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非病毒载体介导的人凝血因子Ⅷ基因在小鼠32D细胞系中的表达
被引量:
6
1
作者
尹俊
王鸿利
+6 位作者
王学锋
璩斌
武文漫
丁秋兰
傅启华
戚正武
王振义
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
2004年第6期721-725,共5页
为了观察非病毒载体 pRC/RSV介导的人凝血因子Ⅷ基因在小鼠 32D细胞系中的表达 ,将B结构域缺失(△ 76 0aa - 16 39aa)的人FⅧcDNA(hFⅧBDcDNA)亚克隆至质粒载体pRC/RSV ,构建重组质粒载体 pRC/RSV hFⅧBDcDNA。经SuperFectTransfectionR...
为了观察非病毒载体 pRC/RSV介导的人凝血因子Ⅷ基因在小鼠 32D细胞系中的表达 ,将B结构域缺失(△ 76 0aa - 16 39aa)的人FⅧcDNA(hFⅧBDcDNA)亚克隆至质粒载体pRC/RSV ,构建重组质粒载体 pRC/RSV hFⅧBDcDNA。经SuperFectTransfectionReagent转染小鼠 32D细胞系 ,分别采用一期法、ELISA法和RT PCR检测细胞培养上清液中人FⅧ的促凝活性 (hFⅧ∶C)和抗原含量 (hFⅧ∶Ag)以及细胞中hFⅧBDcDNA的转录。结果表明 :小鼠 32D细胞系培养上清液中的人FⅧ∶Ag最高达到了 4 5 0 .0 8毫微克 /(10 6细胞·2 4小时 ) ,hFⅧ∶C最高达到了 2 .0 1单位 /(10 6细胞·2 4小时 ) ,RT PCR可检测到 32D细胞中hFⅧBDcDNA转录的mRNA。结论 :非病毒质粒载体 pRC/RSV介导的人凝血因子Ⅷ基因能够在小鼠 32D细胞系中表达人FⅧ蛋白 ,所表达的FⅧ与正常人血浆中的野生型FⅧ具有相似的凝血活性。
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关键词
血友病A
非病毒载体
人凝血因子Ⅷ
基因表达
32d细胞系
下载PDF
职称材料
Notch分子与其配体在32D细胞分化过程中的作用
2
作者
纪春岩
马道新
+1 位作者
赵建强
张茂宏
《中华血液学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第12期642-644,共3页
目的 探讨Notch信号传导系统的作用机制及其对造血系统的影响。方法 将报告基因TP1瞬时转染Notch1 CHO和Notch2 CHO细胞后 ,分别加入转染有不同Notch配体Delta1、Delta4、Jagged1、Jagged2的CHO细胞及正常未转染的CHO细胞 ,使Notch...
目的 探讨Notch信号传导系统的作用机制及其对造血系统的影响。方法 将报告基因TP1瞬时转染Notch1 CHO和Notch2 CHO细胞后 ,分别加入转染有不同Notch配体Delta1、Delta4、Jagged1、Jagged2的CHO细胞及正常未转染的CHO细胞 ,使Notch分子与其配体充分结合并发挥作用 ,加入发光底物PGL 10 0 ,用Lumat测定发光情况。将Notch1 32D细胞加入含G CSF培养液的CHO、Jagged2 CHO及Delta4 CHO细胞中 ,观察Notch1 32D细胞分化及分化抑制情况。结果 5种Notch配体与Notch1结合后均能引起荧光素酶活性增高 ,Jagged2 CHO、Delta4 CHO1 4、Delta4 CHO1 5尤为明显。对Notch2来讲 ,5种配体均可引起TP1活性的增高。在G CSF存在下 ,Notch1 32D细胞可分化为成熟的粒细胞 ;通过分化抑制实验发现Jagged2能抑制G CSF引起的Notch1 32D细胞分化 ,但Delta4不能抑制G CSF引起的Notch1 32D细胞分化。结论 Jagged2、Delta4为Notch1分子的配体 ,Delta4不能抑制G CSF引起的Notch1 32D细胞分化 ,但Jagged2能抑制G CSF引起的Notch1 32D细胞分化。
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关键词
Notch信号传导系统
NOTCH配体
32d细胞系
细胞
分化
原文传递
题名
非病毒载体介导的人凝血因子Ⅷ基因在小鼠32D细胞系中的表达
被引量:
6
1
作者
尹俊
王鸿利
王学锋
璩斌
武文漫
丁秋兰
傅启华
戚正武
王振义
机构
上海第二医科大学附属瑞金医院上海血液学研究所
中国科学院上海生物化学研究所
出处
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
2004年第6期721-725,共5页
文摘
为了观察非病毒载体 pRC/RSV介导的人凝血因子Ⅷ基因在小鼠 32D细胞系中的表达 ,将B结构域缺失(△ 76 0aa - 16 39aa)的人FⅧcDNA(hFⅧBDcDNA)亚克隆至质粒载体pRC/RSV ,构建重组质粒载体 pRC/RSV hFⅧBDcDNA。经SuperFectTransfectionReagent转染小鼠 32D细胞系 ,分别采用一期法、ELISA法和RT PCR检测细胞培养上清液中人FⅧ的促凝活性 (hFⅧ∶C)和抗原含量 (hFⅧ∶Ag)以及细胞中hFⅧBDcDNA的转录。结果表明 :小鼠 32D细胞系培养上清液中的人FⅧ∶Ag最高达到了 4 5 0 .0 8毫微克 /(10 6细胞·2 4小时 ) ,hFⅧ∶C最高达到了 2 .0 1单位 /(10 6细胞·2 4小时 ) ,RT PCR可检测到 32D细胞中hFⅧBDcDNA转录的mRNA。结论 :非病毒质粒载体 pRC/RSV介导的人凝血因子Ⅷ基因能够在小鼠 32D细胞系中表达人FⅧ蛋白 ,所表达的FⅧ与正常人血浆中的野生型FⅧ具有相似的凝血活性。
关键词
血友病A
非病毒载体
人凝血因子Ⅷ
基因表达
32d细胞系
Keywords
hemophilia A
non viral vector
human coagulation factor Ⅷ
gene expression
32
d
cell line
分类号
R554.1 [医药卫生—血液循环系统疾病]
下载PDF
职称材料
题名
Notch分子与其配体在32D细胞分化过程中的作用
2
作者
纪春岩
马道新
赵建强
张茂宏
机构
山东大学齐鲁医院肿瘤中心血液科
出处
《中华血液学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002年第12期642-644,共3页
基金
山东省医药卫生资助项目 (2 0 0 1CA1CJA1)
文摘
目的 探讨Notch信号传导系统的作用机制及其对造血系统的影响。方法 将报告基因TP1瞬时转染Notch1 CHO和Notch2 CHO细胞后 ,分别加入转染有不同Notch配体Delta1、Delta4、Jagged1、Jagged2的CHO细胞及正常未转染的CHO细胞 ,使Notch分子与其配体充分结合并发挥作用 ,加入发光底物PGL 10 0 ,用Lumat测定发光情况。将Notch1 32D细胞加入含G CSF培养液的CHO、Jagged2 CHO及Delta4 CHO细胞中 ,观察Notch1 32D细胞分化及分化抑制情况。结果 5种Notch配体与Notch1结合后均能引起荧光素酶活性增高 ,Jagged2 CHO、Delta4 CHO1 4、Delta4 CHO1 5尤为明显。对Notch2来讲 ,5种配体均可引起TP1活性的增高。在G CSF存在下 ,Notch1 32D细胞可分化为成熟的粒细胞 ;通过分化抑制实验发现Jagged2能抑制G CSF引起的Notch1 32D细胞分化 ,但Delta4不能抑制G CSF引起的Notch1 32D细胞分化。结论 Jagged2、Delta4为Notch1分子的配体 ,Delta4不能抑制G CSF引起的Notch1 32D细胞分化 ,但Jagged2能抑制G CSF引起的Notch1 32D细胞分化。
关键词
Notch信号传导系统
NOTCH配体
32d细胞系
细胞
分化
Keywords
Signal trans
d
uction system, Notch
Ligan
d
,Notch
Cell line,
32
d
Cell
d
ifferentiation
分类号
R329 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
非病毒载体介导的人凝血因子Ⅷ基因在小鼠32D细胞系中的表达
尹俊
王鸿利
王学锋
璩斌
武文漫
丁秋兰
傅启华
戚正武
王振义
《中国实验血液学杂志》
CAS
CSCD
2004
6
下载PDF
职称材料
2
Notch分子与其配体在32D细胞分化过程中的作用
纪春岩
马道新
赵建强
张茂宏
《中华血液学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2002
0
原文传递
已选择
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