BALB/c 3T3细胞中性红摄取试验预测化合物急性毒性的验证研究

目的探讨BALB/c 3T3细胞中性红摄取试验预测化合物急性毒性的可行性,为建立细胞毒性试验预测急性毒性试验平台,开展化合物急性毒性筛查提供理论依据。方法选取11种受试物,开展BALB/c 3T3中性红摄取试验,以IC50结果与急性毒性试验LD50进行线性回归,将拟合的曲线与RC模型曲线进行比较。同时,将受试物的IC50值代入RC模型方程获得急性毒性LD50的预测值,依据GHS急性毒性分级法进行分级,与急性毒性试验的LD50和分级进行比较,同时对结果进行相关性分析。结果阳性对照十二烷基硫酸钠的结果符合试验质量控制的要求。受试物拟合曲线与RC模型曲线几乎平行,11种受试物中,LD50预测值与急性经口毒性试验分级一致的有9种。BALB/c 3T3细胞中性红摄取试验IC50值与急性毒性试验LD50值存在相关性(Pearson r=0.997,P<0.01)。受试物分级结果与实际分级具有等级相关性(Spearman r=0.905,P<0.01)。结论在本试验体系下,BALB/c 3T3细胞中性红摄取试验能够较好地预测急性毒性。既可以作为化合物急性毒性的快速初筛,又可为动物试验起始剂量的选择提供依据。

利用体外3T3细胞中性红摄取试验检测化学物质光毒性作用

目的建立体外Balb/c3T3细胞中性红摄取法作为检测化学物光毒性的试验方法,初步探讨体外BaLb/c3T3细胞中性红摄取法作为豚鼠光毒性试验的一种替代方法。方法采用体外培养的BaLb/c3T3细胞建立反应的最佳条件。结果中性红浓度、孵育时间、pH值、性别浓度等是影响试验结果的因素。结论体外BaLb/c3T3细胞中性红摄取试验可作为动物光毒性试验的替代方法。

3T3中性红摄取光毒性试验的验证研究

目的验证3T3成纤维细胞中性红摄取实验检测化学物质光毒性试验方法的可行性。方法使用两种盲样对3T3成纤维细胞进行染毒,用中性红摄取法测定细胞活性。结果 1号样品预测有潜在光毒性,2号样品预测无潜在光毒性。结论 3T3成纤维细胞中性红摄取实验可用于检测化学物质的光毒性。

3T3中性红试验在化妆品光毒检测中的应用

目的研究3T3成纤维细胞中性红摄取试验(3T3 NRU PT)在化妆品安全性评价中取代动物光毒性试验的可行性。方法选用20种国产特殊用途化妆品,作用丁3T3细胞后,暴露或不暴露于紫外线下,测量540 nm处经化学物质和紫外线照射联合作用细胞的吸光度,分析其平均光效应强度(MPE)、光刺激因子(PIF),细胞存活率,以判断待测物质是否具有光毒性,并与整体动物皮肤光毒性结果进行比较。结果3T3 NRU PT试验测得20种化妆品的PIF值均<5,MPE值均<0.1,按该试验阈值分类方法,均呈光毒性阴性;动物试验结果表明,未出现皮肤反应≥2分的动物,结果也均为光毒性阴性。3T3 NRU PT试验与动物光毒性结果经校正χ2检验比较,差异无统计学意义,其灵敏度、特异度、阳性预测价值、阴性预测价值均为1。结论3T3 NRU PT试验和豚鼠皮肤光毒性试验的结果一致,该方法可取代化妆品终产品的动物光毒性试验。

体外3T3细胞光毒性中性红摄取法评价化妆品的光毒性作用

采用体外3T3细胞光毒性中性红摄取法,评价化妆品引起皮肤光毒反应的可能性。首先用不同质量浓度的5种标准品作用于3T3细胞,通过照射UVA与不照射UVA测试结果相比,建立了光毒性检测评价方法,并对24种化妆品样品(其中7种防晒化妆品和17中美白祛斑化妆品)进行检测和评价。结果表明,有2款化妆品具有比较强的光毒性。

体外3T3成纤维细胞中性红摄取试验对光毒物质的评价

光毒性是指应用于机体局部的物质经暴露于光线后诱发或增强的毒性反应，或者全身系统地应用某一物质后由皮肤光照引发的反应，许多化学物质能诱导产生光毒性效应。传统的光毒性实验方法是将一定量的受试物涂抹在动物去毛的皮肤上，经一定时间间隔后暴露于UVA，观察受试动物皮肤反应并确定该受试物是否具有光毒性。

3T3中性红摄取光毒性实验检测化学物的光毒性作用

近年来，随着动物福利、动物保护运动的兴起和“3R”原则的提出，如何减少、优化、替代实验过程中的动物使用成为全世界特别关注的焦点。欧盟化妆品规程第7次修正案（2003／15／EC）中，明确规定禁止化妆品成品动物试验；2009年，禁止化妆品原料进行动物试验；在2013年，将禁止销售用动物试验检测的化妆品原料及成品，并列入WTO双边协议的条款。

雷公藤红素体内与体外急性毒性试验结果的比较

[目的]研究雷公藤红素对3T3细胞的毒性作用,获得的细胞毒性结果预测急性毒性半数致死量（LD50）,并与采用小鼠上下法（UDP）和Bliss法测定的急性毒性数值进行比较。[方法]以已验证的3T3细胞中性红摄取为细胞毒性模型,以0.01-2.05 mg/L的8个浓度（剂间比为2.15）的雷公藤红素进行处理,分别于处理后48 h进行中性红摄取试验,计算半数抑制浓度（IC50）。以RC数学模型预测其全身急性毒性LD50。参考此LD50值设定起始剂量进行小鼠上下法实验。取70只ICR小鼠,雌雄各半,以3、4、5、6、7、8 mg/kg的雷公藤红素溶液和0 mg/kg[4%二甲亚砜（DMSO）氯化钠注射液]静脉给药,观察14 d,根据动物死亡率采用Bliss法计算LD50。[结果]雷公藤红素3T3细胞中性红摄取试验的IC50值为（0.119 7±0.018 7）mg/L（n=2）,决定系数R2〉0.96,预测其全身急性毒性LD50为5.375 mg/kg。上下法起始剂量设为3.3 mg/kg,测得雷公藤红素在ICR小鼠的LD50值为3.157 mg/kg,95%可信区间为3.1-5.5 mg/kg。小鼠Bliss法测定急性毒性LD50为4.899 mg/kg,95%可信区间为4.483-5.354 mg/kg。[结论]雷公藤红素的体外3T3细胞毒性预测急性毒性与体内方法所得数值一致。