盐离子浓度对HeLa细胞内提取的“30nm”染色质结构影响的电镜观察

染色质是遗传信息发挥作用的重要处所,其结构受到了广泛的关注。研究人员基于不同的实验材料和方法提出一些30 nm染色质纤维结构模型,但并没有形成一个统一的结论。本文选择人源Hela细胞作为实验材料,综合前人的实验方法,从细胞内提取纯化染色质"30 nm"纤维并进行电子显微观察,在不同Na+离子浓度盐溶液中对Hela细胞染色质"30 nm"纤维结构形态及折叠紧密程度的影响进行了分析。结果表明,在0～100 mmol/L Na+之间,随着盐浓度的升高,染色质结构折叠呈现逐渐紧密的趋势。与此同时,在提取染色质纤维的过程中可以通过调节Na+,Ca2+,Mg2+等盐离子浓度抑制Hela细胞内源性核酸酶的活性。本文结果为进一步研究30 nm染色质纤维的高级结构提供了有益的信息。

30nm染色质的体外组装和电镜分析

真核生物的基因组以染色质的形式存在,染色质在真核生物的基因表达调控及胚胎发育过程中起重要作用,为表观遗传提供一个重要的信息整合平台.染色质的高级结构,特别是30 nm染色质的动态变化在基因转录沉默和激活过程中起着重要的调控功能.但是目前对30 nm染色质纤维的组装及其精细结构的认识还十分有限.本文通过体外表达系统,表达未经修饰的组蛋白,并利用克隆构建的601DNA均一重复序列,通过逐步降低盐离子浓度并加入组蛋白H1或镁离子的方法,体外重组均一的30 nm染色质纤维.并利用镀金属、负染色制样和冷冻电镜制样等手段通过透射式电子显微镜(TEM)对30 nm纤维结构的形成原因、组蛋白H1的作用和核小体重复单位(nucleosome repeat lengths,NRLs)长度对30 nm染色质纤维的影响进行研究.研究结果显示在组蛋白H1或二价镁离子存在的情况下,均可形成30 nm染色质纤维.其形成的染色质拓扑结构有所不同.统计分析表明,不同长度核小体重复单位(NRLs)形成的染色质纤维直径有所不同(P<0.05).同时,我们得到了较为均一的冷冻电镜样品,为进一步研究30 nm染色质纤维的高级结构及理解体内染色质存在的形式及动态过程打下了较好的基础.

Eudragit~ NM30D在双氯芬酸钠缓释骨架片中的应用

目的研究双氯芬酸钠缓释片的处方和工艺,并了解聚合物的材料特性及释药机理。方法以聚合物Eudragit~ NM30D水分散体为缓释骨架材料和黏合剂,采用湿法造粒工艺制备双氯芬酸钠缓释骨架片。分别考察聚合物用量、填充剂种类、用量和颗粒大小对药物释放速率的影响。结果Eudragit~ NM30D聚合物在双氯芬酸钠缓释片中可起到缓释骨架的作用;在湿法制粒工艺中,可直接用作黏合剂制粒,简化生产过程。干聚合物的用量为10%、以乳糖为填充剂制备的双氯芬酸钠缓释片的缓释效果与市售对照制剂相似。结论Eudragit~ NM30D可用于双氯芬酸钠缓释骨架片的研制开发,且具有用量少、处方简单、工艺重复性好的特点。

基于纳米磁流体尸体磁共振成像血管造影的可行性研究

目的初步探究纳米磁流体(magnetic nanoparticle ferrofluid,MNPF)在尸体磁共振成像血管造影(postmortem magnetic resonance angiography,PMMRA)的可行性。方法纳米粒子γ-Fe2O3(30nm)通过油酸(oleic acid,OA)表面修饰后,均匀分散在石蜡油(paraffin oil,PO)中,制备γ-Fe2O3浓度为0~1000μg/ml的MNPF。MNPF导入试管密封后固定在MR仪扫描床上,使用T1w-SE、T2w-SE和3DT2*w-GR扫描序列获取影像数据并分析影像学特点。将γ-Fe2O3浓度为0μg/ml、25μg/ml和1000μg/ml的MNPF灌注至牛离体心脏冠脉中,使用T1wSE、T2w-SE扫描序列获取影像数据并分析影像学特点。结果当γ-Fe2O3浓度在0~100μg/ml范围时,MNPF在T1wSE影像上呈现高信号,在T2w-SE影像上呈现低信号,在T2*w-SE影像上,MNPF随着γ-Fe2O3浓度的增加信号逐渐降低直至消失。当γ-Fe2O3浓度超过100μg/ml时,将可能导致磁敏感伪影的产生,而不适合造影剂的使用。结论一定浓度范围的γ-Fe2O3脂溶性MNPF,有可能成为PMMRA的T1阳性造影剂和信号可控T2*对比剂。

电子束光刻研制高分辨X射线波带片透镜最新进展

首先综述了当前X射线透镜的分辨率和效率的水平,预测并讨论了发展我国波带片透镜、赶超国际先进水平的技术路径图。在原有100 nm分辨率波带片和会聚透镜工艺基础上,综述了电子束光刻结合金电镀进一步发展30~70 nm分辨率的X射线波带片的最新进展。在研发30 nm分辨率的波带片中,电子束光刻中的邻近效应严重限制了波带高宽比,而现有商业软件(基于蒙特卡罗模型和显影动力学)的邻近效应修正在同时处理从微米到30 nm的各种图形时效果甚微。为此,本团队针对70 nm分辨率的硬X射线波带片采用了图形修正法,实现了20:1的波带高宽比,针对50 nm分辨率的硬X射线波带片采用了分区域修正法,获得了15:1的波带高宽比;30 nm波带片透镜的金属化摒弃了传统的直流电镀工艺,采用脉冲金电镀,实现了金环均匀电沉积,成功研制了30 nm分辨率的软X射线波带片透镜和30~100 nm的大高宽比分辨率测试卡。所有研制的波带片透镜在上海同步辐射装置得到了X射线光学成像验证。