乌苯美司对JAR,SKOV3和3AO细胞体外生长的抑制作用

目的:观察乌苯美司对人绒毛膜癌和卵巢癌细胞体外生长的抑制作用。方法:应用MTT比色法观察不同浓度的乌苯美司(0.5g/L、1g/L、5g/L、10g/L、15g/L、20g/L)对人绒毛膜癌JAR细胞、卵巢癌3AO细胞和SK-OV3细胞的生长抑制作用,溴乙啶和丫啶橙荧光染色荧光显微镜观察凋亡细胞DNA结构改变。结果:乌苯美司能抑制JAR细胞、3AO细胞和SKOV3细胞的生长,且对JAR和SKOV3细胞的抑制作用呈时效(r=0.412,r=0.339,P均=0.000)和量效(r=0.704,r=0.753,P均=0.000)关系。5g/L乌苯美司作用48h后荧光显微镜下见细胞染色质边聚,细胞核碎裂等凋亡改变。结论:乌苯美司通过细胞凋亡途径可抑制绒毛膜癌和卵巢癌细胞的生长。

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体抑制卵巢癌3AO细胞增殖并促进细胞凋亡

目的研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导卵巢癌3AO细胞凋亡的分子机制。方法用(12.5、25.0、50.0)ng/mL的重组人TRAIL蛋白与卵巢癌3AO细胞共孵育72 h,观察细胞的形态变化,在不同时间段收集细胞,MTT法检测细胞生长增殖,计算细胞的生长抑制率,annexin V-FITC/PI染色结合流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期,原位末端标记法(TUNEL)观察凋亡形态特征,Western blot法检测凋亡相关蛋白caspase-3蛋白表达。结果各浓度组的TRAIL都可以引起3AO细胞形态学改变,对细胞增殖均有抑制作用(P<0.05),25 ng/mL和50 ng/mL TRAIL处理的3AO细胞出现明显的细胞凋亡和周期阻滞,随着药物作用时间的延长,G1期细胞比例逐渐增多,而S期和G2/M期细胞比例减少,caspase-3蛋白呈高表达,但两组之间的凋亡率和凋亡蛋白的表达无显著性差异(P>0.05)。结论 TRAIL是通过抑制细胞周期、阻滞DNA合成、活化caspase-3诱导卵巢癌3AO细胞凋亡。

三氧化二砷体外对人卵巢上皮癌细胞3AO增殖及凋亡的影响

目的 探讨三氧化二砷 (As2 O3 )体外对人卵巢上皮癌细胞株 3AO增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法 将人卵巢上皮癌细胞株 3AO与不同浓度的As2 O3 进行体外培养 ,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)测定不同浓度As2 O3 对 3AO细胞的生长抑制率 ,采用流式细胞技术检测细胞凋亡率、细胞周期时相及其Fas、FasL、P53 和bcl 2蛋白的表达。结果 0 2 5～ 8 0 μmol /L浓度的As2 O3 均显著抑制3AO细胞的增殖 ,且随浓度升高及作用时间的延长 ,抑制率上升 ,As2 O3 与 3AO细胞联合培养 4 8小时的半数致死量 (IC50 )为 (3 90± 0 2 0 ) μmol /L。 0 2 5～ 4 0 μmol /L浓度的As2 O3 均诱导 3AO细胞凋亡 ,随浓度升高 ,凋亡率上升。As2 O3 阻滞 3AO细胞停滞于S期 ,并诱导细胞凋亡。As2 O3 (2 μmol/L )培养3AO细胞 4 8小时 ,Fas蛋白表达率为 (4 6 76± 4 5 0 ) % ,明显高于对照组的 (6 36± 0 82 ) % ,差异有显著性(P <0 0 5 ) ,FasL、P53 和bcl 2蛋白表达无明显变化 (P >0 0 5 )。结论 As2 O3 以剂量 时间依赖性方式抑制人卵巢上皮癌细胞 3AO增殖并诱导其凋亡 ,其作用机制与上调Fas基因表达有关。

米非司酮对人卵巢癌3AO细胞体外增殖和性激素受体ER、PR的影响

目的:研究米非司酮对人卵巢上皮癌细胞株3AO体外增殖和性激素受体ER、PR表达的影响。方法:应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测人卵巢上皮癌细胞株3AO体外增殖活性,以流式细胞间接荧光技术检测肿瘤细胞ER、PR蛋白表达率。结果:米非司酮以剂量和时间依赖方式抑制3AO细胞体外增殖活性,3AO细胞在不同浓度米非司酮(5、10、20、40、80μmol/L)和不同时间(24、48、72、96、120h)培养下,生长抑制率从1.7%增加至85.2%(P<0.05),米非司酮和地塞米松联合应用与相同浓度的米非司酮单独应用比较,细胞增殖抑制率差异无统计学意义(P>0.05)。米非司酮浓度为10μmol/L,培养48h,3AO细胞PR表达率为(12.7±1.4)%,明显低于对照组(44.9±1.4)%,(P<0.01);3AO细胞ER表达率为(55.1±1.7)%,与米非司酮组ER表达率(52.3±0.8)%比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:米非司酮以剂量-时间依赖方式抑制人卵巢上皮癌3AO细胞体外增殖活性,其对3AO细胞的抑制作用与PR变化相关。

吉西他滨和依托泊苷联合应用对人卵巢癌3AO细胞系的作用

目的:观察吉西他滨和依托泊苷联合应用对人卵巢癌3AO细胞系的抑制效应,并初步探讨其作用机制。方法:用MTT法检测化疗药物对人卵巢癌3AO细胞系的抑制率(Fa);FCM(流氏细胞术)检测肿瘤细胞周期分布和细胞凋亡。结果:吉西他滨和依托泊苷单用或合用对人卵巢癌3AO细胞系均有抑制作用,且呈剂量和时间依赖性;通过中效原理计算CI(合用指数)合用48h后,两种药物的CI<1,呈协同作用。合用72h后,当Fa<0.78时,合用指数CI<1,两种药物之间是协同作用,而当Fa>0.78时,合用指数CI>1,两种药物之间呈拮抗作用;吉西他滨和依托泊苷二者联合应用对细胞周期没有影响,但凋亡率明显提高。结论:吉西他滨和依托泊苷单用或合用对3AO均有抑制作用,且呈剂量、时间依赖性。合用48h后,两种药物呈协同作用。合用72h后,当Fa<0.78时,两种药物之间是协同作用,而当Fa>0.78时,两种药物之间呈拮抗作用;吉西他滨和依托泊苷的作用均与其诱导凋亡和影响细胞周期有关,二者联合应用对细胞周期没有影响,但凋亡率明显提高。

γ-干扰素对姜黄素抑制人卵巢癌细胞株3AO增殖的影响

目的 :研究γ 干扰素 (IFN γ)对姜黄素抑制人卵巢癌细胞株 3AO增殖的影响。方法 :采用MTT法计算细胞存活率、Giemsa染色观察细胞形态变化及凋亡情况、流式细胞术检测细胞周期变化。结果 :姜黄素可明显抑制 3AO细胞的生长 ,其半数生长抑制率 (IC50 )约为 1 8.5 μmol/L;姜黄素将肿瘤细胞聚集在S期和G2 /M期并可诱导细胞凋亡。IFN γ与姜黄素联用后 ,使上述作用明显增强 ,与两药单用组相比有统计学差异(P <0 .0 5 )。结论 :IFN γ可协同姜黄素抑制人卵巢癌细胞株

顺铂与姜黄素联用抑制人卵巢癌细胞株3AO增殖作用的研究

目的:研究顺铂（cDDP）对姜黄素抑制人卵巢癌细胞株3AO增殖的影响。方法:采用MTT法计算细胞存活率,Giemsa染色观察细胞形态变化及细胞凋亡情况,用流式细胞术检测细胞周期变化及细胞凋亡率。结果:姜黄素可明显抑制3AO细胞的生长,其半数生长抑制率（IC_50）约为27.8μmol/L;姜黄素将肿瘤细胞聚集在S期和G2/M期并可诱导细胞凋亡。cDDP与各种浓度姜黄素联合可显著抑制3AO细胞增殖（P<0.01）。姜黄素和cDDP均可在一定程度上诱导细胞凋亡,两种药物联用后,诱导细胞凋亡作用显著增强。结论:姜黄素可与cDDP协同抑制人卵巢癌细胞株3AO的增殖。其协同作用的机制可能与诱导细胞凋亡有关。

苯乙酸钠在体外对卵巢癌3AO细胞的生长抑制及其分化诱导

目的研究非毒性分化诱导剂苯乙酸钠（ＮａＰＡ）在体外对卵巢癌３ＡＯ细胞的生长、分化以及表型的影响。方法以３Ｈ－ＴｄＲ参入法和半固体琼脂培养法分别检测了卵巢癌３ＡＯ细胞的着壁依赖性和着壁不依赖性生长。以酶联吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测了３ＡＯ细胞表面人白细胞抗原（ＨＬＡ）Ⅰ、Ⅱ类分子的表达。以电子显微镜观察了３ＡＯ细胞的超微结构。结果（１）ＮａＰＡ能够抑制３ＡＯ细胞的着壁依赖性和着壁不依赖性生长，而对正常羊膜组织Ｗｉｓｈ细胞的生长无显著抑制作用。（２）ＮａＰＡ能够增强３ＡＯ细胞表面ＨＬＡⅠ、Ⅱ类分子的表达。（３）以电子显微镜观察到：在ＮａＰＡ处理的３ＡＯ细胞中，线粒体、内质网以及弹力丝等丰富；而在ＮａＰＡ未处理的３ＡＯ细胞中，除了大量游离的多聚核糖体之外，上述的细胞结构几乎没有。结论ＮａＰＡ不仅能够选择性抑制卵巢癌细胞的生长，而且能够有效地诱导卵巢癌细胞的分化以及表型转变，为ＮａＰＡ分化治疗卵巢癌提供了实验依据。

Genistein对人卵巢癌细胞系3AO诱导内皮细胞迁移作用的研究

目的 研究Genistein对人卵巢粘液性囊腺癌细胞系 3AO诱导人内皮细胞系ECV 30 4迁移的作用 ,以探讨Genistein抑制血管生成作用的机理。方法 采用微孔滤膜培养小室及双室联合细胞培养方法 ,观察在无血清培养条件下 ,3AO细胞或其条件培养基诱导的ECV 30 4细胞迁移以及Genistein对 3AO细胞或其条件培养基诱导的ECV 30 4细胞迁移的影响 ;用免疫组化方法检测血管生长因子VEGF、bFGF及TGFβ 1蛋白的表达水平。 结果 3AO或其条件培养基对内皮细胞均有较强的趋化作用 ,Genistein不但对 3AO细胞或其条件培养基诱导的ECV 30 4细胞迁移有抑制 ,对ECV 30 4细胞本身的非定向性运动也有抑制 ,且这种作用呈Genistein剂量依赖性。 2 0 μmol/LGenistein处理ECV 30 4细胞 4 8h后 ,VEGF、bFGF蛋白的表达水平降低 ,而TGFβ 1蛋白的表达水平升高。结论 Genistein可明显抑制人卵巢粘液性囊腺癌细胞系 3AO及其条件培养基对人内皮细胞系ECV 30 4细胞的诱导迁移作用 ;Genistein可能通过抑制促血管生成调节因子VEGF、bFGF的蛋白表达 ,增强血管生成的负性调节因子TGFβ 1的蛋白表达来抑制这种迁移诱导作用。这可能为其抗血管生成作用的机理之一。

依托泊苷对卵巢癌细胞3AO肿瘤转移抑制基因KAI1表达的影响

目的 研究依托泊苷（VP16）对人卵巢上皮性癌细胞3AO的生长抑制作用及其对细胞中肿瘤转移抑制基因KAI1表达的影响.方法 倒置显微镜下观察3AO细胞在不同浓度的药物作用下形态学变化;采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法观察药物对3AO细胞的生长抑制作用;运用RT-PCR、免疫细胞化学的方法 分别从转录和蛋白翻译水平检测不同药物浓度作用的3AO细胞中肿瘤转移抑制基因KAI1的表达情况.结果 药物作用下,3AO细胞体积缩小,核固缩、深染及凋亡小体出现;MTT法结果 显示药物对3AO细胞的生长抑制率呈明显的剂量依赖性;免疫细胞化学染色显示VP16能显著上调肿瘤转移抑制基因KAI1的表达;RT-PCR检测结果 显示VP16能同样增强KAI1mRNA的表达.结论 VP16不仅能抑制卵巢上皮性癌细胞的生长,而且能增强癌细胞中肿瘤转移抑制基因KAI1的表达,可能为临床上抑制肿瘤转移的药物治疗带来希望.

吡柔比星和顺铂联合应用对人卵巢癌3AO细胞系的作用

目的:观察吡柔比星和顺铂联合应用对人卵巢癌3AO细胞系的抑制效应,并初步探讨其作用机制。方法:用MTT (四甲基偶氮唑盐)法检测化疗药物对人卵巢癌3AO细胞系的抑制率(Fa);FCM(流氏细胞术)检测肿瘤细胞周期分布和细胞凋亡。结果:吡柔比星和顺铂单独用药可时间和浓度依赖性抑制3AO细胞的生长。IC_(50)(半数抑制浓度)随时间延长而明显减小。联合应用吡柔比星和顺铂后抑制率呈时间和浓度依赖性。两药的IC_(50)也比单独用药时显著降低;吡柔比星和顺铂合用呈协同作用;两药单用和联合应用对细胞周期均有影响,细胞凋亡率均提高。结论:两药联合呈协同作用,药物的作用均与其诱导凋亡和影响细胞周期有关,但对细胞周期的影响各不相同。

人卵巢癌细胞株3AO诱导凋亡的研究进展与评价

目的:细胞凋亡是各种抗癌药物诱导癌细胞正常死亡的主要方式,本文旨在对人卵巢癌细胞株3AO诱导凋亡进行评价。方法:采用国内外文献综述方法。结果及结论:通过对人卵巢癌细胞株3AO诱导及促进凋亡的因素及抑制凋亡的因素进行阐述,更多地了解诱导、促进及抑制3AO凋亡的作用机制,更好地指导抗癌药物的临床应用。

双酚A对激素相关肿瘤细胞增殖活性的影响

目的研究环境雌激素双酚A(BPA)对人卵巢癌3AO细胞、子宫内膜癌HHUA细胞及前列腺癌DU145细胞株增殖活性的影响,探讨BPA的致瘤性。方法将不同浓度的BPA以及17β-雌二醇(17β-E2)作用于3AO、HHUA及DU145细胞,并设溶剂对照,采用MTT法测定药物作用48 h的细胞增殖情况,并以浓度为10-9mol/L的BPA、10-7mol/L的E2作用于三种细胞,检测药物作用0、24、48、72 h的细胞增殖活性。结果与溶剂对照相比,BPA分别在10-5、10-9mol/L的浓度促进3AO、HHUA及DU145细胞增殖(P<0.05);10-9mol/LBPA作用48、72 h对HHUA及DU145细胞均有促增殖效应,与溶剂对照相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论BPA可促进激素相关肿瘤细胞3AO、HHUA及DU145的增殖,且其促进肿瘤细胞的增殖效应与剂量、时间相关。提示BPA的污染可能与激素相关性肿瘤的发生发展有关。

热处理与顺铂、5-FU联用对人卵巢癌细胞株的生长抑制作用

目的:探讨不同温度热处理对顺铂(DDP)、5-氟尿嘧啶(5-FU)及其各种联用方式对人卵巢癌细胞株3A0生长的抑制作用。方法:采用细胞培养及MTT方法检测在41、43及45℃温度条件下全量、半量DDP和5-FU及各种联用方式对3A0细胞株的生长抑制作用。结果:温度升高可显著抑制3A0细胞生长,且呈明显的温度依赖性;热处理可显著增强DDP及以DDP为主的联合化疗药物组的细胞生长抑制效果;43℃热处理对5-FU有一定的增强效应。热处理后DDP和5-FU的各种全量和半量联用方式均可达到同温度下全量DDP的细胞抑制效果。结论:DDP和5-FU联合应用及各种联用方式对人卵巢癌3AO细胞均有明显的杀伤作用,热处理可显著增强其杀伤作用。

低密度脂蛋白-阿克拉霉素复合物对卵巢癌靶向治疗的研究

目的 :研究卵巢癌 3AO细胞对阿克拉霉素 低密度脂蛋白复合物 (ACM LDL)及游离ACM的摄取及ACM LDL对卵巢癌细胞的靶向杀伤作用。方法 :采用保温交换法制备ACM LDL复合物 ,观察在相同的作用时间下 ,卵巢癌 3AO细胞对ACM LDL复合物及游离ACM的摄取量 ,测定细胞蛋白合成量及MTT法观察ACM LDL复合物对卵巢癌细胞的杀伤作用。结果 :( 1)相同的作用时间内 ,卵巢癌 3AO细胞摄取ACM LDL复合物的量显著高于游离ACM ;( 2 )ACM LDL复合物对卵巢癌细胞具有剂量依赖性的生长抑制作用 ,当药物浓度达到 2 0 μg/ml时 ,细胞生长停止 ;( 3)ACM LDL复合物对卵巢癌细胞的杀伤作用显著强于游离ACM ,ACM LDL复合物的半数抑制量 (ID50 )为 5 μg/ml ,而游离ACM的ID50为 2 0 μg/ml。 结论 :通过LDL受体 (LDLR)的转运作用 ,以LDL为载体 。

肿瘤转移抑制基因KAI1/CD82在顺铂作用下的卵巢癌细胞中表达的变化

目的研究顺铂(cDDP)作用下人卵巢上皮性癌细胞株3AO中肿瘤转移抑制基因KAI1/CD82的表达的变化,初步探讨其作用机制。方法采用倒置显微镜观察cDDP作用后3AO细胞形态学的变化;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察cDDP对细胞增殖的影响;运用免疫细胞化学方法检测不同浓度cDDP(1、3、9 mg/L3个浓度组)作用的3AO细胞株中KAI1/CD82表达情况,并与细胞对照组(未经药物处理)进行比较。结果cDDP作用后细胞体积缩小、细胞内颗粒增多,细胞核固缩、深染,细胞凋亡;cDDP对3AO细胞的生长抑制作用呈明显的剂量依赖关系;cDDP作用后卵巢癌细胞中KAI1/CD82基因的表达较对照组明显增强。结论cDDP不仅能增加对卵巢癌细胞的生长抑制率,而且能上调卵巢癌细胞中肿瘤转移抑制基因KAI1/CD82的表达,为临床上药物抑制肿瘤转移的深入研究提供了有利的实验依据。

DACT1对Ⅰ型卵巢癌恶性侵袭行为的影响

目的探讨β-环连蛋白抑制基因1(dapper antagonist of catenin-1,DACT1)对Ⅰ型上皮性卵巢癌迁移侵袭能力的影响及可能机制。方法免疫组织化学检测Ⅰ型人卵巢癌临床组织中DACT1的表达;采用人黏液性卵巢癌细胞株3AO构建外源性转染DACT1的稳转株,通过划痕实验、Transwell迁移及基质胶侵袭实验检测细胞运动能力;免疫荧光观察DACT1对细胞骨架重塑的影响。结果Ⅰ型卵巢癌组织中DACT1表达低于正常卵巢组织(P<0.01)。外源性转染DACT1后3AO细胞株迁移侵袭能力降低(P<0.01),且腹腔内成瘤能力有所下降,细胞骨架中特化膜结构减少。结论 DACT1对Ⅰ型卵巢癌浸润转移具有抑制效应,其在Ⅰ型卵巢癌组织中的低表达可能与其疾病发生相关。

青蒿琥酯逆转人卵巢癌3AO细胞所致T淋巴细胞的免疫抑制研究

目的研究新型抗瘤中药制剂青蒿琥酯(ART)对T淋巴细胞表面免疫因子的影响。方法噻唑蓝(MTT)法筛选对卵巢癌3AO细胞增殖无明显影响的最高ART浓度。收集经ART预处理后的3AO细胞培养上清液(ART-S组)及连续两次再培养上清液(ART-S1组和ART-S2组),以不经ART作用的相应同步培养的3AO细胞培养上清液作对照(Con-S组、Con-S1组、Con-S2组),以完全培养基代替3AO细胞培养上清液组为正常对照组(Con组),流式细胞计数法分析各组上清液对T细胞表面CD3ε+、CD3ε+ζ+、IL-2Rα+免疫功能指标的影响。结果对3AO细胞增殖无明显影响的最高ART浓度为12.50 mg/L。Con组的CD3ε+、CD3ε+ζ+、IL-2Rα+细胞表达阳性率分别为(86.07±10.05)%、(25.09±5.84)%、(39.11±5.83)%。Con-S组3项免疫指标明显受抑制,抑制率分别为(50.17±8.02)%、(87.51±9.17)%、(64.84±9.74)%。ART直接作用后可明显下调单纯的3AO肿瘤细胞所致的3项T细胞免疫功能抑制。结论青蒿琥酯对人卵巢癌3AO细胞所致T淋巴细胞免疫功能有一定的逆转作用。

手霉素对人卵巢癌3AO细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨手霉素对人卵巢癌3AO细胞体外增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法:MTT法检测手霉素对3AO细胞的增殖抑制作用;Giemsa染色、透射电子显微镜下观察及FCM分析手霉素对3AO细胞的凋亡诱导作用;FCM检测手霉素对3AO细胞ras、survivin和核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)(p65)蛋白表达的影响。结果:手霉素能显著抑制3AO细胞的增殖(P<0.05),并且这种抑制作用随着手霉素浓度的增加和作用时间的延长而增强。Giemsa染色和透射电子显微镜下观察发现,手霉素可诱导3AO细胞出现典型的凋亡形态学变化及超微结构改变。FCM分析结果显示,与对照组相比,手霉素诱导3AO细胞凋亡率明显增加(P<0.05),细胞周期中的G2/M期细胞也明显增加(P<0.05);3AO细胞的ras、NF-κB(p65)和survivin蛋白的表达水平明显下降(P<0.05)。结论:手霉素可明显抑制人卵巢癌3AO细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与下调细胞ras、NF-κB(p65)和survivin蛋白的表达有关。

华蟾素对卵巢癌3AO细胞存活素表达的影响和意义

目的探讨华蟾素对体外培养的卵巢癌3AO细胞存活素表达的影响和意义。方法体外培养卵巢癌3AO细胞，采用不同浓度的华蟾素干预后，应用RT—PCR检测存活素的表达，流式细胞仪检测细胞的凋亡。结果卵巢癌3AO细胞对照组的存活素mRNA表达为1．01±0．13，细胞凋亡率为（2．31±0．98）％；0．25g／L华蟾素对卵巢癌3AO细胞存活素mRNA和细胞凋亡率无影响（P〉0．05）；2．5g／L华蟾素干预后，卵巢癌3AO细胞存活素mRNA表达为0．67±0．16，癌细胞凋亡率为（28．69±4．16）％，与对照组相比差异均有统计学意义（P〈0．05）；25g／L华蟾素与2．5g／L华蟾素对卵巢癌3AO细胞存活素mRNA和癌细胞凋亡率的影响差异无统计学意义（P〉0．05）。结论2．5g/L华蟾素即可抑制卵巢癌3AO细胞存活素mRNA的表达，抑制癌细胞的增殖。