30S核糖体的结构及其与氨基糖苷类抗生素相互作用的新进展

氨基糖苷类抗生素(AGs)是临床上广泛应用的抗生素之一,其靶位是细菌的30S核糖体。现综述30S核糖体的精确结构及几种AGs如链霉素、巴龙霉素、庆大霉素C_(1a)、妥市霉素、潮霉素B、Geneticin与30S核糖体结合方式,从分子水平上理解AGs的作用机制、构效关系和耐药性、指导设计新的抗生素。

致鹅卵黄性腹膜炎大肠杆菌30S核糖体蛋白S6的原核表达及纯化

根据已发表的30S核糖体蛋白S6(RPS6)基因序列,设计合成了1对针对RPS6的特异性引物,用PCR方法从致鹅卵黄性腹膜炎大肠杆菌中扩增出RPS6基因,并将扩增的目的片段克隆至pGEM-TEasy载体中。测序正确后将RPS6基因片段克隆进表达载体pET-32a(+)中,提取pET-32a(+)-RPS6质粒,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,用IPTG诱导表达。结果显示,PCR产物大小为396bp,与GenBank中同源序列的相似性为99.7%。SDS-PAGE分析结果表明,构建的重组RPS6在大肠杆菌中获得了可溶性表达,分子质量约为34ku,大小与预期相一致。HisTrap FF镍柱纯化大量表达的RPS6融合蛋白(His-RPS6),证实得到了高纯度的重组蛋白,为该蛋白功能研究提供了条件。