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白纹伊蚊唾液rAlb-34k2蛋白可黏附大肠杆菌并抑制其生长
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作者 田炎珅 徐倩 +5 位作者 金芮 朱亚妮 商正玲(指导) 王政艳 程金芝 吴家红 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期784-788,共5页
目的:探讨重组的白纹伊蚊唾液特异性34k2蛋白(rAlb-34k2)黏附大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等多种细菌的可能,及其对大肠杆菌OD600值的影响。方法:利用细菌结合实验,通过Western blot方法检测rAlb-34k2蛋白与大肠杆菌、鲍曼不动杆菌、乙型... 目的:探讨重组的白纹伊蚊唾液特异性34k2蛋白(rAlb-34k2)黏附大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等多种细菌的可能,及其对大肠杆菌OD600值的影响。方法:利用细菌结合实验,通过Western blot方法检测rAlb-34k2蛋白与大肠杆菌、鲍曼不动杆菌、乙型溶血性链球菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌的黏附效应,用分光光度计法检测不同浓度的rAlb-34k2蛋白对24 h内大肠杆菌OD600值的影响。结果:可在7%SDS处理后的大肠杆菌、鲍曼不动杆菌、金黄色葡萄球菌的细菌上清液、菌体沉淀和7%SDS处理的铜绿假单胞菌上清液中检测到rAlb-34k2蛋白,而在处理的乙型溶血性链球菌上清液及其菌体沉淀中未检测到相应的蛋白条带。不同浓度的rAlb-34k2蛋白(16~137 ng/μl)处理后大肠杆菌在12 h的OD600显著低于细菌对照组(P<0.05),其中以高浓度(137 ng/μl、112 ng/μl)的蛋白处理组细菌OD600值下降最为显著,且该现象与Ca^2+无关。此外,同源的rAalb-CTL2蛋白(重组白纹伊蚊唾液CTL2蛋白)在Ca^2+依赖下具有诱导大肠杆菌OD600增高的现象。结论:白纹伊蚊雌蚊唾液特异性rAlb-34k2蛋白可与多种细菌黏附,且可能具有抑制大肠杆菌的作用。 展开更多
关键词 白纹伊蚊 rAlb-34k2蛋白 细菌结合试验 抑菌试验
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试用松景PV-T34K显卡 大肚真能容天下?
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作者 陈曜 《电子与电脑》 2003年第9期24-25,共2页
炎热的夏天已经过去了,北京城最美好的季节——秋天终于来到了大家的身边。各种基于nVIDIA的GeForce FX系列图形核心的显示卡也如同雨后春笋,纷纷在市场上出现,而且不断普及。这次,松景公司又送来了一款别出心裁的GeForce FX 5200显卡,... 炎热的夏天已经过去了,北京城最美好的季节——秋天终于来到了大家的身边。各种基于nVIDIA的GeForce FX系列图形核心的显示卡也如同雨后春笋,纷纷在市场上出现,而且不断普及。这次,松景公司又送来了一款别出心裁的GeForce FX 5200显卡,型号仍旧是我们曾经评测过的XFX PV—T34K。仔细一看,原来它和我们上次的主角之间的差异在显存上,这块显卡居然配备有256MB“超级”容量的显存,真可谓是“大肚能容天下”了。 展开更多
关键词 松景公司 PV-T34k 显卡 显存容量 显存颗粒
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厦华LC-34K5液晶电视 DCDi技术入主液晶电视
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《数字生活》 2004年第12期52-52,共1页
关键词 液晶电视 LC-34k5
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白纹伊蚊唾液蛋白rAlb-34k2-1诱导的特异性细胞免疫应答对BMDM细胞中DENV-2复制的影响
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作者 覃燕春 李莹 +4 位作者 胡欢 周璐 黄贞植 吴家红 商正玲 《中国热带医学》 CAS 2024年第8期907-913,共7页
目的体外探究白纹伊蚊唾液蛋白rAlb-34k2-1诱导的小鼠脾淋巴细胞特异性免疫应答对2型登革病毒(dengue virus type 2,DENV-2)感染小鼠骨髓来源巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages,BMDM)的影响。方法采用CCK-8法分析rAlb-34k2-1蛋... 目的体外探究白纹伊蚊唾液蛋白rAlb-34k2-1诱导的小鼠脾淋巴细胞特异性免疫应答对2型登革病毒(dengue virus type 2,DENV-2)感染小鼠骨髓来源巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages,BMDM)的影响。方法采用CCK-8法分析rAlb-34k2-1蛋白对免疫/未免疫小鼠脾细胞的特异性增殖反应;制备荷载蚊唾液蛋白rAlb-34k2-1、rAalb_CTL1蛋白(蚊唾液C型凝集素蛋白)的抗原提呈细胞(antigen presenting cell,APC),与免疫/未免疫小鼠脾淋巴细胞进行混合淋巴细胞培养,取细胞培养上清处理DENV-2感染的BMDM细胞,实时荧光定量逆转录PCR(real-time quantitative reverse transcription PCR,qRT-PCR)检测DENV-2的核酸变化,分析rAlb-34k2-1蛋白诱导的特异性T淋巴细胞应答对BMDM内DENV-2复制的影响。将免疫/未免疫小鼠脾淋巴细胞与rAlb-34k2-1蛋白预处理的感染BMDM进行共培养,通过qRT-PCR检测培养48、72 h后DENV-2 E基因的表达,分析免疫/未免疫小鼠淋巴细胞对预处理的BMDM中DENV-2复制的影响。结果小鼠脾细胞体外特异性增殖实验显示,与未免疫组比较,rAlb-34k2-1蛋白能导致免疫小鼠脾细胞特异性增殖,刺激指数(stimulation index,SI)>2,P<0.0001;荷载rAalb_CTL1蛋白的混合淋巴细胞培养上清未影响BMDM细胞中DENV-2的复制,荷载rAlb-34k2-1蛋白的混合淋巴细胞培养上清可抑制BMDM中DENV-2复制(2^(-ΔΔCT) <0.5,P<0.05);与免疫/未免疫小鼠脾淋巴细胞混合培养后,rAlb-34k2-1预处理的BMDM中DENV-2复制无差异。结论rAlb-34k2-1蛋白诱导的小鼠T淋巴细胞应答上清可抑制BMDM细胞中DENV-2的复制,为探究蚊唾液蛋白诱导免疫效应在蚊媒病毒致病中的作用提供前期实验基础。 展开更多
关键词 rAlb-34k2-1蛋白 2型登革病毒 细胞免疫应答
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白纹伊蚊唾液ralb34k2-1对DENV2在不同细胞中复制的影响
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作者 李莹 黄贞植 +3 位作者 覃燕春 朱亚妮 吴家红 商正玲 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2023年第6期683-688,694,共7页
目的探讨白纹伊蚊ralb34k2-1对DENV2在不同宿主细胞中复制的影响。方法采用Dot-ELISA和间接ELISA检测ralb34k2-1与DENV2/DENV-EDⅢ的结合特性。采用qRT-PCR检测不同剂量ralb34k2-1对蚊细胞C6/36、Aa23T,哺乳动物细胞BHK-21、RAW264.7、H... 目的探讨白纹伊蚊ralb34k2-1对DENV2在不同宿主细胞中复制的影响。方法采用Dot-ELISA和间接ELISA检测ralb34k2-1与DENV2/DENV-EDⅢ的结合特性。采用qRT-PCR检测不同剂量ralb34k2-1对蚊细胞C6/36、Aa23T,哺乳动物细胞BHK-21、RAW264.7、HacaT、THP-1中DENV2-E基因表达的影响;检测C6/36细胞中抗菌肽DEFE、DPT以及RAW264.7、THP-1细胞中抗病毒因子IFN-β、ISG15、ISG56基因表达的影响。结果Dot-ELISA和间接ELISA检测显示ralb34k2-1能与DENV2、DENV-EDⅢ结合,其中与DENV-EDⅢ结合的A值最高,为0.9177±0.04422。ralb34k2-1预孵育可促进DENV2在C6/36、Aa23T细胞中的复制(2^(-ΔΔCT)值最高为2.0419±0.1027)。5μg ralb34k2-1对C6/36中DEFE的抑制率可达73%(P<0.05)。ralb34k2-1能促进HacaT、THP-1细胞中DENV2的复制,瞬时混合组DENV-E2^(-ΔΔCT)值最高,为2.8024±0.3091,高于预孵育组的2.1325±0.06746,但对鼠源细胞BHK21、RAW264.7中DENV-E基因的表达无显著影响(均P>0.05)。抗病毒因子检测显示,ralb34k2-1单独作用能诱导RAW264.7、THP-1中IFN-β、ISG15、ISG56的表达,其中5μgralb34k2-1作用于RAW264.7细胞后ISG56RNA相对表达(2^(-ΔΔCT))值为377.9795±12.5457,THP-1细胞ISG56RNA的相对表达(2^(-ΔΔCT))值为9.5703±1.0332。结论ralb34k2-1可与DENV2、DENV-EDⅢ结合,推测该蛋白可能通过抑制蚊细胞中抗菌肽的表达协助蚊源细胞中DENV2的复制,而在人源细胞中ralb34k2-1协助DENV2复制的机制与蚊源细胞不同,可为伊蚊雌蚊唾液中34k2蛋白参与DENV2在蚊-人细胞中循环的研究提供实验线索。 展开更多
关键词 白纹伊蚊 重组34k2蛋白 DENV2 蚊源细胞 鼠源细胞系 人源细胞
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白纹伊蚊rAlb-34k2蛋白对C6/36细胞内的DENV2早期抑制作用 被引量:1
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作者 朱亚妮 金芮 +5 位作者 代薇露 李莹 陈玲玲 赵久刚 吴家红 商正玲 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2021年第2期167-170,176,共5页
目的探讨白纹伊蚊唾液rAlb-34k2蛋白在DENV2感染C6/36细胞中的作用。方法采用RT-qPCR检测不同浓度rAlb-34k2蛋白作用6 h、60 h后C6/36细胞内DENV2 NS1核酸的变化;采用Dot-ELISA检测rAlb-34k2蛋白与DENV2颗粒结合情况;采用ELISA及Western... 目的探讨白纹伊蚊唾液rAlb-34k2蛋白在DENV2感染C6/36细胞中的作用。方法采用RT-qPCR检测不同浓度rAlb-34k2蛋白作用6 h、60 h后C6/36细胞内DENV2 NS1核酸的变化;采用Dot-ELISA检测rAlb-34k2蛋白与DENV2颗粒结合情况;采用ELISA及Western blot分别检测rAlb-34k2蛋白与C6/36细胞膜蛋白结合的差异。结果rAlb-34k2蛋白作用6 h后,C6/36细胞内DENV2 NS1 RNA的相对表达被抑制,其中10、25、100μg/ml浓度组NS1 RNA的相对表达(2^(-ΔΔCT))值分别为(0.6778±0.04827)、(0.5972±0.06369)和(0.4704±0.05297),差异有统计学意义(P<0.05);rAlb-34k2蛋白作用60 h后,各蛋白组间差异无统计学意义。Dot-ELISA检测rAlb-34k2蛋白(71、118.3、177.5μg/ml)可与DENV2病毒颗粒结合。间接ELISA检测rAlb-34k2蛋白与C6/36细胞疏水性膜蛋白和亲水性膜蛋白结合的A值分别为(1.1±0.26)和(3.1±0.047),差异有统计学意义(P=0.0016),Western blot检测亲水性膜蛋白的阳性结合条带数显著多于疏水性膜蛋白。结论白纹伊蚊雌蚊唾液特异性rAlb-34k2蛋白体外能与DENV2病毒颗粒及C6/36细胞膜蛋白结合,并抑制DENV2病毒早期在C6/36细胞中增殖。 展开更多
关键词 白纹伊蚊 rAlb-34k2蛋白 DENV2 亲水性膜蛋白
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白纹伊蚊rAlb-34k2蛋白诱导小鼠皮肤补体固有成分及CRIg的变化
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作者 金芮 田炎珅 +7 位作者 朱亚妮 代薇露 卢涛 徐昊 朱俐兰 朱家洪 吴家红 商正玲 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2020年第5期551-555,579,共6页
目的探讨白纹伊蚊唾液特异性34k2重组蛋白(rAlb-34k2)刺激(小鼠腹腔巨噬细胞)RAW264.7及C57BL/6小鼠后补体相关成分mRNA的变化。方法分别用不同浓度rAlb-34k2蛋白刺激RAW264.7细胞和C57BL/6小鼠足垫,采集样本,Trizol提取RNA,逆转录为cDN... 目的探讨白纹伊蚊唾液特异性34k2重组蛋白(rAlb-34k2)刺激(小鼠腹腔巨噬细胞)RAW264.7及C57BL/6小鼠后补体相关成分mRNA的变化。方法分别用不同浓度rAlb-34k2蛋白刺激RAW264.7细胞和C57BL/6小鼠足垫,采集样本,Trizol提取RNA,逆转录为cDNA后经实时荧光定量PCR方法检测刺激后不同时间各组标本中补体C3、C1q、CfB、CRIg的mRNA变化。结果rAlb-34k2诱导CfB、C3、C1q的mRNA表达上调,且皮肤组织上调幅度高于RAW264.7细胞,其中以CfB mRNA的上调幅度及持续更为显著,在诱导24h时各组(5μg、20μg)2-△△CT值分别是23.90±8.38、8.50±1.64(P<0.05);但刺激12-24h时高剂量组与低剂量组比较上调幅度差异无统计学意义(P>0.05)。在RAW264.7细胞,以刺激6h各种补体固有分成CfB、C3、C1q表达上调,但随时间延长均恢复至正常水平,各剂量组间差异不明显。在局部皮肤组织,rAlb-34k2刺激24h后CRIg表达上调,且呈浓度和时间依赖趋势;48h时,各组rAlb-34k2(5μg、20μg)2-△△CT值达到高峰,分别为8.67±2.44和32.98±9.74,有统计学差异(P<0.05)。在Raw264.7细胞,刺激6h时CRIg有上调表达趋势,但随时间延长而下调,各剂量组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论白纹伊蚊唾液rAlb-34k2蛋白参与调控巨噬细胞及皮肤补体重要成分的表达变化,在组织中尤为显著,且显著上调定居组织的巨噬细胞特异性膜受体CRIg。 展开更多
关键词 白纹伊蚊 rAlb-34k2 皮肤局部 补体 CRIg 巨噬细胞
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POSITIVE SOLUTIONS OF NONLOCAL BOUNDARY VALUE PROBLEM FOR NONLINEAR RETARDED DIFFERENTIAL EQUATION
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作者 刘萍 李永昆 卢玲红 《Applied Mathematics(A Journal of Chinese Universities)》 SCIE CSCD 2004年第3期263-271,共9页
By using Krasnoselskii’s fixed-point theorem on a suitable cone, several existence results and corresponding properties of positive solutions of nonlocal boundary value problem for nonlinear retarded differential equ... By using Krasnoselskii’s fixed-point theorem on a suitable cone, several existence results and corresponding properties of positive solutions of nonlocal boundary value problem for nonlinear retarded differential equation are obtained. MR Subject Classification 34K10 Keywords positive solution - retarded differential equation - nonlocal boundary value problem - Krasnoselskii’s fixed-point theorem Supported by the National Natural Science Foundation of China (10361006), the Natural Science Foundation of Yunnan Province (2003A0001M), Youth Natural Science Foundation of Yunnan Univ. (K1059099) and Science Foundation of Yunnan Educational Community. 展开更多
关键词 MR Subject Classification 34k10
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利拉鲁肽前体肽GLP-1(7-37)K34R在大肠埃希菌中的表达与优化 被引量:1
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作者 李朋彦 周成慧 +2 位作者 李潜 赵伟 罗学刚 《医药导报》 CAS 北大核心 2021年第6期729-734,共6页
目的建立利拉鲁肽前体肽GLP-1(7-37)K34R基因工程表达体系,为推进利拉鲁肽生物类似药的产业化开发奠定基础。方法优化密码子并通过重叠PCR扩增获得GLP-1(7-37)K34R编码基因(glp1a),构建glp1a与GST、Ub、SUMO 3种标签蛋白在大肠埃希菌中... 目的建立利拉鲁肽前体肽GLP-1(7-37)K34R基因工程表达体系,为推进利拉鲁肽生物类似药的产业化开发奠定基础。方法优化密码子并通过重叠PCR扩增获得GLP-1(7-37)K34R编码基因(glp1a),构建glp1a与GST、Ub、SUMO 3种标签蛋白在大肠埃希菌中融合表达,分别从诱导时机、诱导温度、诱导时间和IPTG浓度方面对三种标签蛋白的表达条件进行优化。通过镍柱亲和层析纯化,并由肠激酶切除标签,回收纯化目的蛋白,经SDS-PAGE和HPLC分析检测。结果 3种标签中,Ub融合的GLP-1(7-37)K34R蛋白表达量最高,高达130 mg·L^(-1)。将高表达的Ub-GLP-1(7-37)K34R蛋白经纯化酶切回收,获得的蛋白与标准蛋白比对分析显示所获得目的肽完全正确。结论成功利用大肠埃希菌表达出GLP-1(7-37)K34R蛋白,确定蛋白表达的最优条件和最佳融合标签,建立蛋白纯化体系得到含量和纯度较高的目的蛋白。 展开更多
关键词 利拉鲁肽 胰高血糖素样肽1(7-37)K34R 大肠埃希菌 蛋白标签 纯化
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NECESSARV  AND  SUFFICIENT  CONDITIONS FOR  THE  EXISTENCE  AND  UNIQUENESS OF  PERIODIC  SOLUTIONS  OF  LINEAR FUNCTIONAL  DIFFERENTIAL  EQUATIONS WITH CONSTANT COEFFICIENTS
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作者 徐玉民 邓其飞 +1 位作者 刘永清 冯昭枢 《Annals of Differential Equations》 1999年第1期83-92,83-98,共16页
In this paper, the existence and uniqueness of periodic solutions of linearfunctional differential equat,ions, including neutral equations, with constant coef-ficients are investigated, necessary and sufficient condit... In this paper, the existence and uniqueness of periodic solutions of linearfunctional differential equat,ions, including neutral equations, with constant coef-ficients are investigated, necessary and sufficient conditions for the existence anduniqueness of periodic solutions of linear neutral functional differential equationsand some of their special oases are given via systems of linear algebraic equations. Especially, the problems of existonce and Uniqueness of periodic solutions ofgeneral linear functional differential equations of non-neutral type are completelysolved. 展开更多
关键词 lineal. functional differential equation periodic solution necessary and sufficicnt condition Fourier seriesAMS Subject Classification 34C 34k
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ON  THE  FUNCTIONAL-DIFFERENTIAL EQUATION  OF  THE  DISTRIBUTION OF  PRIME  NUMBERS
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作者 郑祖庥 吴汉忠 《Annals of Differential Equations》 1999年第1期99-106,共8页
In this paper the functional-differential equation of the distribution of primenumbers derived by de Visme [4] is strdied in details. It is proved that there existinfinitely many solutions of this equation , and all p... In this paper the functional-differential equation of the distribution of primenumbers derived by de Visme [4] is strdied in details. It is proved that there existinfinitely many solutions of this equation , and all positive strong solutions andpositive solutions of the Cauchy problem behave very much like the distrbutionfunction of prime numbers. The results are complementary to Driver [1] andwright [3]. 展开更多
关键词 distribution of prime numbers function-differential equation existence asymptotic behaviorAMS Subject Classification 34k05
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OSCILLATION THEOREMS FOR SECOND ORDER NONLINEAR DELAY DIFFERENTIAL EQUATIONS
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作者 靳明忠 《Annals of Differential Equations》 1994年第1期24-33,共10页
Some new oscillation criteria for the delay differential eqnationare established.
关键词 and phrases:Nonlinear delay differential equation oscillation 1991 Mathematics Subject Classification Primary 34k25
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ASYMPTOTIC  BEHMIOR  OF  SOLUTIONS  OF FORCED  NONLINEAR  NEUTRAL DIFFERENTIAL  EQUATIONS
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作者 罗交晚 《Annals of Differential Equations》 1999年第1期25-32,共8页
The purpose of this paper is no investigate the asymptotic behavior of soluti- ons of the fored nonlinear neutral diffierential equationsOur rosults, as a special case, improve and extend the corresponding results in[... The purpose of this paper is no investigate the asymptotic behavior of soluti- ons of the fored nonlinear neutral diffierential equationsOur rosults, as a special case, improve and extend the corresponding results in[1] and [2]. 展开更多
关键词 oscillation asymptotic behavior forced nonlinearAMS Subject Classfication 34k15 314C10
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