肝细胞性癌中诊断价值的研究

目的：分析miRNA-186，miRNA-30c在肝细胞性肝癌（hepatocellular carcinoma，HCC）诊断方面潜在的应用价值。方法收集肝细胞性肝癌、慢性肝炎及健康体检者各55例；以逆转录PCR方法检测miRNA-186，miRNA-30c在血清中的相对表达情况，以受试者工作曲线分析两者在肝癌诊断中的应用价值并与血清甲胎蛋白（alpha-fetoprotein，AFP）检测相比较。结果肝癌患者血清中的miRNA-186相对表达量高于慢性肝炎及健康对照组（P＜0.01，P＝0.02），miRNA-30c的相对表达量低于慢性肝炎及健康对照组（P＝0.034，P＜0.01），血清 miRNA-186，miRNA-30c ROC 曲线下面积分别为0.927和0.932，miRNA-186诊断肝癌的灵敏度和特异度分别为78.18％和63.64％，miRNA-30c诊断肝癌的灵敏度和特异度分别为81.82％，71.82％，分别以miR-186＋miR-30c，miR-186＋AFP，miR-30c＋AFP和miR-186＋miR-30c＋AFP作为联合诊断组合时，诊断灵敏度分别为89.09％，85.45％，90.9％和94.54％。特异度分别为66.36％，67.27％，82.73％和53.64％。结论 miR-30 c与 AFP联合检测时在显著提升诊断敏感度的同时，特异度仍维持在较好水平，且准确度也相对最高，是较为理想的肝癌诊断组合。

MiR-30c通过靶向KRAS抑制肝癌细胞系生长侵袭能力的体外研究

目的探讨Mi R-30c对肝癌细胞生长和侵袭的影响。方法采用脂质体Lipofectamine 2000将Mi R-30c模拟物组和Mi R-30c模拟物组阴性对照转染至肝癌细胞Huh7,q RT-PCR检测转染效果,细胞免疫荧光、Western blot检测转染后目的蛋白的表达,Transwell、划痕实验检测细胞迁移侵袭能力、MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期分布的改变。结果成功构建稳定过表达Mi R-30c的肝癌细胞亚系Huh7-Mi R30c,荧光定量PCR结果显示Mi R-30c表达量明显上调,过表达Mi R-30c后Huh7细胞的侵袭和增殖能力均受到明显抑制;抑制Mi R-30c能明显抑制KRAS蛋白和减低p-ERK蛋白表达水平,对ERK蛋白水平无明显影响。结论抑制Mi R-30c表达可能通过调控RAS/MAPK/ERK通路抑制肝癌细胞Huh7增殖和侵袭。

miR-30c抑制宫颈癌细胞恶性表型的分子机制研究

目的:探讨微小RNA(miR)-30c过表达抑制宫颈癌细胞恶性表型的分子机制。方法:运用Lipofectamine 2000转染法将pGenesil-1-miR-30 c质粒转染宫颈癌细胞系C33A、HeLa、SiHa和CaSki,以转染p-Geresil-1的细胞为阴性对照;运用TaqMan real-time PCR检测各组细胞中miR-30c的表达水平;采用MTT法、集落形成实验、Transwell法、Annexin V-FITC及流式细胞术分别测定细胞活力抑制率、集落形成能力、迁移率及凋亡率;Western blot检测Bax、Bcl-2、基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP-13和金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)的蛋白表达水平。结果:转染p Genesil-1-miR-30c质粒的宫颈癌细胞系中miR-30c表达水平均显著高于阴性对照组(P<0.01);过表达miR-30 c的宫颈癌细胞活力抑制率显著高于阴性对照组(P<0.05),细胞集落形成率和迁移率显著低于阴性对照组(P<0.05);流式细胞术检测结果显示,miR-30c过表达的宫颈癌细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05);Western blot结果显示miR-30 c过表达促进Bax和TIMP-1蛋白的表达,而抑制Bcl-2和MMP-13蛋白的表达(P<0.05或P<0.01)。结论 :miR-30 c过表达抑制宫颈癌细胞活力和迁移,诱导宫颈癌细胞凋亡,其机制与激活细胞凋亡通路及抑制MMP-13表达有关。

基于ARM的HMS30C7202平台的嵌入式Linux移植

Linux是一个源代码公开的免费操作系统,有很强的移植性。本文描述了将Linux移植到基于HMS30C7202微处理器的目标板上的方法与过程,说明了如何建立交叉编译环境,讨论了BootLoader、Linux内核及文件系统的移植,并对这种基于Linux的嵌入式系统开发做了展望。

miRNA-30c及其靶基因MTA-1在子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤中的作用

目的:探讨过表达miRNA-30c对子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法:应用子宫内膜癌Ishikawa细胞系建立子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型,予裸鼠皮下移植瘤内多点注射miRNA-30c前体表达质粒,并以阴性质粒及PBS为对照。测量移植瘤体积,计算肿瘤生长抑制率;荧光定量PCR技术检测移植瘤组织miRNA-30c表达水平;蛋白质印迹技术检测移植瘤组织MTA-1蛋白表达水平;免疫组化技术检测移植瘤组织E-cadherin表达及微血管密度(MVD)。结果:成功建立子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型,miRNA-30c质粒治疗明显抑制肿瘤生长,抑制率为(46.98±5.13)%(P<0.01);上调移植瘤组织中miRNA-30c的表达(P<0.05),下调MTA-1蛋白表达(P<0.05),下调移植瘤组织MVD(P<0.05),上调移植瘤组织E-cadherin表达(P<0.05)。结论:过表达miRNA-30c可以通过下调MTA-1表达明显抑制子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤的生长。

MiR-30c-2-3p对足细胞Nephrin、Podocin保护作用及雷公藤甲素干预作用研究

目的:探讨miR-30c-2-3p对小鼠足细胞Nephrin、Podocin保护作用及雷公藤甲素(TP)干预作用。方法:采用嘌呤霉素(PAN)致小鼠足细胞损伤的体外模型,将足细胞分成5组:空白组、转染阴性质粒组(阴性质粒组)、转染阴性质粒+PAN组(阴性质粒+PAN组)、转染miR-30c-2-3p+PAN组(阳性质粒+PAN组)、转染miR-30c-2-3p+PAN+TP组(阳性质粒+PAN+TP组)。瞬时转染miR-30c-2-3p mimics,质粒终浓度均为50 nmol/L,转染6 h后进行药物干预,PAN干预浓度均为45 mg/L,TP干预浓度均为1 ng/ml,药物干预时间均为48 h。CCK-8法检测足细胞活力;实时荧光定量PCR检测细胞中miR-30c-2-3p表达;Western Blot检测足细胞Nephrin、Podocin蛋白表达。结果:(1)阴性质粒+PAN组足细胞活力明显低于空白组及阴性质粒组(P<0.01),阳性质粒+PAN组较阴性质粒+PAN组足细胞活力提高(P<0.05),使用TP干预后其活力进一步提高(P<0.05)。(2)与空白组、阴性质粒组比较,阴性质粒+PAN组miR-30c-2-3p表达减少,差异有统计学意义(P<0.01);与阴性质粒+PAN组相比,阳性质粒+PAN组、阳性质粒+PAN+TP组miR-30c-2-3p表达均增加(P<0.05);但与阳性质粒+PAN组相比,雷公藤甲素干预组未见统计学意义(P>0.05)。(3)与空白组及阴性质粒组比较,阴性质粒+PAN组Nephrin、Podocin两者表达均减少,差异有统计学意义(P<0.01);与阴性质粒+PAN组相比,阳性质粒+PAN组Nephrin、Podocin蛋白表达增加(P<0.05);在使用了TP干预后两者表达进一步增加(P<0.05)。结论:PAN能降低足细胞活力,降低miR-30c-2-3p表达,而增加其表达可以上调足细胞活力以及Nephrin、Podocin的表达。TP可以减轻PAN诱导的足细胞损伤以及Nephrin、Podocin的表达下降,但其作用机制似乎与miR-30c-2-3p无关。

miRNA-30c的研究进展

miRNA是近年来发现的一类长度为18～24个核苷酸的可调控基因表达的非编码小分子RNA,它主要通过与靶标基因3′UTR的完全或不完全配对,降解靶标基因mRNA或抑制其翻译,从而参与调控个体发育、细胞凋亡、增殖及分化等生命活动。miRNA-30c作为miRNAs中的一员,不仅在多种组织中表达,而且许多研究还表明它可能与某些肿瘤的发生发展存在一定的关系。现对miRNA-30c的相关研究进展作一综述。

SRSF9/SRp30c通过调控GRβ对胶质瘤细胞增殖和迁移的影响

目的:探讨富含丝氨酸-精氨酸剪切因子9/富含丝氨酸-精氨酸蛋白30c(SRSF9/SRp30c)和糖皮质激素受体β(GRβ)在胶质瘤细胞中的表达及两者之间的关系。方法:用小干扰RNA(siRNA)靶向干扰胶质瘤U87细胞中SRSF9的表达,同时用慢病毒将短发卡RNA(shRNA)转染细胞,构建SRSF9敲减的U87稳转细胞株,通过荧光显微镜观察并检测转染情况。通过RT-q PCR和Western blot法检测SRSF9/SRp30c和GRβ的表达水平,CCK-8和细胞集落形成实验检测细胞的增殖能力,划痕实验检测细胞的迁移能力。结果:用2种方法敲减SRSF9后,SRSF9/SRp30c表达均降低,GRβ的表达水平也随之下降,差异有统计学意义(P<0.05)。荧光显微镜观察结果表明,成功构建了稳转细胞株,转染效率超过80%。CCK-8实验和细胞集落形成实验的结果表明U87细胞在敲减SRSF9后,细胞活力和集落形成能力降低,差异有统计学意义(P<0.05);划痕实验结果表明U87细胞在敲减SRSF9后,迁移能力明显减弱,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:SRSF9/SRp30c可通过调控GRβ促进胶质瘤细胞的增殖和迁移。

miR-30c在前列腺癌中的临床意义

目的研究mi R-30c在前列腺癌组织的表达及其与前列腺癌的临床相关性。方法从mi RNA芯片检测结果中获得前列腺癌相关的特异表达mi R-30c分子,进一步运用q RT-PCR检测mi R-30c在前列腺癌细胞株及组织的表达情况,结合临床信息,分析mi R-30c表达与前列腺癌临床特征的相关性。结果前列腺癌mi RNA芯片结果表明,mi R-30c在肿瘤中表达下调显著(倍数变化=2.09倍,t=-3.65,P=0.016)。q RT-PCR检测mi R-30c的表达情况表明其在前列腺癌组织的表达显著低于良性组织(3.27±0.62 vs 6.85±0.33,t=7.53,P<0.001)。进一步分析mi R-30c表达与临床预后的关系,结果表明,mi R-30c的表达水平同Gleason评分(χ2=10.04,P<0.01)、病理分期(χ2=5.03,0.01<P<0.05)、转移(χ2=5.68,0.01<P<0.05)及生化复发(χ2=4.07,0.01<P<0.05)显著相关,即Gleason评分低组、病理分期低组、无转移和无生化复发的患者中的mi R-30c表达水平更高。经统计检验,它的表达水平同术前PSA水平(χ2=0.64,P>0.05)及切缘性质(χ2=0.64,P>0.05)无显著相关。结论 mi R-30c与前列腺癌临床相关,检测mi R-30c表达不仅可鉴别前列腺癌及良性组织,并可预测生化复发的概率及危险度。

miRNA-30c在结直肠癌的表达与预后相关性分析

目的探讨结直肠癌中miRNA-30c的表达与结直肠癌患者的临床病理及预后的相关性。方法采用实时定量PCR方法检测200对结直肠癌组织和邻近正常组织的miRNA-30c的表达水平,并对其与临床特征和预后的关系进行了统计分析。结果与正常的相邻组织相比,结直肠癌组织标本miRNA-30c的表达水平显著降低(P<0.001)。miRNA-30c的表达与肿瘤大小(P=0.012)、TMN分期(P=0.002)和淋巴结转移(P=0.004)呈正相关。单因素分析显示,miRNA-30c表达低的患者总生存明显短于表达水平较高的患者(P<0.001)。多因素分析显示miRNA-30c低表达可能是预后不良的独立预后因子(P<0.001)。结论 miRNA-30c可以用于预测结直肠癌患者的预后,并对选择合理的治疗措施有一定帮助。

miR-30c在骨肉瘤组织中的表达及其临床意义

目的:探讨miR-30c在骨肉瘤组织中的表达及其临床意义。方法:37例骨肉瘤组织标本均来自于2007年1月至2015年1月间在新疆医科大学第六附属医院住院接受治疗的骨肉瘤患者,实时定量PCR和原位杂交分析骨肉瘤组织中miR-30c表达情况。单因素和多因素分析miR-30c表达与骨肉瘤临床病理参数和预后之间的相关性。结果:实时定量PCR检测和原位杂交检测分析结果一致表明:骨肉瘤组织中miR-30c的表达水平显著低于正常骨组织,差异有统计学意义(P<0.05);miR-30c低表达组肿瘤与更晚分期和中低分化程度、肿瘤复发有相关性(P<0.05);多元回归分析表明,miR-30c低表达与骨肉瘤患者生存期更短有关(P<0.01);miR-30c低水平表达是骨肉瘤患者预后的一个独立危险因数。结论:miR-30c表达下调能够促进肿瘤进展,是预测骨肉瘤患者预后的可靠指标,miR-30c也具有成为骨肉瘤靶向治疗靶点的潜力。

MiR-30c-2-3p对足细胞活力及Nephrin和Podocin蛋白表达的影响

目的探讨MiR-30c-2-3p对足细胞活力及Nephrin和Podocin蛋白的表达影响。方法采用嘌呤霉素(PAN)诱导的足细胞体外模型,将足细胞分成4组,即空白组、PAN组、阴性质粒+PAN组、阳性质粒+PAN组。通过LipofectamineTM2000瞬时转染MiR-30c-2-3p mimic。通过Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测细胞活力、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中MiR-30c-2-3p表达、Western blot检测Nephrin和Podocin蛋白的表达。结果(1)CCK-8结果提示PAN组足细胞活力明显低于空白组,差异有高度统计学意义(P<0.01),阴性质粒+PAN组较PAN组差异无统计学意义(P>0.05),阳性质粒+PAN组足细胞活力与PAN组和阴性质粒+PAN组相比均有所提高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。(2)qRT-PCR显示PAN组MiR-30c-2-3p的表达较空白组明显下降,差异有高度统计学意义(P<0.01);阴性质粒+PAN组较PAN组表达差异无统计学意义(P>0.05),而阳性质粒+PAN组MiR-30c-2-3p的表达较PAN组和阴性质粒+PAN组均提高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。(3)Western blot提示PAN组Nephrin和Podocin蛋白的表达较空白组明显下降,差异有高度统计学意义(P<0.01);与PAN组相比,阴性质粒+PAN组两者蛋白的表达差异无统计学意义(P>0.05),而阳性质粒+PAN组Nephrin和Podocin蛋白的表达较单纯PAN组和阴性质粒+PAN组均增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PAN对足细胞的活力,MiR-30c-2-3p含量及Nephrin和Podocin蛋白的表达有抑制作用,而通过外源性增加MiR-30c-2-3p表达后可提高足细胞的活力,同时可增加Nephrin和Podocin蛋白的表达。