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抗B7-H3单克隆抗体对中性粒细胞哮喘小鼠模型的作用研究
被引量:
2
1
作者
丁林
陈正荣
+3 位作者
顾文婧
季伟
严永东
李毅平
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第10期740-746,共7页
目的 探讨阻断型抗小鼠B7-H3单克隆抗体对中性粒细胞哮喘(neutrophilic asthma, NA)小鼠模型的干预作用.方法 BALB/c雌性小鼠24只,随机分成4组,分别为磷酸缓冲盐溶液(PBS)对照组(A组)、中性粒细胞哮喘组(B组)、抗B7-H3单克隆抗...
目的 探讨阻断型抗小鼠B7-H3单克隆抗体对中性粒细胞哮喘(neutrophilic asthma, NA)小鼠模型的干预作用.方法 BALB/c雌性小鼠24只,随机分成4组,分别为磷酸缓冲盐溶液(PBS)对照组(A组)、中性粒细胞哮喘组(B组)、抗B7-H3单克隆抗体干预组(C组)、同型对照IgG组(D组).B、C、D组均给予OVA联合LPS致敏,OVA雾化激发,A组给予同等剂量的PBS注射和激发,C组和D组在诱导期分别注射50 μg抗B7-H3单克隆抗体和同型对照IgG.观察各组小鼠雾化时的症状;收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织;显微镜下进行BALF细胞总数及分类计数;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠BALF上清中IFN-γ、IL-4、IL-6、IL-17、TNF-α、G-CSF细胞因子的水平;小鼠肺组织病理切片HE染色观察肺组织病理改变;PAS染色观察气道黏液的分泌;同时肺组织免疫组化法检测B7-H3表达水平.结果 (1)B组和D组小鼠雾化激发后出现呼吸急促、烦躁不安、频繁搔抓头面部等表现,C组喘息症状较B组有所缓解,A组活动自如.(2)B组、C组、D组BALF细胞总数、中性粒细胞百分比及嗜酸性粒细胞百分比较A组均明显升高(P均〈0.05);C组BALF细胞总数、中性粒细胞百分比和嗜酸性粒细胞百分比较B组、D组降低(P均〈0.05);B组与D组比较无显著差异.(3)B组、C组、D组BALF中IFN-γ、IL-4、IL-6、IL-17、TNF-α、G-CSF水平较A组均显著性上升,其中B组、D组IL-6、TNF-α、IL-17和G-CSF水平比C组明显增高(P均〈0.05);IL-4水平B组和D组低于C组(P均〈0.05).(4)A组肺组织病理染色示无明显炎症细胞及黏液分泌;B组和D组炎症细胞、中性粒细胞浸润和黏液分泌较A组明显增多,C组较B组、D组有所减轻.(5)肺组织免疫组化显示A组几乎无表达B7-H3阳性细胞,B组和D组B7-H3阳性细胞数明显增多,C组较B组、D组阳性细胞数明显减少(P〈0.05).结论 阻断型抗小鼠B7-H3单克隆抗体通过早期阻断B7-H3表达能够减轻NA小鼠喘息症状,减少肺组织炎症细胞浸润和黏液的分泌,下调Th17相关细胞因子分泌,从而减轻NA小鼠肺组织炎症损伤、全身炎症反应,部分阻断NA免疫致病机制的发生发展.
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关键词
抗
b
7-H
3
单克隆
抗体
中性粒细胞哮喘
小鼠模型
原文传递
口蹄疫病毒非结构蛋白单克隆抗体阻断ELISA的建立与效果评价
被引量:
7
2
作者
厍大亮
卢曾军
+4 位作者
曹轶梅
付元芳
孙普
李冬
刘在新
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第11期1144-1151,共8页
使用组氨酸单克隆抗体作为捕获抗体,口蹄疫病毒非结构蛋白(NSP)3B单克隆抗体作为检测抗体,原核表达的口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC作为抗原,建立了一种以区分疫苗免疫动物与康复带毒动物或持续感染动物为目的,检测口蹄疫病毒非结构蛋白3AB...
使用组氨酸单克隆抗体作为捕获抗体,口蹄疫病毒非结构蛋白(NSP)3B单克隆抗体作为检测抗体,原核表达的口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC作为抗原,建立了一种以区分疫苗免疫动物与康复带毒动物或持续感染动物为目的,检测口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗体的阻断ELISA(FMDV NSP B-ELISA)。使用本研究建立的ELISA检测了大量牛、羊及猪的血清,并用公式(1-样品D450nm/阴性对照D450nm)来计算血清阻断率,最终确定:血清阴断率≥0.46判为阳性,血清阻断率<0.46判为阴性。根据此标准检测试验感染牛、羊及猪血清,敏感性≥85.4%;检测免疫健康牛、羊及猪血清,特异性≥99.2%。通过比较发现本研究建立的ELISA与Ceditest NS ELISA试剂盒有很高的符合率,对感染动物血清与疫区田间牛血清的阳性检出率均高于同类试剂盒。表明,本研究建立的ELISA可以作为田间疫情监测方法,在口蹄疫灭活疫苗免疫动物群体中使用。
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关键词
口蹄疫病毒
非结构蛋白
3
A
b
C
3b单克隆抗体
阻断ELISA
免疫动物
感染动物
血清鉴别
原文传递
题名
抗B7-H3单克隆抗体对中性粒细胞哮喘小鼠模型的作用研究
被引量:
2
1
作者
丁林
陈正荣
顾文婧
季伟
严永东
李毅平
机构
苏州大学附属儿童医院呼吸科
苏州大学附属儿童医院儿科研究所
出处
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第10期740-746,共7页
基金
国家自然科学基金(8157010146,81771676)
文摘
目的 探讨阻断型抗小鼠B7-H3单克隆抗体对中性粒细胞哮喘(neutrophilic asthma, NA)小鼠模型的干预作用.方法 BALB/c雌性小鼠24只,随机分成4组,分别为磷酸缓冲盐溶液(PBS)对照组(A组)、中性粒细胞哮喘组(B组)、抗B7-H3单克隆抗体干预组(C组)、同型对照IgG组(D组).B、C、D组均给予OVA联合LPS致敏,OVA雾化激发,A组给予同等剂量的PBS注射和激发,C组和D组在诱导期分别注射50 μg抗B7-H3单克隆抗体和同型对照IgG.观察各组小鼠雾化时的症状;收集支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织;显微镜下进行BALF细胞总数及分类计数;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠BALF上清中IFN-γ、IL-4、IL-6、IL-17、TNF-α、G-CSF细胞因子的水平;小鼠肺组织病理切片HE染色观察肺组织病理改变;PAS染色观察气道黏液的分泌;同时肺组织免疫组化法检测B7-H3表达水平.结果 (1)B组和D组小鼠雾化激发后出现呼吸急促、烦躁不安、频繁搔抓头面部等表现,C组喘息症状较B组有所缓解,A组活动自如.(2)B组、C组、D组BALF细胞总数、中性粒细胞百分比及嗜酸性粒细胞百分比较A组均明显升高(P均〈0.05);C组BALF细胞总数、中性粒细胞百分比和嗜酸性粒细胞百分比较B组、D组降低(P均〈0.05);B组与D组比较无显著差异.(3)B组、C组、D组BALF中IFN-γ、IL-4、IL-6、IL-17、TNF-α、G-CSF水平较A组均显著性上升,其中B组、D组IL-6、TNF-α、IL-17和G-CSF水平比C组明显增高(P均〈0.05);IL-4水平B组和D组低于C组(P均〈0.05).(4)A组肺组织病理染色示无明显炎症细胞及黏液分泌;B组和D组炎症细胞、中性粒细胞浸润和黏液分泌较A组明显增多,C组较B组、D组有所减轻.(5)肺组织免疫组化显示A组几乎无表达B7-H3阳性细胞,B组和D组B7-H3阳性细胞数明显增多,C组较B组、D组阳性细胞数明显减少(P〈0.05).结论 阻断型抗小鼠B7-H3单克隆抗体通过早期阻断B7-H3表达能够减轻NA小鼠喘息症状,减少肺组织炎症细胞浸润和黏液的分泌,下调Th17相关细胞因子分泌,从而减轻NA小鼠肺组织炎症损伤、全身炎症反应,部分阻断NA免疫致病机制的发生发展.
关键词
抗
b
7-H
3
单克隆
抗体
中性粒细胞哮喘
小鼠模型
Keywords
Anti-
b
7-H
3
McA
b
Neutrophilic asthma
Murine model
分类号
R-332 [医药卫生]
R562.25 [医药卫生—呼吸系统]
原文传递
题名
口蹄疫病毒非结构蛋白单克隆抗体阻断ELISA的建立与效果评价
被引量:
7
2
作者
厍大亮
卢曾军
曹轶梅
付元芳
孙普
李冬
刘在新
机构
中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室甘肃省生物检测工程技术研究中心
出处
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第11期1144-1151,共8页
基金
国家公益性行业(农业)科研专项(201103008)
文摘
使用组氨酸单克隆抗体作为捕获抗体,口蹄疫病毒非结构蛋白(NSP)3B单克隆抗体作为检测抗体,原核表达的口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC作为抗原,建立了一种以区分疫苗免疫动物与康复带毒动物或持续感染动物为目的,检测口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗体的阻断ELISA(FMDV NSP B-ELISA)。使用本研究建立的ELISA检测了大量牛、羊及猪的血清,并用公式(1-样品D450nm/阴性对照D450nm)来计算血清阻断率,最终确定:血清阴断率≥0.46判为阳性,血清阻断率<0.46判为阴性。根据此标准检测试验感染牛、羊及猪血清,敏感性≥85.4%;检测免疫健康牛、羊及猪血清,特异性≥99.2%。通过比较发现本研究建立的ELISA与Ceditest NS ELISA试剂盒有很高的符合率,对感染动物血清与疫区田间牛血清的阳性检出率均高于同类试剂盒。表明,本研究建立的ELISA可以作为田间疫情监测方法,在口蹄疫灭活疫苗免疫动物群体中使用。
关键词
口蹄疫病毒
非结构蛋白
3
A
b
C
3b单克隆抗体
阻断ELISA
免疫动物
感染动物
血清鉴别
Keywords
foot-and-mouth disease virus
non-structural proteins
3
A
b
C
3
b
monoclonal anti
b
ody
b
loc-king ELISA
vaccinated animal
infected animal
sera differentiation
分类号
S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]
Q503 [生物学—生物化学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗B7-H3单克隆抗体对中性粒细胞哮喘小鼠模型的作用研究
丁林
陈正荣
顾文婧
季伟
严永东
李毅平
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017
2
原文传递
2
口蹄疫病毒非结构蛋白单克隆抗体阻断ELISA的建立与效果评价
厍大亮
卢曾军
曹轶梅
付元芳
孙普
李冬
刘在新
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2012
7
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