减蛋综合征病毒33K蛋白基因克隆及结构分析

纯化的减蛋综合征病毒（ＥＤＳＶ）ＤＮＡ经ＨｉｎｄⅢ水解、０．８％琼脂糖电泳后，回收各ＤＮＡ条带并克隆至ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＫＳ载体，建立了ＥＤＳＶ基因文库，对３３Ｋ蛋白基因进行了分析。本研究证实，ＥＤＳＶ３３Ｋ蛋白基因含有２个外显子，与羊腺病毒（ＯＡＶ）３３Ｋ蛋白比较，Ｎ端编码产物的同源性为３０．８％，Ｃ端的为６０％。用ＲＴ－ＰＣＲ扩增３３ＫｍＲＮＡ和ｃＤＮＡ克隆及序列分析证实，ＥＤＳＶ３３Ｋ蛋白含有８２碱基（ｎｔ）的内含子，去掉内含子３３Ｋ蛋白基因能形成完整的ＯＲＦ，其编码产物由１７７氨基酸（ａａ）组成，推测分子质量为２．０６×１０４，与人５型腺病毒和ＯＡＶ的同源性分别为２８．１％和４４．７％。

Ⅰ群禽腺病毒间接33K-ELISA检测方法的建立

【目的】建立一种鉴别I群禽腺病毒(FAVI)灭活苗免疫和野毒感染的检测方法,为FAVI的防控与净化提供技术支撑。【方法】以FAVI33K重组蛋白为包被抗原,筛选和优化间接ELISA的条件,建立FAVI抗体的间接33K-ELISA检测方法,检验其特异性、敏感性和重复性,并鉴别检测FAVI活病毒感染血清和灭活苗免疫血清各50份。【结果】33K重组抗原最佳包被浓度6.0μg/mL,包被条件为37℃孵育1h后4℃过夜,最佳封闭液为5%脱脂奶,封闭时间1.0h;待检血清稀释度1:100,抗原抗体最佳作用时间1.0h;酶标二抗最佳稀释度1:3000,作用时间45min。优化后的间接33K-ELISA的阴、阳性临界值为0.316。其特异性、敏感性、重复性试验及鉴别检测结果表明,优化后的间接33K-ELISA具有特异性强、灵敏度高、重复性好等优点,且能成功鉴别FAVI感染与灭活疫苗接种。【结论】间接33K-ELISA操作简便、特异性强、灵敏度高、重复性好、适于批量检测,可有效鉴别FAVI感染和灭活苗免疫接种,利于挑选出FAVI感染动物,为FAVI的防控与净化提供了新思路和新方法。

Ⅰ群禽腺病毒33K基因的原核表达与鉴定

33K蛋白是Ⅰ群禽腺病毒(fowl adenovirus groupⅠ,FAVⅠ)的非结构蛋白,在感染的过程中起重要作用。为了构建原核表达载体pGEX-33K作为诊断抗原,本研究根据GenBank中FAVⅠ33K基因序列,设计1对特异性引物。用PCR方法扩增目的片段,将其克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,构建了重组质粒pGEX-33K。将其转化大肠杆菌感受态细胞DH5α,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,pGEX-33K表达的分子量为36.7KD,表达产物主要以可溶性的形式存在于菌体中;最佳IPTG诱导浓度为0.75mmol/L,最佳诱导时间为4h;经Western Blot鉴定,pGEX-33K重组蛋白可与FAVⅠ阳性血清发生特异性反应,为FAVⅠ抗体ELISA鉴别诊断试剂盒的研究奠定基础。

Alenia ATCR-33K一次雷达绝缘油油位告警故障分析

本文首先介绍了AleniaATCR-33K一次雷达工作原理和发射机的系统组成,然后详细分析绝缘油冷却系统工作原理,并对绝缘油告警故障排查进行详细分析,通过云龙雷达站AleniaATCR-33K一次雷达绝缘油告警故障排查实例对绝缘油告警排故过程进行深入探讨,最后对排故过程中绝缘油加油程序进行详细阐述。从而能够形成Alenia ATCR-33K一次雷达绝缘油油位告警排故的系统性思路。

Fe_(81)Ga_(19)磁致伸缩合金的动态机电耦合系数

采用区熔定向凝固的方法,制备目标成分为Fe_(81)Ga_(19)的磁致伸缩取向晶体,进行900℃保温真空热处理3 h后油淬．采用交流阻抗仪测定其阻抗谐振频率,求出机电耦合系数(K_(33))．结果表明,直流磁场强度从32．7 mT增加到48．1和63．6 mT时,K_(33)值由0．126增加到0．129和0．133;压力从0增加到15 MPa,在32．7 mT磁场条件下K_(33)值与预加应力变化关系不明显,但在63．6 mT磁场及15 MPa下热处理样品的K_(33)值达到0．157;样品表面缺陷对交流阻抗曲线有直接影响,存在表面缺陷的样品很难测出K_(33)值．

Tb-Dy-Fe超磁致伸缩合金的动态机电耦合系数

用区熔定向凝固方法制备出成分为Tb_(0．3)Dy_(0．7)Fe_(1．90)的〈110〉和〈112〉取向的超磁致伸缩材料,研究了在900℃真空热处理后材料的动态机电耦合系数．结果表明,定向生长的〈110〉和〈112〉取向样品K_(33)值比铸态有明显的提高；随着磁场的增大,K_(33)值先增大后又逐渐减小；外加压力从0MPa增大到10MPa,K_(33)值逐渐增大；继续增大压力,K_(33)值减小．适当的热处理使K_(33)值明显提高．热处理后样品K_(33)值的提高与样品磁畴结构的改变有关．

Fe_(72.5)Ga_(27.5)磁致伸缩合金动态机电耦合系数K_(33)

采用区熔定向凝固法制备目标成分为Fe_(72.5)Ga_(27.5)的磁致伸缩定向生长试样.采用改进的交流阻抗法测定定向生长态及其淬火态(1000℃/3 h,W.Q.)试样的阻抗谐振频率谱,求出不同偏振磁场和预压力情况下的动态机电耦合系数K_(33).由于Fe-Ga合金的磁致伸缩性能比Tb-Dy-Fe巨磁致伸缩材料小一个数量级,原有的测试方法不易得Fe-Ga合金的K_(33).本实验在拾取信号时采用了四线并接接线方式并将交流激励信号输入水平调整到0.5 A,获得了稳定且明显的Fe-Ga合金阻抗谐振频率谱线.实验结果表明:定向生长试样在32.7 mT偏振磁场、无预压应力下K_(33)为0.103;淬火态试样在同样偏振磁场和无预压应力下K_(33)达到0.137.K_(33)随外加偏振磁场的增大而减小,随预压力的增大呈现先增大而后减小的趋势.淬火态试样的K_(33)较定向生长试样有明显提高.外加偏振磁场和预压力对淬火态试样的K_(33)的影响规律同定向生长试样一致.

角蛋白K18及其33、52位丝氨酸磷酸化在HBV感染肝脏疾病中的表达及意义

目的探索K18磷酸化ser33和ser52水平与HBV感染肝脏疾病的关系。方法应用组织化学免疫荧光法检测HBV感染后不同进程肝组织中K18及其磷酸化ser33和ser52的表达及其相对亚细胞定位;Western blot方法检测HBV感染后不同进程肝组织中K18及其磷酸化ser33和ser52水平。结果组织化学免疫荧光结果显示K18及其磷酸化Ser33和Ser52在所有肝组织都有表达,K18的表达没有明显差异,K18磷酸化Ser33和Ser52在正常细胞中表达较弱,位于细胞膜周围,在慢性HBV肝病时弥漫分散于细胞浆中且表达增强,重型肝炎表达最高;Western blot结果显示与对照相比,K18的Ser52水平被显著诱导但在不同程度肝脏疾病的表达无显著差异,重型肝炎时,K18的Ser33水平被显著诱导。结论K18高度磷酸化可能是HBV感染后肝脏疾病病情进展的标志。

广州地铁线网主所大面积停电故障应急处置探讨与应用

文章通过对广州地铁线网主所主变容量、牵引动力照明负荷用电量进行统计分析,概述现阶段主所发生大面积停电故障应急处置遇到的问题,以及研究分析总结出合理建议,应用在实际地铁运营之中。