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HnRNPE2 decoy RNA恢复C/EBPα活性诱导32D-P210的细胞粒系分化
1
作者
魏容
曾建明
+6 位作者
袁颖
王雅珍
黄世峰
罗红伟
肖青
陈新敏
冯文莉
《第四军医大学学报》
北大核心
2009年第10期877-880,共4页
目的:采用核不均一核糖核蛋白E2(hnRNP E2)decoy RNA靶向阻断CCAAT增强子结合蛋白alpha(C/EBPα)基因的异常翻译,诱导小鼠白血病样32D-P210细胞株向粒系分化,并进一步探讨其分子机制.方法:电穿孔法分别将野生型和突变型hnRNP E2 decoy ...
目的:采用核不均一核糖核蛋白E2(hnRNP E2)decoy RNA靶向阻断CCAAT增强子结合蛋白alpha(C/EBPα)基因的异常翻译,诱导小鼠白血病样32D-P210细胞株向粒系分化,并进一步探讨其分子机制.方法:电穿孔法分别将野生型和突变型hnRNP E2 decoy RNA表达质粒转染入32D-P210细胞,经G418筛选出稳定株后,RT-PCR检测C/EBPa,粒细胞集落刺激因子受体(G-CSFR)与髓过氧化物酶(MPO)基因的mRNA水平;WesternBlot检测C/EBPa,G-CSFR的蛋白表达水平;瑞氏染色观察粒细胞集落刺激因子(G-CSF)刺激前后细胞形态;流式细胞仪检测分化抗原Gr-1,CD11b的表达.结果:筛选到分别稳定表达野生型或突变型hnRNP E2 decoy RNA的TG细胞株和TGA细胞株.与未转染组32D-P210细胞相比,TG细胞株C/EBPa mRNA水平无改变,但42ku-C/EBPa蛋白、G-CSFR mRNA和MPO mRNA水平分别升高了(43.8±4.9)%,(69.1±3.2)%和(37.8±4.2)%(P<0.05);G-CSF刺激后,TG细胞出现中、晚幼粒细胞甚至成熟粒细胞形态学特征;同时Gr-1分化抗原的表达率上升至40.3%,未转染组32D-P210细胞的Gr-1表达率5.5%(P<0.05);然而CD11b在3组细胞都是高表达,没有明显的变化(P>0.05);以上各参数在TGA细胞株与未转染组32D-P210细胞株间均无显著性差异(P>0.05).结论:hnRNP E2 decoy RNA能够诱导32D-P210细胞向粒系分化,其机制可能与decoy RNA特异性阻断hnRNAE2与C/EBPα mRNA非翻译区结合,调节C/EBPα mRNA翻译,恢复42ku-C/EBPα表达,上调其下游G-CSFR和MPO等分化基因的表达有关.G-CSF可加速这一作用从而促进32D-P210细胞的分化过程.
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关键词
32d-p210
DECOY
RNA
细胞分化
核不均一核糖核蛋白E2
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职称材料
sh-hnRNP-E2逆转录病毒对32D-P210细胞诱导的白血病模型小鼠的保护作用
2
作者
韩红星
张文萍
+2 位作者
张秋萍
杨燕
单万水
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2011年第8期915-920,共6页
目的探讨sh-hnRNP-E2逆转录病毒对32D-P210细胞诱导的白血病模型小鼠的保护作用。方法建立32D-P210转化细胞株在C3H等基因小鼠体内定殖的慢性粒细胞白血病(Chronic myeloid leukemia,CML)模型,并进行鉴定;sh-hn-RNP-E2逆转录病毒感染32D...
目的探讨sh-hnRNP-E2逆转录病毒对32D-P210细胞诱导的白血病模型小鼠的保护作用。方法建立32D-P210转化细胞株在C3H等基因小鼠体内定殖的慢性粒细胞白血病(Chronic myeloid leukemia,CML)模型,并进行鉴定;sh-hn-RNP-E2逆转录病毒感染32D-P210细胞24 h后,经尾静脉移植入C3H等基因雌性小鼠中,观察sh-hnRNP-E2对CML模型小鼠的保护作用。结果经鉴定已成功建立32D-P210转化细胞株在C3H等基因小鼠体内定殖的CML模型;sh-hnRNP-E2逆转录病毒预感染32D-P210靶细胞,可促进靶细胞向粒系分化,并显著延长模型小鼠的生存期。结论 sh-hnRNP-E2逆转录病毒感染对CML模型小鼠具有显著的保护效应,是一种有效的CML体内治疗策略。
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关键词
白血病
粒-单核细胞
慢性
RNA干扰
细胞分化
32d-p210
细胞
模型
动物
原文传递
题名
HnRNPE2 decoy RNA恢复C/EBPα活性诱导32D-P210的细胞粒系分化
1
作者
魏容
曾建明
袁颖
王雅珍
黄世峰
罗红伟
肖青
陈新敏
冯文莉
机构
重庆医科大学临床血液学教研室
重庆医科大学临床医学系
重庆医科大学附属第一医院血液科
出处
《第四军医大学学报》
北大核心
2009年第10期877-880,共4页
基金
国家自然科学基金(30600748)
文摘
目的:采用核不均一核糖核蛋白E2(hnRNP E2)decoy RNA靶向阻断CCAAT增强子结合蛋白alpha(C/EBPα)基因的异常翻译,诱导小鼠白血病样32D-P210细胞株向粒系分化,并进一步探讨其分子机制.方法:电穿孔法分别将野生型和突变型hnRNP E2 decoy RNA表达质粒转染入32D-P210细胞,经G418筛选出稳定株后,RT-PCR检测C/EBPa,粒细胞集落刺激因子受体(G-CSFR)与髓过氧化物酶(MPO)基因的mRNA水平;WesternBlot检测C/EBPa,G-CSFR的蛋白表达水平;瑞氏染色观察粒细胞集落刺激因子(G-CSF)刺激前后细胞形态;流式细胞仪检测分化抗原Gr-1,CD11b的表达.结果:筛选到分别稳定表达野生型或突变型hnRNP E2 decoy RNA的TG细胞株和TGA细胞株.与未转染组32D-P210细胞相比,TG细胞株C/EBPa mRNA水平无改变,但42ku-C/EBPa蛋白、G-CSFR mRNA和MPO mRNA水平分别升高了(43.8±4.9)%,(69.1±3.2)%和(37.8±4.2)%(P<0.05);G-CSF刺激后,TG细胞出现中、晚幼粒细胞甚至成熟粒细胞形态学特征;同时Gr-1分化抗原的表达率上升至40.3%,未转染组32D-P210细胞的Gr-1表达率5.5%(P<0.05);然而CD11b在3组细胞都是高表达,没有明显的变化(P>0.05);以上各参数在TGA细胞株与未转染组32D-P210细胞株间均无显著性差异(P>0.05).结论:hnRNP E2 decoy RNA能够诱导32D-P210细胞向粒系分化,其机制可能与decoy RNA特异性阻断hnRNAE2与C/EBPα mRNA非翻译区结合,调节C/EBPα mRNA翻译,恢复42ku-C/EBPα表达,上调其下游G-CSFR和MPO等分化基因的表达有关.G-CSF可加速这一作用从而促进32D-P210细胞的分化过程.
关键词
32d-p210
DECOY
RNA
细胞分化
核不均一核糖核蛋白E2
Keywords
32d-p210
decoy RNA
cell differentiation
hnRNP E2
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
R852.22 [医药卫生—航空、航天与航海医学]
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职称材料
题名
sh-hnRNP-E2逆转录病毒对32D-P210细胞诱导的白血病模型小鼠的保护作用
2
作者
韩红星
张文萍
张秋萍
杨燕
单万水
机构
深圳市第三人民医院检验科
深圳市罗湖区妇幼保健院
出处
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2011年第8期915-920,共6页
基金
深圳市科技计划项目(200903090)
文摘
目的探讨sh-hnRNP-E2逆转录病毒对32D-P210细胞诱导的白血病模型小鼠的保护作用。方法建立32D-P210转化细胞株在C3H等基因小鼠体内定殖的慢性粒细胞白血病(Chronic myeloid leukemia,CML)模型,并进行鉴定;sh-hn-RNP-E2逆转录病毒感染32D-P210细胞24 h后,经尾静脉移植入C3H等基因雌性小鼠中,观察sh-hnRNP-E2对CML模型小鼠的保护作用。结果经鉴定已成功建立32D-P210转化细胞株在C3H等基因小鼠体内定殖的CML模型;sh-hnRNP-E2逆转录病毒预感染32D-P210靶细胞,可促进靶细胞向粒系分化,并显著延长模型小鼠的生存期。结论 sh-hnRNP-E2逆转录病毒感染对CML模型小鼠具有显著的保护效应,是一种有效的CML体内治疗策略。
关键词
白血病
粒-单核细胞
慢性
RNA干扰
细胞分化
32d-p210
细胞
模型
动物
Keywords
Leukemia
myelomonocytic
chronic
RNA interference
Cell differentiation
32d-p210
cells
Model
animal
分类号
R733.7 [医药卫生—肿瘤]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
HnRNPE2 decoy RNA恢复C/EBPα活性诱导32D-P210的细胞粒系分化
魏容
曾建明
袁颖
王雅珍
黄世峰
罗红伟
肖青
陈新敏
冯文莉
《第四军医大学学报》
北大核心
2009
0
下载PDF
职称材料
2
sh-hnRNP-E2逆转录病毒对32D-P210细胞诱导的白血病模型小鼠的保护作用
韩红星
张文萍
张秋萍
杨燕
单万水
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2011
0
原文传递
已选择
0
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