7-二氟甲氧基-5,4'-二正辛烷氧基金雀异黄素钝化Pim-1对宫颈癌细胞增殖和侵袭的抑制作用

目的检测7-二氟甲氧基-5,4'-二正辛烷氧基金雀异素(7-difluoromethoxyl-5,4'-di-n-octylygenistein,DFOG)对宫颈癌He La细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用及其机制。方法体外培养宫颈癌He La细胞,用MTT法检测DFOG对He La细胞的增殖抑制作用;用PI染色FCM检测DFOG对He La细胞周期分布的影响;用Transwell法检测DFOG对He La细胞迁移及侵袭的抑制作用;用Western blotting、si RNA/c DNA转染检测DFOG对He La细胞增殖、迁移侵袭抑制作用的可能分子生物学机制。结果 DFOG在体外对He La细胞增殖、迁移、侵袭呈浓度依赖性的抑制作用,阻滞细胞周期于G1期,伴随着Pim-1蛋白表达下调,同时Pim-1下游蛋白Cyclin D、Cyclin E、Cyclin A表达下调,而p15和p21蛋白表达上调。用si RNA干扰沉默Pim-1基因,则DFOG对He La细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用明显加强;用Pim-1-c DNA转染He La细胞,则能部分抵消DFOG对细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用。结论 DFOG通过钝化Pim-1组织细胞与G1期而发挥其抑制宫颈癌He La细胞增殖、迁移和侵袭的作用。

7-二氟甲氧基-5,4'-二正辛烷氧基金雀异黄素对人卵巢癌裸鼠移植瘤生长的影响

目的:研究7-二氟甲氧基-5,4'-二正辛烷氧基金雀异黄素(7-difluoromethoxyl-5,4'-di-n-octylygenistein,DFOG)对人卵巢癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法:建立人卵巢癌HO-8910细胞裸鼠皮下移植瘤,随机分为5组,每组5只,即生理盐水组(Saline),紫杉醇组(TAX),DFOG此处为3组(5、10、20 mg/kg)组,观察各组移植瘤的体积和重量变化,观察各组荷瘤裸鼠重量及其血清乳酸脱氢酶(LDH)、谷丙转氨酶(ALT)、肌酐值(Cr)、外周血白细胞计数(WBC)的变化。FCM检测移植瘤组织细胞的凋亡率,Western blot检测移植瘤组织细胞cortactin蛋白的表达变化。结果:DFOG各组显著抑制人卵巢癌HO-8910细胞裸鼠移植瘤生长,与Saline组比较,移植瘤体积明显减小(P均<0.05),其中DFOG10mg/kg组对移植瘤抑制率与TAX组相当(P>0.05);与Saline组比较,DFOG各组移植瘤重量明显减轻(P均<0.05),其中DFOG10mg/kg组对移植瘤重量减少率与TAX组相当(P>0.05)。与Saline组及DFOG各组比较,TAX组荷瘤裸鼠重量显著降低(P均<0.05),而Saline组和DFOG各组之间荷瘤裸鼠重量比较差异无统计学意义(P>0.05);与Saline组及DFOG各组比较,TAX组荷瘤裸鼠血清LDH、ALT、Cr值和外周血WBC计数显著降低(P均>0.05),而Saline组与DFOG各组比较,荷瘤裸鼠血清LDH、ALT、Cr值和外周血WBC计数无明显差异(P>0.05)。DFOG各组作用HO-8910细胞移植瘤16 d后,HO-8910细胞发生凋亡,与Saline组比较(P均<0.05),其中DFOG10 mg/kg组凋亡率与TAX组相当(P>0.05);同时cortactin蛋白表达降低,与Saline组比较(P均<0.05),其中DFOG10 mg/kg组凋亡率与TAX组相当(P>0.05)。结论:DFOG能抑制卵巢癌HO-8910细胞裸鼠移植瘤生长,下调cortactin蛋白表达和诱导HO-8910细胞凋亡。

DFOG对卵巢癌OVCAR3源性球细胞迁移和Twist1/FoxM1表达的影响

目的 :检查金雀异黄素(genistein,GEN)及其新型合成类似物7-二氟甲氧基-5,4’-二-正辛烷氧基金雀异黄素(7-difluoromethoxyl-5,4'-di-n-octyl genistein,DFOG)对人卵巢癌OVCAR3源性球细胞迁移和Twist1/Fox M1蛋白表达的作用。方法 :Transwell小室细胞迁移试验检测细胞迁移率。蛋白质印迹分析细胞Twist1和Fox M1蛋白表达水平。结果 :与OVCAR3细胞相比,OVCAR3源性球细胞迁移率更高。GEN(40μM)或DFOG(5μM和10μM)抑制OVCAR3源性球细胞迁移。此外,GEN(40μM)或DFOG(5μM和10μM)平行地下调Twist1和Fox M1蛋白表达。结论 :GEN及其类似物DFOG抑制OVCAR3源性球细胞体外迁移与其抑制Twist1和Fox M1蛋白表达相关。