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广西香蕉枯萎病病原菌4号生理小种的分子检测与鉴定 被引量:11
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作者 莫贱友 秦碧霞 +3 位作者 郭堂勋 黄穗萍 李其利 李焜华 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1312-1315,共4页
【目的】明确在广西个别香蕉产区发现的香蕉枯萎病病原种类,为防控该病害提供科学依据。【方法】从广西不同香蕉产区采集香蕉枯萎病病株样本,分离纯化获得6株菌株,以香蕉枯萎病1号和4号生理小种为阳性对照,采用特异PCR的方法,对分离到的... 【目的】明确在广西个别香蕉产区发现的香蕉枯萎病病原种类,为防控该病害提供科学依据。【方法】从广西不同香蕉产区采集香蕉枯萎病病株样本,分离纯化获得6株菌株,以香蕉枯萎病1号和4号生理小种为阳性对照,采用特异PCR的方法,对分离到的6株菌株进行分子检测,并用盆栽香蕉和西贡蕉小苗接种进行菌株致病性鉴定。【结果】经ST1/ST2特异引物扩增,1号菌株与香蕉枯萎病菌1号生理小种扩增到约200bp片段;2~6号菌株和香蕉枯萎病菌4号生理小种扩增到约250bp片段。与标样对比结果表明,1号菌株为香蕉枯萎病1号生理小种,2~6号菌株为香蕉枯萎病4号生理小种;盆栽接种致病性鉴定结果与分子检测结果相同。【结论】广西个别蕉区已遭受香蕉枯萎病菌4号小种侵染,各级部门应高度重视。 展开更多
关键词 香蕉枯萎病菌 4号生理小种 PCR检测 鉴定 广西
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农杆菌介导的香蕉枯萎病菌4号生理小种转化体系的优化 被引量:11
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作者 高剑 肖苏生 +2 位作者 王文华 曾涛 曾会才 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1197-1203,共7页
香蕉枯萎病是世界范围内香蕉种植区最为严重的病害之一,严重威胁和影响着香蕉产业的发展。本文针对香蕉枯萎病病原菌的4号生理小种,建立了农杆菌介导的转化体系,确定了影响转化效率主要因子的优化体系是:农杆菌在IM培养基诱导前农杆菌OD... 香蕉枯萎病是世界范围内香蕉种植区最为严重的病害之一,严重威胁和影响着香蕉产业的发展。本文针对香蕉枯萎病病原菌的4号生理小种,建立了农杆菌介导的转化体系,确定了影响转化效率主要因子的优化体系是:农杆菌在IM培养基诱导前农杆菌OD600为0.15、农杆菌经IM液体培养基诱导的时间为7h、乙酰丁香酮(AS)浓度为150μmol/L、Focr4孢子浓度为1×106个/mL、共培养时间为48h、培养温度为25℃、诱导培养基pH值为5.5。在此条件下,转化效率能达到700~800个转化子/106个香蕉枯萎病菌孢子。PCR验证表明外源的T-DNA已经成功随机地整合到该病原菌基因组中。目前,应用该转化体系已获得2300多个转化子,为后续克隆相关致病基因打下了良好基础。 展开更多
关键词 香蕉枯萎病 4号生理小种 T-DNA插入 优化体系
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4种三唑类杀菌剂对香蕉枯萎病菌的抑制效果及其差异性 被引量:2
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作者 项丹丹 杨晓芳 +3 位作者 易干军 陶海青 初元琦 李春雨 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期830-842,共13页
香蕉枯萎病由尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum f. sp. cubense, Foc)侵染引起,正严重威胁着我国香蕉产业,目前尚无有效的化学防治措施。本研究通过测定菌丝生长速率比较了香蕉枯萎病菌热带4号生理小种(Foc tropical race 4, Fo... 香蕉枯萎病由尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum f. sp. cubense, Foc)侵染引起,正严重威胁着我国香蕉产业,目前尚无有效的化学防治措施。本研究通过测定菌丝生长速率比较了香蕉枯萎病菌热带4号生理小种(Foc tropical race 4, Foc TR4)对4种常用三唑类杀菌剂的敏感性,发现丙硫菌唑、戊唑醇、丙环唑、腈菌唑对Foc TR4的抑制作用依次减小。通过菌丝形态观察、相对电导率测定和丙二醛含量测定发现,与对照组相比,4种杀菌剂均可引起Foc TR4菌丝分枝增多、不规则扭曲,表面干瘪、凹陷和扁平化等畸形现象,使得菌丝细胞膜通透性和丙二醛含量显著性增加。三唑类杀菌剂可增大细胞色素P450酶活性并显著性上调细胞色素P450甾醇14α-脱甲基酶(cytochrome P450 sterol 14α-demethylase, CYP51)基因CYP51-1、CYP51-3的表达。本研究还通过分子对接和表面等离子共振试验明确了4种三唑类杀菌剂与Foc TR4中CYP51的互作模式差异,发现虽然丙硫菌唑对Foc TR4的生物活性优于其他3种杀菌剂,但是其与CYP51的亲和力最弱,说明丙硫菌唑与CYP51的作用方式存在特异性。本研究可为防治香蕉枯萎病菌Foc的新型杀菌剂的筛选和合理设计提供一定的理论参考。 展开更多
关键词 三唑类杀菌剂 香蕉枯萎病 尖孢镰刀菌古巴专化型热带4号生理小种 化学防治
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DNA methylation patterns of banana leaves in response to Fusarium oxysporum f. sp. cubense tropical race 4 被引量:2
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作者 LUO Jing-yao PAN Xiao-lei +6 位作者 PENG Tie-cheng CHEN Yun-yun ZHAO Hui MU Lei PENG Yun HE Rui TANG Hua 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2016年第12期2736-2744,共9页
Fusarium wilt of banana, which is caused by Fusarium oxysporum f. sp. cubense tropical race 4 (Foc TR4), is a serious soil-borne fungal disease. Now, the epigenetic molecular pathogenic basis is elusive. In this stu... Fusarium wilt of banana, which is caused by Fusarium oxysporum f. sp. cubense tropical race 4 (Foc TR4), is a serious soil-borne fungal disease. Now, the epigenetic molecular pathogenic basis is elusive. In this study, with methylation-sensitive amplification polymorphism (MSAP) technique, DNA methylation was compared between the leaves inoculated with Foc TR4 and the mock-inoculated leaves at different pathogenic stages. With 25 pairs of primers, 1 144 and 1 255 fragments were amplified from the infected and mock-inoculated leaves, respectively. DNA methylation was both changed and the average methylated CCGG sequences were 34.81 and 29.26% for the infected and the mock-inoculated leaves. And DNA hypermethylation and hypomethylation were induced by pathogen infection during all pathogenic stages. Further, 69 polymorphic fragments were sequenced and 29 of them showed sequence similarity to genes with known functions. And RT-PCR results of four genes indicated that their expression patterns were consistent with their methylation patterns. Our results suggest that DNA methylation plays important roles in pathogenic response to Foc TR4 for banana. 展开更多
关键词 BANANA Fusarium wilt disease Fusarium oxysporum f. sp. cubense tropical race 4 foc TR4 DNA methylation methylation-sensitive amplification polymorphism (MSAP) EPIGENETICS disease defense genes
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The Cost-Benefit Analysis for Bananas Diversity Production in China Foc. Zones 被引量:5
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作者 Linbing Xu Bingzhi Huang +2 位作者 Yuanli Wu Yonghong Huang Tao Dong 《American Journal of Plant Sciences》 2011年第4期561-568,共8页
Over 50 years ago, banana export plantations in Panama were ruined by Fusarium wilt race 1 (Foc. R1) since the popular cultivar Gros Michel is susceptible to Foc. R1 [1]. Fortunately, the resistant cultivar Cavendish ... Over 50 years ago, banana export plantations in Panama were ruined by Fusarium wilt race 1 (Foc. R1) since the popular cultivar Gros Michel is susceptible to Foc. R1 [1]. Fortunately, the resistant cultivar Cavendish replaced Gros Michel as the world biggest commercial fruit after ten years’ research and development. Due to its good economic profit, banana industry develops very fast recently in China. Unfortunately, Fusarium oxysporum f. sp. cubense tropical race 4 (TR4) brought disaster to Cavendish plantation since 1996. Most of traditional banana planting zones of Guangdong and Hainan provinces were infected by Foc. TR4 to the end of 2009. In order to fight against Foc. TR4, here we tried to investigate the cost-benefit and disease resistance of six banana cultivars (Cavendish Baxijiao, Dajiao, Guangfen No. 1, Fenzha No. 1, Gongjiao, Haigongjiao) planted in China Foc. Zones. Comparisons were conducted on their economic characteristics, cost, benefit, as well as the advantage and disadvantage and their application in rota-tion. Generally, supposing the investment of $ 4400/ha, the banana plantation attains a good economic profit as $ 2200/ha. Rotation of these cultivars can maintain the biodiversity as well as improve the sustainable development of banana industry. 展开更多
关键词 BANANA DIVERSITY foc. TR 4 Zone COST-BENEFIT Disease Resistance
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Study on Control Effect of Invasive Banana Fusarium Disease(Fusarium oxysporum f.sp.cubense tropical race 4)by Different Varieties and Fertilization Treatments
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作者 Long Yuan Yang Baoming +11 位作者 Huang Yuling Bai Tingting Xu Shengtao Yin Kesuo Fan Huacai Zeng Li Li Xundong Guo Zhixiang Li Yongping Yang Derong Li Jinping Zheng Sijun 《Plant Diseases and Pests》 CAS 2020年第1期1-5,共5页
[Objective]The paper was to understand the field resistance performance of different banana varieties and the prevention and control ef-fect of different fertilizers,so as to provide technical reference for the preven... [Objective]The paper was to understand the field resistance performance of different banana varieties and the prevention and control ef-fect of different fertilizers,so as to provide technical reference for the prevention and control of Fusarium wilt.[Method]Field trials were set up with three treatments:shrimp peptide organic fertilizer+shrimp peptide special protection+shrimp peptide fruit Yekang(simplified as shrimp peptide organic fertilizer treatment),conventional organic fertilizer+microbial preparations(simplified as microbial treatment),and conventional or-ganic fertilizer(simplified as control).Four different banana varieties of Brazilian banana,Guijiao No.1,Nantianhuang,and Yunjiao No.1 were se-lected for the field trial.The disease incidence of Fusarium wilt and the control effects of three fertilizers were investigated during four time periods.[Result]The disease incidence of four varieties in three treatments varied.The disease incidence of Nantianhuang and Yunjiao No.1 were signifi-cantly lower than that of other two varieties.There was also significant difference in disease incidence of three treatments.The disease incidence from high to low was control>shrimp peptide organic fertilizer treatment>microbial treatment.The average monthly TR4 pathogen content in heavily infected banana plantation was more than 2000 copies,while the highest one reached 15148.9 copies.[Conclusion]Microbial agents reduced the disease incidence of Fusarium wilt to some content.Nantianhuang and Yunjiao No.1 showed the highest disease resistance compared with other varieties.However,their resistance needs to be further improved before practical application. 展开更多
关键词 FUSARIUM oxysporum f.sp.cubense TROPICAL RACE 4(foc TR4) DISEASE incidence Variety Microbial preparation
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香蕉品种对枯萎病菌感病性与对病菌毒素敏感性之间的相关性 被引量:8
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作者 杨秀娟 杜宜新 +2 位作者 陈福如 甘林 阮宏椿 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期93-98,I0001,共7页
为明确香蕉品种对香蕉枯萎病菌感病性与对病菌粗毒素敏感性之间的相关性,采用根部病菌孢子接种测定了36份香蕉品种苗对香蕉枯萎病菌4号生理小种的感病性,以及采用植株根部和叶片毒素处理测定了5份香蕉品种苗对病菌粗毒素的敏感性。结果... 为明确香蕉品种对香蕉枯萎病菌感病性与对病菌粗毒素敏感性之间的相关性,采用根部病菌孢子接种测定了36份香蕉品种苗对香蕉枯萎病菌4号生理小种的感病性,以及采用植株根部和叶片毒素处理测定了5份香蕉品种苗对病菌粗毒素的敏感性。结果表明,天宝角蕉(AAA)、柴蕉(AAA)、广粉1号(AAB)和贡蕉(AA)表现抗病,哥斯达黎加蕉(AAA)和抗枯5号(AAA)表现中抗;感病品种对毒素的敏感性高于抗病品种。通过香蕉不同品种的病情指数、萎蔫指数和叶片损伤面积的差别分析,发现香蕉苗期对枯萎病菌感病性与对病菌粗毒素敏感性之间存在正相关性,60d龄期的假植苗病情指数与其叶片损伤面积之间存在显著的正相关性。因而叶片毒素处理法测量香蕉假植苗中部叶片损伤面积可作为一种快速区别香蕉抗病能力的有效方法。 展开更多
关键词 香蕉品种 枯萎病4号小种 病菌粗毒素 敏感性 相关性
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西岛内港沉积物放线菌的分离及其抗菌活性研究
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作者 徐小雄 冯慧敏 +1 位作者 陈永敢 马红梅 《现代农业科技》 2011年第11期17-18,共2页
从西岛内港采集沉积物,采用自然风干后,湿热60℃、处理10 min的预处理方法,稀释涂布于GA培养基上,成功地分离得到44株海洋源的放线菌。经初步形态显微观察判断,其中18株为链霉菌,26株为非链霉菌,链霉菌中以小单孢菌为主。18株链霉菌抗... 从西岛内港采集沉积物,采用自然风干后,湿热60℃、处理10 min的预处理方法,稀释涂布于GA培养基上,成功地分离得到44株海洋源的放线菌。经初步形态显微观察判断,其中18株为链霉菌,26株为非链霉菌,链霉菌中以小单孢菌为主。18株链霉菌抗香蕉枯萎病测试结果显示,菌株090314表现出一定的抗香蕉枯萎病菌(4号生理小种,FOC 4)活性。 展开更多
关键词 沉积物 放线菌 分离 抗菌活性 西岛内港
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香蕉枯萎病菌内源报告基因比卡菌素聚酮合酶编码基因Bik1的鉴定及应用 被引量:3
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作者 王艳玮 曾凡云 +4 位作者 漆艳香 丁兆建 谢艺贤 张欣 彭军 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2022年第3期473-483,共11页
香蕉枯萎病是由尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum f.sp.cubense,Foc)引起的香蕉毁灭性土传病害,其中4号生理小种(Foc4)能感染几乎所有的香蕉品系,危害最严重。本研究克隆鉴定Foc4比卡菌素聚酮合酶编码基因(bikaverin PKS-encodi... 香蕉枯萎病是由尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum f.sp.cubense,Foc)引起的香蕉毁灭性土传病害,其中4号生理小种(Foc4)能感染几乎所有的香蕉品系,危害最严重。本研究克隆鉴定Foc4比卡菌素聚酮合酶编码基因(bikaverin PKS-encoding gene,Bik1)Foc4Bik1,编码一个由2036个氨基酸组成的多功能酶,具有I型PKS聚酮合酶的保守结构域,包含酰基转移酶功能域[acyl-carrier protein(ACP)transacylase,SAT],β-酮脂酰合成酶功能域(β-ketoacyl synthase,KS),丙二酰酰基转移酶功能域(acyltransferase,AT),脱氢酶(dehydratase,DH)以及硫酯酶(thioesterase,TE)等多个保守蛋白结构域。采用Split-marker同源重组技术获得基因敲除突变体ΔFoc4Bik1,通过比较突变体和野生菌株生长速度、产孢量、致病力等差异,证明ΔFoc4Bik1突变体仅影响次生代谢产物比卡菌素的生物合成,不影响病原菌的其他生理表型及致病力;其次,ΔFoc4Bik1突变体摇培后菌液呈白色,与野生型Foc4的暗红色形成鲜明对比,说明Foc4Bik1基因符合作为内源报告基因的条件。本研究以Foc4Bik1为内源靶标基因,利用水稻恶苗病菌(F.fujikuroi)的基因编辑载体pUC-fFuCas9-HTBNLS-hph,尝试以质粒体内表达Cas9和sgRNA的方式探索Foc4中CRISPR/Cas9编辑的可行性。gRNA序列由在线网站设计,构建的sgRNA162导入质粒构建靶向Foc4Bik1的pUC-fFuCas9-HTBNLS-hph-Foc4Bik1基因编辑载体,与供体质粒pUC19-Foc4Bik1-HDR一起导入原生质体通过同源重组修复(homology directed repair,HDR)的方式进行基因编辑。经过潮霉素抗性筛选获得的ΔFoc4Bik1(HDR)基因编辑后的敲除转化子进行PCR检测和摇培,白色菌液表型与PCR检测阳性的敲除转化子相互对应,证实了Foc4基因编辑的可行性。此外,Foc4Bik1可作为香蕉枯萎菌Foc4内源报告基因并评估探索新的分子生物学技术在香蕉枯萎菌上应用的可能性。 展开更多
关键词 香蕉枯萎菌4号生理小种(foc4) 比卡菌素聚酮合酶基因Bik1 基因敲除 表型分析 CRISPR/Cas9基因编辑
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基于TD-SCDMA无线定位虚拟线阵四阶累量修正MUSIC算法的研究
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作者 张毅 罗元 黄帮明 《信号处理》 CSCD 北大核心 2007年第6期951-954,共4页
无线定位的圆-角定位技术中,DOA估计极其重要。本文针对基于TD-SCDMA智能天线预处理后的虚拟均匀线阵MUSIC算法带来的阵列孔径小,抗阵元误差扰动性差的不足,研究了基于模式空间虚拟均匀线阵四阶累量的MUSIC算法,由于虚拟线阵四阶累量MU... 无线定位的圆-角定位技术中,DOA估计极其重要。本文针对基于TD-SCDMA智能天线预处理后的虚拟均匀线阵MUSIC算法带来的阵列孔径小,抗阵元误差扰动性差的不足,研究了基于模式空间虚拟均匀线阵四阶累量的MUSIC算法,由于虚拟线阵四阶累量MUSIC算法的应用范围局限于独立的信号源的DOA估计,不能用于相关信号源DOA估计,因而提出了基于模式空间虚拟均匀线阵四阶累量的修正MUSIC(FOC-MMUSIC)算法,有效地拓展了阵元孔径,改善了系统抗阵元误差扰动和算法对相关信号源DOA的估计性能。 展开更多
关键词 时分同步码分多址 多重信号分类算法 虚拟均匀线阵 四阶累量的修正MUSIC算法
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香蕉对尖孢镰刀菌热带4号小种的抗性评价方法的建立 被引量:16
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作者 左存武 李斌 +6 位作者 李春雨 魏岳荣 胡春华 邓贵明 邝瑞彬 杨乔松 易干军 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期876-884,共9页
为了准确快速地评价香蕉对枯萎病病原菌尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum f.sp.cubense)热带4号小种(Tropical race 4,Foc TR4)的抗性,在温室条件下以浸根法和改良的灌根法将Foc TR4接种至不同抗性的香蕉品种,比较分析接种... 为了准确快速地评价香蕉对枯萎病病原菌尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum f.sp.cubense)热带4号小种(Tropical race 4,Foc TR4)的抗性,在温室条件下以浸根法和改良的灌根法将Foc TR4接种至不同抗性的香蕉品种,比较分析接种后香蕉的发病情况,并检测了两个Foc TR4的特异引物的扩增效率,以完善评价方法。结果显示,利用两种方法接种都能体现香蕉的抗性,但改良的灌根法在孢子浓度为1×10^4时的接种效果最好,接种后各品种发病情况与品种本身的实际抗性最为接近。特异引物Foc TR4 F/R的扩增效率较高,1次和2次PCR分别能有效检测发病等级为3和1以上的香蕉球茎。 展开更多
关键词 香蕉 枯萎病 尖孢镰刀菌热带4号小种 抗病性评价 分子检测
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根癌农杆菌介导的香蕉枯萎病菌4号生理小种的转化 被引量:16
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作者 李敏慧 张荣 +3 位作者 姜大刚 习平根 庄楚雄 姜子德 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期405-412,共8页
本文针对香蕉枯萎病菌4号生理小种这一对我国香蕉生产构成了极大威胁的检疫性有害生物,建立了根癌农杆菌介导的该生理小种的转化体系,确定了影响转化效率主要因子的最佳条件分别是:共培养乙酰丁香酮(AS)浓度为200μmol/L、共培养时间为4... 本文针对香蕉枯萎病菌4号生理小种这一对我国香蕉生产构成了极大威胁的检疫性有害生物,建立了根癌农杆菌介导的该生理小种的转化体系,确定了影响转化效率主要因子的最佳条件分别是:共培养乙酰丁香酮(AS)浓度为200μmol/L、共培养时间为48 h、培养温度为25℃、诱导培养基pH值为5.5。此条件下,转化效率达到21~24个转化子/104香蕉枯萎病菌孢子。PCR和Southern杂交分析表明外源的T-DNA已经成功随机地整合到该病原菌基因组中,且多为单拷贝。应用该转化体系已获得近25 000个转化子,为研究该生理小种致病机制奠定了基础。 展开更多
关键词 香蕉枯萎病菌4号生理小种 农杆菌介导的转化 影响因子优化
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香蕉内生枯草芽孢杆菌EBT1对香蕉生长和抗枯萎病的影响 被引量:9
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作者 杨秀娟 陈福如 +2 位作者 甘林 杜宜新 阮宏椿 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期300-306,共7页
为探讨香蕉内生枯草芽孢杆菌EBT1对香蕉生长和抗病性的诱导作用,研究了EBT1培养液对台蕉2号(AAA)丛生芽增殖及再生苗生长的影响,并测定香蕉苗对枯萎病4号生理小种孢子及其毒素的抗性。结果表明,培养基中添加10%(v/v)EBT1培养液能明显提... 为探讨香蕉内生枯草芽孢杆菌EBT1对香蕉生长和抗病性的诱导作用,研究了EBT1培养液对台蕉2号(AAA)丛生芽增殖及再生苗生长的影响,并测定香蕉苗对枯萎病4号生理小种孢子及其毒素的抗性。结果表明,培养基中添加10%(v/v)EBT1培养液能明显提高丛生芽的增殖、苗株重、假茎高、抗毒素和抗病能力,并增加香蕉苗保护酶SOD、PAL、POD、PPO和CAT活性。在EBT1培养液全程诱导、增殖诱导和生根诱导中,全程诱导对香蕉苗生长及其抗性的诱导效果最好,增殖诱导次之,毒素处理1~7天后,源于EBT1培养液全程诱导处理的香蕉苗酶活水平较高,其5种保护酶活性峰值分别为对照的3.82、1.18、1.50、2.70和1.52倍。 展开更多
关键词 内生枯草芽孢杆菌 香蕉组织培养 香蕉枯萎病菌4号生理小种 保护酶活性
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