雷公藤甲素通过miR-34b-5p/Notch1轴抑制骨肉瘤U2OS细胞增殖并诱导其铁死亡

目的:探究雷公藤甲素(TPL)通过miR-34b-5p调控Notch1表达对骨肉瘤U2OS细胞铁死亡影响的机制。方法:常规培养U2OS细胞,将其分为对照组、TPL(10μmol/L)组、TPL(10μmol/L)+Fer-1(铁死亡抑制剂,20μmol/L)组、miR-NC组、miR-34b-5p组、miR-34b-5p+Fer-1(20μmol/L)组、TPL(10μmol/L)+anti-miR-34b-5p组、anti-miR-34b-5p+Fer-1(20μmol/L)组。qPCR法、CCK-8法、铁离子检测试剂、DHE-荧光探针和WB法分别检测各组U2OS细胞中miR-34b-5p的表达、增殖能力、Fe2+水平、ROS水平以及铁死亡相关蛋白(GPX4、SLC7A11及Notch1蛋白)的表达,双萤光素酶报告基因实验验证miR-34b-5p与Notch1的靶向结合关系。结果:TPL可促进U2OS细胞中miR-34b-5p表达,Fer-1和anti-miR-34b-5p则抑制miR-34b-5p的表达(均P<0.05)。TPL明显抑制U2OS细胞的增殖、GPX4、SLC7A11、Notch1蛋白的表达、增加细胞中Fe2+和ROS的含量,Fer-1可逆转TPL对U2OS细胞的作用(均P<0.05)。过表达miR-34b-5p与TPL对U2OS细胞的作用相似(均P<0.05)。miR-34b-5p可靶向结合Notch1(均P<0.05)。miR-34b-5p抑制剂可明显抑制TPL对U2OS细胞的影响,Fer-1可增强miR-34b-5p抑制剂的作用(均P<0.05)。结论:TPL可抑制U2OS细胞的增殖能力并促进其铁死亡,其作用机制可能与miR-34a-5p靶向调节Notch1表达有关。

外周血中miR-34b表达水平对Ⅲb~Ⅳ期NSCLC患者靶向治疗效果及预后的评估价值分析

目的:探究外周血中微小RNA-34b(miR-34b)表达水平对Ⅲb~Ⅳ非小细胞肺癌(NSCLC)患者靶向治疗效果及预后的评估价值。方法:选取2020年1月至2022年1月于我院接受靶向治疗的104例NSCLC患者作为研究对象,根据靶向治疗效果分为有效组(n=40)及无效组(n=64)。所有患者治疗后均接受1年随访,根据预后情况分为生存组(n=32)及死亡组(n=72)。实时定量PCR检测外周血中miR-34b,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析外周血miR-34b表达水平对Ⅲb~Ⅳ期NSCLC患者靶向治疗效果及预后的评估价值,采用Kaplan-Meier生存曲线分析不同外周血miR-34b表达水平与Ⅲb~Ⅳ期NSCLC患者预后的关系。结果:有效组外周血miR-34b表达水平高于无效组(P<0.05);ROC曲线显示,外周血miR-34b表达水平评估Ⅲb~Ⅳ期NSCLC患者靶向治疗效果的AUC为0.856(P<0.05);存活组外周血miR-34b表达水平高于死亡组(P<0.05);ROC曲线显示,外周血miR-34b表达水平评估Ⅲb~Ⅳ期NSCLC患者预后的AUC为0.916(P<0.05);Log-rank检验显示,miR-34b>2.16组和miR-34b≤2.16组患者生存率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:外周血miR-34b表达水平与Ⅲb~Ⅳ期NSCLC患者靶向治疗效果及预后有关,检测外周血miR-34b表达水平有助于评估靶向治疗效果及预后。

外周血lncRNA TUG1、miR-34b-5p水平与非小细胞肺癌患者术后发生肺部感染的关系研究

目的探讨外周血长链非编码核糖核酸(lncRNA)牛磺酸上调基因1(TUG1)、微小核糖核酸(miRNA)-34b-5p表达与非小细胞肺癌(NSCLC)患者术后发生肺部感染的关系。方法选择2017年4月至2023年4月于该院接受手术治疗的951例NSCLC患者,根据术后是否发生肺部感染将患者分为感染组(106例)和非感染组(845例)。检测所有研究对象外周血中lncRNA TUG1、miR-34b-5p水平,采用Pearson相关分析lncRNA TUG1与miR-34b-5p之间的相关性;采用多因素Logistic回归分析NSCLC患者术后发生肺部感染的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析lncRNA TUG1、miR-34b-5p诊断NSCLC患者术后发生肺部感染的价值。结果感染组外周血lncRNA TUG1水平低于非感染组(P<0.05),miR-34b-5p水平高于非感染组(P<0.05)。感染组外周血lncRNA TUG1水平与miR-34b-5p水平呈负相关(r=-0.516,P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,手术时间过长、miR-34b-5p水平升高是NSCLC患者术后发生肺部感染的危险因素(P<0.05),lncRNA TUG1水平升高是NSCLC患者术后发生肺部感染的保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,lncRNA TUG1、miR-34b-5p单项及联合检测诊断NSCLC患者术后发生肺部感染的曲线下面积分别为0.821(95%CI:0.771~0.866)、0.775(95%CI:0.720~0.820)、0.913(95%CI:0.877~0.946),2项指标联合检测诊断的AUC大于lncRNA TUG1、miR-34b-5p单项诊断(Z=3.220、2.895,P<0.05)。结论NSCLC患者外周血lncRNA TUG1水平下调、miR-34b-5p水平上调,均与患者术后发生肺部感染有关,2项指标可能是判断NSCLC患者术后发生肺部感染的潜在标志物。

MiR-34b的表达与三阴性乳腺癌的临床特点及预后的关系

目的探讨MiR-34b在三阴性乳腺癌中的表达及其与临床特征和预后的关系。方法选择43例三阴性乳腺癌患者,通过qRT-PCR方法定量检测MiR-34b,并分析其与患者的临床特点和预后的相关性。结果 MiR-34b在有淋巴结转移的三阴性乳腺癌中表达上调(P<0.05)。MiR-34b与淋巴结转移相关(P<0.05),与年龄、肿块大小、临床分期均不相关(P>0.05)。MiR-34b的表达与总生存期呈负相关(P<0.05)。结论MiR-34b可能成为三阴性乳腺癌患者一种新的预后标记。

miR-34b在白血病细胞株表达和启动子区CpG岛甲基化状态及其临床意义

目的:探讨miR-34b在白血病细胞株表达和启动子区CpG岛甲基化状态及其临床意义。方法:选择10例非血液系统疾病患儿作为对照组,收集对照组骨髓细胞标本,另选择HL-60和K562白血病细胞株,采用荧光定量PCR检测对照组骨髓细胞、HL-60和K562细胞株的miR-34b相对表达量,并用甲基化特异性PCR检测各组miR-34b甲基化状态。用地西他滨处理HL-60和K562细胞株,用同样方法检测两种细胞株miR-34b相对表达量及甲基化状态。采用脂质体转染法将Has-miR-34b转染至K562细胞株,根据转染是否成功分为未转染组、阴性对照组和Has-miR-34b转染组,记录各组培养后不同时间细胞的增殖情况,并计算增殖抑制率。结果:对照组miR-34b相对表达量为(5.23±0.75),HL-60相对表达量为(0.05±0.01),K562相对表达量为(0.04±0.01),3组间比较差异具有统计学意义(F=44.812,P=0.000)。HL-60细胞株和K562细胞株分别在启动子区CpG岛存在甲基化状态,10例非血液系统疾病患儿骨髓细胞无甲基化现象。经过地西他滨处理后HL-60和K562细胞株miR-34b表达水平均显著增加(P<0.05);加地西他滨前后白血病细胞株启动子区CpG岛均存在甲基化,但是加药后甲基化明显减弱,提示地西他滨对启动子区CpG岛甲基化具有抑制作用。培养48、72、96和120 h后Has-miR-34b转染组细胞增殖抑制率分别为24.8%、46.7%、33.6%和24.7%,细胞增殖率均显著低于未转染组和阴性对照组,组间比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:白血病细胞株miR-34b启动子区CpG岛甲基化使其表达水平显著降低,这也是miR-34b对细胞株增殖抑制作用降低的原因;miR-34b也有可能是一种抑癌基因参与调控白血病的发生、发展。

早期非小细胞肺癌患者hsa-mir-34b基因启动子甲基化水平检测

目的 检测早期非小细胞肺癌（NSCLC）患者癌组织与癌旁组织hsa-mir-34b（mir-34b）基因启动子甲基化水平的差异.方法 采用重亚硫酸盐还原技术、降落巢式PCR扩增27例Ⅰ期NSCLC患者癌组织和癌旁组织配对样本中mir-34b基因启动子区DNA,克隆测序法分析甲基化谱变异,并与临床病理特征进行关联分析.结果 癌组织mir-34b基因启动子CpG岛整体甲基化水平为9.7%（6.8%～22.3%）,而癌旁组织为8.5%（5.3%～11.0%）,癌组织甲基化水平高于癌旁组织（Z=2.355, P=0.019）.当前吸烟患者mir-34b基因启动子甲基化发生率高于以往吸烟及不吸烟者.癌组织mir-34b基因启动子甲基化水平与患者性别、年龄、PS评分无关.结论 早期NSCLC患者癌组织mir-34b基因启动子甲基化水平升高,吸烟可能与mir-34b基因启动子甲基化的发生有关.mir-34b基因甲基化与早期肿瘤发生相关的机制值得进一步研究.

河南汉族人群mir-34b/c基因rs4938723多态性与结直肠癌遗传易感性及预后的关系

目的:探讨河南汉族人群mir-34b/c基因rs4938723多态性与结直肠癌(CRC)遗传易感性及预后的关系。方法:收集180例CRC患者术前及180例体检健康者(对照)空腹静脉血,采用PCR-RFLP法分析mir-34b/c基因启动子区rs4938723多态性;采用Kaplan-Meier法针对不同基因型患者绘制生存曲线并进行log-rank检验,采用Cox回归模型分析rs4938723多态性与CRC预后的关系。结果:CRC组C等位基因频率高于对照组(P<0.05);Kaplan-Meier生存分析结果显示,TT基因型与TC+CC基因型患者生存曲线差异有统计学意义(P<0.05),TC+CC基因型患者生存状况差于TT型患者。Cox回归分析结果显示,与TT基因型比较,TC、CC基因型是CRC预后不良的危险因素,HR(95%CI)分别为1.284(1.035~1.593)、2.042(1.415~2.946)。结论:mir-34b/c基因rs4938723多态性与河南汉族人群CRC遗传易感性及预后关系密切。

地西他滨联合CAG方案治疗复发急性髓细胞白血病患者的疗效及对miR-34b、USP22表达的影响

目的探讨地西他滨联合CAG方案治疗复发急性髓细胞白血病(AML)患者的疗效及对microRNA-34b(miR-34b)、特异性泛素蛋白酶22(USP22)表达的影响。方法将30例复发AML患者按照随机数字表法分为治疗组和对照组,各15例,分别采用地西他滨联合CAG方案、CAG方案。比较两组的总缓解率(ORR)、miR-34b和USP22的表达,随访观察两组患者的生存率,采用Kaplan-Meier法分析中位总生存(OS)期,分析miR-34b和USP22的表达与预后的相关性。结果治疗组ORR显著高于对照组(66.67%vs.26.67%,P<0.05)。治疗组化疗后miR-34b蛋白表达升高,USP22蛋白表达降低,且与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。随访24~36个月,治疗组和对照组生存率分别为53.3%、33.3%(P>0.05)。治疗组中位OS期为9.53个月(95%CI:7.94~11.11),显著高于对照组6.57个月(95%CI:5.21~7.92)(P<0.05)。与存活组比较,死亡组化疗后miR-34b蛋白表达明显降低,USP22蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论地西他滨联合CAG方案治疗复发AML患者,可能通过调控miR-34b及其下游靶基因USP22的表达,有效提高缓解率,延长生存期,改善预后。

miR-34b-5p上调抑制弥漫大B细胞淋巴瘤的侵袭及RhoA/ROCK信号通路

目的研究miR-34b-5p过表达对弥漫大B细胞淋巴瘤的生长和运动以及RhoA/ROCK信号通路的影响。方法选择弥漫大B细胞淋巴瘤系中SU-DHL-4细胞进行研究。建立空白对照组、空载体转染组、miR-34b-5p转染组,采用qRT-PCR检测miR-34b-5p的表达量,采用菌落形成实验、流式细胞术和Transwell试验检测细胞增殖、凋亡及侵袭能力;采用Western blot检测E-cadherin、N-cadherin Vimentin、RhoA和ROCK蛋白的表达量。结果在转染miR-34b-5p的细胞内,miR-34b-5p的表达量上调。miR-34b-5p过表达能抑制弥漫大B细胞淋巴瘤SU-DHL-4细胞增殖,促进细胞凋亡,减轻细胞侵袭,抑制RhoA/ROCK信号通路。结论 miR-34b-5p过表达可以抑制弥漫大B细胞淋巴瘤的生长和运动以及RhoA/ROCK信号通路。

神经病理性疼痛大鼠脊髓背角Sirt1与miR-34b表达的变化

目的研究Sirt1与mi R-34b在神经病理性疼痛大鼠脊髓背角中表达变化的临床意义。方法将14只雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)和坐骨神经慢性压迫性损伤组(CCI组),每组7只。于模型建立前1d及术后第7、14天,测定大鼠机械缩足反射阈值(MWT)和热缩足反射潜伏期(TWL)。术后第14天取大鼠L_(4~5)节段脊髓进行病理学检查,HE染色后观察脊髓背角运动神经元的数量变化。real-time PCR检测脊髓背角内Sirt1与mi R-34b的表达,Western blot测定大鼠脊髓背角内Sirt1、脑源性神经营养因子(BDNF)和环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)的表达。结果经MWT和TWL验证,大鼠CCI神经病理性疼痛模型建立成功。HE染色显示,与Sham组比较,CCI组大鼠在手术后7、14d脊髓背角神经元数量显著减少(均P<0.05)。real-time PCR结果显示,与Sham组相比,CCI组Sirt1表达降低,mi R-34b表达升高(均P<0.05)。Western blot显示Sirt1与CREB表达降低,p CREB与BDNF表达增加。结论 Sirt1与mi R-34b的表达变化可能参与坐骨神经慢性压迫性损伤导致的神经病理性疼痛的形成和维持。

非小细胞肺癌组织中微小RNA-34b的表达及临床意义

目的探讨微小RNA-34b(miR-34b)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达情况及其与临床病理特征的关系。方法收集本院2015年1月至2017年12月NSCLC患者的手术切除癌组织和癌旁组织120对,采用实时定量PCR(QPCR)检测组织中miR-34b的相对表达量并比较癌组织和配对癌旁组织中miR-34b的表达差异,以120例NSCLC组织中miR-34b表达水平的均数分为低表达组(<均数)和高表达组(≥均数),分析不同miR-34b表达水平与临床病理特征(性别、年龄、吸烟史、肿瘤大小、淋巴结转移、分化程度、TNM分期、病理类型和复发情况)的关系。结果 QPCR检测结果显示癌组织的miR-34b水平为0.530±0.071,低于癌旁组织的1.036±0.198,差异有统计学意义(P<0.05);以120例NSCLC组织中miR-34b的均数为界值(0.530)分为低表达组64例和高表达组56例,分析结果显示miR-34b表达与性别、年龄、吸烟史和病理类型均无关(P>0.05),而与肿瘤大小、淋巴结转移、分化程度、TNM分期和复发情况有关(P<0.05)。NSCLC肿瘤体积较大(≥3 cm)、淋巴结转移阳性、低分化、TNM分期较晚(Ⅲ期)及复发的高表达率分别为36.0%(18/50)、25.6%(10/39)、34.5%(19/55)、31.7%(13/41)和34.0%(16/47),均低于体积较小(<3 cm)、淋巴结转移阴性、高中分化、分期较早(Ⅰ～Ⅱ期)和未复发的54.3%(38/70)、56.8%(46/81)、56.9%(37/65)、54.4%(43/79)和54.8%(40/73),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 NSCLC组织中miR-34b低表达,与肿瘤的发展和复发情况有关,miR-34b可能作为NSCLC潜在的分子筛查及预后预测标志物。

miR-34b-3p调控Keap1表达减轻脑缺血再灌注氧化应激损伤

目的探讨微小RNA-34b-3p(miR-34b-3p)和Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白(Keap1)对脑缺血再灌注氧化应激损伤的作用及调控机制。方法制备脑缺血再灌注(I/R)动物模型,实时定量PCR(qPCR)检测miR-34b-3p的表达。I/R动物模型大脑中注射miR-34b-3p慢病毒,检测miR-34b-3p对氧化应激的影响。免疫印迹(WB)和萤光素酶报告基因检测miR-34b-3p对Keap1表达的调控。B35细胞中过表达或干扰Keap1,检测Keap1对氧化应激损伤的影响。B35细胞中共表达Keap1和miR-34b-3p,检测miR-34b-3p对Keap1导致的氧化应激的影响。结果miR-34b-3p在I/R动物模型大脑中表达降低,I/R动物模型大脑中过表达miR-34b-3p,使3-硝基酪氨酸(3-NT)、一氧化氮(NO)含量降低,总超氧化物歧化酶(SOD)和锰超氧化物歧化酶(MnSOD)含量升高,表明miR-34b-3p减弱氧化应激。动物模型和细胞中过表达miR-34b-3p减少Keap1蛋白表达,增加核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素氧合酶1(HO-1)蛋白表达。萤光素酶报告基因结果显示miR-34b-3p可靶向Keap13'非翻译区(3'-UTR)。细胞中过表达Keap1增强氧化应激,而干扰Keap1则结果相反。共表达实验表明,miR-34b-3p减弱了Keap1导致的氧化应激。结论miR-34b-3p通过调控Keap1表达减轻脑缺血再灌注氧化应激损伤。

MDA-MSP技术检测粪便miR34b/c甲基化及其在结直肠癌早期诊断中的意义

目的:探讨粪便miR34b/c甲基化状态的检测在结直肠癌早期诊断中的意义.方法:从126例结直肠癌患者癌组织、癌旁组织、粪便和64例正常对照者的粪便中分别提取DNA,采用多重置换扩增(multiple displacement amplification,MDA)技术对经过亚硫酸氢盐修饰样本进行全基因组扩增,结合甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)检测组织和粪便中miR34b/c基因甲基化状态.结果:结直肠癌癌组织miR34b/c基因的甲基化阳性率为95.2%(120/126),对应的癌旁正常组织为11.9%(15/126),两者比较有显著差异(P<0.01);miR34b/c甲基化状态与各临床病理参数无显著相关(P>0.05).结直肠癌粪便miR34b/c甲基化阳性率为90.2%(111/123),显著高于正常对照7.8%(5/64),差异有统计学意义(P<0.01).粪便DNAmiR34b/c用于结直肠癌早期诊断的敏感性为91.2%,特异性为92.2%.结论:miR34b/c甲基化是结直肠癌的重要分子特征,检测粪便miR34b/c甲基化有望成为结直肠癌早期诊断的一个全新的肿瘤标志物.MDA结合MSP为miRNA的甲基化分析提供了一种较理想的研究手段.

miR-34b基因在鼻咽癌组织中的表达及意义

目的检测鼻咽癌组织中miR-34b的表达,并探讨其与鼻咽癌临床病理的关系。方法收集2016年1月~2017年10月海口市人民医院经病理确诊的114例鼻咽癌患者标本作为鼻咽癌组,另选取同期行鼻内镜鼻息肉手术切除的良性鼻咽标本40例作为对照组。采用荧光定量PCR检测miR-34b在两组中的表达,并分析其与鼻咽癌临床病理特征的关系。结果鼻咽癌组织中miR-34b的相对表达量2-^(△Ct)值为0.136±0.021,显著低于对照组织的0.294±0.052(P<0.01);miR-34b的相对表达量2-^(△Ct)值与鼻咽癌患者的性别、年龄和病理分级无显著相关性(P>0.05);miR-34b的相对表达量2-^(△Ct)值在临床Ⅲ、Ⅳ期患者为0.126±0.015,显著低于Ⅰ、Ⅱ期患者的0.183±0.046(P<0.05);miR-34b值在淋巴结有转移的患者为0.116±0.013,显著低于无转移的0.162±0.041(P<0.05)。结论鼻咽癌组织中miR-34b呈低表达,其表达变化可能参与鼻咽癌的发生、发展和转移过程。

miRNA-34b联合PSA检测对前列腺癌的诊断价值

目的探讨miRNA-34b联合前列腺特异抗原(PSA)检测对前列腺癌的诊断价值。方法选取2016年1月至2018年10月广安市人民医院诊治的40例前列腺癌患者和40例良性前列腺增生患者以及40例健康成年人作为研究对象。将其分别设为前列腺癌组、前列腺增生组和正常对照组。采用化学发光法测定tPSA的含量,实时荧光定量PCR法检测miRNA-34b的表达情况,比较三组研究对象的检测结果。结果前列腺癌组患者PSA和miRNA-34b含量明显高于前列腺增生组患者和正常对照组成员,其差异均具有统计学意义(均P<0.05)。前列腺癌组患者miRNA-34b的表达与年龄无关,差异无统计学意义(P>0.05),与是否淋巴结转移、临床分期和病理分级有关,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。miRNA-34b的灵敏度和特异度不如PSA,约登指数低于PSA,但PSA联合miRNA-34b检测的灵敏度和特异度优于PSA。结论miRNA-34b在前列腺癌组患者中有较高的表达,可以作为前列腺癌诊断性血清标志物。PSA联合miRNA-34b对于前列腺癌的诊断效能优于单独检测miRNA-34b、PSA,可以用于前列腺癌的早期诊断。

内蒙古地区蒙古族哮喘患者外周血单个核细胞miR-34b-5p、miR-150水平及意义

目的:探究微小RNA-34b-5p(miR-34b-5p)、微小RNA-150(miR-150)在内蒙古地区蒙古族哮喘患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达水平及意义。方法:选取2013年1月~2014年1月本院收治的120例蒙古族哮喘患者为蒙古哮喘组,以同期本院就诊的汉族哮喘患者120例为汉族哮喘组,并选择同期健康体检者120例为健康组;RT-PCR法检查所有研究对象PBMC中miR-34b-5p、miR-150表达水平;肺功能仪检测各组肺功能指标;ELISA检测各组受试者外周血中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-13的水平;分析上述指标与疾病严重程度的相关性;评价miR-34b-5p、miR-150表达水平对哮喘的诊断价值。结果:汉族哮喘组和蒙古哮喘组患者miR-34b-5p、IFN-γ、IL-2水平及FEV1%均明显低于健康组,miR-150、IL-4及IL-13显著高于健康组(P<0.05);蒙古族和汉族患者IFN-γ、IL-2水平及FEV1%比较无显著差异(P>0.05);蒙古族miR-34b-5p显著低于汉族;而miR-150、IL-4及IL-13则显著高于汉族(P<0.05);miR-150为疾病严重程度的保护因素(OR=0.081,P=0.023),而miR-34b-5p为疾病严重程度的危险因素(OR=20.898,P=0.015);两族患者开展联合检测的诊断效能均显著优于miR-34b-5p及miR-150单一检测(z=12.257,10.947,P<0.001)。结论:miR-34b-5p及miR-150与内蒙古地区哮喘患者疾病严重程度显著相关,且不同种族之间哮喘患者表达水平差异明显,二者联用能对哮喘诊断的效果具有显著提升,并且可用于评价患者疾病的严重程度。

弥漫性大B细胞淋巴瘤miR-34b基因甲基化改变及其意义

目的:检测miR-34b基因在弥漫性大B细胞淋巴瘤(Diffuse Large B-cell Lymphoma,DLBCL)中的甲基化状态,探讨miR-34b基因甲基化在弥漫性大B细胞淋巴瘤发生、发展中的作用和意义。方法:采用基质辅助激光解析电离时间飞行质谱(MALDI-TOF MS)技术检测分析40例弥漫性大B细胞淋巴瘤和20例淋巴组织反应性增生(reactive hyperplasia,RH)样本中miR-34b基因启动子区甲基化状态。结果:弥漫性大B细胞淋巴瘤组织中miR-34b基因的平均甲基化率明显高于淋巴组织反应性增生组,两者在CpG 9.10的平均甲基化率差异有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-34b基因甲基化可能导致该基因转录表达沉默,是弥漫性大B细胞淋巴瘤发生发展的促进因素。

hsa-miR-34b-3p与CDK4在骨肉瘤组织中的表达水平及临床意义

目的探究hsa-miR-34b-3p(miR-34b)与CDK4在骨肉瘤中表达水平,并分析临床意义。方法选取100例冻存骨肉瘤组织及其对应的癌旁组织标本。使用qRT-PCR检测组织中miR-34b表达水平。使用WB检测CDK4蛋白的表达水平。结果与癌旁非肿瘤组织相比,骨肉瘤组织中miR-34b表达水平显著降低,而CDK4蛋白的表达显著增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。在骨肉瘤组织中,miR-34b的表达随肿瘤分期进展而逐渐降低,而CDK4蛋白的表达逐渐增高,miR-34b表达与CDK4蛋白表达呈负相关。在软组织浸润和转移者中miR-34b的表达水平显著低于软组织无浸润和无转移者,而CDK4蛋白表达则相反。结论在骨肉瘤组织中,miR-34b的表达随临床分期进展而逐渐降低,可能通过负向调控CDK4表达而在骨肉瘤发生发展过程中发挥作用。

粪便miR34b/c基因甲基化检测在结直肠癌早期诊断中的价值

目的:探讨粪便miR34b/c基因甲基化状态的检测在结直肠癌早期诊断中的意义。方法:从98例结直肠癌患者癌组织、癌旁组织、粪便、血中分别提取DNA,采用甲基化特异性PCR结合变性高效液相色谱法检测患者组织、粪便和血中miR34b/c基因甲基化状态。结果:结直肠癌癌组织miR34b/c基因的甲基化阳性率为91.8%(90/98例),对应的癌旁正常组织为4.08%(4/98例),两者比较差异有统计学意义(P=0.000 1)。用癌组织、粪便、血标本miR34b/c基因甲基化诊断结直肠癌的敏感度、特异度分别为:组织91.8%(90/98例)和95.9%(94/98例);粪便88.8%(87/98例)和91.7%(66/72例);血83.7%(82/98例)和87.5%(63/72例)。结直肠癌患者粪便miR34b/c基因甲基化检测结果与癌组织检测结果大致相同。结论:miR34b/c甲基化是结直肠癌的重要分子生物学特征,粪便miR34b/c基因甲基化的敏感性和特异性较高,粪便miR34b/c甲基化异常可作为结直肠癌早期诊断的肿瘤标志物。

MicroRNA-34b/c rs4938723 T>C多态性与中国汉族人群肾细胞癌易感性的相关性

目的：研究中国汉族人群microRNA‐34b／c启动子区T＞C（rs4938723）多态性与肾细胞癌易感性之间的关系。方法采用病例对照研究模式，通过TaqMan探针PCR法检测年龄和性别匹配的710例中国汉族人群肾细胞癌患者和760例正常人群的microRNA‐34b／c启动子区T＞C（rs4938723）基因型，探讨该位点基因多态性与肾细胞癌易感性之间的关系。结果与 TT／TC基因型携带者相比，CC型（OR＝1．53，95％ CI＝1．06～2．21，CC基因型比TT基因型；OR＝1．48，95％ CI＝1．05～2．10，CC基因型比T T／TC基因型）携带者发生肾细胞癌的危险性明显升高。分层分析显示携带CC基因型的老年患者（OR＝1．80，95％CI＝1．08～3．01）、男性患者（OR＝1．64，95％ CI＝1．08～2．51）、吸烟患者（OR＝2．07，95％ CI＝1．16～3．69）及饮酒患者（OR＝1．94，95％ CI＝1．01～3．73）发生肾细胞癌的危险性明显升高。结论 microRNA‐34b／c启动子区T＞C（rs4938723）基因多态性与我国汉族人群肾细胞癌易感性有关，CC型携带者发生肾细胞癌的危险性要明显高于T T／TC型携带者。