miR-324-3p/MAGOH分子轴在脑胶质瘤中的功能及作用机制研究

目的探究miR-324-3p/MAGOH分子轴在脑胶质瘤中的功能及作用机制。方法收集2022年6月—2023年6月遵义医科大学附属医院神经外科接受手术治疗的胶质瘤患者(n=50)和非胶质瘤的脑病患者(n=20)样本,体外培养人脑胶质瘤细胞系U87。实时荧光定量核酸扩增检测系统(Real-time Quantitative PCR Detecting System,qPCR)检测脑胶质瘤细胞(U87)和患者临床标本中miR-324-3p和MAGOH的表达。蛋白免疫印迹法(Western Blot,WB)检测MAGOH、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)2和MMP9的表达水平。细胞计数试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测胶质瘤细胞的增殖能力。Transwell检测胶质瘤细胞的侵袭能力。荧光素酶报告基因检测miR-324-3p和MAGOH的相互作用。免疫组化检测MAGOH在脑胶质瘤组织中的表达。结果胶质瘤患者癌组织中MAGOH的表达较高,差异有统计学意义(P<0.01);且与miR-324-3p的表达呈现显著负相关(r=0.7383,P=0.0002)。过表达MAGOH能促进胶质瘤细胞的增殖和侵袭(P<0.01),而过表达miR-324-3p能抑制胶质瘤细胞的增殖和侵袭(P<0.01)。miR-324-3p和MAGOH的3’-UTR相互作用,且过表达MAGOH能抑制miR-324-3p对胶质瘤细胞的抑制作用(P<0.01)。结论miR-324-3p通过抑制MAGOH的表达来抑制胶质瘤细胞和增殖和侵袭。

基于IncRNA-MIAT/miR-324-3p/Notch通路探究大鼠脑缺血再灌注损伤的作用机制

目的 探讨长链非编码RNA心肌梗死相关转录(lncRNA-MIAT)在大鼠脑缺血再灌注损伤(I/R)模型的表达及其对低氧缺糖复供(OGD/R)诱导的PC12细胞凋亡及氧化应激的影响。方法 SD大鼠10只,随机分为I/R模型组及假手术组,采用大脑中动脉闭塞法(MCAO)建立脑损伤I/R模型。建立大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤的细胞系(PC12细胞)的氧糖剥夺/复氧(OGD/R)模型,检测相关指标。采用RT-PCR法检测LncRNA MIAT和miR-324-3p在SD大鼠脑组织和PC12细胞中的表达量。采用黄嘌呤氧化酶法(WST-8V)、硫代巴比妥酸法(TBA test)及5,5’—二硫代双(2—硝基苯甲酸)法(DTNB)分别检测PC12细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)的含量;酶联免疫吸附法(ELISE)检测PC12细胞的肿瘤坏死因子—α (TNF-α)、白介素—6 (IL-6)及白介素—1β (IL-1β)等炎性因子的含量;流式细胞法检测PC12细胞的凋亡率,蛋白印迹法(Western blot)法检测细胞凋亡相关蛋白Bax(Bcl-2家族促凋亡蛋白)、Bcl-xl(Bcl-2家族抗凋亡蛋白)、Bcl-2(B淋巴细胞瘤—2),Notch信号通路相关蛋白Notch1 (Notch家族1型跨膜糖蛋白)、Hes1 (多毛增强子1)、Hes5表达量。结果 I/R组大鼠、OGD/R组PC12细胞中LncRNA MIAT水平分别显著低于假手术组、对照组(P<0.05),miR-324-3p水平呈相反变化趋势。过表达LncRNA MIAT显著上调OGD/R组LncRNA MIAT、Bcl-xl、Bcl-2表达量,抑制Bax表达量(P<0.05)。过表达LncRNA MIAT能显著降低Vetor组MDA含量,提高SOD和GSH含量(P<0.05)。ELISA结果显示,过表达LncRNA MIAT组TNF-α、IL-6及IL-1 β含量显著低于Vector组,同时显著高于过表达LncRNA MIAT+过表达miR-324-3p组(P<0.05)。Western-blot检测结果显示,过表达LncRNA MIAT组Notch1、Hes1、Hes5表达量显著低于模型组和过表达LncRNA MIAT+过表达miR-324-3p组(P<0.05)。结论 LncRNA-MIAT的过度表达可抑制OGD/R模型中PC12细胞Notch1、Hes1和Hes5(Notch通路相关蛋白)的表达,降低PC12细胞的氧化损伤和凋亡率,其机制可能与LncRNA-MIAT调节miR-324-3p的表达有关。

LncRNA BLACAT1调节miR-324-5p/MAP4K3轴对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探讨长链非编码RNA膀胱癌相关转录本1(LncRNA BLACAT1)调节miR-324-5p/丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶激酶3(MAP4K3)轴对人肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测肝癌组织、癌旁组织以及人正常肝细胞、人肝癌细胞(Huh-7、SMMC-7721、MHCC97 L)中BLACAT1、miR-324-5p、MAP4K3 mRNA的表达水平;将肝癌细胞系Huh-7细胞分为:ctrl组、si-NC组、si-BLACAT1组、si-BLACAT1+miR-NC组、si-BLACAT1+miR-324-5p inhibitor组;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组细胞中BLACAT1、miR-324-5p、MAP4K3 mRNA的表达;CCK-8法检测细胞增殖;划痕实验检测细胞迁移;Transwell小室检测细胞侵袭;蛋白免疫印迹检测细胞中MAP4K3、PCNA、MMP2、MMP9、c-Myc、Cyclin D1的表达;双荧光素酶报告基因实验分别验证BLACAT1和miR-324-5p、miR-324-5p和MAP4K3的关系。结果肝癌组织和人肝癌细胞系中BLACAT1、MAP4K3 mRNA表达水平显著增加,miR-324-5p表达显著降低(P<0.05);与ctrl组、si-NC组比较,si-BLACAT1组Huh-7细胞的BLACAT1、MAP4K3 mRNA表达、A450值、迁移率、侵袭率、PCNA、MMP2、MMP9、MAP4K3、c-Myc、Cyclin D1表达明显降低(P<0.05),miR-324-5p表达显著增加(P<0.05);抑制miR-324-5p表达减弱了敲低BASCAT1对Huh-7细胞的增殖、迁移和侵袭能力的抑制作用;BASCAT1靶向负调控miR-324-5p表达,miR-324-5p靶向调控MAP4K3表达。结论敲低BLACAT1可能通过靶向miR-324-5p来下调MAP4K3表达,进而抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭。

血清miR-324-3p及miRNA-483-3p在PCOS中的表达水平及与超声诊断监测指标的关系

目的:探究与分析血清miR-324-3p及miRNA-483-3p在PCOS中的表达水平及与超声诊断监测指标的关系。方法:选取本院自2018年4月至2021年4月收治的PCOS患者103例作为观察组,另选择同时期来本院接受健康体检的未发生PCOS妇女100例作为对照组,对比两组患者的一般资料,采用实时定量PCR对血清miR-324-3p及miRNA-483-3p水平进行测量,同时采用GE公司生产的彩色多普勒诊断仪对两组的卵巢超声情况进行记录,采用Spearman相关性分析血清miR-324-3p及miRNA-483-3p与PCOS超声指标的关系。结果:观察组与对照组相比卵巢体积较大、卵泡数目较多,血流指数较快,血清miR-324-3p水平较低,miRNA-483-3p水平较低,差异有统计学意义(P<0.05)。行Spearman相关性分析可见,卵巢体积、卵泡数目及血流指数分别与血清miR-324-3p及miRNA-483-3p之间呈现出了明显的负相关性。结论:血清miR-324-3p及miRNA-483-3p在PCOS中呈现出了较低的表达水平,且与其超声诊断指标呈现出了明显的相关性,为PCOS的临床诊断及后续治疗提供了可靠依据。

miR-324-3p通过调控MC1R基因影响黑色素的形成

旨在证明miR-324-3p可以通过调控其预测的靶基因MC1R及其下游基因的表达从而对羊驼皮肤黑色素的合成产生影响。本研究在体外培养的羊驼皮肤黑色素细胞中转染miR-324-3p过表达载体,应用qRT-PCR与Western blotting分析比较各试验组中MC1R基因与毛色相关基因小眼畸形相关转录因子(Microphthalmia-associtated transcription factor,Mitf)、酪氨酸酶(Tyrosinase,Tyr)、酪氨酸相关蛋白2(Tyrosinase related protein 2,Tyrp2)的表达差异性,利用酶标仪检测黑色素产量的变化。结果显示:(1)miR-324-3p在棕色与白色羊驼皮肤中均有表达,且在棕色羊驼皮肤中极显著表达(P<0.01),其相对表达量是白色的1.64倍;(2)黑色素细胞被转染了miR-324-3p过表达载体后,处理组靶基因MC1R及其下游调控基因Mitf、Tyr和Tyrp2的表达量与黑色素产量较空白对照组均有下调,且以Mitf基因表达量极显著下调(P<0.01)。综上表明,羊驼皮肤中miR-324-3p可能通过调控MC1R基因的表达,顺势下调MC1R基因下游调控基因Mitf、Tyr与Tyrp2的表达,最终对羊驼皮肤黑色素细胞中黑色素的类型及合成量产生影响。

miR-223、miR-324-5p与慢性乙肝肝纤维化的相关性及其临床诊断价值

目的探讨miR-223、miR-324-5p与慢性乙肝肝纤维化的关系,以及其对慢性乙肝感染及肝纤维化程度的临床诊断价值。方法选取本院2018年1月至2019年12月收治的80例慢性乙型肝炎患者为乙肝组,80例健康者为对照组,采用RT-PCR法检测所有受试者血清中miR-223、miR-324-5p相对表达水平。根据肝组织活检Metavir评分标准将乙肝组分为无肝纤维化组(n=20)和肝纤维化组(n=60),采用二元Logistics回归分析miR-223、miR-324-5p与乙型肝炎肝纤维化的关系。随后再将乙肝组分为轻中度肝纤维化组(n=44)和重度肝纤维化组(n=36),绘制ROC曲线研究miR-223、miR-324-5p相对表达水平对乙型肝炎病毒感染和重度肝纤维化的诊断效能。结果乙肝组患者血清中miR-223和miR-324-5p水平均显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。肝纤维化组患者血清中miR-223和miR-324-5p水平均显著高于无肝纤维化组,差异均有统计学意义(P<0.05)。二元Logistics回归分析提示miR-223水平是乙型肝炎患者肝纤维化的危险因素。重度肝纤维化患者血清中miR-223和miR-324-5p水平均显著高于轻中度肝纤维化患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。在乙型肝炎的诊断中,miR-223、miR-324-5p及两者联合的ROC曲线下面积分别为0.855,0.818,0.879,均有统计学意义(P<0.05)。在重度肝纤维化的诊断中,miR-223、miR-324-5p及两者联合的ROC曲线下面积分别为0.792,0.676,0.830,均有统计学意义(P<0.05)。诊断效能统计结果显示,miR-223和miR-324-5p联合检测诊断乙型肝炎的准确度、特异度均优于各指标单独检测;miR-223和miR-324-5p联合检测诊断重度肝纤维化的准确度、敏感度均优于各指标单独检测。结论miR-223水平可能是乙型肝炎患者肝纤维化的危险因素,具有进一步研究价值。外周血miR-223和miR-324-5p水平可有效反映乙型肝炎病毒的感染情况和肝纤维化程度,同时监测两者表达水平,有助于对乙型肝炎的诊断和对肝纤维化程度的判断。

微小RNA-324对非小细胞肺癌细胞迁移侵袭及ETS1表达的影响

目的探讨微小RNA-324(miR-324)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞迁移和侵袭能力及E26转录因子1(ETS1)表达的影响。方法采用实时荧光定量PCR(QPCR)比较正常支气管上皮细胞16HBE和NSCLC细胞H322中miR-324水平的差异,采用脂质体Lipofectamine 2000法将miR-324抑制物或模拟物分别转染至H322细胞(抑制组和过表达组),以仅转染脂质体的细胞为空转染组;QPCR检测转染48 h后各组的miR-324水平,采用CCK-8法检测各组转染24、48、72 h的增殖情况,采用Transwell法检测各组的迁移和侵袭能力,Western blotting检测各组的ETS1表达情况。结果 QPCR检测结果显示H322细胞的miR-324水平为0.172±0.023,低于正常支气管上皮细胞16HBE的1.106±0.274,差异有统计学意义(P<0.05)。空转染组、抑制组和过表达组的miR-324水平分别为1.069±0.082、0.287±0.034和7.114±0.726,与空转染组相比,过表达组的miR-324水平升高而抑制组的miR-324水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与空转染组相比,过表达组的增殖率降低而抑制组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell检测结果显示迁移实验中空转染组、抑制组和过表达组的穿膜细胞数分别为(472.3±35.6)个、(692.1±50.6)个和(341.7±37.5)个,侵袭实验中空转染组、抑制组和过表达组的穿膜细胞数分别为(392.1±40.5)个、(521.6±57.6)个和(228.3±31.6)个,与空转染组相比,抑制组的穿膜细胞数升高而过表达组的穿膜细胞数降低,差异有统计学意义(P<0.05)。转染组、抑制组和过表达组的ETS1蛋白水平为0.56±0.13、0.87±0.23和0.26±0.09,与空转染组相比,抑制组的ETS1水平升高而过表达组的ETS1水平降低(P<0.05)。结论 miR-324在NSCLC细胞中的表达下调并可抑制细胞增殖和侵袭迁移能力,发挥类似抑癌基因的作用,可能通过靶向转录因子ETS1表达来发挥作用。

血浆miR-324-5p对单纯性先天性心脏病预后风险分级的评估

目的研究单纯性先天性心脏病(CHD)患者血浆miR-324-5p表达变化,评价其在CHD预后和风险分级等方面的临床应用价值。方法选取2012年1月至2013年1月沈阳军区总医院先天性心脏病内科收治的CHD患儿76例为CHD组,另选取13例健康者血清标本为对照组,应用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测血浆中miR-324-5p的表达变化,通过Kalpan-Meier生存分析、Cox比例风险模型等综合评价血浆miR-324-5p在CHD预后和风险分级等方面的临床应用价值。结果与对照组相比,单纯性CHD患者外周血浆miR-324-5p表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);Kaplan-Meier生存分析表明,miR-324-5p表达水平较高组患者复发风险及死亡概率更高(P<0.05);Cox比例风险模型分析表明,在单因素分析中,miR-324-5p表达水平和体质量指数(BMI)是CHD的发病危险因子(P<0.05),风险比(HR)分别为1.79和2.17;在多因素分析中,只有BMI是CHD的发病危险因子(P<0.05),HR为1.38,HR 95%置信区间(CI)为(1.12,1.79)。结论血浆miR-324-5p作为CHD诊断的生物学标志物具有一定的临床应用价值,但还需要与其他指标联合应用。

基于PC的H.324可视电话系统的实现

介绍了符合ITU TH .32 4协议在PSTN网上的可视电话系统的软件实现。该系统利用具有MMX技术的PC机实现软件实时视频、音频编解码 ,利用符合V .34协议的Modem通过PSTN网实现数据通信。重点讨论了H .2 6 3视频编解码、视频采集、视频显示以及H .2 4 5通信控制协议的实现。

基于DSP的H.324可视电话研究与实现

介绍了H.324可视电话的基本框架,并在分析视音频编解码所需要的计算量和存储容量的基础上,针对H.324标准下的H.263、G.723.1、H.245、H.223、V.34各标准,采用AD公司的DSP芯片,设计了基于DSP的可视电话系统。

基于四运放LM324的模拟电子设计综合训练

介绍了四运放集成电路运算放大器LM324。根据全国大学生电子设计竞赛的基本技能训练要求,阐述了运用1片含有4个运放的LM324实现三角波信号产生、二输入加法运算、带通滤波、二输入比较4个功能模块电路,得到最终波形。经过认真设计和反复实验,该电路在Multisim中的仿真结果符合综合训练的设计要求,实际制作出来的电路的测试结果也满足设计要求。实践证明,该训练方案能有效地培养学生的模拟电子设计能力,同时提高学生综合运用专业知识的能力。

lncRNA HCG18调控miR-324-5p/GLI1轴在急性髓系白血病细胞增殖和侵袭中的作用机制

目的长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18(lncRNA HCG18)调对急性髓系白血病(AML)的作用机制尚不清楚。探讨lncRNA HCG18控微小RNA-324-5p(miR-324-5p)/胶质瘤相关基因同源蛋白1(GLI1)轴对AML细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法选择2017年1月-2021年3月在本院血液科住院治疗的AML患者35例作为研究对象(AML组),另选取同期在本院治疗并进行骨髓穿刺检查的非血液系统肿瘤性疾病患者30例作为对照组,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测所有入选人员骨髓单个核细胞中lncRNA HCG18与miR-324-5p的表达。体外培养AML细胞HL-60,将细胞分为对照组、si-NC组、lncRNA HCG18 siRNA组、miR-NC组、miR-324-5p mimics组、miR-324-5p mimics+GLI1 NC组、miR-324-5p mimics+GLI1组、lncRNA HCG18 siRNA+NC inhibitor组、lncRNA HCG18 siRNA+miR-324-5p inhibitor组,分别检测检测HL-60细胞中lncRNA HCG18、miR-324-5p表达、HL-60细胞增殖、迁移与侵袭及GLI1、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9蛋白表达。双荧光素酶报告系统分析miR-324-5p与lncRNA HCG18、GLI1的靶向关系。结果与对照组比较,AML组患者骨髓单个核细胞中lncRNA HCG18表达水平(2.85±0.32)较对照组(1.03±0.11)显著升高(P<0.01),而miR-324-5p表达水平(0.47±0.05)较对照组(1.05±0.09)显著降低(P<0.01);沉默lncRNA HCG18表达或过表达miR-324-5p后HL-60细胞增殖、细胞迁移与侵袭数、Cyclin D1、MMP-2、MMP-9蛋白表达显著降低(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验显示,miR-324-5p与lncRNA HCG18、GLI1均有靶向关系;抑制miR-324-5p表达可逆转沉默lncRNA HCG18表达对HL-60细胞增殖、迁移与侵袭的抑制作用;GLI1过表达可逆转过表达miR-324-5p对HL-60细胞增殖、迁移与侵袭的抑制作用。结论lncRNA HCG18在AML细胞中高表达,抑制lncRNA HCG18表达可通过调控miR-324-5p/GLI1轴抑制AML细胞增殖、迁移与侵袭。

JOPENS流服务与TDE-324系列地震数据采集器实时数据流接口程序的设计与实现

JOPENS系统是为地震台网中心开发的数据处理软件系统,为使地震台站记录到的实时数据流能接入JOPENS系统处理,必须为数采开发对应的接口程序,用来接收地震台站数采的实时数据流。介绍了JOPENS的流服务与珠海泰德公司生产的TDE-324系列数采实时数据流接口的设计思想与实现过程,并对接口程序进行了故障处理能力试验检测,对接口程序在地震台网实际运行中接收到的数据进行连续率统计分析,据此对接口程序的稳定性、容错能力、断点续传等特性作出了初步评价。JOPENS的流服务器通过该接口获取该型号数采的实时波形数据,并已经在此基础上实现了全国观测数据的实时共享。

基于DSP平台的H.324系统研究与实现

在分析H.324系统中双向视音频编解码所需要的运算量和存储容量的基础上,选择两片高速DSP芯片TMS320VC5509,合理分配资源,对视频编解码中关键代码进行优化,设计和实现了双向视音频编解码的实时H.324系统。特别是在定点DSP上采用了整数变换代替浮点DCT,消除了浮点运算,减少了运算量,给出了实验结果。

基于H.324协议的可视电话延时测试的一种方法

论文介绍了基于H.324协议框架的可视电话的基本原理。H.324协议是基于PSTN普通电话线路的多媒体可视通信协议。通过深入研究H.324可视电话的特点,提出了一种环路延时测试方法,提高了系统测试效率;最后给出了运行测试结果。

基于TI TMS320DM642平台的H.324可视电话设计及任务调度策略

TITMS320DM642芯片运算能力达4800MIPs,时钟频率600MHz,具有强大的多媒体数字信号处理能力。本文提出了一种TITMS320DM642平台上H.324可视电话的设计方案,重点研究了系统各模块设计和调度对H.324可视电话性能的影响,提出了一种有效的TITMS320DM642平台上H.324可视电话系统的任务调度策略,提高了可视电话通信系统的性能。

基于H324的电视会议系统中AEC设计研究

消回声的处理是长话通信中的一个关键技术,也是电视会议系统中必须解决的一个重要问题。本文讨论了电视会议系统中声音传输产生回声的特点、AEC(Acoustic Echo Canceller)的设计方法及其关键技术。文中所阐述的算法已在电视会议系统中实时实现了软件的消回声处理。

基于DSP的H.324终端实现

提出了一种基于DSP的H．324终端的实现方案分析了其中主要模块的功能，描述了系统软硬件的关系以及系统核心模块的实现。