老年腔隙性脑梗死患者血清微小RNA-377和微小RNA-137水平及临床意义

目的分析老年腔隙性脑梗死(LI)患者血清微小RNA(miR)-377、miR-137水平及临床意义。方法选择2021年2月至2022年12月哈励逊国际和平医院收治的老年LI患者248例作为LI组,另选择同期来我院体检的健康者110例作为健康组;根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分将老年LI患者248例分为神经缺损组60例(≥2分)和无神经缺损组188例(<2分)。检测血清miR-377、miR-137水平;用Pearson相关性分析和Spearman相关性分析;logistic回归分析老年LI患者神经缺损影响因素;ROC曲线评估血清miR-377、miR-137水平对老年LI及神经缺损诊断的预测价值。结果LI组血清miR-377、miR-137水平低于健康组(P<0.01)。miR-377和miR-137联合评估老年LI的曲线下面积(AUC)为0.782(95%CI:0.735~0.824),高于二者单一检测(P<0.01)。神经缺损组脑动脉硬化、血红蛋白降低、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)1、IL-6、IL-17、C反应蛋白(CRP)、改良的Rankin量表(mRS)评分高于无神经缺损组(P<0.05,P<0.01),血清miR-377、miR-137水平低于无神经缺损组(0.61±0.25 vs 0.89±0.28,0.61±0.24 vs 0.85±0.27,P<0.01)。血清miR-377与miR-137水平呈正相关(P<0.01);血清miR-377、miR-137水平与TNF-α、IL-6、CRP、mRS评分均呈负相关(P<0.01)。miR-377、miR-137、TNF-α、IL-6、CRP是老年LI患者神经缺损的影响因素(P<0.01)。miR-377、miR-137联合评估老年LI患者神经缺损的AUC为0.812(95%CI:0.758~0.859),高于二者单一检测(P<0.05,P<0.01)。结论血清miR-377、miR-137水平在老年LI及其神经缺损患者血清中表达较低,检测其水平具有一定临床预测价值。

基于TC377微控制器的整车控制器电源设计

介绍了基于TC377微控制器的整车控制器电源设计,采用TLE7368-3E多通道电源芯片,分别对输入电路设计和输出电路进行设计,并对电源设计进行验证和优化,最终实现对TC377供电,及控制器的静电保护、反接保护和防浪涌保护,输出电压稳定、干净、抗扰性强、驱动能力大,对主控芯片损伤小。整个电源设计只需一个电源芯片,集成度高、成本低,适应于作业恶劣的环境。

circDNMT1 调节 miR-377-3p/PUM1 轴对三阴性乳腺癌细胞增殖、凋亡和上皮-间质转化的影响

目的探讨circDNMT1调节miR-377-3p/PUM1轴对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞增殖、凋亡和上皮-间质转化(EMT)的影响。方法收集儋州市人民医院2018年至2021年收治的24例TNBC患者的TNBC组织和其邻近正常组织,采用qRT-PCR、Western blot法分别检测组织及小鼠正常乳腺上皮细胞系HC11和TNBC细胞系4T1、Eph41424、JC中circDNMT1表达、miR-377-3p表达、PUM1蛋白表达。将4T1细胞分为4T1组(未转染)、si-NC组(转染si-NC)、si-DNMT1组(转染si-DNMT1)、si-DNMT1+anti-NC组(同时转染si-DNMT1和anti-NC)、si-DNMT1+anti-miR-377-3p组(同时转染si-DNMT1和anti-miR-377-3p),qRT-PCR检测各组4T1细胞中circDNMT1、miR-377-3p表达;CCK-8检测各组4T1细胞增殖情况;流式细胞术检测各组4T1细胞凋亡情况;Western blot检测各组4T1细胞PUM1、EMT相关蛋白及凋亡相关蛋白表达;TargetScan网站预测miR-377-3p与circDNMT1、PUM1的结合位点,双荧光素酶报告验证miR-377-3p与circDNMT1、PUM1的靶向关系。BALB/c小鼠接种4T1细胞后随机分为空白对照组(注射等量生理盐水)、阴性对照组(尾静脉注射si-NC)、DNMT1沉默组(尾静脉注射si-DNMT1)、联合对照组(尾静脉注射si-DNMT1和anti-NC)、联合沉默组(尾静脉注射si-DNMT1和anti-miR-377-3p),记录小鼠肿瘤质量,采用苏木精-伊红染色观察肿瘤形态变化。结果在TNBC组织和细胞中circDNMT1、PUM1上调,miR-377-3p下调,且在4T1细胞中表达差异最显著,因此本研究选择4T1细胞进行后续实验。与4T1组、si-NC组比较,si-DNMT1组4T1细胞中miR-377-3p表达、4T1细胞凋亡率及Bax、cleaved caspase-3、E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P<0.05),circDNMT1水平、PUM1蛋白表达水平、24 h和48 h OD值、Bcl-2蛋白表达水平、N-cadherin蛋白表达水平、Vimentin蛋白表达水平均显著减少/降低(P<0.05);与si-DNMT1组、si-DNMT1+anti-NC组比较,si-DNMT1+anti-miR-377-3p组4T1细胞中miR-377-3p表达、4T1细胞凋亡率、Bax蛋白表达水平、cleaved caspase-3蛋白表达水平、E-cadherin蛋白表达水平显著降低(P<0.05),PUM1蛋白表达水平、24 h和48 h OD值、Bcl-2蛋白表达水平、N-cadherin蛋白表达水平、Vimentin蛋白表达水平均显著增加/升高(P<0.05)。与miR-NC+WT-circDNMT1组比较,miR-377-3p mimic+WT-circDNMT1组细胞荧光素酶活性显著降低(P<0.05);与miR-NC+WT-PUM1组比较,miR-377-3p mimic+WT-PUM1组细胞荧光素酶活性显著降低(P<0.05)。空白对照组、阴性对照组小鼠肿瘤细胞排列密集,边界清晰;DNMT1沉默组、联合对照组肿瘤细胞排列疏松,胞核固缩,细胞碎片增多;联合沉默组小鼠肿瘤细胞排列比较密集,边界趋于清晰。与空白对照组、阴性对照组比较,DNMT1沉默组小鼠肿瘤质量显著减少(P<0.05);与DNMT1沉默组、联合对照组比较,联合沉默组小鼠肿瘤质量显著增加(P<0.05)。结论沉默circDNMT1可能通过上调miR-377-3p来抑制PUM1表达,进而抑制TNBC细胞增殖和EMT,促进细胞凋亡。

长链非编码RNA CCAT1靶向调控miR-377对前列腺癌PC3细胞生物学行为的影响

目的探讨长链非编码RNA CCAT1靶向调控miR-377对前列腺癌PC3细胞生物学行为的影响。方法选取前列腺癌组织78例为病理组,同时获取78例相邻的非恶性组织标本为癌旁组织,应用RT-PCR法测定2组标本miR-377、InRNA CCAT1表达水平,分析不同临床病理特征前列腺癌患者IncRNA RNA CCAT1、miR-377表达水平差异。设PC3前列腺癌细胞组、InRNA-NC组、InRNA CCAT1 mimics组、InRNA CCAT1 inhibitor组。培养72 h后,采用CCK-8测定法检测细胞增殖水平,流式细胞仪检测细胞凋亡水平,transwell测定法评估细胞侵袭能力,RT-PCR法及蛋白印迹法测定细胞miR-377、InRNA CCAT1、RUNX1表达水平。结果病理组miR-377水平低于癌旁组,InRNA CCAT1水平高于癌旁组(P<0.05)。病理学分级越高、TNM分期越高、有淋巴血管间隙浸润、有淋巴结转移、有复发的前列腺癌患者miR-377表达水平越低,InRNA CCAT1表达水平越高(P<0.05)。与PC3前列腺癌细胞组、InRNA-NC组比较,InRNA CCAT1 mimics组细胞OD值、存活率、穿膜数、InRNA CCAT1、凋亡率升高,miR-377、RUNX1蛋白降低(P<0.05),InRNA CCAT1 inhibitor组细胞OD值、存活率、穿膜数、InRNA CCAT1、凋亡率降低,miR-3771、RUNX1蛋白升高(P<0.05);与InRNA CCAT1 mimics组比较,InRNA CCAT1 inhibitor组细胞OD值、存活率、穿膜数、InRNA CCAT1、凋亡率降低,miR-377、RUNX1蛋白升高(P<0.05)。结论InRNA CCAT1在前列腺癌组织中高表达,miR-377在前列腺癌组织中低表达,InRNA CCAT1、miR-377表达水平与前列腺癌患者临床病理特征具有一定相关性。InRNA CCAT1靶向抑制miR-377、RUNX1表达进而促进前列腺癌PC3细胞恶性生物学行为。

山萘酚调控VPS9D1-AS1/miR-377-3p对人宫颈癌细胞系SiHa增殖和凋亡的影响

目的探讨山萘酚调控长链非编码RNAVPS9D1反义RNA 1(VPS9D1-AS1)/miR-377-3p对人宫颈癌细胞系增殖和凋亡的影响。方法将人宫颈癌细胞系SiHa分为对照组、山萘酚低、中和高剂量组(5、10和20μmol/L山萘酚)、si-NC组(转染si-NC)、si-VPS9D1-AS1组(转染si-VPS9D1-AS1)、山萘酚+pcDNA-VPS9D1-AS1组(20 mg/L山萘酚+转染pcDNA-VPS9D1-AS1)、山萘酚+anti-miR-377-3p组(20 mg/L山萘酚+转染anti-miR-377-3p)。RT-qPCR、MTT法和集落形成实验分别测定VPS9D1-AS1、miR-377-3p表达、细胞活性和集落形成;流式细胞测量术、划痕试验、Transwell小室法和Western blot分别测定细胞凋亡、迁移、侵袭和Bax及Bcl-2表达;荧光素酶活性检测分析VPS9D1-AS1对miR-377-3p的靶向作用。结果与对照相比,低、中和高剂量山萘酚降低SiHa细胞中VPS9D1-AS1表达水平,集落形成数、细胞活性、Bcl-2蛋白表达水平、迁移距离和侵袭细胞数,且提高了miR-377-3p表达水平、凋亡率和Bax蛋白表达水平;作用均呈浓度依赖性(P<0.05)。SiHa细胞中沉默VPS9D1-AS1后,miR-377-3p表达水平、凋亡率和Bax蛋白表达水平高于si-NC组,且集落形成数、Bcl-2蛋白表达水平、细胞活性、迁移距离和侵袭细胞数低于si-NC组(P<0.05)。VPS9D1-AS1能靶向miR-377-3p。山萘酚处理的SiHa增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响能被过表达VPS9D1-AS1或抑制miR-377-3p所逆转。结论山萘酚通过靶向miR-377-3p下调VPS9D1-AS1,减轻宫颈癌细胞系增殖、迁移和侵袭,以及加速凋亡。

子痫前期孕妇胎盘组织中miR-377-3p、血小板凝血酶蛋白1 mRNA表达分析

目的 观察子痫前期(PE)孕妇胎盘组织中微小RNA-377-3p(miR-377-3p)和血小板凝血酶蛋白1(THBS1)的表达变化,分析二者与PE发病的关系。方法 选择PE孕妇65例纳入PE组,其中重度PE 30例、轻度PE 35例;选择同期正常分娩孕妇40例纳入对照组。采用实时荧光定量PCR法检测两组孕妇胎盘组织中的miR-377-3p和THBS1 mRNA,分析miR-377-3p、THBS1 mRNA表达与PE孕妇临床病理参数的关系,采用双荧光素酶实验验证miR-377-3p对THBS1 mRNA的调控作用。结果 PE组孕妇胎盘组织中miR-377-3p表达低于对照组,且轻度患者低于重度患者(P均<0.05);PE组THBS1 mRNA表达高于对照组,且轻度患者高于重度患者(P均<0.05)。PE组胎盘组织中miR-377-3p表达与收缩压、舒张压和24 h尿蛋白呈负相关(r分别为-0.339、-0.530、-0.541,P均<0.05),与血小板计数呈正相关(r=0.439,P<0.05);THBS1 mRNA表达与收缩压、舒张压和24 h尿蛋白呈正相关(r分别为0.397、0.306、0.467,P均<0.05),与血小板计数呈负相关(r=-0.289,P<0.05)。miR-377-3p与THBS1存在潜在的互补结合位点,miR-377-3p可负向调节THBS1 mRNA表达。结论 PE孕妇胎盘组织中miR-377-3p表达下调、THBS1 mRNA表达上调,二者异常表达可能与PE严重程度及妊娠结局有关;miR-377-3p可能通过靶向调控THBS1 mRNA表达影响PE的发生发展。

LncRNA SNHG1通过miR-377-3p/AKT2轴对宫颈癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响

目的探讨长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因1(lncRNA SNHG1)对宫颈癌(CC)细胞增殖、凋亡和迁移的调控机制。方法体外培养人CC细胞系SiHa、Hela、CaSki和人正常宫颈上皮细胞HUCEC,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞中SNHG1、微小RNA-377-3p(miR-377-3p)和丝氨酸/苏氨酸激酶2(AKT2)mRNA的表达水平。将SNHG1小分子干扰RNA(si-SNHG1)转染Hela细胞构建SNHG1敲低细胞,并在SNHG1敲低细胞系中下调miR-377-3p表达进行验证。实验分为对照组(NC组)、si-NC组、si-SNHG1组、si-SNHG1+miR-377-3p inhibitor阴性对照组(inhibitor-NC)、si-SNHG1+miR-377-3p inhibitor组。转染48 h后,RT-qPCR检测转染效果;Western Blot检测细胞AKT2蛋白表达水平;MTT法检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞凋亡率;Transwell小室实验检测细胞侵袭能力;划痕愈合实验检测细胞迁移能力。双荧光素酶报告基因检测和RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)分析Hela细胞中SNHG1、miR-377-3p和AKT2的调控作用。裸鼠异种移植瘤实验、免疫组织化学染色探究敲低SNHG1对CC细胞体内生长的影响。结果与HUCEC细胞相比,不同CC细胞系中SNHG1和AKT2 mRNA表达水平显著升高(P<0.05),miR-377-3p表达水平显著降低(P<0.05);敲低SNHG1表达可显著上调miR-377-3p的表达水平,下调AKT2的mRNA和蛋白水平,降低Hela细胞的增殖活性、迁移与侵袭能力,并诱导细胞凋亡(P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测和RIP实验证实SNHG1可靶向负调控miR-377-3p的表达,AKT2是miR-377-3p的靶标。裸鼠异种移植瘤实验结果显示,敲低SNHG1可显著抑制体内移植瘤生长(P<0.05);下调miR-377-3p可显著减弱敲低SNHG1对Hela细胞增殖、迁移和侵袭能力并可抑制体内移植瘤生长(P<0.05)。结论SNHG1可能通过海绵miR-377-3p调节AKT2表达,参与CC进展。

结肠癌患者血清miR-139-3p和miR-377-3p表达水平及肠道菌群的变化及其与复发转移的关系

目的分析结肠癌患者血清miR-139-3p和miR-377-3p表达水平与临床病理的关系、肠道菌群的变化及其与复发转移的关系。方法选取2019年3月至2021年3月入该院接受根治术治疗的结肠癌患者共126例作为结肠癌组,另选取同期在该院接受体检的体检健康者共83例作为健康对照组。观察两组血清miR-139-3p和miR-377-3p的表达水平及肠道菌群状态情况,对比不同临床特征的结肠癌患者血清指标表达水平,对比不同复发转移情况的结肠癌患者肠道菌群的变化情况,分析结肠癌患者血清miR-139-3p和miR-377-3p表达水平与其临床病理及肠道菌群表达的相关性。结果结肠癌组血清miR-139-3p和miR-377-3p较健康对照组均呈更高表达,差异有统计学意义(均P<0.05);结肠癌组术前、术后的双歧杆菌数量均低于健康对照组,大肠杆菌数量均高于健康对照组,差异有统计学意义(均P<0.05);结肠癌组中发生复发转移、低分化、临床分期处于Ⅲ期的患者血清miR-139-3p和miR-377-3p呈更高表达,差异有统计学意义(均P<0.05);Spearman相关系数分析显示,血清miR-139-3p、miR-377-3p表达水平与结肠癌患者临床分期、复发转移均呈正相关,与临床分化程度呈负相关(均P<0.05);复发转移组患者双歧杆菌数量较未复发转移组明显更低,大肠杆菌数量较未复发转移组相比明显升高,差异有统计学意义(均P<0.05);Pearson相关系数分析显示,血清miR-139-3p、miR-377-3p与结肠癌患者大肠杆菌数量呈正相关,上述两项指标与双歧杆菌数量呈负相关(均P<0.05)。结论结肠癌根治术后双歧杆菌属高表达和大肠杆菌属低表达意味着结肠癌患者复发转移风险更低,血清miR-139-3p和miR-377-3p与结肠癌患者临床分期、肿瘤分化程度、复发转移及肠道菌群变化均密切相关,后续临床针对结肠癌患者可通过监测上述两项血清指标及肠道菌群来辅助评估患者临床病情严重程度,对优化完善诊疗方案、降低患者复发转移风险具有积极作用。

结直肠癌患者血清miR-21-5p、miR-377-3p表达与Wnt/β-catenin信号通路和预后的关系分析

目的研究结直肠癌(CRC)患者血清微小RNA(miR)-21-5p、miR-377-3p表达及与Wnt/β-连环蛋白(catenin)通路及预后的关系。方法选取2017年1月—2018年1月中国人民解放军联勤保障部队第九八九医院肿瘤科收治的CRC患者92例作为CRC组,医院同期健康体检者60例作为健康对照组。检测血清miR-21-5p、miR-377-3p表达量及Wnt/β-catenin通路指标Wnt3a、β-catenin、c-myc、细胞周期素D1(Cyclin D1)mRNA表达量。Pearson相关分析miR-21-5p、miR-377-3p与Wnt3a、β-catenin、c-myc、Cyclin D1 mRNA表达的相关性。比较不同临床病理特征CRC患者血清miR-21-5p、miR-377-3p表达差异。Kaplan-Meier曲线及Logrank检验分析不同血清miR-21-5p、miR-377-3p表达CRC患者预后的差异。多因素Cox回归分析CRC患者预后的影响因素。结果与健康对照组比较,CRC组患者血清miR-21-5p、Wnt3a、β-catenin、c-myc、Cyclin D1 mRNA表达量显著升高,miR-377-3p表达量显著降低(t/P=29.202/<0.001、52.006/<0.001、45.973/<0.001、39.196/<0.001、23.119/<0.001、38.120/<0.001)。血清miR-21-5p与Wnt3a、β-catenin、c-myc、Cyclin D1 mRNA表达呈正相关(r/P=0.404/<0.001、0.410/0.002、0.529/<0.001、0.378/<0.001),miR-377-3p与Wnt3a、β-catenin、c-myc、Cyclin D1 mRNA表达呈负相关(r/P=-0.347/0.007、-0.408/<0.001、-0.450/<0.001、-0.419/<0.001)。TNM分期Ⅲ~Ⅳ期和伴淋巴结转移CRC患者血清miR-21-5p表达明显高于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期和无淋巴结转移患者,而血清miR-377-3p表达明显低于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期和无淋巴结转移患者,差异具有统计学意义(t/P=19.741/<0.001、18.534/<0.001、11.799/<0.001、17.639/<0.001)。血清miR-21-5p高表达患者3年生存率低于低表达患者(χ^(2)/P=17.700/<0.001),miR-377-3p低表达患者3年生存率低于高表达患者(χ^(2)/P=21.380/<0.001)。多因素Cox回归分析显示,肿瘤TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、伴淋巴结转移、miR-21-5p升高是CRC患者预后的独立危险因素[OR(95%CI)=1.875(1.322~2.662)、1.662(1.163~2.374)、1.847(1.366~2.500)],miR-377-3p升高是CRC患者预后的独立保护因素[OR(95%CI)=0.518(0.363~0.739)]。结论CRC患者血清miR-21-5p表达升高,miR-377-3p表达降低,两者可通过调控Wnt/β-catenin通路促进CRC的肿瘤进展,可作为辅助评估CRC患者预后的肿瘤标志物。

血清和房水中miR-377-3p和miR-365-3p表达水平与糖尿病性黄斑水肿程度的相关性

目的:探讨血清和房水中miR-377-3p和miR-365-3p表达水平与糖尿病性黄斑水肿(DME)程度的相关性。方法:前瞻性研究。选取2021-02/2022-02三六三医院收治的初诊为DME患者60例60眼(如双眼发病取严重眼入组,若两眼程度一致取右眼),其中轻度24眼,中度21眼,重度15眼;另选同期本院收治的未发生DME的2型糖尿病患者60例60眼作为对照组。收集所有患者基本临床资料,包括BMI、吸烟史、饮酒史、高血压、高血脂、糖尿病病程、糖化血红蛋白、空腹血糖、Hcy;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清和房水中miR-377-3p和miR-365-3p表达水平。结果:DME组患者糖尿病病程、糖化血红蛋白、空腹血糖、同型半胱氨酸(Hcy)均显著高于对照组(均P<0.05);DME组患者血清中miR-377-3p和miR-365-3p表达水平均低于对照组(均P<0.05);重度组患者血清和房水中miR-377-3p和miR-365-3p表达水平显著低于中度组和轻度组,中度组显著低于轻度组(均P<0.05);血清中miR-377-3p和miR-365-3p表达水平与CMT呈负相关(r=-0.342、-0.374,均P<0.05),房水中miR-377-3p和miR-365-3p表达水平与CMT呈负相关(r=-0.425、-0.503,均P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,糖尿病病程、空腹血糖及Hcy是2型糖尿病患者发生DME的危险因素,血清中miR-377-3p和miR-365-3p是2型糖尿病患者发生DME的保护因素(P<0.05)。结论:DME患者血清和房水中miR-377-3p、miR-365-3p均低表达,并与DME患者严重程度呈负相关。

CircCPA4调节miR-377-3p/GGA3轴对肺癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响

目的 探讨CircCPA4调节miR-377-3p/GGA3轴对肺癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(EMT)的影响。方法 qRT-PCR、Western blot分别检测肺癌组织、相邻正常组织、人肺癌A549细胞、人正常肺上皮细胞BEAS-2B中CircCPA4、miR-377-3p、GGA3表达;将A549细胞分为NC组(未做任何处理)、si-NC组(转染si-NC)、si-CircCPA4组(转染si-CircCPA4)、si-CircCPA4+inhibitor NC组(转染si-CircCPA4+inhibitor NC)、si-CircCPA4+miR-377-3p inhibitor组(转染si-CircCPA4+miR-377-3p inhibitor)。双荧光素酶报告基因实验检测CircCPA4、miR-377-3p、GGA3的关系;qRT-PCR检测A549细胞中CircCPA4、miR-377-3p表达;CCK-8法检测A549细胞增殖情况;流式细胞术检测A549细胞凋亡;Transwell检测A549细胞侵袭、迁移数量;Western blot检测A549细胞GGA3、E-cadherin、Vimentin、N-cadherin的蛋白水平。结果 在肺癌组织和肺癌A549细胞中CircCPA4、GGA3水平显著上调(P<0.05),miR-377-3p表达量显著下调(P<0.05)。与NC组、si-NC组比较,si-CircCPA4组A549细胞OD_(450)值、迁移、侵袭细胞数量、CircCPA4表达量、GGA3、N-cadherin、Vimentin蛋白水平显著下降(P<0.05),A549细胞凋亡率、miR-377-3p表达量、E-cadherin蛋白水平显著升高(P<0.05);而miR-377-3p表达下调消除了沉默CircCPA4对A549细胞恶性生物学行为的抑制作用;CircCPA4靶向调节miR-377-3p/GGA3轴。结论 沉默CircCPA4可能通过上调miR-377-3p来抑制GGA3表达,抑制A549细胞增殖、EMT,促进细胞凋亡。

急性淋巴细胞白血病患者miR377-和SMYD3表达水平与临床预后意义

目的探讨急性淋巴细胞白血病患者微小RNA-377(miR-377)和SET及MYND结构域包含蛋白3(SMYD3)表达水平及临床预后意义。方法选择2016年3月至2020年6月该院收治的135例急性淋巴细胞白血病患者作为观察组,同时选择同期120例体检健康者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测研究对象外周血miR-377、SMYD3表达水平。随后比较不同组别、不同临床特征及不同疗效的患者miR-377、SMYD3表达水平差异,并采用Kaplan-Meier法和多因素Cox回归模型分析miR-377、SMYD3与急性淋巴细胞白血病患者预后的关系。结果观察组miR-377表达水平低于对照组,SMYD3表达水平高于对照组(P<0.05)。miR-377高表达组患者的危险度分型,白细胞计数(WBC)(入院时、入院1月后),乳酸脱氢酶(LDH)(入院时、入院1月后),骨髓原幼细胞比例均明显低于miR-377低表达组(P<0.05)。SMYD3高表达组患者的危险度分型,WBC(入院时、入院1月后),LDH(入院时、入院1月后),骨髓原幼细胞比例均明显高于SMYD3低表达组(P<0.05)。完全缓解(CR)组miR-377、SMYD3表达水平与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05),miR-377表达水平从低到高依次为未缓解(NR)组、部分缓解(PR)组、CR组、对照组(P<0.05),SMYD3表达水平从高到低依次为NR组、PR组、CR组、对照组(P<0.05)。miR-377高表达组总生存率(65.33%)明显高于miR-377低表达组(41.67%)(P<0.05),SMYD3高表达组总生存率(41.94%)明显低于SMYD3低表达组(65.75%)(P<0.05)。多因素Cox回归模型分析显示,危险度分型、WBC、LDH、骨髓原幼细胞比例、miR-377、SMYD3均为影响急性淋巴细胞白血病患者预后的危险因素(P<0.05)。结论急性淋巴细胞白血病患者miR-377呈低表达水平,SMYD3呈高表达水平,且二者表达水平与患者临床特征、疗效及预后均密切相关,因此可作为评估患者临床预后的有效指标。

苦瓜皂苷调控circ_0008274/miR-377对结肠癌细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨苦瓜皂苷对结肠癌细胞增殖及凋亡的影响及其可能作用机制。方法:体外培养结肠癌细胞Caco-2,分为对照组、苦瓜皂苷L组、苦瓜皂苷M组、苦瓜皂苷H组、si-NC组、si-circ_0008274组、苦瓜皂苷H+pcDNA-circ_0008274组;MTT法、平板克隆实验、流式细胞术分别检测细胞增殖、克隆形成及凋亡;qRT-PCR法检测circ_0008274、miR-377的表达量;双荧光素酶报告实验检测circ_0008274与miR-377的靶向关系。结果:与对照组比较,苦瓜皂苷L组、苦瓜皂苷M组、苦瓜皂苷H组细胞增殖抑制率、miR-377的表达量、细胞凋亡率升高(P<0.05),克隆形成数减少(P<0.05),circ_0008274的表达量降低(P<0.05);与si-NC组比较,si-circ_0008274组细胞增殖抑制率、细胞凋亡率升高(P<0.05),克隆形成数减少(P<0.05);circ_0008274可靶向调控miR-377的表达;与苦瓜皂苷H组比较,苦瓜皂苷H+pcDNA-circ_0008274组miR-377的表达量、细胞增殖抑制率、细胞凋亡率降低(P<0.05),克隆形成数增多(P<0.05)。结论:苦瓜皂苷可通过抑制circ_0008274表达而促进miR-377表达来诱导结肠癌细胞凋亡、抑制细胞增殖。

糖尿病肾病患者血清miRNA377的表达及其对SMAD信号通路调控作用

目的探索糖尿病肾病(DN)患者血清miRNA377(miR377)的表达特点及其可能的下游调控通道。方法用实时荧光定量PCR方法检测经肾活检确诊的DN组、糖尿病无肾病损害(DM)组和健康人群(对照组)血清中miR377的相对表达量,用TargetScan等生物信息学的方法预测miR377调节的靶基因,并在体外细胞模型中上调miR377的表达,检测下游机制蛋白。结果 DN组(1.32±0.13)和DM组(0.92±0.11)患者血清中miR-377均高于对照组(0.33±0.06),差异有统计学意义(P<0.01);生物信息学分析显示为糖尿病肾病中miR377的靶基因为SMAD;Western blot结果显示,转染miR377mimics组HMC细胞中SMAD2和SMAD3蛋白的表达量均高于miR377NC组和对照组(P<0.05),而SMAD7在各组中表达量无明显差异(P>0.05)。结论糖尿病肾病患者血清的miR377存在异常高表达,可能预示肾脏病变的程度。

玉米新品种强盛377的选育及高产配套技术

玉米新品种强盛377是山西省农业科学院作物科学研究所于2010年冬以自育系N577作母本、自选系N133作父本杂交组配育成的玉米新品种。根据所内鉴定、品比及山西省区试、生产试验和品质分析、抗病性鉴定结果,该品种具有稳产、高产、抗病和品质优良等特点。2017年8月通过山西省农作物品种审定委员会审定。其适宜在全生育期活动积温(≥10℃)2 300～2 500℃左右的区域种植,种植密度为6.45万～6.75万株/hm^2。

MicroRNA-377和组蛋白甲基转移酶SMYD3在肝细胞癌中的表达及两者的相关性

目的:探讨microRNA-377(miR-377)与组蛋白甲基转移酶SMYD3在肝癌中的表达规律及与肝癌的相关性.方法:利用实时定量PCR分别检测不同肝组织及肝细胞系中miR-377表达水平,应用实时定量PCR和Western blot分别检测不同肝组织及肝细胞系中SMYD3 mRNA和蛋白水平的表达情况.通过转染miR-377模拟物上调其在肝癌细胞株HepG2中表达后,应用实时定量PCR、Western blot分别检测转染前后HepG2中SMYD3 mRNA和蛋白表达的变化.结果:MiR-377 mRNA在人肝癌旁组织和肝癌组织中的表达较正常肝脏明显降低(0.331±0.059,0.139±0.064 vs 0.874±0.178,均P<0.05);在HepG2中的表达较L-02明显降低(0.145±0.021vs0.868±0.194,P<0.05).SMYD3 mRNA和蛋白质在人肝癌旁组织和肝癌组织中的表达较正常肝脏明显升高(mRNA:3.836±0.137,5.836±0.965vs1.235±0.332;蛋白:0.381±0.020,0.484±0.030vs0.252±0.015;均P<0.05).SMYD3 mRNA和蛋白质在肝癌细胞系HepG2中的表达较正常肝细胞系L-02明显升高(mRNA:0.845±0.047vs0.348±0.134;蛋白:0.575±0.008vs0.259±0.007,均P<0.05).转染miRNA-377模拟物上调HepG2中miR-377表达后转染组SMYD3 mRNA和蛋白表达较空白组和阴性对照组均明显下降(mRNA:0.125±0.010 vs 0.857±0.163,0.779±0.167;蛋白:0.092±0.026 vs 0.347±0.040,0.383±0.054,均P<0.05).结论:miRNA-377在肝癌中表达明显下调,其靶基因SMYD3表达上调;表达下调的miRNA-377丧失对SMYD3表达的抑制可能是肝癌发生的重要机制.

ML377铝锂合金热稳定性研究

研究了ML377铝锂合金高温拉伸性能以及长时间热暴露后的室温力学性能,同时对合金热暴露前后的显微组织进行了透射电镜观察。实验结果表明:ML377合金高温拉伸强度随拉伸温度的升高而逐渐降低,在200℃下的高温瞬时拉伸性能优于传统高温用铝合金。在107℃、150℃热暴露条件下,ML377合金的强度没有明显下降,这是因为合金中T1相在此温度下具有较强的抗粗化能力;但200℃热暴露条件下,T1相显著粗化,部分T1相溶解向平衡相转化,导致合金力学性能明显下降。

miR-377-5p通过下调VEGF-C对结肠癌的血管和淋巴管生成的影响研究

目的探讨miR-377-5p通过下调VEGF-C对结肠癌的血管和淋巴管生成的影响研究。方法该实验分为3组,miR-377-5p干扰组、miR-377-5p阴性对照组和miR-377-5p过表达组。采用实时荧光RT-PCR、Western blot、CCK-8、流式细胞、细胞划痕、Transwell、血管生成实验检测miR-377-5p m RNA和蛋白表达、细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭、血管和淋巴管生成。结果与正常结肠组织对比,结肠癌组织中miR-377-5p m RNA和miR-377-5p蛋白的表达明显低于正常结肠组织(均P<0.05);与miR-377-5p干扰组相比,miR-377-5p阴性对照组和miR-377-5p过表达组中的m RNA及蛋白显著升高(均P<0.05),与miR-377-5p阴性对照组相比,miR-377-5p过表达组的m RNA及蛋白明显增加(P<0.05);与miR-377-5p干扰组相比,miR-377-5p阴性对照组和miR-377-5p过表达组的结肠癌细胞增殖能力明显降低(P<0.05),与miR-377-5p阴性对照组相比,miR-377-5p过表达组的结肠癌细胞增殖能力显著降低(P<0.05);与miR-377-5p干扰组相比,miR-377-5p阴性对照组和miR-377-5p过表达组的结肠癌细胞增殖凋亡明显升高(P<0.05),与miR-377-5p阴性对照组相比,miR-377-5p过表达组的结肠癌细胞凋亡能力显著升高(P<0.05);伤口愈合实验显示,miR-377-5p过表达组的结肠癌细胞的迁移能力显著低于miR-377-5p干扰组和miR-377-5p阴性对照组(P<0.05);miR-377-5p过表达组的结肠癌细胞的侵袭能力也明显低于miR-377-5p干扰组和miR-377-5p阴性对照组(P <0.05);miR-377-5p过表达组的VEGF-A、VEGF-C和P-Akt、VEGFR-3蛋白水平显著低于miR-377-5p干扰组和miR-377-5p阴性对照组(P<0.05);miR-377-5p过表达组的MVD(微血管密度)和LMVD(淋巴微血管密度)显著低于miR-377-5p干扰组和miR-377-5p阴性对照组(P<0.05)。结论 miR-377-5p在结肠癌中低表达,抑制了结肠癌细胞的增殖、细胞迁移和侵袭,促进了结肠癌细胞的凋亡能力,并直接靶向VEGF-C抑制肿瘤的血管和淋巴管生成。

DHPLC与ABI377系统的微卫星检测效果比较

利用猪SCAU-LL资源群,根据猪USDA-MARC2.0连锁图谱,选取4号染色体上微卫星标记SW 1678,用变性高效液相色谱(DHPLC)系统和AB I377系统分析了F2代64个个体的微卫星多态性,比较了这2个分析系统在进行微卫星分型中的效率和利弊.2个系统检测到57个样品的基因型相同,有相同的2个样品未检测到产物.另外有3个样品,DHPLC检测出基因型,AB I377未检测到,有2个样品AB I377检测出基因型,而DHPLC未检测到.2个系统检测微卫星多态性的相同率达92.2%,DHPLC未检出率6.3%,AB I377未检出率7.8%,2个系统检测的灵敏度和准确度基本接近,但是DHPLC的检测成本低于AB I377的检测成本.

miR-377-3p对前列腺癌细胞增殖和凋亡影响的分子机制研究

目的探讨miR-377-3p在多种前列腺癌细胞系中的表达及对前列腺癌细胞增殖和凋亡的影响,以及其可能的分子机制。方法通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-377-3p在正常前列腺细胞系RWPE-1及前列腺癌细胞系LNCaP、PC-3和DU-145中的表达,选取其中两种表达miR-377-3p最少的LNCaP和PC-3为对象,分为两组:对照组(转染miR-NC)和实验组(转染miR-377-3p)。细胞计数试剂盒(CCK-8)实验和克隆形成实验检测前列腺癌细胞活力和增殖能力。流式细胞术检测细胞凋亡情况。miRNA靶基因预测软件预测miR-377-3p可能的靶基因。qRT-PCR检测p21活化蛋白激酶2(PAK2)基因的表达。Western blotting法检测PAK2、p-Akt和p-ERK蛋白的表达情况。结果 miR-377-3p在前列腺癌细胞系中的表达量均低。实验组细胞活力明显被抑制,增殖能力明显降低。实验组细胞凋亡显著增加。实验组PAK2 mRNA及其蛋白的表达明显降低,PAK2mRNA在LNCaP细胞中对照组和实验组的表达量分别为(1.00±0.10)和(0.60±0.23)(P<0.05),在PC-3细胞中对照组和实验组的表达量分别为(1.01±0.14)和(0.46±0.14)(P<0.01)。p-Akt和p-ERK蛋白表达明显降低。结论 miR-377-3p在多种前列腺癌细胞系中呈低表达,抑制前列腺癌细胞系LNCaP和PC-3的增殖能力,促进细胞凋亡,其可能的分子机制是靶向抑制PAK2基因,可能成为具有前列腺癌靶向治疗意义的分子。