普罗布考促进小鼠体内胆固醇逆转运的研究

目的检测普罗布考干预后小鼠血清脂质,血清、肝脏及粪便中3H-胆固醇占经腹腔注射3H-胆固醇总量的百分比,探讨普罗布考对小鼠体内胆固醇逆转运的影响。方法32只C57BL/6小鼠随机分为4组,给予不同剂量普罗布考(0,0.1%,0.5%,1%W/W)添加饲料饲养4wk后,腹腔注射经ac-LDL及3H-胆固醇处理过的RAW264.7小鼠巨噬细胞悬液(0.5ml/鼠,细胞数达5.0×106,放射活性达6.2×106cpm),单笼喂养24h后取血,酶法测定血清脂质;收集血清、肝组织、0～24h粪便,分别用液闪计数仪测定3H-胆固醇含量(均以占注射总量百分比计);结果0.1%普罗布考干预4wk后总胆固醇(TC)较对照组降低34.3%,52.8%,(P<0.01),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及甘油三酯(TG)降低20%,22%,(P<0.05);0.5%和1%普罗布考降低TC,HDL-C47%,55%,(P<0.01);降低LDL-C和TG为32%,30%,(P<0.05)。腹腔注射巨噬细胞悬液24h后血清中3H-胆固醇含量呈剂量依赖性轻度降低,而肝脏和粪便中3H-胆固醇含量呈剂量依赖性明显升高,分别为20%～48%(P<0.05)和20%～84%(P<0.01)。结论普罗布考虽然降低HDL-C血浆水平,但是明显促进胆固醇的逆转运,加速了胆固醇经粪便的清除,利于动脉粥样硬化的防治。

中链甘油三酯对高胆固醇血症小鼠胆固醇逆转运的影响

目的观察中链甘油三酯(medium-chain triglyceride,MCT)对高胆固醇血症小鼠体质量、体脂、血清脂质水平及其体内胆固醇逆转运的影响。方法建立高胆固醇血症小鼠模型,将30只造模成功小鼠随机分为中链甘油三酯组(MCT组)和长链甘油三酯(long-chain triglyceride,LCT)组,给予含2%MCT和2%LCT高脂高胆固醇饲料喂养3个月后,腹腔注射富含3H胆固醇的RAW264.7巨噬细胞悬液,单笼饲养3 d,收集每天粪便,腹主动脉取血,测量体长、肝及附睾脂肪组织。测定血清脂质,用液闪计数仪测定血清、肝及粪便中3H胆固醇放射活性。结果实验结束时,与LCT组相比,MCT组小鼠空腹体质量、体质量增加量、Lee氏指数、附睾脂肪重量及血清TC水平显著降低(P<0.05);两组血清HDL-C、n-HDL-C和TG差异无统计学意义(P>0.05);与LCT组比较,MCT组血清和肝3H胆固醇水平均显著降低(P<0.05),同时48 h粪便中3H胆固醇流出量及72 h总量显著增加(P<0.05)。结论 MCT能够减轻高胆固醇血症小鼠体质量,减少体脂肪积累和改善胆固醇代谢,且能促进体内胆固醇的逆转运。

性别差异对磷脂转运蛋白基因敲除小鼠胆固醇逆转运效率的影响

目的观察磷脂转运蛋白基因敲除(PLTP^(-/-))后雌雄小鼠血浆脂质水平的差异,比较PLTP^(-/-)对雌雄小鼠胆固醇逆转运(RCT)效率的影响。方法选择8周龄同窝出PLTP^(-/-)小鼠雌雄各8只,喂饲高脂饲料4周后,酶法检测小鼠血浆中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-Ch)和非高密度脂蛋白胆固醇(non-HDL-Ch)水平,Western blot检测血浆载脂蛋白A1(apo A1)表达,小鼠腹腔注射含~3H-胆固醇的巨噬细胞,48 h后,取小鼠血浆、肝脏、胆汁、小肠和粪便,利用液闪计数仪检测小鼠各组织中的放射活度,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝组织清道夫受体BI(SR-B1)、低密度脂蛋白受体(LDL-R)、三磷酸腺苷结合转运蛋白G5/G8(ABCG5/G8)、肝X受体α(LXRα)、胆固醇7α羟化酶(CYP7A1)、小肠ABCG5/G8和肝x受体α(LXRα)的基因表达。结果相比于雄性PLTP^(-/-)小鼠,雌性PLTP^(-/-)小鼠血浆中TC、TG、HDL-Ch和non-HDL-Ch的表达无明显改变,但apo A1水平,差异有统计学意义(P<0.05),雌性PLTP^(-/-)小鼠升高;体内RCT实验显示:与雄性PLTP^(-/-)小鼠相比,雌性PLTP^(-/-)小鼠血浆和小肠中放射活度无变化,肝脏、胆汁和粪便中放射活度,差异有统计学意义(P<0.05),雌性PLTP^(-/-)小鼠升高;RT-PCR显示:与雄性PLTP^(-/-)小鼠相比,雌性PLTP^(-/-)小鼠肝脏中RCT相关因子LXRα、ABCG5/G8及CYP7A1表达,差异有统计学意义(P<0.05),雌性PLTP^(-/-)小鼠升高,而SR-B1、LDL-R表达无明显变化;小肠壁LXRα、ABCG5/G8表达未见明显变化。结论磷脂转运蛋白基因敲除后,雌性PLTP^(-/-)小鼠的胆固醇逆转运效率较高于雄性PLTP^(-/-)小鼠,肝脏中RCT相关蛋白基因表达增加。

南蛇藤及其活性成分促胆固醇逆转运的作用机制

目的探讨南蛇藤对高脂饮食喂饲小鼠胆固醇逆转运（RCT）的影响，明确南蛇藤促RCT的活性成分及其分子机制。方法8周龄雄性C57BL／6J小鼠随机分为普通饮食对照组、高脂饮食组、南蛇藤用药组[10．0g／（kg·d）]。连续药物干预6周后，每组取6只小鼠腹腔注射经氧化型低密度脂蛋白及’H一胆固醇处理过的小鼠巨噬细胞悬液。分别于12、24及48h取血浆，收集48h小鼠胆汁、肝脏、小肠及24、48h粪便，闪烁计数仪测定上述组织中的放射活性。剩余各组6只小鼠测定血浆总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）和非高密度脂蛋白胆固醇（non．H．DLC）含量。采用RT．PCR分析肝脏RCT相关基因清道夫受体BI（SR—BI）、低密度脂蛋白受体（LDLR）、肝X受体仪（LXRc~）和胆固醇7仅．羟化酶（CYP7A1）、三磷酸腺苷结合转运蛋白G5／G8（ABCG5／G8）的表达，Westemblot检测肝脏中相关基因蛋白的表达。

前β_1-HDL对细胞胆固醇流出的影响

目的 比较不同高密度脂蛋白 (HDL)亚类对细胞胆固醇移出的影响。方法 利用 3H-胆固醇负载的人血管平滑肌细胞 (SMC)为材料 ,通过细胞胆固醇流出时间与清除率的双倒数作图求出最大清除率 (Emax)及移出时间常数 (Ke) ,以此比较不同 HDL 亚类促使细胞胆固醇移出的特性和强度。结果 前 β1 - HDL 对 SMC3H-胆固醇的 Emax高于 α- HDL 及不含 apo E的 HDL3(P<0 .0 1) ;而 Ke又小于后两者 (P<0 .0 1)。结论 前 β1 - HDL 在清除SMC3H -胆固醇的能力 (Emax)及效率 (Ke)上均明显高于α- HDL及不含 apo E的 HDL3,是比α- HDL更为有效的细胞移出胆固醇的接受体。

鸽动脉壁胆固醇运行的放射自显影示踪

给正常和高血脂草鸽静脉注射37kBq/g(1μci/g)的(?)H—胆固醇后,分别在2、4、5、6、8、和12小时对主动脉组织进行放射自显影示踪.结果表明在2小时时两组动脉壁内均未见显影颗粒;4小时后则均有银颗粒显示,实验组的银颗粒明显多于对照组;8小时后对照组的血管壁内银颗粒已消失,而实验组在12小时后外膜处仍可见少量银颗粒.实验结果提示血中胆固醇分子是由血管腔进入内膜和中膜层,然后再由外膜运出.