猪A3Z2基因生物信息学分析及其对PEDV复制的抑制作用

【目的】对猪源载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽蛋白3(apolipoprotein B mRNA-editing enzyme catalytic polypeptide protein 3,APOBEC3,简称A3)家族的A3Z2基因进行克隆、生物信息学分析,筛选稳定表达A3Z2的IPEC-J2细胞,研究A3Z2对猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)增殖的影响,以期为研究A3Z2的抗病毒功能奠定基础。【方法】以IPEC-J2细胞总RNA为模板,采用RT-PCR法扩增猪A3Z2基因CDS区,并对其进行遗传进化和生物信息学分析。构建pcDNA3.1-3×Flag-A3Z2载体,将其转染IPEC-J2细胞后经G418筛选、有限稀释法和单克隆细胞培养,获得稳定表达A3Z2的细胞株。分别采用间接免疫荧光试验和Western blotting方法鉴定A3Z2的表达,采用实时荧光定量PCR和Western blotting方法分析PEDV N基因的mRNA和蛋白表达水平。【结果】猪A3Z2基因CDS区长843 bp,编码280个氨基酸,分子质量约为32.7 ku,不存在跨膜区及信号肽切割位点,主要存在于细胞核中。A3Z2蛋白二级结构由α-螺旋(27.14%)、延伸链(17.86%)、β-转角(6.43%)和无规则卷曲(48.75%)构成。通过细胞筛选获得稳定表达A3Z2的细胞株IPEC-J2-A3Z2;间接免疫荧光方法和Western blotting结果显示,A3Z2能在IPEC-J2细胞中表达。实时荧光定量PCR和Western blotting结果显示,细胞株IPEC-J2-A3Z2中PEDV N基因的mRNA和蛋白表达均被A3Z2抑制。【结论】本研究成功克隆了猪A3Z2基因,筛选获得了IPEC-J2-A3Z2细胞株,证实了A3Z2抑制PEDV复制的作用,为研究PEDV与A3Z2相互作用的分子机制和以此为靶点筛选抗PEDV新药提供了思路。

保肝药物在2H3R3Z3E3(S3)/4H3R3方案抗结核治疗肺结核致肝损伤患者的效果分析

目的分析益肝灵软胶囊在2H3R3Z3E3(S3)/4H3R3方案抗结核治疗肺结核致肝损伤患者的效果。方法选取2019年1月至2022年12月我院收治的肺结核患者106例,分为对照组和研究组各53例。所有患者均行2H3R3Z3E3(S3)/4H3R3方案抗结核治疗,在此基础上对照组给予复方甘草酸苷片治疗,研究组给予益肝灵软胶囊治疗。对比两组肝损伤发生率,对比两组肝功能指标、免疫指标,对比两组不良反应发生率和治疗有效率。结果研究组肝损伤发生率低于对照组(P<0.05);研究组ALB、ALT、AST、TP以及IgA、IgM、IgG均低于对照组(P<0.05);研究组不良反应发生率低于对照组(P<0.05);研究组总有效率显著高于对照组(P<0.05)。结论采用益肝灵软胶囊治疗2H3R3Z3E3(S3)/4H3R3方案抗结核治疗肺结核致肝损伤患者,可降低肝损伤发生率,改善肝功能与免疫指标,减少不良反应,提高临床疗效。

边台-H3Z双层鱼骨型分支水平井钻井技术

简要介绍了国内首口TAML4级完井同向双层鱼骨型分支水平井边台-H3Z井的设计概况,分析了该井的钻井技术难点,从井眼轨迹控制、动力钻具选择、钻具组合和钻井液体系的优选、窗口保护、套管内分支与完井、悬空侧钻及夹壁墙的保护等方面,对该井所采取的技术措施进行了详细介绍。该井的成功,为应用分支水平井技术开发古潜山难动用储量、提高单井产量、提高采收率、降低综合开发成本、提高经济效益开辟了新的途径。

2H_3R_3Z_3E_3/4H_3R_3方案治疗初始涂阳肺结核556例效果分析

目的观察分析2H3R3Z3E3/4H3R3方案治疗初始涂阳肺结核的效果,为肺结核病防治工作提供参考依据。方法回顾性分析556例初始涂阳肺结核病患者的资料,均采用"世界银行贷款+中国结核病控制项目"的2H3R3Z3E3/4H3R3方案治疗,观察不同年龄阶段(中青年组、中年组、老年组)治疗效果及安全性。结果所有患者均于本科完成疗程,治疗满6个月,转阴503例(90.5%);对比各年龄阶段的治疗效果,同个时间点的转阴率比较,老年组的转阴率均低于其他各组,差异有显著性(P<0.05);老年组不良反应发生率显著高于其他两组,差异均有显著性(P<0.05)。结论本科用2H3R3Z3E3/4H3R3方案治疗初治凃阳肺结核治愈率复合国家>85%的要求,老年患者的治疗效果及安全性低于非老年患者,因此对疑似肺结核的老年人应提倡早登记、早确诊、早治疗,用2H3R3Z3E3/4H3R3方案治疗期间应加强观察病情以便调整用药剂量或用药方案。

马胞嘧啶脱氨基酶A3Z3的多态性及抗马传染性贫血病毒作用

马胞嘧啶脱氨基酶家族成员之一的A3Z3分子(eqA3Z3),可通过胞嘧啶脱氨基酶活性限制马传染性贫血病毒(EIAV)的复制。为研究eqA3Z3分子多态性与其抗EIAV活性之间的关系,本实验采用RT-PCR技术从10匹马体内扩增A3Z3基因,对获得的不同马体内A3Z3分子的序列进行比对分析,发现了两种不同于已报道eqA3Z3分子的突变体。将其克隆于真核表达载体pcDNA-HA中,并分别与EIAV感染性质粒共转染293T细胞,通过GST Pull-down方法证明了3种分子均能够与EIAV Gag蛋白相互作用。此外,western blot结果显示3种分子均能够被包装进病毒粒子。同时荧光素酶活性结果表明3种分子具有相同的限制EIAV复制功能。以上研究结果有助于进一步深入了解和评价马属动物Apobec3分子抗逆转录病毒的作用。

也谈分式函数U(x,y,z)=(axy+byz+cxz)/(k_1x^2+k_2y^2+k_3z^2)的最值问题

文[1]利用双判别式探讨了形如U（x,y,z）=（axy+byz+cxz）/（k1x2+k2y2+k3z2）（1）（其中 k1,k2,k3∈R+,a,b,c∈R）的三元二次齐次分式函数的最值问题.按照该文的解题途径,我们要进行多次讨论,需要解两个一元四次不等式,其最大的不足乃是无法得到一个便于操作的公式化结论.最近,笔者运用三角代换方法探讨以上问题,得到了较好的结果.令 x′=（k1）1/2x,y′=（k2）1/2y,z′=（k3）1/2z.则函数（1）右边成为记 a/(（k1k2）1/2)=λ1,b/(（k2k3）1/2)=λ2,c/(（k1k3）1/2)=λ3则原问题转化为探求形如U（x,y,z）=（λ1xy+λ2yz+λ3xz）/（x2+y2+z2）（2）（其中λ1,λ2,λ3∈R）的函数的最值.

马A3Z3V1抑制马传染性贫血病毒早晚期反转录的鉴定

马A3Z3V1是宿主细胞内的一种APOBEC3免疫因子,它可以有效抑制马传染性贫血病毒(EIAV)在马宿主细胞内的复制。为鉴定马A3Z3V1分子对EIAV早晚期反转录的抑制作用,本实验根据EIAV的R/U5和gag基因序列分别设计了检测EIAV早晚期反转录产物的引物并建立了SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法,利用该方法评价免疫因子A3Z3V1对EIAV逆转录过程的影响。结果显示,在早期反转录过程中,A3Z3V1可以使EIAV的反转录产物最高减少7倍;在晚期反转录过程中,A3Z3V1可以使EIAV的反转录产物最高减少3倍。本实验结果将有助于进一步研究APOBEC3分子的抗病毒作用机制。

“5S+3Z”在多学科专业共享实验室管理中的应用

实验室共享管理是提高实验仪器设备、软件、场地使用率的重要手段,也是当前高校实验室建设的重要任务之一。为打破不同学科专业之间实验资源独占的壁垒,结合我校北斗实验室的特点及面临的现状,文章提出应用"5S"管理理念和"3Z"精神相结合的多学科专业共享实验室管理模式。通过这种管理模式实践,提高了实验室使用率,促进了人才培养质量的提高。

2HRZE/4H_3R_3和2H_3R_3Z_3E_3/4H_3R_3治疗初治涂阳肺结核病社会效果评价

目的 对 2HRZE/4H3R3和 2H3R3Z3E3/4H3R3治疗初治涂阳肺结核病患者社会效果评价 ,为结核病的社会控制提供依据。方法 应用中国卫生部结核病控制项目 2HRZE/4H3R3方案 ,治疗初治涂阳肺结核病人的监测资料和 2 0 0 3年对《中国结核病控制规划 (2 0 0 1～ 2 0 10 )》阶段评估 ,抽查“世界银行贷款 + 中国结核病控制项目”2H3R3Z3E3/4H3R3方案治疗初治涂阳肺结核病人治疗的资料进行分析。结果 在落实较好的全程督导服药治疗下 ,两方案已达到国家规划目标。目前 2H3R3Z3E3/4H3R3未能达到国家规划目标 ,治愈率明显较强化期每日服药方案低 ,而失败率、丢失率、副反应停药率明显较高。结论 经费落实不到位导致患者全程督导服药治疗不能很好落实 ,是影响化疗效果的主要原因。由于全程督导服药治疗不能很好落实 ,致使全程隔日服药方案不能胜任规划目标的要求 。

2H3R3Z3E3/4H3R3方案治疗肺结核的临床疗效分析

目的分析研究肺结核采用2H3R3Z3E3/4H3R3方案治疗的临床治疗效果。方法抽取2011年4月—2013年8月在我院收治的患有肺结核的病人150例,按照年龄分为中青年组、中年组以及老年组三组,对其三组病人的临床治疗效果给予对比分析。结果中青年组转阴率为92%,中年组转阴率为75%,老年组转阴率为72%,老年组转阴率明显低于中年组和中青年组,其差异具有统计学意义(P<0.05);中青年组不良反应发生率6%,中年组不良反应发生率为10%,老年组不良反应发生率为24%,老年组发生不良反应几率明显高于中年组和中青年组,其差异具有统计学意义(P<0.05)。结论肺结核采用2H3R3Z3E3/4H3R3方案治疗,可以获得明显的临床治疗效果,可是老年病人的临床疗效以及安全有效性明显低于中年和青年病人,所以,对疑似患有肺结核的老年人应该采取及时确诊、及时治疗的原则,使病人健康生活质量得到保障,具有临床推广价值。

中学历史课堂“3Z”教学结构研究与实践

中学历史"3Z"(自主梳理—主题探究—知能检测)教学结构研究与实践,针对当前中学历史教学中存在的陈旧的教学观念和教学程式导致的教学低效问题,依据建构主义教育理论、人本主义学习理论等,通过优化课堂教学结构,为教师整合课程资源,为学生参与学习提供一个相对稳定的可操作的开放的有序空间,真正实现理想的历史学习,构建具有历史学科特点的中学历史"两型"课堂教学模式。

领跑64位轻薄时代 华硕W3Z炫目登场

华硕近日推出首 款14英寸64位轻薄笔 记本——W3Z。作为华 硕此次发布的主力产 品,W3Z采用AMD TurionTM 64移动计算 技术,同时融合华硕笔 记本“轻薄专家”的经 典设计,进一步将此优 势顺利扩展到64位领 域的同时,W3Z成为市 场上首款真正意义上的 64位轻薄笔记本,从而 为关注速度与移动性能 的用户提供了可信赖的 选择。

装配3Z型行星减速器的简易方法

工程机械除利用变矩器、变速器、中央传动装置和后桥等来实现增加发动机的扭矩外,还常在宽基低压轮胎的轮辋处采用3Z型行星减速器装置(如成工ZL30装载机)来进一步增加发动机的输出扭矩,以达到提高设备克服施工阻力的目的.

高校“3Z”勤工助学资助育人机制的构建

勤工助学作为高校学生资助体系的重要组成部分,既有助于家庭经济困难学生的全面发展,又能发挥资助育人的作用,成为高校资助育人工作的有效途径之一。本文立足于勤工助学的基本内涵,积极拓展“3Z”勤工助学的新内涵,挖掘影响高校勤工助学工作质量的主要因素,着眼学生参与勤工助学的整个过程,分析研究勤工助学的选拔、培养、反哺、评价和跟踪这五大育人机制,以促进高校的资助工作由保障型资助向发展型资助的高效过渡,进一步提升育人实效。